载脂蛋白E联合临床相关指标预测阿尔兹海默病模型的建立与验证

目的 以载脂蛋白E(ApoE)为基础,结合阿尔茨海默病发病危险因素及临床常见指标,构建阿尔兹海默病发病风险的临床预测模型。方法 从南京市中医院大数据平台中,检索时间为2019年1月至2021年1月两年时间内,阿尔兹海默病患者61例,模糊匹配健康体检者111例。利用LASSO回归筛选危险因素,构建logistic回归预测模型,10折交叉进行区分度验证,bootstrap法进行校准度验证,临床决策曲线评判预测模型的临床指导性,最后以列线图可视化呈现临床预测模型。结果 筛选出12个变量,最终纳入4个危险因素:年龄、游离三碘甲状腺素(FT3)、性别、ApoE。全样本ROC曲线下面积为0.879,10折交叉9次验证后ROC曲线下平均面积为0.864;采用Bootstrap法抽样及Hosmer-Lemeshow校准度检验,结果χ^(2)=6.496,P=0.592>0.05。临床决策曲线阈值概率区间为1%~88.6%。结论 利用年龄、游离三碘甲状腺素、性别、 ApoE构建的临床预测模型对患者进行个体化评估,可以预警阿尔兹海默病,开展早期预防干预,减缓该病的发生发展。

ApoE基因多态性与高水平Hcy的协同作用对妊娠高血压的影响

目的为探究载脂蛋白E(ApoE)基因多态性与同型半胱氨酸(Hcy)的协同作用对妊娠高血压发病的影响。方法选取2021年1月至2021年12月新疆维吾尔自治区人民医院收治的200例妊娠期高血压孕妇作为研究组,同期非妊娠高血压孕妇200例作为对照组,检测两组孕妇ApoE基因多态性以及Hcy水平。结果研究组蛋白尿、水肿、胎儿生长受限、羊水过少的发生率均显著高于对照组(χ^(2)值介于10.751~34.783之间,P<0.01),且血中Hcy水平显著高于对照组(t=3.210,P<0.05)。研究组ε2ε3、ε3ε3基因型频率以及ε2、ε3等位基因频率均显著低于对照组,ε3ε4、ε4ε4基因型频率以及ε4等位基因频率均显著高于对照组(χ^(2)值介于4.624~32.172之间,P<0.05),ε2ε2、ε2ε4基因型频率略高于对照组但无显著性差异(χ^(2)值分别为1.309、0.069,P>0.05)。研究组E3、E4 AopE表型孕妇的Hcy水平均显著高于对照组(t值分别为4.009、2.609,P<0.05),且研究组E4表型孕妇的Hcy水平显著高于E2、E3(F值为4.118,P<0.05)。E4表型中研究组孕妇的高Hcy比例显著高于对照组(χ^(2)=4.650,P<0.05),而E2、E3表型中两组孕妇的高Hcy比例均无显著性差异(χ^(2)值分别为3.678、3.432,P>0.05)。结论ApoE基因多态性和高水平Hcy在妊娠期高血压疾病发病中存在协同作用,ApoE基因ε4等位基因的存在与高Hcy水平之间的相互作用会增加妊娠期高血压疾病发生的风险。

栀子苷调节PI3K/AKT/mTOR信号通路在动脉粥样硬化形成过程中对Th17/Treg功能的影响

目的:观察栀子苷对载脂蛋白E缺乏(ApoE^(-/-))小鼠Th17/调节性T(Treg)细胞失衡的影响及其作用机制。方法:将50只纯合子ApoE^(-/-)雌性小鼠随机分为对照组、模型组和栀子苷低剂量组、栀子苷中剂量组、栀子苷高剂量组。对照组小鼠喂养普通饲料,模型组和栀子苷组小鼠喂养高脂饲料。从第8周开始,栀子苷各剂量组每日灌胃栀子苷(25、50、100 mg/kg),连续8周。试验结束时,采用油红O染色评估主动脉及其根部动脉粥样硬化(AS)病变面积比。采用定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)分析主动脉组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-17A和IL-10 mRNA表达;采用流式细胞仪分析脾脏中Th17和Treg细胞百分比;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测主动脉组织磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关蛋白表达。结果:油红O染色病变显示,栀子苷中剂量组、栀子苷高剂量组病变百分比低于模型组(P<0.05)。与对照组比较,模型组主动脉TNF-α、IL-6和IL-17A mRNA表达水平升高(P<0.05);栀子苷各剂量组主动脉TNF-α、IL-6和IL-17A mRNA表达水平降低(P<0.05)。与对照组比较,模型组主动脉抗炎细胞因子IL-10 mRNA表达水平降低(P<0.05);栀子苷各剂量组主动脉抗炎细胞因子IL-10 mRNA表达水平升高(P<0.05)。与对照组比较,模型组小鼠脾脏中Th17细胞百分比升高,Treg细胞百分比降低(P<0.05)。栀子苷处理恢复了AS小鼠Th17和Treg细胞的平衡。栀子苷抑制PI3K的表达及AKT和mTOR的磷酸化,MHY1485(mTOR活化剂)减弱了栀子苷对T细胞分化的影响。结论:栀子苷抗AS作用机制可能与抑制PI3K/AKT/mTOR信号引起的Treg细胞增多和Th17细胞减少有关。

