载脂蛋白C-Ⅲ研究进展

载脂蛋白C-Ⅲ是一种水溶性低分子蛋白质,主要分布于血浆高密度脂蛋白、极低密度脂蛋白和乳糜微粒中。新近研究表明,载脂蛋白C-Ⅲ是脂蛋白代谢的重要调节因子,与高三酰甘油血症和心血管疾病进展相关联。载脂蛋白C-Ⅲ在代谢综合征和动脉粥样硬化中起重要作用,可能是心血管疾病进展的重要预测因子。调节载脂蛋白C-Ⅲ代谢也许是控制代谢综合征患者血脂代谢异常和治疗心血管疾病发病的一重要靶点。

血清载脂蛋白CⅢ水平与老年急性冠脉综合征病人冠状动脉病变程度的相关性研究

目的探讨老年急性冠脉综合征(ACS)病人血清中载脂蛋白CⅢ(Apo CⅢ)水平与血脂及冠脉病变程度的相关性。方法选取110例ACS病人作为研究对象(ACS组),依据病变程度将其分为ACS单支病变组和ACS多支病变组,每组各55例;同时另选取健康体检者100例作为对照组,比较ACS组与对照组一般临床资料,以及对照组、ACS单支病变组和ACS多支病变组血脂、脂蛋白α(Lpα)、载脂蛋白AⅠ(Apo A-Ⅰ)及Gensini评分,并分析Apo CⅢ水平与上述指标的相关性。结果 ACS组的男性与吸烟者比例均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);ACS单支病变组和ACS多支病变组的低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、Lpα、ApoCⅢ水平及Gensini评分均显著高于对照组(P<0.05),且ACS多支病变组上述指标均显著高于ACS单支病变组(P<0.05);3组Apo A-Ⅰ水平比较,对照组>ACS单支病变组>ACS多支病变组,差异有统计学意义(P<0.05);ACS多支病变组高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。相关性分析结果表明,Apo CⅢ与总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、LDL-C、Lpα、冠状动脉病变支数及Gensini评分呈正相关(P<0.05),与HDL-C及Apo A-Ⅰ水平呈负相关(P<0.05)。结论老年ACS病人血清Apo CⅢ升高,且与冠状动脉病变程度有关,ApoCⅢ可能参与了ACS的发生和发展。

载脂蛋白C Ⅲ拮抗低密度脂蛋白对内皮细胞的损伤

为探讨高密度脂蛋白-载脂蛋白和载脂蛋白CⅢ在保护内发细胞免受低密度脂蛋白损伤方面所起的作用。将体外培养的人脐静脉内皮细胞分成对照组、高密度脂蛋白-载脂蛋白+低密度脂蛋自组、载脂蛋白CⅢ+低密度脂蛋白组和低密受脂蛋白组4组。通过观察细胞形态变化、测定乳酸脱氢酶释放率和前列环素合成，来观察低密度脂蛋白对内皮细胞形态和功能的影响、结果发现．低密度脂蛋白可引起内皮细胞收缩、细胞膜损伤、乳酸脱氢酶释放增加和前列环素合成减少。预加入高密度脂蛋白-载脂蛋白或载脂蛋白CⅢ（100mg／L）．内皮细胞再受到低密度脂蛋白（1.5g/L）的损伤时，细胞形态和功能不发生明显改变。提示高密度脂蛋白-载脂蛋白和载脂蛋白CⅢ均能部分拮抗低密度脂蛋白对内皮细胞的损伤。

