春尺蠖热激蛋白AcinHsp70基因的克隆、分子特性与表达分析

【目的】克隆春尺蠖热激蛋白Hsp70基因,分析其理化性质与表达情况,探究该基因在春尺蠖应对外界不利环境中的作用。【方法】基于前期所测转录组数据(春尺蠖幼虫不同低温胁迫),克隆获取Hsp70基因,命名为AcinHsp70(GenBank登录号:OP750249);利用生物信息分析软件对Hsp70基因的理化性质进行分析;采用qPCR技术检测AcinHsp70基因在不同温度(-10、-5、0、5和25℃)胁迫中回温与不回温及4℃不同时间处理下的表达谱。【结果】春尺蠖AcinHsp70基因完整CDS序列全长1899 bp,编码633个氨基酸,蛋白质预测分子量为69.91 kDa,预测等电点为5.51。在N端均不含信号肽且无跨膜区。磷酸位点检测分别发现丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸磷酸位点24、26和8个;未发现糖基化位点。该蛋白的平均亲水性为-0.507,预测不稳定系数为33.19,故该蛋白属于亲水稳定蛋白,亚细胞定位结果显示,其主要位于细胞质。序列一致性比对与系统进化树分析结果显示,春尺蠖与庆网蛱蝶(Melitaea cinxia)亲缘关系最近,序列一致性达92.91%。基因表达结果显示,不同温度(-10℃除外)胁迫下,AcinHsp70基因表达量均无明显差异,回温后表达量显著上调。AcinHsp70基因表达量总体呈先升后降趋势,在4℃处理1 h后表达量达到最大值。【结论】AcinHsp70基因与春尺蠖应对低温胁迫的响应密切相关,结果有助于揭示该基因在低温胁迫下的分子功能。

春尺蠖幼虫生防细菌的分离鉴定及杀虫活性测定

为筛选出对鳞翅目幼虫有致病作用的昆虫病原菌,从春尺蠖(Apocheima cinerarius)幼虫的罹病体中分离获得疑似致病细菌4株,依据科赫氏法则最终筛选出1株具有杀虫活性的菌株CH-1。基于生理生化及16S rRNA序列鉴定,菌株CH-1为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)。以小菜蛾(Plutella xylostella)、甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)、草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)、春尺蠖(Apocheima cinerarius)幼虫进行短小芽孢杆菌CH-1杀虫活性的测定。结果表明:短小芽孢杆菌CH-1发酵液及上清液均对小菜蛾等鳞翅目幼虫具有杀虫活性和致死效果,其中发酵液效果较上清液更为显著。在处理4 d后,发酵液处理下小菜蛾、甜菜夜蛾、草地贪夜蛾、春尺蠖的3龄幼虫死亡率分别为96.67%、100%、100%、100%,比清水对照的死亡率分别高40.00%、70.00%、40.00%、40.00%,比上清液处理的死亡率分别高0、13.33%、60.00%、0。试验得出,短小芽孢杆菌CH-1具有防治多种鳞翅目害虫的应用潜力。

植保无人机与人工喷雾防治柠条锦鸡儿春尺蠖效果比较

采用无人机和常规背负式电动喷雾器,药剂选用25%灭幼脲3号SC、5%阿维菌素EC和5%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐EW,探索不同施药方式对柠条锦鸡儿(Caragana korshinskii)春尺蠖(Apocheima cinerarius)的防控效果。结果表明,采用飞行高度为2.5 m,飞行速度5 m/s,喷幅3 m,大疆T16植保无人机低空低容量施药对春尺蠖有良好的防控效果,对柠条锦鸡儿安全且无药害。25%灭幼脲3号SC和5%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐EW表现出良好的速效性,单剂5%阿维菌素EC速效性欠佳;无人机施药优于人工背负式电动喷雾器施药防治效果。