三酰甘油与APOE基因多态性在短暂性脑缺血发作患者发生急性脑梗死中的交互作用研究

目的探讨三酰甘油(TG)与载脂蛋白E(APOE)基因多态性在短暂性脑缺血发作(TIA)患者发生急性脑梗死中的交互作用。方法对2019年1月—2021年6月349例TIA进行6个月随访,根据是否发生急性脑梗死分为发生组、未发生组,比较2组一般资料、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、TG、APOE基因多态性,并比较不同TG水平患者APOE基因多态性,使用多因素Logistic回归分析TIA发生急性脑梗死的影响因素,使用交互作用系数γ分析TG与APOE基因多态性的交互作用。结果随访6个月,共45例(12.89%)TIA患者发生急性脑梗死。发生组TG高于未发生组(P<0.01)。发生组及TG升高患者E3/3基因型、ε3等位基因频率分别低于未发生组及TG正常患者,E3/4基因型、ε4等位基因频率分别高于未发生组及TG正常患者(P<0.05)。校正TIA持续时间、TIA发作频率后,TG、APOE基因型E3/3、E3/4及等位基因ε4仍是TIA发生急性脑梗死的独立影响因素(P<0.01)。TG升高与APOE基因型E3/4在TIA发生急性脑梗死中呈正向交互作用,且交互作用符合次相乘模型。结论TG升高与APOE基因型E3/4在TIA发生急性脑梗死中呈正向交互作用,且交互作用符合次相乘模型,TG升高可增强APOE基因型E3/4对TIA发生急性脑梗死的易感性。

动脉粥样硬化小鼠模型研究进展

动脉粥样硬化(As)是一种发生于大中动脉的慢性进行性疾病,其导致的心脑血管并发症是造成人类死亡的主要原因。目前小鼠模型不仅广泛用于As的机制研究,还运用于临床前药物的转化研究。常用的小鼠模型包括ApoE^(-/-)小鼠、LDLr^(-/-)小鼠等转基因小鼠。此外,一些基于手术或操作的新兴动物模型(如部分颈动脉结扎、AAV8-PCSK9-D377Y注射小鼠)也逐渐应用于As病理生理机制的探究。但由于As发病机制复杂,目前尚无一种模型可完全复制人As的形态及病理生理过程。

嗅三针对帕金森病痴呆小鼠海马CA1区载脂蛋白E和病理底物表达的影响

目的:观察嗅三针干预对帕金森病痴呆(Parkinson’s disease dementia,PDD)小鼠海马CA1区载脂蛋白E(apolipoprotein E,Apo E)、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)以及相关核心病理底物表达的影响,探讨嗅三针改善PDD认知功能的部分作用机制。方法:将雄性C57BL/6小鼠随机分为空白组(Control)、假手术组(Sham)、模型组(Model)和电针组(AE),每组10只;采用单侧内侧前脑束(medial forebrain tract,MFB)注射6-羟多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)建立PD模型并筛选PDD小鼠。建模筛选成功后,电针组选取嗅三针进行电针治疗,各组小鼠干预14天后采用Morris水迷宫实验和穿梭箱实验评估各组小鼠学习记忆能力;HE染色观察海马CA1区细胞病理改变;免疫印迹法检测海马CA1区α-syn、Aβ、Apo E蛋白的表达;免疫荧光双标观察海马CA1区Apo E与GFAP的共定位率。结果:与模型组比较,电针组小鼠水迷宫逃避潜伏期缩短(P<0.01),穿越平台次数增加(P<0.05),穿梭箱主动回避次数增加(P<0.05),电击刺激平均时间减少(P<0.01)。模型组小鼠海马CA1区神经细胞排列稀疏、变性坏死,细胞核体积变小、浓染、结构不清,呈核固缩表现;而电针组小鼠海马CA1区神经元病变有明显改善,大部分细胞排列规则,细胞核圆而大,染色浅,形态清晰。电针组小鼠海马CA1区α-syn、Aβ、Apo E蛋白以及Apo E与GFAP共定位率均较模型组减少(P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.05)。结论:嗅三针可提高PDD小鼠认知能力并改善神经元形态结构与功能,机制可能与其抑制星形胶质细胞Apo E表达从而减少海马CA1区α-syn、Aβ沉积有关。