PCR-RFLP检测载脂蛋白CⅢ基因T-455C多态性方法的建立及应用

目的建立聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP)检测载脂蛋白CⅢ(apoCⅢ)T-455C多态性的方法,探讨南通汉族人群中apoCⅢ多态性与高三酰甘油血症(HTG)的相关性。方法用PCR扩增apoCⅢ基因启动子区包含T-455C多态性在内的DNA片段,扩增产物用限制性内切酶BseGⅠ酶切后电泳,分析apoCⅢ基因型,同时采用生化方法检测研究对象的血脂和载脂蛋白水平。结果检测到3种基因型,分别为-455TT、-455TC和-455CC。HTG患者组和健康对照组apoCⅢ-455C等位基因频率(50.44%比33.11%)和apoCⅢ-455CC基因型频率(26.55%比12.16%)均有显著差异(P<0.01);C等位基因携带者患HTG的风险是非携带者的2.06倍(95%CI:1.31～3.24);-455C等位基因携带者有较高的三酰甘油(TG)和apoCⅢ蛋白水平(P<0.05)。结论PCR-RFLP是一种快速、敏感的分析apoCⅢ基因启动子区T-455C多态性的方法;apoCⅢ-455C等位基因与HTG的发生相关。

高糖膳食对大鼠肝实质及非实质细胞VLDL HDL及载脂蛋白CⅢ受体的影响

对高糖膳食诱发的内源性高甘油三酯血症大鼠肝脏VLDL、HDL及载脂蛋白(apo)CⅢ的受体功能进行了研究。发现肝非实质细胞VLDL受体存在下降调节机理;VLDL及HDL的受体除了受血浆脂蛋白浓度的下降或上升调节外,还可能与apoCⅢ受体活性的增加有关。

急性心肌梗死患者血清载脂蛋白CⅢ水平的意义分析

目的研究载脂蛋白CⅢ在急性心肌梗死患者和非冠心病患者血清中的水平是否具有显著性差异,并探讨其临床意义。方法选取心内科住院治疗的患者共110例,将其分为急性心肌梗死组（84例）与非冠心病组（26例）。收集患者住院期间的一般临床资料,包括年龄、性别、是否有高血压、糖尿病、血脂异常症、吸烟史;血生化指标等资料,包括血清肌钙蛋白Ⅰ、甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇（LDLC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDLC）、尿酸、同型半胱氨酸、血清脑钠肽、射血分数;血清炎症指标资料,包括血清胱抑素C及高敏C反应蛋白。测定每位患者血清载脂蛋白CⅢ的浓度,比较急性心肌梗死组与非冠心病组患者各项临床资料及载脂蛋白CⅢ的水平。结果心肌梗死组患者中男性较非冠心病组更多（P〈0.05）,吸烟率较非冠心病组更高（P〈0.05）;心肌梗死组患者血清肌钙蛋白Ⅰ、血清脑钠肽水平高于非冠心病组（P〈0.05）,而HDLC、射血分数低于非冠心病组（P〈0.05）;心肌梗死组血清胱抑素C、高敏C反应蛋白水平显著高于非冠心病组（P〈0.01）,同时测定结果显示心肌梗死组血清载脂蛋白CⅢ水平显著高于非冠心病组（P〈0.01）。多元线性回归分析显示,载脂蛋白CⅢ与性别、吸烟史、HDLC、肌钙蛋白Ⅰ、脑钠肽、射血分数、胱抑素C、高敏C反应蛋白之间无显著相关性。结论急性心肌梗死患者血清载脂蛋白CⅢ水平显著高于非冠心病患者,考虑载脂蛋白CⅢ通过影响血脂代谢来促进动脉粥样硬化形成,其过程中有多种炎症介质参与,推测载脂蛋白CⅢ可能成为急性心肌梗死炎症反应程度的预测指标。