基于遥感主要环境影响因子与春尺蠖羽化的相关性分析

【目的】研究地表温度、土壤含水量对春尺蠖羽化的影响,为提高虫害防治效率、降低防治成本提供理论依据。【方法】以新疆克拉玛依市开发区为例,选择有代表性的12块林地(P_(0)~P_(11)),利用实测春尺蠖羽化量数据、地表温度及土壤含水量卫星数据,采用趋势、相关性及回归方法,分析春尺蠖羽化量的时空分布特征及其变化趋势,研究地表温度、土壤含水量在时空维度对其羽化的影响。【结果】(1)点P_(3)、P_(4)、P_(10)、P_(11)所处林分春尺蠖虫害最严重,P_(6)所处林分虫害水平始终较低。(2)春尺蠖逐日羽化量与地表温度呈正相关,与土壤含水量呈负相关,且这种相关性主要集中在羽化高峰日前。(3)点P_(5)、P_(7)、P_(8)所处林分内土壤含水量与春尺蠖逐日羽化量的负相关性较大。(4)2021年羽化高峰日前,地表温度主要通过蒸发效应影响土壤含水量进而间接影响羽化进程,而2022年地表温度对羽化则主要表现为直接影响。【结论】地表温度、土壤含水量对春尺蠖羽化的影响是一种综合效应。在适宜春尺蠖羽化的土壤温湿度范围内,地表温度的上升或土壤含水量的下降会促进羽化,反之则抑制羽化,且这种影响主要集中在羽化高峰日前。点P_(5)、P_(7)、P_(8)所处林分内土壤含水量与春尺蠖逐日羽化量的负相关性较大,可在这些区域内开展人工灌溉从而抑制春尺蠖的发生。

春尺蠖保幼激素结合蛋白AcinJHBP基因的克隆、分子特征与表达分析

[目的]探究AcinJHBP基因在春尺蠖生长发育与滞育中的作用。[方法]基于前期所测春尺蠖蛹转录组数据(非滞育蛹-滞育蛹与滞育蛹-滞育解除蛹),克隆获取JHBP基因,命名为AcinJHBP(GenBank登录号:OR860357);利用生物信息学软件分析AcinJHBP基因的序列特征及理化性质;采用qPCR技术检测AcinJHBP的时空表达(不同发育阶段和组织)情况。[结果]春尺蠖AcinJHBP基因完整CDS序列全长726 bp,编码241个氨基酸,蛋白质预测分子量为26.97 kDa,预测等电点为5.13。春尺蠖AcinJHBP基因预测分子式为C_(1211)H_(1915)N_(313)O_(364)S_(9),负电荷残基(Asp+Glu)总电荷为34,正电荷残基(Arg+Lys)总电荷为26,半衰期和脂肪指数分别为30 h和97.51。该蛋白的平均亲水性为-0.098,预测不稳定系数为27.13,故该蛋白属于亲水稳定蛋白,N端氨基酸为蛋氨酸(Met,M)。AcinJHBP在N端含一个长为17个氨基酸残基的信号肽,但无跨膜区;磷酸位点检测分别发现丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸磷酸位点分别为9、6和3个,未发现糖基化位点。亚细胞定位结果显示,其主要位于细胞外。系统进化结果表明,AcinJHBP与同为鳞翅目尺蛾科的冬尺蠖(Operophtera brumata)血淋巴保幼激素结合蛋白JHBP亲缘关系最近。基因表达结果显示,在不同发育阶段,AcinJHBP基因在春尺蠖卵至5龄幼虫期间表达均较低(3龄幼虫除外),且无显著差异(P>0.05),而在非滞育蛹-成虫期,AcinJHBP表达量呈逐渐下降趋势。在不同组织中,春尺蠖AcinJHBP基因在雄虫头部表达量最高。[结论]AcinJHBP基因与春尺蠖生长发育与滞育密切相关,该结果为进一步揭示该基因在春尺蠖蛹越夏、越冬滞育中的功能奠定一定理论基础。

基于GS和GIS的春尺蠖种群分布动态研究

本文利用杀虫灯诱杀春尺蠖雄成虫的数据,采用地统计学空间插值方法,借助遥感(RS)和地理信息系统(GIS)技术,得出2001～2003年和田地区春尺蠖种群空间分布格局及其动态。结果显示,3年中春尺蠖种群均为聚集分布,但聚集程度、种群空间分布和数量处于动态变化之中。通过TM卫片解译提取和田地区森林图层,在ARCGIS中完成对插值模拟图的切割,从而把春尺蠖种群动态的年际分布显示在具体的森林斑块内。研究结果可作为进一步研究春尺蠖种群暴发机理和系统控制的基础。

春尺蠖性信息素活性成分的提取和GC-MS鉴定

为了寻求高效无污染的防治害虫春尺蠖Apocheima cinerarius Erschoff的方法,本实验对春尺蠖雌蛾性信息素进行了初步研究。本研究采取正己烷溶剂浸提法提取春尺蠖处女雌蛾性信息素腺体中的性信息素,运用气相色谱-触角电位联用仪(gas chromatography-electroantennographic detection,GC-EAD)测定春尺蠖雄蛾触角对雌蛾性信息素腺体提取物中性信息素成分的活性反应,并运用气相色谱-质谱联用仪(gas chromatograph-mass spectrum,GC-MS)鉴定信息素成分。GC-EAD结果显示雄蛾触角对雌蛾性信息素腺体提取物中的一种成分有较好的反应。GC-MS分析结果表明能引起雄蛾触角电生理反应的成分为含有十四个碳原子直链结构的不饱和乙酸酯,但其双键位置有待合成标准化合物进一步分析鉴定。该研究结果为春尺蠖雌蛾性信息素备选化合物的筛选提供了方向,为其结构的确定奠定了基础。