血浆Hcy、ApoE基因多态性对血管性痴呆患者认知功能及治疗效果的影响

目的探讨血清同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)、载脂蛋白E(apolipoprotein E,ApoE)基因多态性对血管性痴呆患者认知功能的影响。方法回顾性分析于医院接受治疗的100例血管性痴呆患者病例资料作为研究对象,使用简易智力状态检查量表(mini-mental state examination,MMSE)评估患者认知功能,将MMSE评分为21~26分患者纳入轻度组,将10~20分患者纳入中度组,将0~9分患者纳入重度组。参照《中国痴呆与认知障碍诊治指南》给予患者常规治疗,治疗前主要检查项目包括血浆Hcy、ApoE基因多态性,治疗3个月后记录患者临床疗效;分析ApoE基因多态性、Hcy与血管性痴呆患者认知功能障碍及临床疗效的关系。结果100例血管性痴呆患者MMSE评分为16.50(9.00,20.00)分,其中轻度24例,中度49例,重度27例;重度组ApoE基因表型为ε2/4、ε4/4患者占比高于轻度组、中度组,入院时血浆Hcy水平高于轻度组、中度组,差异有统计学意义(P<0.05);行多元Logistic回归分析结果显示,血浆Hcy、ApoE基因是导致血管性痴呆患者认知功能障碍加重的危险因素(P<0.05);100例血管性痴呆患者,治疗3个月后,显效47例,好转30例,无效23例,总有效率为77.00%;行二元Logistic回归分析显示,血浆Hcy、ApoE基因均是影响血管性痴呆患者治疗效果的危险因素(P<0.05)。结论ApoE基因多态性、Hcy与血管性痴呆患者认知功能障碍病情严重程度及临床关系密切,未来临床可通过检测患者ApoE基因多态性、Hcy水平,评估患者认知障碍严重程度及治疗无效风险,针对病情严重治疗无效风险较高者,采取针对性干预,以改善患者临床疗效。

缺血性脑卒中患者颈动脉斑块稳定性及狭窄的危险因素分析

目的 探讨缺血性脑卒中患者颈动脉斑块稳定性及狭窄的危险因素。方法 收集2020年5月至2021年5月于湘南学院附属医院住院接受诊治的159例缺血性脑卒中患者的临床资料,根据颈动脉斑块稳定性将患者分为斑块稳定组(n=67)和斑块不稳定组(n=92)。另根据颈动脉狭窄程度将患者分为轻度狭窄组(n=108)和中重度狭窄组(n=51)。比较斑块稳定组与斑块不稳定组、轻度狭窄组与中重度狭窄组患者的临床特征,分析缺血性脑卒中患者颈动脉斑块不稳定及颈动脉中重度狭窄的危险因素。结果 斑块稳定组患者的年龄、高血压比例、糖尿病比例、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平、糖化血红蛋白(HbA1c)水平及D-二聚体/纤维蛋白原比值(DFR)均低于斑块不稳定组患者,载脂蛋白E(ApoE)水平高于斑块不稳定组患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。轻度狭窄组患者的年龄、高血压比例、糖尿病比例、LDL-C水平、HbA1c水平及DFR均低于中重度狭窄组患者,ApoE水平高于中重度狭窄组患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素分析结果显示,年龄、高血压、糖尿病、LDL-C水平、HbA1c水平、ApoE水平及DFR均是缺血性脑卒中患者颈动脉斑块不稳定和颈动脉中重度狭窄的影响因素(P<0.05)。结论 年龄、高血压、糖尿病、LDL-C水平、HbA1c水平、ApoE水平及DFR均与缺血性脑卒中患者颈动脉斑块不稳定和颈动脉狭窄密切相关,值得深入研究。

