载脂蛋白B-100基因突变与脂蛋白代谢及动脉粥样硬化

载脂蛋白B100(apoB100)是低密度脂蛋白(LDL)的重要组分之一,对于维持LDL结构的完整及血清胆固醇水平的相对稳定起着重要的作用。apoB100及其结构上的变化在高血脂及动脉粥样硬化方面所起到的作用和影响非常巨大。目前apoB100的编码基因及蛋白质的部分结构已基本阐明,已发现了一些结构域和决定其主要生物功能的LDL受体结合部位中,能明显影响其结构与功能的基因突变点,即第3500氨基酸突变(R3500Q、R3500W)及第3531氨基酸突变(R3531C)。apoB100结构上的变异均不同程度地减低apoB100与LDL受体结合的能力,其中最为重要的变异是R3500Q,可直接导致个体高脂血症的发生。本文对apoB100基因突变所造成其结构上的变异及这种变异与高脂血症、动脉粥样硬化的关系进行了综述。

载脂蛋白B-100亚单位多聚肽免疫对Apo E-/-小鼠血脂水平和动脉粥样硬化斑块面积影响的研究

目的:探讨载脂蛋白B-100(apolipoprotein B-100,apo B-100)亚单位多聚肽免疫对载脂蛋白E基因缺陷(Apo E-/-)小鼠动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的影响。方法:将Apo E-/-小鼠随机分成3组:模型对照组(A组)、apo B-100亚单位混合组(B组)、apo B-100全肽组(C组),每组12只。B、C组小鼠给予相应多肽进行皮下免疫注射,A组小鼠皮下注射等体积的生理盐水。所有小鼠高脂喂养25周后全部处死,ELISA法检测特异性Ig G抗体滴度,生化仪检测各组小鼠血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)水平,油红O染色后检测主动脉AS粥样斑块面积及其与管腔面积的比值。结果:(1)B组和C组首次免疫后平均抗体滴度均高于免疫前(1∶962.5 vs.1∶0.121,t=9.522,P=0.000;1∶1108.3 vs.1∶0.121,t=7.531,P=0.000),差异均有统计学意义;B组和C组二次免疫后平均抗体滴度均高于免疫前(1∶3 582.9 vs.1∶0.121,t=11.972,P=0.000;1∶3 824.8 vs.1∶0.121,t=8.220,P=0.000),差异均有统计学意义;B组和C组首次二次免疫后平均抗体滴度均高于首次免疫,差异均有统计学意义(t=3.522,P=0.009;t=3.179,P=0.007)。(2)B组的血清TC(16.03±1.49)、TG(1.72±0.12)、LDL-C(2.15±0.16)水平均低于A组(23.44±1.72、3.01±0.26、3.04±0.28),HDL-C水平(2.87±0.17)高于A组(1.82±0.11),差异均有统计学意义(t=3.289,P=0.027;t=2.766,P=0.031;t=3.025,P=0.029 t=4.187,P=0.001);C组血清TC(17.94±1.55)、TG(1.88±0.15)、LDL-C(1.97±0.14)水平均低于A组,HDL-C水平(3.01±0.39)高于A组,差异均有统计学意义(t=4.209,P=0.001;t=5.116,P=0.000;t=6.025,P=0.000;t=3.157,P=0.026)。(3)B组和C组动物较A组AS病变程度轻,斑块面积与管腔面积比值小于A组(4.59±1.41)vs.(17.6±5.36),t=3.465,P=0.021;(3.87±2.05)vs.(17.6±5.36),t=2.992,P=0.030),差异有统计学意义。结论:apo B-100亚单位多聚肽可能通过调节Apo E-/-小鼠血脂代谢,影响Apo E-/-小鼠动脉粥样硬化病变的形成。

家族性载脂蛋白B-100缺陷症的检测

目的：建立检测家族性载脂蛋白Ｂ－１００缺陷症（ＦＤＢ）的方法和研究ＦＤＢ与高脂血症和冠心病的关系。方法：用聚合酶链反应扩增载脂蛋白Ｂ－１００基因特定片段，以非放射性物质地高辛标记等位基因特异性寡核苷酸作为探针与扩增产物杂交，检测突变载脂蛋白Ｂ基因。结果：在１０３例高脂血症患者中发现１例突变，１００例冠心病患者中有２例突变，３４５例正常人中无突变者。结论：该基因与脂质代谢和冠心病有关；本试验方法简便、稳定。

