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cDNA微阵列分析人apoE_4转基因鼠肾脏基因表达谱的变化 被引量:1
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作者 周厚清 薛越强 +2 位作者 杨鹏 李卓成 琦祖和 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2005年第3期180-183,共4页
目的研究人apoE4转基因鼠肾脏的基因表达谱变化。方法分别提取人apoE4转基因鼠和正常C57BL/6J小鼠的肾脏总RNA,经逆转录合成cDNA探针后分别与鼠cDNA表达点阵杂交,再用ESTblot软件进行分析,并用Northern印迹证明基因表达的改变。结果人ap... 目的研究人apoE4转基因鼠肾脏的基因表达谱变化。方法分别提取人apoE4转基因鼠和正常C57BL/6J小鼠的肾脏总RNA,经逆转录合成cDNA探针后分别与鼠cDNA表达点阵杂交,再用ESTblot软件进行分析,并用Northern印迹证明基因表达的改变。结果人apoE4转基因鼠肾脏中有38个基因的mRNA表达升高,22个基因的mRNA表达降低。其中血浆谷胱甘肽过氧化物酶前体、视黄酸γ受体和白介素5受体等基因的表达明显增加。B-raf原癌基因、促红细胞生成素受体、整联蛋白α4的基因表达显著降低。Northern杂交证明转基因鼠肾脏的c-Jun基因表达升高。结论人apoE4转基因鼠肾脏的c-Jun、血浆谷胱甘肽过氧化物酶前体、白介素5受体等基因的表达增加;促红细胞生成素受体、整联蛋白α4等基因的表达减少。 展开更多
关键词 微阵列分析 载脂蛋白e 小鼠 转基因 基因表达
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人突变的载脂蛋白E对转基因小鼠学习与记忆能力的影响 被引量:1
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作者 廖峥嵘 琦祖和 +2 位作者 孙明增 杨迪 恽君惕 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期348-351,共4页
目的 研究突变的人载脂蛋白 E(apo E)对大脑皮层功能的影响。方法 以 F1代 apo E4与 apo E7转基因小鼠为研究对象 ,分别用 Southern印迹分析及 EL ISA检测人 apo E基因在 F1代小鼠染色体上的整合与在血中的表达 ;以主动回避实验检测... 目的 研究突变的人载脂蛋白 E(apo E)对大脑皮层功能的影响。方法 以 F1代 apo E4与 apo E7转基因小鼠为研究对象 ,分别用 Southern印迹分析及 EL ISA检测人 apo E基因在 F1代小鼠染色体上的整合与在血中的表达 ;以主动回避实验检测小鼠的学习能力和短期与长期记忆能力的变化 ,同时用酶法测定 F1代小鼠的血脂水平。结果  (1)人 apo E4和 apo E7基因稳定地整合于 F1代小鼠染色体上并高效表达于血清中 ;(2 ) F1代小鼠血脂升高的同时 ,apo E4小鼠学习能力与短期记忆能力均显著下降 ,apo E7小鼠短期记忆能力也下降。结论 人apo E4与 apo E7基因过度表达均可使转基因小鼠大脑皮层功能受损害 ,提示人 apo E基因突变可能与 apo E4表型一样 ,也与早老性痴呆的发病有一定关系。 展开更多
关键词 载脂蛋白e 转基因小鼠 学习 记忆
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转基因鼠载脂蛋白E基因异常表达与血脂代谢水平的相关性 被引量:1
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作者 廖峥嵘 琦祖和 孙明增 《生物学杂志》 CAS CSCD 2001年第5期21-22,共2页