不同药剂对舞毒蛾和春尺蠖的毒力测定

用3%高效氯氰菊酯、5%吡虫啉乳油、8%绿色威雷微胶囊剂3种无公害杀虫剂对常见园林食叶害虫舞毒蛾(Lymantria dispar(Linnaeus))、春尺蠖(Apocheima cinerarius Erschoff)进行了室内外的毒力测定,结果表明:3%高效氯氰菊脂2000倍液对舞毒蛾幼虫和春尺蠖幼虫毒杀作用效果最好,校正死亡率分别达到94.67%和94.83%。

沙雅县天然胡杨林春尺蠖发生规律的初步研究

春尺蠖在沙雅县1年发生一代,以蛹在树冠下土壤中越夏、越冬。第二年3月当地表5～10cm深处土壤温度在0℃左右时,成虫开始羽化出土。卵于4月上旬开始孵化,整个卵的孵化进度呈明显的Logistic曲线,其方程式为:N=100/(1+e6.6255-1.2343t)。该虫的防治时期是4月10～25日,最佳防治时期是4月15～20日,采用飞机低容量喷雾可收到较好的防治效果。

新疆和田地区春尺蠖种群空间格局动态分析

以2001—2003年频振式杀虫灯诱杀成虫数据为基础,采用地统计学方法,以地理信息系统的ArcGis为平台,分析并显示出:新疆和田地区春尺蠖种群成聚集分布,聚集半径在154.29￣243.76km之间,聚集中心由2001、2002年的皮山县、洛浦县两个聚集中心扩展到2003年的皮山县、洛浦县、民丰县三个聚集中心,各年的聚集程度有所变化,种群数量成递增趋势。

春尺蠖种群空间分布型及抽样技术研究

对春尺蠖成虫和卵块的空间分布型及抽样技术研究表明,各组样本各项指标均符合聚集分布的检定标准。应用Taylor幂法则、Iwao回归分析法测定出春尺蠖成虫和卵块的空间格局是基本成分为个体群的聚集分布,聚集强度随种群密度的升高而增加。得出了春尺蠖成虫在一定精确度水平下的序贯抽样模型和最适理论抽样模型分别为:Tn=2.2693m+0.8009)。卵块在一定精确度水平下的序D2(3.0702D2-0.8/n且n>0.8/D2和N=1贯抽样模型和最适理论抽样模型分别为:Tn=0.6281m+0.6337)。D2(1.2555D2-0.6337/n且n>0.

春尺蠖羽化期监测及其无公害防治试验

【目的】通过对新疆阿克苏市春尺蠖羽化期的动态监测，旨在掌握春尺蠖的最佳防治时期；春尺蠖的无公害防治试验，为春尺蠖高效无公害防治技术在阿克苏地区的推广应用提供参考。【方法】成虫期利用光控杀虫灯、糖醋液、树干涂胶来进行动态监测；成虫期采取树干直接涂胶、间接涂胶来进行防治；幼虫期采取两种生物制剂来进行防治。【结果】阿克苏市春尺蠖的羽化期在3月5～27日。雄虫的羽化期比雌虫的羽化期要早3～5d。无公害防治试验结果表明：树干直接涂胶比间接涂胶的捕获数量高出6．8倍；从幼虫虫口密度减退率来看，树干间接涂胶后的幼虫虫口密度比树干直接涂胶后的幼虫虫口密度高出2．2倍；两种生物制剂以核型多角体病毒的效果最好，其防治效果达到90．74％。【结论】春尺蠖的最佳防治时期应在3月5日之前，利用雌、雄虫不同的羽化期分而治之。羽化期的监测使用控杀虫灯的效果较好，发生量监测使用树干涂胶效果较好。无公害防治试验中树干直接涂胶和核型多角体病毒的效果好，且对果树、果品安全。

春尺蠖NPV生物学特性及室内增殖研究

春尺蠖核型多角体病毒(Apocheima cinerarius nucleopolyhedrovirus,AciNPV)是春尺蠖的主要病原微生物。该文研究了AciNPV的形态结构和室内生物活性,及AciNPV室内生产过程中的适宜感染浓度、感染虫龄和感染温度,从而为该病毒今后的商业化生产和应用提供借鉴。