家族性载脂蛋白B-100缺陷症(FDB)

家族性载脂蛋白B-100缺陷症(FDB)是近年研究较多的一种引起高胆固醇血症和未成年期心血管病变的常染色体显性遗传性疾病,它是由于载脂蛋白B-100基因的第26位外显子上一个点突变(G→A)引起的低密度脂蛋白与受体结合下降,使胆固醇于体内堆积所致。本文综述载脂蛋白B-100的结构、功能以及FDB的分子生物学基础、临床表现、检测方法、流行病学调查、治疗等国内外研究现状,以利于我们探索动脉硬化的发病机理,达到早期诊治目的。

原发性高胆固醇血症家系成员载脂蛋白B-100基因突变的筛查

目的 筛查原发性高胆固醇血症患者载脂蛋白B 1 0 0基因可能存在的突变体。方法 通过改变参与巢式聚合酶链反应 (PCR)反应的一个寡核苷酸引入酶切入点法检测载脂蛋白B 1 0 0基因发生R350 0Q的突变情况。在其附近可能存在的突变位点用单链构象多态性分析 (SSCP)和DNA测序分析法进行筛查。结果 34例样本均未发现载脂蛋白B 1 0 0基因突变位点。结论 载脂蛋白B 1 0 0基因突变可能不是引起原发性高胆固醇血症的主要原因。

家族性载脂蛋白B-100缺陷的研究(综述)

家族性载脂蛋白Ｂ－１００缺陷的研究（综述）俞锐敏朱致惠（暨南大学医学院第一附属医院内科，５１０６３０，广州）关键词：载脂蛋白Ｂ－１００；缺陷；基因突变；高胆固醇血症中图分类号：Ｒ５８９－１现已证实低密度脂蛋白胆固醇（ＬＤＬ－Ｃ）在体内的清除通过以下两...

载脂蛋白B-100 3500精氨酸→色氨酸突变的简便快速诊断

目的 建立一个简便快速方法 ,用于诊断家族性载脂蛋白B 10 0缺陷症R35 0 0W。方法 设计一对寡核苷酸引物 ,其上游引物为突变引物。以PCR扩增目的DNA顺序 ,产物用限制酶Nco1酸解 ,酶解体系中加入含Nco1切口的DNA片段作内参照物 ,以排除酶切时假阴性的出现。结果 所设计引物能成功地用于PCR以扩增目的DNA片段 ,长 14 4碱基对。产物与限制酶Nco1保温 ,正常基因产物不被切割 ,突变基因产物则由于引入一个人工限制酶切口而被切割 ,产生 117碱基对的片段 ,这两长度不同的片段可被 2 %琼脂糖凝胶电泳所分离。利用这一方法 ,于 16 2例高血浆胆固醇患者中检出两例杂合R35 0 0W突变基因携带者。结论 本突变引物PCR法成功地检出ApoB 10 0R35 0 0W突变基因 ,方法可靠 。