载脂蛋白AⅠ-CⅢ-AⅣ基因簇XmnⅠ、MspⅠ位点多态性与胆固醇结石病关系的研究

目的探讨载脂蛋白(Apo)AⅠ-CⅢ-AⅣ基因簇多态性与胆囊胆固醇结石病的关系,揭示胆固醇结石病的遗传易感性。方法应用多聚酶链反应技术(PCR)对胆固醇结石病患者及正常对照者ApoAⅠ-CⅢ-AⅣ基因簇的限制性片段长度多态性进行研究,检测ApoAⅠ-CⅢ-AⅣ基因位点XmnⅠ及MspⅠ。结果胆石组和对照组均以X1、M1等位基因为主,多为X1X1、M1M1纯合子基因型。胆石组各基因型和各等位基因频率与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。胆石组女性患者正常型基因X1X1纯合子频率和正常等位基因X1的频率低于对照组女性,突变型基因X1X2杂合子、X2X2纯合子以及突变型等位基因X2的频率均高于对照组女性,差异有统计学意义(P<0.05)。胆石组男性患者正常型基因M1M1纯合子频率低于对照组男性,而突变型基因M1M2杂合子频率高于对照组男性,差异有统计学意义(P<0.05)。结论ApoAⅠ-CⅢ-AⅣ基因簇XmnⅠ位点的多态性可能与女性胆囊胆固醇结石病有关,而MspⅠ位点的多态性可能与男性胆囊胆固醇结石病有关。

Apo CⅢ基因多态性在中国汉族健康人群中的分布特点及与不同种族人群的比较

目的探讨中国南通地区汉族人群载脂蛋白CⅢ(ApoCⅢ)基因多态性在健康人群中的分布特点,并与不同种族进行比较研究。方法收集中国南通地区74名无血缘关系健康个体的静脉血提取DNA,应用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)结合微流控电泳技术,分别分析ApoCⅢ基因T-455C和C-482T的多态性。结果中国汉族人群ApoCⅢ-455C等位基因频率明显低于印度和哥斯达黎加人群(P<0.01),与高加索和法国人群相似;中国汉族人群ApoCⅢ-482T等位基因频率明显高于法国人群(P<0.01),与印度和高加索人群相似。结论ApoCⅢ基因T-455C和C-482T的多态性在健康人群分布具有种族差异。

小鼠肝细胞膜载脂蛋白CⅢ受体特性的进一步研究

目的 研究小鼠肝细胞膜载脂蛋白 (apo) C 受体与 apo C 、C 、C 及 E的结合特性。方法 用受体的放射性配基结合分析法 (RBA )观察血浆脂蛋白 (VL DL、L DL及 HDL )以及纯化的 apo C 、C 、C 及 E与小鼠肝细胞膜 apo C 受体结合的活性。结果 apo C 受体与 1 2 5I- apo C 的结合能被非标记 apo C 、C 、C 、E及 VL DL抑制 ,其中 apo C 、C 、C 及 VL DL抑制曲线相似 ,以 apo C 的抑制作用最强 ,apo C 次之 ,apo C 最弱 ,apo E与 apo C 受体亦有一定结合 ;而含 apo B10 0的 L DL以及含 apo A 及 apo A 的 HDL和人血清白蛋白则对结合无影响。结论 小鼠肝细胞膜上存在 apo C 受体 ,除能特异结合 apo C 及 VL DL外 ,亦能在一定程度上与apo C 、C 及 E结合。

ApoC-Ⅲ启动子C-482T和T-455C单核苷酸多态性与2型糖尿病的相关性研究

目的研究载脂蛋白CⅢ(apoC-Ⅲ)启动子单核苷酸多态性(SNP)C-482T和T-455C与中国江苏地区汉族人群2型糖尿病(T2DM)间的关系。方法测定中国江苏地区汉族人群164例T2DM患者及145例健康人群对照组apoC-Ⅲ的两个位点C-482T和T-455C的基因型和等位基因频率;同时测定两组人群的血脂谱。结果上述两个位点的基因型频率和等位基因在T2DM组和对照组间无统计学差异(P﹥0.05),两组间的apoA1和apoC-Ⅲ血清水平的差异有统计学意义(P=0.01和P<0.01),对照组中C-482T的TT基因的apoC-Ⅲ血清水平高于CC和CT基因型,差别有统计学意义(P<0.01)。结论 apoC-Ⅲ启动子的两个SNP位点C-482T和T-455C及单体型与2型糖尿病的发病无关,但两组间血脂谱有差别,健康人群的C-482T多态性与高apoC-Ⅲ血清水平相关。

