丙烯酸对仿刺参(Apostichopusjaponicus)幼参免疫酶活性的影响

为研究丙烯酸对仿刺参(Apostichopus japonicus)的免疫酶活性的影响,采用半静水式毒性测试方法,分别用3种不同浓度(0.84、4.20、21.00mg/L)丙烯酸处理24、48、72、96h后,检测仿刺参体腔液中酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性。结果发现:与对照组相比,各浓度丙烯酸处理24h后,ACP、CAT酶活性无显著差异,SOD酶活性显著上升;中、低浓度处理组AKP酶活性显著上升。48h后,随着丙烯酸处理浓度升高,ACP、AKP、SOD酶活性上升,具有剂量-效应正相关性;与对照组相比,中、低浓度处理组CAT活性显著降低,高浓度处理组CAT活性显著上升。72h后,随着丙烯酸处理浓度升高,SOD酶活性下降,具有剂量-效应负相关性。96h后,ACP、AKP酶活性与对照组无显著差异,高浓度组SOD酶活性极显著降低。上述结果表明:0.84~21.00mg/L的丙烯酸处理0~96h对仿刺参体腔液ACP、AKP、SOD和CAT等免疫指标有一定程度的影响。

饲料粗蛋白含量对刺参消化酶及消化道结构的影响

本实验以鱼粉、酪蛋白以及藻粉等为主要原料配制了粗蛋白质量分数为12%、16%、20%、24%、28%、32%的6种半精制刺参(Apostichopus japonicus)饲料,研究饲料中粗蛋白含量对刺参生长、蛋白酶和淀粉酶活性以及肠道结构的影响。结果表明,刺参饲料中粗蛋白含量对刺参的生长、饲料系数、蛋白质效率以及消化道中蛋白酶和淀粉酶活性都有明显影响,肠道蛋白酶和淀粉酶活性对饲料粗蛋白含量有适应性,随饲养时间也有适应性变化。饲料中粗蛋白含量对刺参肠道结构也有一定的影响。

氨氮胁迫对刺参几种免疫酶活性的影响

以养殖刺参(Apostichopus japonicus)为研究对象,对不同浓度的氨氮处理及病菌感染条件下刺参体腔液免疫酶的变化进行了测定。结果表明:随着氨氮处理强度的增加,刺参体腔液中超氧化物歧化酶(SOD)、碱性磷酸酶(ALP)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)及溶菌酶(LSZ)活性呈现先升高后降低的趋势,而同时感染病菌的情况下,较低质量浓度的氨氮胁迫可使SOD、GPX、ALP及LSZ活性上升,但在较高浓度氨氮处理时,酶活性的诱导则受到抑制。说明适宜浓度的氨氮处理可增强刺参的免疫力,从而减轻病菌感染对刺参造成的免疫功能损伤和提高刺参抗病力。刺参在感染病原菌假交替单胞菌(Pseudoalte-romonas sp)的条件下,3 mg/L、4 mg/L和6 mg/L浓度的氨氮处理第6天,刺参的累积发病死亡率分别为44.4%、55.6%和72.2%,高于对照组,表明较高浓度的氨氮胁迫能够显著降低刺参的免疫力,增加对病原菌的易感性。因此,在刺参养殖过程中,氨氮浓度的调控具有重要的意义。

刺参虾青素基因的克隆及不同体色个体间表达差异的分析

仿刺参(Apostichopus japonicus Selenka)的体色变化很大,多数背腹均为黄褐色,极少数呈白化特征,背腹均为纯白色。经人工繁育实验发现,白化仿刺参的子代仍多具白化特征。本文研究了虾青素基因与刺参白化特征的相关性。在克隆虾青素基因cDNA全长的基础上,比较了普通仿刺参和白化仿刺参在不同发育时期虾青素基因表达量的差异。结果表明,该基因的cDNA含有2058个核苷酸,编码560个氨基酸。经实时定量PCR分析,白化成参体壁中虾青素基因表达量显著低于普通成参;而在仿刺参色素沉积的早期,白化稚参体壁中虾青素基因表达量从受精后第39天开始显著低于普通稚参。可见,仿刺参体壁中虾青素基因的低表达与刺参白化特征的发生密切相关。