ApoA-1和ApoB-100/ApoA-1比值对子痫前期孕妇的预测诊断价值探讨

目的:检测并比较子痫前期(PE)孕妇和正常健康孕妇血清中载脂蛋白A-1(ApoA-1)、载脂蛋白B-100(ApoB-100)的浓度及ApoB-100/ApoA-1比值,探讨其在预测PE中的诊断价值。方法:收集武汉中心医院2015年6月至2016年6月收治的48例PE孕妇为PE组,另选择同期健康孕妇48例为对照组。ELISA法检测ApoA-1、ApoB-100浓度,比较两组血清ApoA-1、ApoB-100浓度及ApoB-100/ApoA-1比值,ROC工作曲线检测其诊断PE的诊断效能。结果:PE组ApoA-1浓度显著低于对照组(167. 07±14. 61 mg/dl vs 244. 37±20. 84 mg/dl,P<0. 001)。PE组ApoB-100浓度与对照组差异无统计学意义(104. 84±7. 05 mg/dl vs 102. 39±8. 08 mg/dl,P=0. 118)。PE组ApoB-100/ApoA-1比值显著高于对照组(0. 63±0. 07 vs 0. 42±0. 05,P<0. 001)。血清ApoA-1、ApoB-100浓度和ApoB-100/ApoA-1比值在是否重度PE、HELLP综合征、胎儿生长受限及是否需要降压治疗的PE孕妇中差异无统计学意义(P>0. 05)。ROC曲线示ApoA-1截断值为210 mg/dl时,预测诊断PE的敏感性为98%,特异性为92%,AUC=0. 971;当ApoB-100/ApoA-1截断值为0. 49时,预测诊断PE的敏感性为92%,特异性为93%,AUC=0. 931。结论:ApoA-1浓度和ApoB-100/ApoA-1比值是PE患者有价值的预测诊断指标,值得临床进一步研究。

MiR-100-5p和miR-199b-5p靶向结合mTOR诱导结肠癌细胞自噬

目的:研究结肠癌(CRD)细胞中miR-100-5p和miR-199b-5p与mTOR诱导的自噬之间的关系。方法:选取人CRC SW480细胞株,分别用miR-100-5p和miR-199b-5p的mimics和抑制剂转染SW480细胞,采用实时定量PCR检测转染后2种miRNA的表达量、自噬基因Beclin1和LC3的表达量,CCK-8检测细胞存活率,流式细胞技术检测细胞凋亡率,荧光素酶实验检测2种miRNA与mTOR之间的关系。结果:与对照组比较,转入miR-100-5p和miR-199b-5p mimics的SW480细胞中Beclin1和LC3的表达水平显著增加(P<0.05),经miR-100-5p和miR-199b-5p mimics转染的SW480细胞生长更慢(P<0.05),同时细胞凋亡率增加(P<0.05);荧光素酶报告基因结果显示,与对照组相比,miR-100-5p和miR-199b-5p mimics组的miR-100-5p和miR-199b-5p表达水平都显著降低,表明mTOR 3’UTR区可能是miR-100-5p and miR-199b-5p的结合部位。结论:miR-100-5p和miR-199b-5p可能通过靶向mTOR诱导SW480细胞的自噬死亡。

顶空-气相色谱法测定B-100生物柴油中游离甲醇含量

建立了顶空-气相色谱测定B-100生物柴油中游离甲醇含量的方法.B-100生物柴油样品使用N,N-二甲基乙酰胺溶解,90℃下顶空平衡45 min,在HP-INNOWAX色谱柱上进行分离和测定.方法建立了外标法定量的标准曲线,相关系数r大于0.999,样品中甲醇质量分数的检出限为0.005%.对实际样品进行检测,相对标准偏差为4.96%~6.83%（n=6）,加标回收率为92.0%~110%.方法操作简单、快速、重复性好,适用于B-100生物柴油中游离甲醇含量的测定.

全球只有50台! Densen(丹麦王子)B-100周年纪念版合并式放大器

参考价格:23900元/台基本规格:输出功率:60W×2(8 Ω)、120W×2(4Ω)·频率响应:2Hz-20kHz(+0/-3dB)·电源供应:360VA环形变压器·电容储备:40000 μ F·重量:1 2kg·外形尺寸:宽440mm