APOE多态性在炎症因子诱导的神经毒性反应性星形胶质细胞中的差异作用

目的:探讨载脂蛋白E(APOE)基因多态性在神经毒性反应性星形胶质细胞中的差异作用,为阿尔茨海默病(AD)发病机制的研究提供理论依据。方法:体外分离培养APOE基因敲除小鼠(APOE^(-/-))原代皮层星形胶质细胞,免疫荧光染色法鉴定细胞纯度。构建人APOE3和APOE4重组过表达质粒,分别转染至原代APOE^(-/-)星形胶质细胞中,以APOE^(-/-)原代细胞为对照,采用Western blotting法检测细胞中APOE和神经胶质酸性蛋白(GFAP)蛋白表达水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞培养上清中APOE水平。采用白细胞介素1α(IL-1α)、肿瘤坏死因子(TNF)和补体C1q联合刺激转染APOE3和转染APOE4的原代星形胶质细胞制备炎症模型,分为APOE3+PBS组、APOE4+PBS组、APOE3+IL-1α+TNF+CC1q组和APOE4+IL-1α+TNF+C1q组,采用细胞免疫荧光染色法观察各组细胞形态表现,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组细胞中磷脂酰肌醇蛋白聚糖4(Gpc4)、磷脂酰肌醇蛋白聚糖6(Gpc6)、血小板反应蛋白1(Thbs1)、血小板反应蛋白2(Thbs2)、酸性分泌蛋白类似蛋白1(Sparcl1)、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、C3和S100钙结合蛋白B(S100B)mRNA表达水平,微球吞噬实验检测各组细胞吞噬能力,Western blotting法检测各组细胞中B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)蛋白表达水平。结果:与APOE^(-/-)组比较,转染APOE3和APOE4组细胞中APOE和GFAP蛋白表达水平及细胞培养上清中APOE水平明显升高(P<0.01)。荧光显微镜下观察,分别与APOE3+PBS组和APOE4+PBS组比较,APOE3+IL-1α+TNF+Cq1组和APOE4+IL-1α+TNF+Cq1组星形胶质细胞突起变短,胞体变大;与APOE3+IL-1α+TNF+Cq1组比较,APOE4+IL-1α+TNF+Cq1组星形胶质细胞突起更短。分别与APOE3+PBS组和APOE4+PBS组比较,APOE3+IL-1α+TNF+Cq1组和APOE4+IL-1α+TNF+Cq1组细胞中Gpc4、Gpc6、Thbs1、Thbs2和Sparcl1 mRNA表达水平明显降低(P<0.01);与APOE3+IL-1α+TNF+Cq1组比较,APOE4+IL-1α+TNF+Cq1组细胞中Gpc4、Gpc6、Thbs1、Thbs2和Sparcl1 mRNA表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。分别与APOE3+PBS组和APOE4+PBS组比较,APOE3+IL-1α+TNF+Cq1组和APOE4+IL-1α+TNF+Cq1组细胞中GDNF mRNA表达水平明显降低(P<0.01),C3和S100B mRNA表达水平明显升高(P<0.01);与APOE3+IL-1α+TNF+Cq1组比较,APOE4+IL-1α+TNF+Cq1组细胞中GDNFmRNA表达水平明显降低(P<0.05),C3和S100B mRNA表达水平明显升高(P<0.05)。分别与APOE3+PBS组和APOE4+PBS组比较,APOE3+IL-1α+TNF+Cq1组和APOE4+IL-1α+TNF+Cq1组细胞吞噬微珠数量明显减少;与APOE3+IL-1α+TNF+Cq1组比较,APOE4+IL-1α+TNF+Cq1组细胞吞噬微珠数量明显减少。分别与APOE3+PBS组和APOE4+PBS组比较,APOE3+IL-1α+TNF+Cq1组和APOE4+IL-1α+TNF+Cq1组细胞中Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01),Caspase-3蛋白表达水平明显升高(P<0.01);与APOE3+IL-1α+TNF+Cq1组比较,APOE4+IL-1α+TNF+Cq1组细胞中Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.01),Caspase-3蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论:APOE4基因型比APOE3诱导炎症因子能力更强,可诱导神经毒性反应性星形胶质细胞表型,增加神经毒性,影响星形胶质细胞凋亡,从而加剧神经元损伤。

ApoE基因多态性与冠心病的研究进展

冠心病严重威胁人类健康,近年由于人们生活方式等因素的影响,冠心病的发病率逐渐升高。血脂水平是影响冠心病发生的危险因素之一,而载脂蛋白E(ApoE)作为影响血脂水平的重要因素,在脂质代谢中具有重要作用。ApoE基因多态性可通过不同作用机制直接或间接影响冠心病的发生,全面了解ApoE基因多态性与血脂水平及冠心病的相关性,可以为临床冠心病的预防及早期诊疗提供参考,并可优化患者的治疗方案,减少治疗过程中不良反应的发生。