在土池网箱中促进仿刺参(Apostichopus japonicus)繁殖、变态和附着的研究

2007年5～8月在大连瓦房店市交流岛乡一口面积2．36hm^2的仿刺参（Apostichopus japonicus）养殖池中放置10个200目5m×5m×2．0m和1个长2．0m×宽1．5m×高1．0m的网箱，采用3种方法促进仿刺参繁殖和附着。第一种是让其在室内产卵后发育到耳状幼体初期时，放到室外的大网箱中正常培育。第二种是在室外的小网箱中催熟、产卵，发育至耳状幼体初期放到大网箱中培育。第三种方法是把种参放在大网箱中自然促熟、产卵和培育。经40d的试验，共催产亲参126头，获受精卵1．98亿粒。孵出耳状幼体1．03亿，孵化率52．02％，培育出稚参16．91万头。室内水槽中催产、受精和孵化的效果与室外网箱差异不显著，但室外网箱催产、受精和孵化操作简单，易于大面积推广和生产绿色稚参。

升温对‘水院1号’和大连养殖刺参非特异性免疫影响的研究

为获知升温对‘水院1号’和大连养殖刺参相关免疫酶活性及MDA含量的影响，实验设置不同温度梯度（16、20、24、28℃），分别对‘水院1号’和大连养殖刺参体腔液中过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）、溶菌酶（LSZ）的活性及丙二醛（MDA）含量进行测定。结果显示：（1）在升温过程中，‘水院1号’和大连养殖刺参体腔液中CAT、SOD、POD活性均呈先升高后降低的趋势。CAT活性范围分别为77.160~151.76、24.617~51.740 U/mL；SOD活性范围分别为0.070~0.154、0.056~0.100 U/mL；POD活性范围分别为2.360~3.470、1.407~2.407 U/mL。‘水院1号’和大连养殖刺参体腔液中LSZ活性均呈先升高再降低又升高的趋势，活性范围分别为9.741~30.898、8.554~28.006 U/mL。‘水院1号’刺参体腔液中MDA含量随着水温升高逐渐降低，其含量范围为42.331~46.563 nmol/mL，大连养殖群体刺参体腔液中MDA含量呈先降低后升高的趋势，变化范围为46.079~47.329 nmol/mL。（2）在升温过程中，‘水院1号’刺参体腔液中CAT、SOD、POD和LSZ活性变化较大连养殖群体刺参的变化差异大，其中CAT和POD活性变化差异显著（P〈0.05）。在28℃水温下，‘水院1号’刺参MDA含量显著小于大连养殖群体刺参MDA含量（P〈0.05）。研究表明，刺参能够对水温升高及时地做出生理免疫反应，通过调节非特异性免疫酶活性来清除机体内多余的活性氧，保护机体免受环境改变造成的损害。研究发现，‘水院1号’刺参较大连养殖群体刺参反应更为灵敏，对高温的适应性更强。本研究为探讨刺参对高温适应性和对‘水院1号’品种推广具有一定意义。

温度和pH对刺参(Apostichopus japonicus)消化酶活力的影响

消化酶活力能够反映刺参对不同营养成分的消化能力。当某一反应条件发生改变时,消化酶的活力大小就会发生变化,因此研究不同因子对消化酶活力的影响对于了解消化酶的性质具有重要的意义。温度和pH是影响消化酶活力的最重要的反应条件。本文中作者应用酶学分析研究了温度和pH对剌参前肠和中肠各种消化酶活力的影响。蛋白酶活力测定采用福林-酚法,脂肪酶活力测定采用水解法,淀粉酶活力和纤维素酶活力测定采用水杨酸显色法。实验结果表明,反应温度和反应pH对刺参前肠和中肠中的消化酶活力具有显著影响(P<0.05)。前肠和中肠中蛋白酶活力均在反应温度为50℃时达到最大值,前肠和中肠中脂肪酶和纤维素酶均在反应温度为40℃时达到最大值,而前肠和中肠中淀粉酶最适反应温度分别为40℃和30℃。刺参前肠蛋白酶活力在酸性环境下较中肠高,且在反应pH为5.0—5.8之间酶活力相对稳定,而中肠蛋白酶活力在碱性环境下较前肠高,且在反应pH为7.0—8.6之间酶活力相对稳定;刺参前肠脂肪酶活力随着pH的升高出现两个相对稳定的峰值,分别为4.2—5.0和6.2—7.0区间,中肠脂肪酶活力在pH为3.8时达到最大值,而在pH超过9.0明显失活:剌参前肠和中肠淀粉酶活力在pH变化时表现出相似的变化趋势,在反应pH为6.6—7.4之间酶活力较高且相对稳定;剌参前肠和中肠中纤维素酶活力在pH变化时反应不一致,前肠淀粉酶在反应pH为6.2—7.4之间酶活力较高且相对稳定,中肠纤维素酶活力在反应pH为5.4—7.0之间酶活力较高且相对稳定。此外,通过比较四种消化酶比活力值的大小,可以看出剌参蛋白酶活力最高,其次为纤维素酶和淀粉酶活力,而脂肪酶活力最低。