冠心病患者血清载脂蛋白AI、B_(100)与组织型纤溶酶原激活剂及其抑制物的相关性

目的：探讨载脂蛋白ＡＩ、Ｂ１００与冠心病患者组织型纤溶酶原激活剂（ｔ－ＰＡ）及其抑制物活性的关系。方法：对５２例冠心病患者和２５例健康人用免疫比浊法测定血清载脂蛋白ＡＩ、Ｂ１００浓度，并以发色底物法测定血浆组织型纤溶酶原激活剂及其抑制物的活性。结果：冠心病各类型中，急性心肌梗死（ｎ＝１２）及不稳定性心绞痛（ｎ＝１９）组载脂蛋白Ｂ１００、纤溶酶原激活剂抑制物活性显著高于对照组（Ｐ＜０．０１和Ｐ＜０．００１）；载脂蛋白ＡＩ、组织型纤溶酶原激活剂显著低于对照组（Ｐ＜０．００１和Ｐ＜０．０１）。在稳定性心绞痛组（ｎ＝２１），载脂蛋白Ｂ１００和纤溶酶原激活剂抑制物亦升高（Ｐ＜０．０５），载脂蛋白ＡＩ与组织型纤溶酶原激活剂亦降低（Ｐ＜０．０５）。相匹配的不稳定性心绞痛及对照组各１９例的相关分析发现载脂蛋白Ｂ１００与组织型纤溶酶原激活剂活性无关，而载脂蛋白Ｂ１００与纤溶酶原激活剂抑制物活性均呈正相关（ｒ＝０．８３３０和ｒ＝０．７７２９），载脂蛋白ＡＩ与纤溶酶原激活剂抑制物活性均呈负相关（ｒ＝－０．６７３４和ｒ＝－０．８６７４）。结论：载脂蛋白ＡＩ、Ｂ１００浓度与纤溶酶原激活剂抑制物活性之间存在相关关系；载脂蛋白ＡＩ与纤溶?

多不饱和脂肪酸饮食对载脂蛋白E缺失小鼠含载脂蛋白B100脂蛋白代谢的影响

探讨不同多不饱和脂肪酸饮食对载脂蛋白E(apoE)缺失小鼠含apoB100脂蛋白代谢的影响.2月龄雄性载脂蛋白E缺失小鼠添加2%紫苏籽油或红花油饮食干预6周,检测其血脂和血清apoB100水平;测定肝脏组织中HMG-Co A还原酶活性;使用实时定量PCR分析肝组织中含apoB100脂蛋白代谢相关基因表达;蛋白质印迹(Western blot)检测PPARα蛋白表达;油红O染色检测肝细胞中脂质积累.结果显示,紫苏籽油饮食干预可降低血清LDL-C和apoB100水平,降低肝组织中HMG-Co A还原酶活性以及apoB100、FAS、HMG-Co AR、ACAT2、LRP、LDLR和SREBP-1c基因mRNA的表达,显著升高转录因子PPARα的mRNA和蛋白质水平,明显降低肝脏中脂质沉积.而红花油饮食干预后升高了小鼠血清甘油三酯和高密度脂蛋白胆固醇以及肝脏apoB100的mRNA表达水平,降低PPARα的mRNA和蛋白质水平,明显促进肝脏中脂质积累.结果提示在饮食中添加紫苏籽油可有效降低含apoB100脂蛋白的代谢,对动脉粥样硬化以及脂肪肝等疾病有更好的保护作用,对于正常人群以及家族性Ⅲ型高脂蛋白血症患者的日常膳食提供理论依据.

聚合酶链反应结合酶切法检测载脂蛋白B－100第3500位氨基酸突变方法的建立

聚合酶链反应结合酶切法检测载脂蛋白Ｂ－１００第３５００位氨基酸突变方法的建立刘 芳，何丽芳，宁寿葆，任建英，黄伟民（上海医科大学儿科医院，卫生部医学分子病毒学实验室２０００３２；上海市徐汇区中心医院２０００４０）关键词载脂蛋白Ｂ－１００；聚合酶链反应...

血脂和载脂蛋白A_1、B_（100）测定对NIDDM血管病变的诊断价值

测定３５２例有或无血管病变的非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）病人及４４例正常人的血清甘油三酯（ＴＧ）、总胆固醇（ＴＣ）、高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬ－ｃｈ）、低密度脂蛋白胆固醇（ＬＤＬ－ｃｈ），载脂蛋白Ａ１（ＡｐｏＡ１）、载脂蛋白Ｂ（１００）（ＡｐｏＢ（１００））的水平。分析了这些指标与ＮＩＤＤＭ并发血管病变的相关性。结果：ＮＩＤＤＭ并发血管病变各组与ＮＩＤＤＭ无并发症组及正常对照组之间比较ＬＤＬ－ｃｈ和ＡｐｏＢ（１００）水平升高；ＡｐｏＡ１／ＡｐｏＢ（１００）比值降低。提示上述指标可作为ＮＩＤＤＭ并发血管病变的预测指标。