SLCO1B1和ApoE基因多态性与冠心病关系的研究

目的探讨溶质载体有机阴离子转运蛋白家族1B1(SLCO1B1)和载脂蛋白E(ApoE)基因多态性与冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)的关系。方法选取2020年1月至2022年6月于甘肃省武威肿瘤医院心血管内科收治的80例冠心病患者作为观察组,同一时间选取本院体检的80例健康者作为对照组,抽取外周血检测SLCO1B1和ApoE基因多态性,全自动生化分析仪检测血脂指标,Logistic分析冠心病的危险因素。结果对照组与观察组SLCO1B1基因型15/15、1a/15、1a/1a、1a/1b、1a/5、1b/15及1b/1b、等位基因15、1a、1b及5比较,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组ApoE等位基因ε2及ε3的占比显著高于对照组(P<0.05)。与对照组相比,观察组患者SLCO1B1基因在1b/15型上总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及载脂蛋白B(ApoB)水平升高,1a/15型TG水平升高,1a/1b型上高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及载脂蛋白A1(ApoA1)降低,1b/1b型上TG升高,HDL-C及ApoA1降低(P<0.05)。与对照组相比,观察组ApoE基因在E2/E3型HDL-C降低,E3/E3型TG升高,HDL-C及ApoA1水平降低,E3/E4型HDL-C及ApoA1水平降低(P<0.05)。以冠心病为因变量,以上述结果中P<0.05的因素(高血压、糖尿病、TG、LDL-C、ApoA1、ApoB、ε3及ε4)作为自变量,运用Logistic回归分析结果发现,高血压、糖尿病、TG、LDL-C、ApoA1、ApoB及ApoE基因ε4型是诱发冠心病的危险因素(P<0.05)。结论SLCO1B1和ApoE基因多态性与血脂水平异常相关,ApoE基因ε4型可提高冠心病的发生。

APOE基因与安徽地区冠心病血脂及冠脉病变程度的关系

目的:探究APOE基因与安徽地区冠心病血脂及冠脉病变程度的关系。方法:选取100例冠心病血脂异常患者为观察组,50例健康成人为对照组,行APOE基因型检查,比较两组及不同基因型组的血脂水平分布。结果:冠心病患者TC、TG和LDL-C水平升高,HDL-C水平降低。高血脂患者中,APOEε3型占比最高,APOEε2型最低。ε4型冠心病患者的TC和LDL-C水平高于ε2、ε3型,而ε2型冠心病患者的TG水平高于ε3、ε4型。不同冠状动脉病变程度的APOE基因型存在差异。结论:安徽地区,APOE不同等位基因型之间血脂水平有差异,且其不同基因型与冠状动脉病变程度有关。

台儿庄地区心脑血管疾病患者ApoE和SLCO1B1基因多态性分析

目的:分析台儿庄地区心脑血管疾病患者他汀类药物代谢相关基因ApoE和SLCO1B1的基因多态性分布情况,评估患者对服用他汀类药物的疗效和风险,指导临床进行个体化精准用药。方法:以2022年3月-2023年1月与台儿庄人民医院神经内科及心内科就诊的268例心脑血管病患者为研究对象,应用DNA连接酶测序法对患者外周血基因组中ApoE和SLCO1B1基因进行检测,分析基因多态性分布情况,并比较不同性别,不同年龄段,不同地域间的基因型分布差异。结果:观察268例台儿庄地区心脑血管病患者的ApoE及SLCO1B1基因位点多态性突变频率符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律。ApoE基因型共检出5种,其中E3/E3型占比最大,为76.9%,其他基因型E2/E2型,E2/E3型,E3/E4型,E4/E4型占比依次为0.37%,10.4%,11.9%,0.37%,未检出E2/E4型。疗效正常基因型E3型(E2/E4+E3/E3)占比最高,为76.87%,疗效较好基因型E2型(E2/E2+E2/E3)与疗效较差基因型E4型(E3/E4+E4/E4)占比分别为10.82%,12.31%。不同性别,不同年龄患者间ApoE不同疗效基因型分布差异无统计学意义(P>0.05),但不同地区间比较,ApoE不同疗效基因型分布差异有统计学意义(P<0.05)。SLCO1B1基因共检出6种基因型,其中*1b/*1b,*1b/*15,*1a/*1b占比较高,分别为28.73%,20.15%,41.79%,其他基因型*1a/*1a,*1a/*15or*1b/*5,*15/*15频率分别为5.6%,3.36%,0.37%,未检测到*1a/*5、*5/*5和*5/*15基因型。基因型组合中,肌病低风险基因型(*1a/*1a+*1a/*1b+*1b/*1b)占比最高为76.12%,肌病中风险基因型(*1a/*5+*1a/*15or*1b/*5+*1b/*15)和肌病高风险基因型(*5/*5+*5/*15+*15/*15)占比分别为23.51%,0.37%。不同性别,不同年龄,不同地区间患者比较,SLCO1B1不同肌病风险基因型频率分布差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:台儿庄地区心脑血管病患者ApoE基因以疗效正常型E3型为主,SLCO1B1基因以肌病低风险基因型为主,且两种基因型各组合与年龄,性别无关,ApoE基因存在地区差异。通过基因检测可筛选出12.31%疗效较差的患者以及23.88%的肌病中高风险患者,可辅助临床制定合理的用药方案。