胰岛素及胰高血糖素对HepG2细胞载脂蛋白CⅢ受体功能的影响

为寻求一种可替代人肝细胞研究载脂蛋白 (apolipoprotein ,apo)CⅢ受体的生理模型 ,并探讨apoCⅢ受体的生理功能及其在内源性高甘油三酯血症发病机制中的作用 ,首先以12 5I标记的人apoCⅢ为配体 ,利用放射性配体结合分析法观察了人肝癌细胞系HepG2细胞是否有apoCⅢ受体存在 .结果证实HepG2细胞上存在高亲和力的、可饱和的、特异的apoCⅢ受体结合位点 ,其受体的亲和力 (Kd)和apoCⅢ受体结合容量 (Bmax)分别为(9 5 3± 1 0 3)× 10 -9mol/L和 (3 2 8± 0 31) μg/ g .随后又分别研究了胰岛素及胰高血糖素对HepG2细胞apoCⅢ受体功能的影响 ,结果表明 :胰岛素可使HepG2细胞apoCⅢ受体结合容量 (Bmax)显著增加 ,但对受体的亲和力 (Kd)无影响 ;胰高血糖素可使HepG2细胞apoCⅢ受体亲和力显著下降 (即Kd 值升高 ) ,对受体的结合容量无影响 .

层析聚焦分离人血清载脂蛋白A-Ⅰ和C-Ⅲ

用硫酸右旋糖酐沉淀法结合角头密度梯度超离心法,从混合人血清中提取出极低密度脂蛋白(VLDL)和高密度脂蛋白(HDL)。脱脂后用层析聚焦分离纯化其中的apoA-Ⅰ和apoC-Ⅲ,均呈现一条带,其分子量分别为28 183和9440 Dalton。等电点聚焦电泳鉴定apoA-Ⅰ有8种多态型。其主要多态型的等电点为5.66～5.87。apoC-Ⅲ的三种异构蛋白apoC-Ⅲ_0、C-Ⅲ_1和C-Ⅲ_2的等电点分别为5.06、4.88和4.72。层析聚焦方法简便,分离效果好,速度快,对于HDL和VLDL中主要载脂蛋白的分离、纯化有一定的应用价值。

2型糖尿病患者载脂蛋白CⅢ基因多态性与高三酰甘油血症关系研究

目的探讨中国南通地区汉族2型糖尿病（T2DM）患者中高三酰甘油血症（HTG）是否与载脂蛋白CⅢ（apoCⅢ）基因启动子区T-455C和C-482T多态性有关。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性检测212例T2DM患者apoCⅢ-455和-482位点多态性的基因型和等位基因频率,同时检测相关生化指标。结果 apoCⅢT-455C和C-482T多态性位点之间存在强连锁不平衡（D＇〉0.7,r2〉0.6,P〈0.0001）。等位基因以常见等位基因-455T和-482C为主,-455和-482位点基因型均分别以杂合型-455TC和-482CT为主。此2个多态性位点等位基因和基因型频率在正常三酰甘油（NTG）组和HTG组之间差异均无统计学意义（P〉0.05）。-455CC和-455TC型患HTG的风险与野生型-455TT相比差异无统计学意义（P〉0.05）,比值比（OR）[95%可信区间（CI）]分别为0.79（0.31～1.99）和1.09（0.52～2.28）。-482TT和-482CT型患HTG的风险与-482CC相比差异也无统计学意义（P〉0.05）,OR（95%CI）分别为1.33（0.53～3.34）和1.65（0.78～3.51）。所有相关生化指标在这2个多态性位点各基因型之间差异也均无统计学意义（P〉0.05）。结论在中国南通地区汉族T2DM患者中,未发现apoCⅢ基因启动子区多态性与HTG有关联,与非T2DM人群中研究结果不一致。