探讨载脂蛋白E(apoE)基因在转基因鼠体内的表达及其在血脂代谢中的作用。以单克隆抗体酶联免疫吸附法分别测定apoE4 、apoE7转基因鼠 (tg4、tg7)的血清apoE含量。用甘油磷酸化酶 (GPO)法和胆固醇氧化酶 (CHOD—PAP)法对转基因鼠及对照组... 探讨载脂蛋白E(apoE)基因在转基因鼠体内的表达及其在血脂代谢中的作用。以单克隆抗体酶联免疫吸附法分别测定apoE4 、apoE7转基因鼠 (tg4、tg7)的血清apoE含量。用甘油磷酸化酶 (GPO)法和胆固醇氧化酶 (CHOD—PAP)法对转基因鼠及对照组鼠 (control)的血清甘油三酯 (TG)和胆固醇 (TC)进行测定。tg4血清apoE含量为 2 0 3± 7.2ug/dl,tg7血清apoE含量为 1 8± 5 4ug/dl。血清TG水平转基因鼠 [tg4 (1 9.1 6± 0 .3 1 )mmol/L ,tg7(1 8.1 5± 0 .4 6)mmol/L]与对照组鼠 [(4 .95± 2 .2 5 )mmol/L]的差异均有显著性(p <0 .0 5 )。血清TC水平tg4 [(4 .4 4± 0 .0 4 )mmol/L]与对照组鼠 [(1 .4 9± 0 .0 1 )mmol/L]也表现出显著性的差异 (p <0 .0 5 )。 展开更多
关键词 载脂蛋白e 基因表达 甘油三脂 血清胆固醇 转基因鼠 血脂代谢 异常表达
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人ApoE转基因小鼠与TGE_(7-2) TGE_(7-3)转基因鼠系的建立 被引量:1
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作者 江天 孙明增 +2 位作者 琦祖和 杜淼 李光三 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 1996年第2期65-70,共6页
用含小鼠金属硫蛋白(MT-1)基因启动子与突变的人ApoE7基因的6.0KbDNA片段作为目的基因制备转基因小鼠,利用显微注射法将目的基因导入441枚受精卵,移植于20只假孕鼠,其中15只受孕,共产仔鼠80只,经a-... 用含小鼠金属硫蛋白(MT-1)基因启动子与突变的人ApoE7基因的6.0KbDNA片段作为目的基因制备转基因小鼠,利用显微注射法将目的基因导入441枚受精卵,移植于20只假孕鼠,其中15只受孕,共产仔鼠80只,经a-32P斑点杂交与Southern杂交法鉴定出两只整合有人ApoE基因的转基因雌鼠,其拷贝数分别为2和5。将两只首建鼠(雌性Fo代)与正常雄鼠交配,建立F1代转基因鼠系TGE7-2和TGE7-3,为进一步从整体上研究ApoE在脂质代谢中的作用以及ApoE与动脉粥样硬化和Alzheimer’s病的关系创造条件。 展开更多
关键词 转基因小鼠 转基因鼠 e7基因 正常 受孕 APOe基因 孕鼠 目的基因 雌性 DNA片段
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人突变appE基因在转基因鼠体内的表达及血清脂质变化 被引量:2
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作者 孙明增 琦祖和 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第3期334-338,共5页
为了研究人突变apoE7基因在血脂代谢中的作用.采用微注射的方法建立了人apoE7转基因鼠,三个首建鼠(tg1,tg2,tg3)整合目的基因的拷贝数相差2倍左右,其血中表达的人apoE7的水平也不相同,低水平表达的t... 为了研究人突变apoE7基因在血脂代谢中的作用.采用微注射的方法建立了人apoE7转基因鼠,三个首建鼠(tg1,tg2,tg3)整合目的基因的拷贝数相差2倍左右,其血中表达的人apoE7的水平也不相同,低水平表达的tg1为1.26mg/dl,高水平表达的首建鼠tg3血清中apoE7浓度可高达21.1mg/dl.异常apoE基因的表达导致了转基因鼠血清甘油三酯和胆固醇明显升高,为对照的1.5~3倍.高密度脂蛋白HDL降低,低密度脂蛋白LDL和极低密度脂蛋白VLDL升高.经20mmol/LZnSO4诱导后,F1代Tg3鼠系血清甘油三酯(TG)水平高达444mg/dl,胆固醇(TC)高达234mg/d1.HDL升高和LDL/VLDL降低十分明显,表现了高脂血症的指征. 展开更多
关键词 载脂蛋白e 转基因小鼠 突变 appe基因