载脂蛋白E通过激活ERK/MMP9信号通路促进子宫内膜癌细胞的迁移

目的 研究载脂蛋白E(APOE)在子宫内膜癌转移中的具体作用及分子调控机制。方法 子宫内膜癌HEC-1B细胞常规培养,空白对照组siRNA以及APOE靶向的siRNA转染子宫内膜癌HEC-1B细胞,以及采用空载质粒和APOE过表达质粒转染子宫内膜癌HEC-1B细胞,分为空白对照组siCtrl、siAPOE组、空载质粒组、APOE过表达质粒组。利用划痕实验和Transwell实验检测子宫内膜癌细胞的迁移能力,通过MTT实验及流式细胞术验证APOE对子宫内膜癌细胞增殖能力的影响,使用Hoechst染色法检测干扰APOE后HEC-1B细胞的凋亡情况,采用qPCR、Western blotting观察ERK/MMP9信号通路的变化;通过免疫组化的方法分析APOE的表达与子宫内膜癌组织分化程度的相关性。结果 划痕实验和Transwell小室实验结果显示,与空白对照组相比,转染了siAPOE的HEC-1B细胞的迁移能力均明显下降(P<0.05)。与空载质粒组相比,过表达APOE能显著促进子宫内膜癌细胞HEC-1B的迁移能力(P<0.05)。MTT实验及流式细胞术结果显示APOE对细胞增殖无影响。Hoechst染色实验结果表明干扰APOE后HEC-1B细胞的凋亡能力没有受到影响。Western blotting结果显示敲低APOE能够降低子宫内膜癌细胞中MMP9的蛋白表达水平(P<0.05),而过表达APOE能使细胞内MMP9的蛋白水平升高(P<0.05);U0126能够抑制过表达APOE对MMP9的促进作用(P<0.05)。免疫组化结果显示,APOE在子宫内膜癌组织的表达水平比癌旁组织高。结论 APOE在子宫内膜癌组织中呈高表达,APOE可通过影响ERK的磷酸化,促进子宫内膜癌细胞中MMP9的表达,促进子宫内膜癌细胞的迁移。

颞三针治疗轻中度血管性痴呆及对血清血液流变学、ApoE、AchE的影响

目的观察颞三针联合康复训练治疗血管性痴呆(VD)的临床疗效及对血液流变学、载脂蛋白E(ApoE)及乙酰胆碱酯酶(AchE)的影响。方法选择2019年9月—2021年9月本院收治的70例VD患者作为研究对象,按随机数表法分为治疗组和对照两组,每组各35例。治疗组在常规基础药物治疗上采取颞三针联合康复训练治疗,对照组在常规基础药物治疗上采取康复训练治疗。分别在治疗前后采用日常生活能力评定量表(ADL)、简易智能量表(MMSE)评价其临床疗效,并检测血液流变学、血清AChE和ApoE水平的变化。结果与治疗前比较,两组患者治疗后MMSE、ADL评分均明显升高(P<0.01),而血清AChE、ApoE水平均降低(P<0.01),全血高切黏度、全血低切黏度和血浆黏度水平有不同程度降低(P<0.01,P<0.05);治疗组治疗后ADL、MMSE评分高于对照组(P<0.01,P<0.05),血清AChE、ApoE水平低于对照组(P<0.01,P<0.05),全血高切黏度、全血低切黏度和血浆黏度水平明显低于对照组(P<0.01)。结论颞三针结合康复训练治疗VD疗效肯定,能明显改善患者的认知障碍,提高日常生活水平能力,改善生活的质量,其认知能力的提高可能与调节血液流变学、血清AChE、ApoE水平有关。