泸州地区正常人群载脂蛋白A_I,B_(100)及脂蛋白(a)的调查

测定泸州地区250名健康人血清中的载脂蛋白（Apo）A－I．B_100及脂蛋白（a）［LP（a）］水平。结果:ApoA－I：1．29±0．24g／L，ApoB_100:0．66±0．18g／L，Apo－I／ApoB_100：2．05±0.64,LP（a）：上限值为300mg／L，并与几个城市的结果作了比较。

载脂蛋白B_(100)杂交瘤细胞株的建立及单抗免疫学特性的研究

采用密度梯度离心法从新鲜人血浆中快速分离提取高纯度的LDL,以此免疫BALB/c小鼠,应用淋巴细胞杂交技术建立了11株稳定分泌抗ApoB_(100)的杂交瘤细胞株,所分泌的11种单抗除L_2/169为IgG2b外,其余均为IgG_1。腹水抗体效价为10^(-5)～10^(-8)。应用ELISA间接法证明,11种单抗均与ApoB_(100)(本研究制备及Sigma产品)产生强阳性反应,部分单抗与VLDL产生反应,而均不与其它包括脂蛋白、载脂蛋白在内的血浆蛋白产生反应。应用免疫印迹法证明,各种McAb识别的靶抗原分子量为525KD。对其中4种McAb的抗原表位特异性也进行了研究,通过相加试验及双抗体竞争试验均证实,4种单抗可分为2组,各识别不同的抗原决定簇。

血清载脂蛋白B－100测定与胆固醇测定的对照观察

血清载脂蛋白Ｂ－１００测定与胆固醇测定的对照观察（３００１４０）天津铁路医院检验科李瑞贤载脂蛋白是血中脂蛋白的蛋白质部分，存在于人血浆中的载脂蛋白主要有ＡⅠ、ＡⅡ、ＡⅣ、Ｂ－１００以下简称载Ｂ、Ｂ－４８等，其功能除维持血浆脂蛋白的正常结构外，还与脂类...

复方丹参注射液对感染性休克大鼠脑损伤时一氧化氮、B-细胞淋巴瘤-2蛋白及S100的影响

目的 探讨复方丹参注射液对感染性休克大鼠腑损伤时一氧化氮（NO）、B-细胞淋巴瘤-2 （bcl-2）蛋白及S100水平的影响.方法 选取2周龄健康清洁级Wistar大鼠40只,随机分为4个组,每组10只.感染性休克1组及感染性休克2组：通过尾静脉给予脂多糖（5 mg/kg）复制感染性休克模型;治疗组：造模成功后通过腹腔注射给予复方丹参注射液（5 mg/kg）;正常对照组：在其他组给予药物时给予9 g/L盐水替代.除感染性休克2组于造模成功12 h取材外,其余3组均于造模后6h取材.断头法取脑组织及摘眼球法取静脉血,用硝酸还原法检测4组大鼠脑组织中NO水平,免疫组织化学法检测4组大鼠海马组织bcl-2蛋白的表达,酶联免疫吸附法检测4组大鼠静脉血S100水平.结果 与正常对照组相比,感染性休克1组及治疗组NO、bcl-2及S100水平均明显升高,差异均有统计学意义（F=25.64、3 027.17、632.04,P均＜0.05）;治疗组NO及S100水平均较感染性休克1组明显降低,差异有统计学意义（F=25.64、632.04,P均＜0.05）,治疗组bcl-2表达水平较感染性休克1组明显增高,差异有统计学意义（F=3 027.17,P＜0.05）.感染性休克2组NO及S100水平较感染性休克1组均升高,差异均有统计学意义（t=-12.34、-4.89,P均＜0.05）,感染性休克2组bcl-2表达水平较感染性休克1组降低,差异有统计学意义（t=6.88,P＜0.05）.NO与bcl-2呈显著负相关（r=-0.928,P＜0.05）,NO与S100呈显著正相关（r=0.877,P＜0.05）.结论 感染性休克时,NO参与脑损伤的过程,可能与其下调bcl-2的表达,上调S100的表达有关;复方丹参注射液可能通过抑制NO生成,上调bcl-2表达,下调S100表达,对脑组织起保护作用.