载脂蛋白C-Ⅲ基因多态性与血脂水平的关系

目的探讨载脂蛋白C-Ⅲ(ApoC-Ⅲ)C-482T基因多态性与血浆脂质的关系.方法用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法(PCR- RFLP)检测172例心内科住院病人ApoC-Ⅲ基因多态性,同时检测血脂水平.结果ApoC-ⅢC-482T基因型以CT型最多,占57.54%,CC型及TT型分别占33.72%及14.53%,C等位基因频率为59.59%,T等位基因频率为40.41%.各基因型间血脂水平比较,总胆固醇(TC),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)有显著性差异,P<0.05.进一步两两比较显示,CT型TC较TT型高,P<0.05;CT型LDL-C较CC型、TT型高,P<0.05.结论ApoC-Ⅲ-482T多态性位点与血TC、LDL-C水平关系密切.

大鼠肝非实质细胞载脂蛋白CⅢ结合位点(受体)的研究

作者对“apoCⅢ受体假设”进行了研究,发现^(125)I-标记的人apocⅢ与新分离的大量肝非实质细胞可发生特异结合,而且该结合为一可饱和的特异的受体反应过程,其kd为0.1～0.55μmol/L,B_(max)为18.1～42.0ng/mg细胞蛋白,平均每个肝非实质细胞约有1.0～4.5×10~5个特异的apoCⅢ结合位点。

ApoCⅢ转基因引起的高血浆甘油三酯对弹力蛋白酶诱导的LDLR^(-/-)小鼠腹主动脉瘤的影响

目的:研究载脂蛋白CⅢ(Apo CⅢ)转基因引起的高血浆甘油三酯(TG)对腹主动脉瘤发生发展的影响。方法:以LDLR^(-/-)和Apo CⅢ+LDLR^(-/-)小鼠喂饲高脂饲料,分别造成高胆固醇血症和高胆固醇合并高甘油三酯血症模型;采用弹力蛋白酶法在2种基因型小鼠上诱导建立腹主动脉瘤模型;以动脉瘤发生率、动脉瘤直径、主动脉弹力板降解情况及血管基质金属蛋白酶的表达等为指标,比较LDLR^(-/-)和Apo CⅢ+LDLR^(-/-)小鼠分别在普通饲料和高脂饲料喂饲条件下,腹主动脉瘤的发生和发展情况;采用TNF-α诱导血管平滑肌细胞(VSMC)建立动脉瘤体外微环境模型,研究来自具有正常含量Apo CⅢ或高含量Apo CⅢ小鼠的富含甘油三酯的脂蛋白(TRLs)对弹力蛋白表达的影响。结果:高脂饲料加重了LDLR^(-/-)小鼠的腹主动脉瘤程度;高脂饲料喂饲的Apo CⅢ+LDLR^(-/-)小鼠腹主动脉瘤轻于高脂喂饲的LDLR^(-/-)小鼠;在体外,TRLs具有抑制TNF-α诱导的VSMC弹力蛋白酶降解的作用,且来自高含量Apo CⅢ小鼠的TRLs对弹力蛋白降解的抑制作用更为显著。结论:Apo CⅢ转基因引起的高血浆甘油三酯能减轻弹力蛋白酶诱导的LDLR^(-/-)小鼠的腹主动脉瘤,该作用可能与Apo CⅢ基因及其导致的高血浆甘油三酯有关。

电喷雾质谱法研究全氟辛酸和全氟辛磺酸与载脂蛋白C Ⅲ的相互作用

本文采用电喷雾质谱法(ESI-MS)研究了全氟辛酸(PFOA)和全氟辛磺酸(PFOS)与载脂蛋白CⅢ(Apo CⅢ)的相互作用。ESI-MS检测和竞争性实验结果表明Apo CⅢ分别能够和PFOA及PFOS形成稳定的蛋白复合物,PFOS的结合能力强于PFOA。当样品溶液中蛋白质与配体小分子的摩尔浓度比为1∶4时,Apo CⅢ蛋白能够与PFOA形成化学计量比为1∶1的复合物;与PFOS可形成1∶1、1∶2、1∶3的复合物。由ESI-MS图谱计算出PFOS-Apo CⅢ,PFOA-Apo CⅢ结合常数Ka1分别为8.33×104M-1,7.79×104M-1。分子对接模拟辅助质谱实验方法进一步探究了这些PFCs与Apo CⅢ的结合位点。