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hApoE7转基因小鼠纯合子的培育和鉴定 被引量:1
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作者 张丽春 杨鹏 +2 位作者 蒋效松 薛越强 琦祖和 《中国比较医学杂志》 CAS 2004年第2期78-80,共3页
目的 载脂蛋白E (apoE)是血浆中参与脂质代谢的重要蛋白质 ,并且与迟发型早老性痴呆 (AD)相关。为从整体水平研究人突变ApoE基因剂量与效应的关系 ,我们拟培育C57BL 6 hApoE7纯合子转基因小鼠。方法 将经Southern杂交鉴定为阳性的F1... 目的 载脂蛋白E (apoE)是血浆中参与脂质代谢的重要蛋白质 ,并且与迟发型早老性痴呆 (AD)相关。为从整体水平研究人突变ApoE基因剂量与效应的关系 ,我们拟培育C57BL 6 hApoE7纯合子转基因小鼠。方法 将经Southern杂交鉴定为阳性的F1代小鼠进行互配 ,仔代经PCR初筛 ,再行Southern杂交鉴定 ,杂交结果经扫描定量分析以确定hApoE7基因整合的拷贝数 ,纯合子小鼠的拷贝数为杂合子的两倍。经此法鉴定的纯合子小鼠与正常C57BL 6小鼠进行侧交以进行进一步的鉴定。结果 Southern杂交鉴定出F1代转基因小鼠 6只 ,F2代转基因小鼠 7只 ,其中纯合子 3只。将所得到的纯合子小鼠与正常的C57BL 6小鼠交配 ,仔代鼠经PCR鉴定结果全部为阳性。结论 通过培育C57BL 6 hApoE7纯合子转基因小鼠 ,发现人ApoE7基因在转基因小鼠体内可以稳定遗传 ,转基因的遗传特征符合常染色体单位点整合。 展开更多
关键词 hApoe7 载脂蛋白e 转基因小鼠 纯合子 迟发型早老性痴呆 AD
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转基因鼠载脂蛋白E基因表达异常对学习和记忆能力的影响 被引量:7
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作者 廖峥嵘 李英敏 +3 位作者 琦祖和 孙明增 杨迪 恽军惕 《中华精神科杂志》 CAS CSCD 2000年第2期118-120,共3页
目的 探讨载脂蛋白E(apoE)基因与神经系统记忆功能之间的关系。方法 以单克隆抗体酶联免疫吸附测定法分别测定apoE4 、apoE7转基因鼠及对照组鼠 (每组各 12只 )的血清apoE含量。通过主动回避反应 (跳台 )试验对apoE4 、apoE7转基因鼠... 目的 探讨载脂蛋白E(apoE)基因与神经系统记忆功能之间的关系。方法 以单克隆抗体酶联免疫吸附测定法分别测定apoE4 、apoE7转基因鼠及对照组鼠 (每组各 12只 )的血清apoE含量。通过主动回避反应 (跳台 )试验对apoE4 、apoE7转基因鼠及对照组鼠的神经系统记忆功能进行检测。结果 人apoE基因不仅能在F1代仔鼠体内表达 ,且血清apoE含量 [apoE4 鼠 (1 72± 0 34 )mg/L ,apoE7鼠 (1 5 3± 0 2 4)mg/L]与对照组鼠 [(0 76± 0 0 7)mg/L]的差异均有显著性 (P <0 0 5 )。apoE4 转基因鼠在学习 [(2 1± 2 1)min]和短期记忆 [(1 2± 1 2 )min]方面所表现出的受电击时间总和均长于对照组鼠 [(0 4± 0 3)min ,(0 1± 0 1)min],P <0 0 5 ;而apoE7转基因鼠则只表现为短期记忆方面的错误次数 (2 2± 2 1)高于对照组鼠 (0 8± 1 6 ) ,P <0 0 5。结论 提示apoE基因的异常表达影响转基因鼠的大脑功能。 展开更多
关键词 学习能力 记忆能力 转基因鼠 载脂蛋白e
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h载脂蛋白E_4/h淀粉样前体蛋白转基因鼠自发变换行为的研究 被引量:1
8
作者 廖峥嵘 李英敏 +2 位作者 琦祖和 薛越强 杨鹏 《中华精神科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期182-185,共4页