橙皮素调控Nrf2/ARE通路改善载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化的实验研究

目的:基于核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应原件(ARE)通路探讨橙皮素对载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠动脉粥样硬化(AS)的影响。方法:将48只ApoE^(-/-)小鼠用高脂饮食喂养12周后,采用左颈总动脉缩窄性套管法建立ApoE^(-/-)小鼠AS模型。模型制备成功后将ApoE^(-/-)小鼠随机分为模型组、橙皮素低剂量组、橙皮素高剂量组、鸦胆子苦醇组,每组12只。另取12只雄性C57BL/6J小鼠作为对照组,给予普通饲料喂养。橙皮素低、高剂量组小鼠分别给予50 mg/kg、100 mg/kg橙皮素灌胃,每日1次;鸦胆子苦醇组小鼠灌胃100 mg/kg橙皮素,隔天腹腔注射Nrf2抑制剂鸦胆子苦醇2 mg/kg,连续给药12周;对照组和模型组给予等量0.5%羧甲基纤维素钠灌胃。检测各组血清血脂水平以及丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平;油红O染色观察主动脉斑块形成和主动脉窦脂质沉积情况,并计算损伤面积百分比;荧光探针测定主动脉中活性氧(ROS)的生成;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测主动脉中Nrf2/ARE通路相关蛋白表达。结果:与对照组相比,模型组小鼠主动脉ROS增加,血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)、MDA、主动脉斑块损伤和主动脉窦脂质损伤面积百分比、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)的表达均明显升高,血清SOD、GSH-Px活性、主动脉Nrf2、还原型辅酶/醌氧化还原酶(NQO1)、血红素加氧酶1(HO-1)的表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,橙皮素低、高剂量组小鼠ROS降低,血清TC、TG、LDL-C、ox-LDL、MDA水平、主动脉斑块损伤和主动脉窦脂质损伤面积百分比、Keap1均明显下降,HDL-C、SOD、GSH-Px活性、Nrf2、NQO1、HO-1的表达均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);鸦胆子苦醇可逆转高剂量橙皮素减轻ApoE^(-/-)小鼠AS病变的作用。结论:橙皮素可能通过激活Nrf2/ARE通路,维持内皮细胞中的氧化还原平衡,减轻ApoE^(-/-)小鼠AS病变,具有较好的抗AS作用。

针刺改善老年小鼠术后认知功能障碍效果及对ApoE、PSD-95的影响

目的探讨针刺对老年小鼠术后认知功能障碍(POCD)的改善效果以及对载脂蛋白E(ApoE)、突触后致密物95(PSD-95)表达的影响。方法将80只小鼠随机均分为对照组、假手术组、POCD组和针刺组,每组20只,POCD组和针刺组小鼠经腹腔探查+阑尾切除+脾切除术制成POCD模型,假手术组小鼠只做切口不做手术,对照组不做任何处理,针刺组术后次日进行百会、手三里、曲池、足三里和昆仑穴位电针刺激,2次/d,10 min/次,连续21 d。Y迷宫实验检测各组小鼠行为学能力,透射电镜观察小鼠海马突触超微结构变化,免疫印迹法检测小鼠海马ApoE、PSD-95、Tau、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)和β淀粉样蛋白(Aβ)蛋白表达,反转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测小鼠海马突触素(SYP)、PSD-95 mRNA水平。结果与对照组、假手术组相比,POCD组和针刺组小鼠错误反应次数(EN)、单次到达安全区时间、全天总反应时间(TRT)和海马ApoE、Tau、磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)/p38 MAPK、Aβ蛋白表达均升高,而海马区突触密度、PSD-95蛋白表达和SYP、PSD-95 mRNA水平均低于对照组、假手术组(P<0.05)。与POCD组相比,针刺组小鼠EN、单次到达安全区时间和海马TRT、ApoE、Tau、p-p38 MAPK/p38 MAPK和Aβ蛋白表达均降低(P<0.05),而海马区突触密度、PSD-95蛋白表达和SYP、PSD-95 mRNA水平均升高(P<0.05)。结论针刺对老年小鼠POCD的行为学能力和海马突触微结构损伤有改善作用,可能与调节突触可塑性相关蛋白表达水平和抑制p38 MAPK活性有关。

