血清甲胎蛋白阳性胃癌患者人表皮生长因子2、切除修复交叉互补组1及胸甘酸合成酶的表达及意义

目的探讨人表皮生长因子2(HER2)、切除修复交叉互补组1(ERCC1)及胸甘酸合成酶(TS)在血清甲胎蛋白(AFP)阳性胃癌(AFPGC)患者与普通胃癌患者中的表达差异。方法收集61例AFPGC组织标本为实验组,122例普通胃癌为对照组。免疫组化法检测HER2、ERCC1及TS的表达,分析两组间三者的表达差异,并分析其表达与临床病理特征的关系以及对生存期的影响。结果实验组与对照组中HER2的阳性率分别为45.90%、30.33%,差异有统计学意义(P=0.038);ERCC1的阳性率分别为70.49%、61.48%,差异无统计学意义(P=0.23);TS的阳性率分别为80.33%、63.93%,差异有统计学意义(P=0.023)。实验组中HER2在Ⅰ~Ⅱ期的阳性率显著高于Ⅲ期(P=0.033),对照组中ERCC1在有神经脉管侵犯者的阳性率显著高于无侵犯者(P=0.036)。总样本中HER2阳性胃癌的生存期显著短于阴性者(P<0.001),而ERCC1、TS组无显著差异。浸润深度(P=0.039,RR=1.862)、血清AFP水平(P<0.001,RR=1.002)是胃癌的独立预后因素。结论AFPGC中HER2的阳性率明显高于普通胃癌,提示AFPGC可能在曲妥珠单抗靶向治疗中有更多获益;AFPGC中TS的阳性率明显高于普通胃癌,提示AFPGC更有可能对氟尿嘧啶类化疗存在耐药。

真核表达质粒pcDNA3.1(+)-A1CF的构建及在肺癌中的表达

目的构建Apobec-1互补因子(A1CF)真核表达质粒,转染肺癌细胞A549和H1299并检测其表达。方法提取肾癌细胞786-o中总RNA,经RT-PCR扩增人A1CF基因,通过酶切法插入pcDNA3.1(+)载体,构建pcDNA3.1(+)-A1CF真核表达质粒,经BamHI和XbaI双酶切及DNA序列测序鉴定。Lipofectamine 2000脂质体转染肺癌细胞,Western blot法检测A1CF在肺癌细胞中的表达情况。划痕和Transwell小室实验观察A1CF对肺癌迁移侵袭能力的影响。结果酶切及测序结果显示pcDNA3.1(+)-A1CF中插入的片段序列测定结果与人A1CF序列一致,重组质粒转染两种肺癌细胞后,转染组的目的蛋白表达量明显增高,且E-cadherin和P-ERK表达水平也明显增高(P<0.05)。结论成功克隆人A1CF基因cDNA,并构建真核表达质粒。A1CF促进肺癌细胞迁移侵袭可能与ERK的磷酸化有关。