目的建立h载脂蛋白E_4(h-apo E_4)/h淀粉样前体蛋白(h-APP)双转基因鼠模型,探讨人apo E_4及人突变APP基因在脂质代谢及早老痴呆疾病(AD)中的作用。方法将h-apo E_4转基因鼠及h-APP转基因鼠交配,建立h-apo E_4/h-APP双转基因鼠。通过酶... 目的建立h载脂蛋白E_4(h-apo E_4)/h淀粉样前体蛋白(h-APP)双转基因鼠模型,探讨人apo E_4及人突变APP基因在脂质代谢及早老痴呆疾病(AD)中的作用。方法将h-apo E_4转基因鼠及h-APP转基因鼠交配,建立h-apo E_4/h-APP双转基因鼠。通过酶法检测鼠血清胆固醇。Y迷宫检测鼠自发变换行为。结果经聚合酶链反应初选,Southern杂交进一步鉴定,获得h-apoE_4/APP双转基因鼠(10只)。h-apo E_4/h-APP转基因鼠血清胆固醇水平[9月龄(2.76±0.75)mmol/L,12月龄(3.35±1.23)mmol/L]明显高于同龄对照组鼠(10只)[9月龄(2.03±0.30)mmol/L,12月龄(2.16±0.50)mmol/L](P<0.05),分别是同龄对照组鼠的1.3倍和1.2倍。12月龄h-APP转基因鼠和h-apo E_4转基因鼠血清胆固醇水平[h-APP鼠(2.38±0.37)mmol/L,h-apo E_4鼠(2.67±0.59) mmol/L]均明显高于同龄对照组鼠[(2.16±0.5)mmol/L](P<0.05)。转基因鼠自发变换行为[h-apo E_4/h-APP(0.74±0.03)%,h-APP(0.80±0.05)%,h-apo E_4(0.72±0.07)%]与对照组鼠[(0.95±0.06)%]的差异有统计学意义(P<0.01或<0.05)。结论h-apo E_4基因与血清胆固醇水平有关,h-apo E_4基因及h-APP基因的异常表达对实验鼠的空间记忆能力有影响。 展开更多
关键词 载脂蛋白e 淀粉样Β蛋白前体 小鼠 转基因 胆固醇 空间行为
原文传递
载脂蛋白E背景E1A激活基因阻遏子转基因小鼠建立及鉴定 被引量:1
9
作者 赵晓杰 闫冰 +2 位作者 刘丹 张大力 何佳奇 《临床军医杂志》 CAS 2023年第5期510-513,共4页
目的建立并鉴定载脂蛋白E(ApoE)背景E1A激活基因阻遏子(CREG)转基因(Apo^E(⁃/⁃)CREG^(Tg))小鼠。方法将雄性Apo^E(⁃/⁃)小鼠与雌性CREG^(Tg)小鼠进行交配,获得雄性Apo^E(+/⁃)小鼠和雌性Apo^E(+/⁃)CREG^(Tg)小鼠,再将两者进行交配,以获得A... 目的建立并鉴定载脂蛋白E(ApoE)背景E1A激活基因阻遏子(CREG)转基因(Apo^E(⁃/⁃)CREG^(Tg))小鼠。方法将雄性Apo^E(⁃/⁃)小鼠与雌性CREG^(Tg)小鼠进行交配,获得雄性Apo^E(+/⁃)小鼠和雌性Apo^E(+/⁃)CREG^(Tg)小鼠,再将两者进行交配,以获得Apo^E(⁃/⁃)CREG^(Tg)小鼠。第4周时,提取鼠耳基因组DNA,采用聚合酶链式反应(PCR)和琼脂糖凝胶电泳进行基因型鉴定。提取小鼠脂肪组织和脾组织的RNA、蛋白,采用荧光定量PCR、蛋白免疫印迹法检测小鼠脂肪组织和脾组织CREG基因转录水平、蛋白表达水平。结果子代小鼠中,ApoE^(+/+)小鼠9只(12.33%),ApoE^(+/+)CREG^(Tg)小鼠10只(13.70%),Apo^E(+/⁃)小鼠19只(26.03%),Apo^E(+/⁃)CREG^(Tg)小鼠16只(21.92%),Apo^E(⁃/⁃)小鼠8只(10.95%),Apo^E(⁃/⁃)CREG^(Tg)小鼠11只(15.07%),成功构建Apo^E(⁃/⁃)CREG^(Tg)小鼠模型。Apo^E(⁃/⁃)CREG^(Tg)小鼠脂肪组织、脾组织的CREG基因转录水平、蛋白表达高于Apo^E(⁃/⁃)小鼠,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论本研究成功建立了Apo^E(⁃/⁃)CREG^(Tg)小鼠模型,为深入阐明CREG在动脉粥样硬化等心血管疾病中的作用及机制提供了新的实验工具。 展开更多
关键词 载脂蛋白e e1A激活基因阻遏子 转基因 小鼠
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