代谢相关脂肪性肝病患者SLCO1B1和APOE基因多态性与脂代谢紊乱关系研究

目的 分析代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)患者有机阴离子转运蛋白1B1(SLCO1B1)和载脂蛋白E(APOE)基因多态性与脂代谢紊乱的关系。方法 2018年8月~2021年8月我院诊治的MAFLD患者121例和同期健康体检者150例,常规检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,采用PCR-荧光探针法检测外周血SLCO1B1和APOE基因型。结果 MAFLD组血清TC、TG和LDL-C水平分别为(5.8±2.3)mmol/L、(2.9±1.4)mmol/L和(3.3±1.5)mmol/L,均显著高于健康人【分别为(4.8±1.2)mmol/L、(1.5±1.3)mmol/L和(2.6±1.1)mmol/L,P<0.05】;MAFLD组SLCO1B1基因*1a/*1a和*1a/*1b基因型频率分别为8.3%和35.5%,显著高于健康人的2.7%和23.3%(P<0.05),而*1b/*1b基因型频率为32.2%,显著低于健康人的46.0%(P<0.05);MAFLD组APOE基因ε3/3基因型频率和E3基因表型频率分别为69.4%和71.9%,显著高于健康人的56.7%和58.7%(P<0.05),而ε3/4基因型频率和E4基因表型频率分别为17.4%和18.2%,均显著低于健康人的29.3%和30.7%(P<0.05);26例SLCO1B1基因B型患者血清TC、TG和LDL-C水平分别为(6.4±1.2)mmol/L、(3.5±2.2)mmol/L和(3.8±0.8)mmol/L,均显著高于92例A型患者【分别为(5.5±1.3)mmol/L、(2.6±3.3)mmol/L和(3.0±1.2)mmol/L,P<0.05】或3例C型患者【分别为(4.6±0.3)mmol/L、(2.6±0.9)mmol/L和(2.5±0.2)mmol/L,P<0.05】;87例APOE基因E3型血清TG和LDL-C水平分别为(3.2±1.6)mmol/L和(3.4±1.1)mmol/L,显著高于12例E2型【分别为(2.7±1.8)mmol/L和(2.8±0.8)mmol/L,P<0.05】或22例E4型【分别为(2.3±0.7)mmol/L和(3.0±1.2)mmol/L,P<0.05】。结论 MAFLD患者SLCO1B1和APOE基因多态性与脂代谢紊乱密切相关,值得深入研究。

ApoE基因多态性与脑梗死患者他汀类药物调脂疗效的关系分析

目的探讨载脂蛋白(Apo)E基因多态性与脑梗死患者他汀类药物调脂疗效的关系。方法选取2019-2022年该院连续服用他汀类降脂药物至少1个月的脑梗死患者364例,根据其服药时间分为T1组(连续服药1个月,126例)、T2组(连续服药2个月,62例)、T3组(连续服药3个月及以上,176例),使用PCR-荧光探针法测定患者的ApoE基因型,回顾性分析各组患者服药前后血清甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和总胆固醇(TC)水平与ApoE基因表型的关系。结果T1组患者按生化表型分为E2型14例(11.11%)、E3型87例(69.05%)、E4型25例(19.84%);T2组患者按生化表型分为E2型4例(6.45%)、E3型43例(69.35%)、E4型15例(24.19%);T3组患者按生化表型分为E2型23例(13.07%)、E3型125例(71.02%)、E4型28例(15.91%)。3组患者的基线资料比较,差异无统计学意义(P>0.05)。服药前各表型血脂水平无明显改变,服药后TC、LDL-C、TG水平均降低,HDL-C水平均升高(P<0.05)。服药后T2组患者中E3、E4型人群LDL-C水平比E2型降低更为明显(P<0.05)。服药后T3组患者中E2型比E3、E4型LDL-C水平降低更为明显(P<0.05),E2型比E4型TC水平降低更为明显(P<0.05)。结论ApoE基因多态性与他汀类药物的调脂疗效具有密切联系,在临床使用他汀类药物治疗时应采取个体化的服药方案。

外周血指标在特应性皮炎患儿中的水平变化及其临床意义

目的:探究特应性皮炎(atopic dermatitis,AD)患儿外周血指标中白细胞介素-13(interleukin-13,IL-13)、γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、免疫球蛋白E(immunoglobulin E,IgE)及载脂蛋白A1(apolipoprotein A1,apo A1)/载脂蛋白B(apolipoprotein B,apo B)/载脂蛋白E(apolipoprotein E,apo E)水平变化及其临床意义。方法:选取2020年5月至2022年4月在青岛市市立医院接受治疗的AD患儿73例(AD组),同时选取60例健康儿童作为对照(健康组)。比较2组儿童外周血指标表达差异,同时比较不同性别、年龄、疾病严重程度AD患儿的血浆指标水平。结果:与健康组相比,AD组患儿血清IL-13、IgE、apo A1水平较高,血清apo E水平较低,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。不同性别、不同年龄(>7岁,≤7岁)分别比较,患儿血清IL-13、IFN-γ、IgE及apo A1/B/E水平差异均无统计学意义(均P>0.05)。AD患儿血清IL-13、IgE、apo A1水平随病情加重而逐渐升高,差异均有统计学意义(均P<0.05),而轻、中、重度AD患儿的血清IFN-γ、apo B、apo E水平差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论:血清IL-13、IgE、apo A1可能参与AD疾病进展。