载脂蛋白C-Ⅲ在心血管疾病中的研究进展

血脂异常会导致心血管疾病风险增加,降脂可减少动脉粥样硬化及其并发症的发生发展。他汀类药物能有效降低低密度脂蛋白,然而,许多患者在低密度脂蛋白很低的情况下仍发生心血管事件,载脂蛋白C-Ⅲ有直接导致动脉粥样硬化的作用,促发炎症因子的表达释放,是心血管疾病独立危险因素,因而载脂蛋白C-Ⅲ抑制剂为心血管疾病的治疗提供新的干预方式。

动脉粥样硬化脑梗死与载脂蛋白C3、超敏C反应蛋白水平的相关性研究

目的探讨急性动脉粥样硬化脑梗死与血浆载脂蛋白C3及超敏C反应蛋白(hs-CRP)的关系。方法收集60例急性动脉粥样硬化脑梗死患者作为观察组,测定入院后第二天的血清载脂蛋白C3、hs-CRP的含量,同时一周后复测hs-CRP的含量。收集30名健康成人列为对照组,测定血清载脂蛋白C3及hs-CRP的含量。结果观察组血清载脂蛋白C3的含量高于对照组,两者差异有统计学意义(P<0.01),观察组血清hs-CRP在急性明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.01),随着病情的好转hs-CRP逐渐下降,但仍高于健康对照组(P<0.01),与急性期比较,两者差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清载脂蛋白C3、超敏C反应蛋白与动脉粥样硬化脑梗死有密切关系,超敏C反应蛋白的下降,可提示病情改善。

APOB、APOC-Ⅰ和LDLR基因多态性与血脂水平的关联性分析

目的探讨LDLR基因rs688 C>T、APOB基因rs693 C>T、APOC-Ⅰ基因rs4420638 A>G位点分布特征及其与血脂水平的相关性。方法以462例兰州地区汉族人群为研究对象,采用聚合酶链式反应-高分辨率熔解(PCR-HRM)技术对LDLR基因rs688 C>T、APOB基因rs693 C>T、APOC-Ⅰ基因rs4420638 A>G 3个SNP位点进行基因分型,分析其与血脂水平的关系。结果 LDLR基因rs688C>T、APOB基因rs693 C>T、APOC-Ⅰ基因rs4420638 A>G基因型频率和等位基因频率分别为CC64.9%、CT 32.5%、TT 2.6%,C 81.2%、T 18.8%;CC 87.0%、CT 13.0%,C 93.5%、T 6.5%;AA85.7%、AG 14.3%,A 92.9%、G 7.1%。在显性模型下,分别以TC、TG、LDL-C、HDL-C为因变量,以性别、年龄、BMI、rs688 C>T、rs693 C>T、rs4420638 A>G为自变量进行多元线性回归分析发现,LDLR基因rs688 T等位基因携带者的TC、LDL-C水平显著高于CC纯合型(β=0.301,P<0.01;β=0.335,P<0.01);APOB基因rs693 T等位基因携带者的TC、TG水平显著低于CC纯合型(β=-0.250,P=0.027;β=-0.162,P=0.029);APOC-Ⅰ基因rs4420638 G等位基因携带者的TG水平显著高于AA纯合型(β=0.180,P=0.016)。结论 LDLR基因rs688 C>T、APOB基因rs693 C>T、APOC-Ⅰ基因rs4420638A>G位点与中国兰州地区汉族人群血脂水平相关。