杨尺蠖核型多角体病毒的研究Ⅶ．AciNPV杀虫剂的防治效果

应用ＡｃｉＮＰＶ杀虫剂防治杨尺蠖，在地面或空中使用高容量、低容量或超低容量喷洒，均能引起病毒流行病的发生。应用当年，杨尺蠖的种群密度可降低８５％～９６％。喷洒剂量地面最适为３．０×１０１１～６．０×１０１１ＰＩＢ／ｈｍ２，不能低于２．０３×１０１１ＰＩＢ／ｈｍ２；飞机超低容量为３．７５×１０１ＰＩＢ／ｈｍ２，不能低于１．８８×１０１１ＰＩＢ／ｈｍ２。隔带喷洒可降低飞行作业费６３．８％。防治适期以１～２龄幼虫占８５％左右为最好。防治３～４龄幼虫应加大用量１倍，但保叶效果极差。喷洒时间在１６：００以后为好，可避免阳光对病毒的影响。

春尺蠖越冬蛹羽化特性及幼虫空间分布研究

对春尺蠖Apocheima cinerarus Erschoff越冬蛹羽化特性及幼虫的空间分布特征研究表明,春尺蠖越冬蛹羽化高峰期在3月10—12日,羽化与气温密切相关,羽化数随着温度的升高而增加,环境温度为13℃时羽化数最多,但当达到最大羽化数后,温度的变化对羽化数的影响不甚明显;羽化初期雌虫多于雄虫,以后雄虫增多,羽化后期雄虫数明显减少;春尺蠖幼虫聚集在树冠底层和中层的东面和南面。

沙雅县天然胡杨林春尺蠖发生及飞防效果分析

春尺蠖卵 4月上旬开始孵化 ,整个卵的孵化进度呈明显的逻辑斯蒂曲线。该虫的防治适期是4月 1 0— 2 5日 ,最佳防治时间是 4月 1 5— 2 0日 ;2 5 %灭幼脲Ⅲ号悬浮剂、Bt( 1 60 0 0IU/mg)可湿性粉剂、春尺蠖核型多角体病毒制剂

叶尔羌河流域胡杨春尺蠖虫害分布的河流廊道效应分析

为验证胡杨Populus euphratica春尺蠖Apocheima cinerarius Erschoff分布的河流廊道效应,以新疆巴楚县夏河林区胡杨林分布区作为研究区域,研究胡杨春尺蠖的传播规律,在前期采用多时相、中等分辨率的MODIS数据提取2001、2006、2011、2016年虫害发生区域的基础上,结合实地调查,对河流廊道效应进行验证。结果表明:近16年来胡杨春尺蠖的发生面积逐年增加,且增加趋势较为明显,无虫害区占比下降达59.48百分点;春尺蠖的空间分布体现出明显的河流廊道效应,距河流越远,虫害发生率越低,河流是其重要的传播途径;林业部门要注重对胡杨春尺蠖发生的重点区域进行精准防治,使春尺蠖发生的热点区域缩小。

四脊裸孢壳Dh菌株的生物学特性及对沙枣尺蠖的防治效果

从沙枣尺蠖上分离到一真菌菌株Dh ,经鉴定为四脊裸孢壳。该菌喜温 ,生长温度范围为 1 5～ 4 5℃ ,最适温度为 30℃ ;病菌在pH4～ 8之间生长良好 ;孢子的萌发温度范围为 8～4 5℃ ,以 30℃为最适 ;在黑暗、日光灯、黑暗与散射光交替、自然光条件下 ,该菌的生长与产孢情况无明显的差异 ;该菌能利用葡萄糖、蔗糖等多种碳源 ,在可溶性淀粉、甘露醇和麦芽糖上生长量最大 ;可利用多种氮源 ,尤其对尿素、氯化铵的利用最好。Dh经纯化培养后 ,室内对沙枣尺蠖致死率达 86 4 2 % ,田间致死率达 82 1 3%。

春尺蠖蛹呼吸代谢与滞育关系的研究

春尺蠖蛹呼吸代谢与滞育关系的研究＊梁成杰赵玲吴燕王贵成关键词春尺蠖呼吸代谢速率冷刺激滞育春尺蠖（ＡｐｏｃｈｅｉｍａｃｉｎｅｒａｒｉｕｓＥｒｓｃｈｏｆ）属于一化性昆虫［１］，蛹期滞育长达１８０～２１０ｄ。蛹滞育前后形态上无明显差别。通过Ｗａｒｂｕｒｇ呼...

杨尺蠖核多角体病毒的研究 Ⅵ.病毒的贮藏效果

杨尺蠖核多角体病毒,在不同条件和不同时间的贮藏效果试验证明,在4℃冰箱或-20℃低温冰箱内贮藏,多角体制备物及其配制的AciNPV杀虫剂,其活性至少可保持两年;在室温条件下贮藏,多角体制备物的活性仅能保持一年,而加工制剂则可保持近两年。