2种免疫多糖对刺参组织主要免疫酶活性的影响

研究了口服不同剂量海藻硫酸多糖、壳聚糖对刺参(Apostichopus japonicus)酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、溶菌酶(LSZ)、超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响。在基础饲料中分别添加0.25%、0.5%、1.0%海藻硫酸多糖(质量百分比);0.5%、1.0%、2.0%壳聚糖,以基础饲料饲喂组为对照,饲喂7d。于投喂后第2天、5天、9天和15天检测ACP、AKP、LSZ与SOD活性。结果显示,投喂后15d内,各实验组ACP、AKP活性均随时间和剂量增加持续升高,与对照组具有显著性差异(P<0.05),其中添加1.0%海藻硫酸多糖与2.0%壳聚糖效果最佳,1.0%海藻硫酸多糖组的ACP、AKP酶活最高,分别是对照组的3倍、2.3倍,2.0%壳聚糖添加组的ACP、AKP活性分别是对照组的3.9倍、4.4倍;LSZ活性则随时间延长先升高后降低,最高时与对照组具有显著性差异(P<0.05),且LSZ活性与免疫多糖添加量不成正比关系,0.5%海藻硫酸多糖与1.0%壳聚糖组效果最佳,酶活最高分别是对照组的1.4倍、3.3倍;SOD活性均在第2天显著升高,短暂的升高后逐渐降低趋于对照,1.0%海藻硫酸多糖、2.0%壳聚糖组SOD酶活最高,分别是对照组的1.7倍、2.1倍。研究结果表明,海藻硫酸多糖和壳聚糖可作为刺参免疫增强剂使用,建议其适宜添加量分别为1.0%海藻硫酸多糖、2.0%壳聚糖。

浒苔对刺参幼参生长影响的初步研究

对浒苔(Enteromorpha prolifera)的一般营养成分、氨基酸及脂肪酸含量进行测定,并以浒苔为原料投喂体质量(5.26±0.14)g的刺参(Apostichopus japonicas Selenka)幼参,与幼参常用饵料如鼠尾藻(Sargassum thunbergii)、马尾藻(Sargassum muticum)、海带(Laminaria japonica)进行效果对比。营养成分检测结果显示,浒苔蛋白质含量为15.7%,其中含量较高的氨基酸有天门冬氨酸、谷氨酸、丙氨酸、亮氨酸等;脂肪含量低(1%),多不饱和脂肪酸比例较高(0.24%);浒苔中各重金属(无机砷、镉、铅、甲基汞)含量均低于国家相关限量标准。以4种海藻为饵料投喂幼参70 d后,各组刺参幼参生长良好,成活率无明显差异(P>0.05),幼参体质量均显著增长(P<0.05);各组刺参的特定生长率(SGR)由高到低依次为鼠尾藻组、浒苔组、马尾藻组、海带组;摄食率(IR)由高到低依次为海带、马尾藻、浒苔、鼠尾藻,饵料转化率(FE)由高到低依次为鼠尾藻组、浒苔组、马尾藻组、海带组。浒苔、鼠尾藻、马尾藻3个投喂组刺参幼参特定生长(SGR)无显著差异(P>0.05),但显著高于海带组(P<0.05)。本研究说明,浒苔蛋白含量高、脂肪含量低,可全部或部分替代鼠尾藻添加到幼参饵料。

刺参(Apostichopus japonicus)EST序列中微卫星分布分析及其标记的筛选

利用微卫星查找软件对现已公布的6632条刺参ESTs的数据库中2—6个碱基重复单元组成的简单序列重复进行筛选,进而对其微卫星的丰度和分布进行比较研究。共发现微卫星序列416个,占整个ESTs数据库的6.48%;其中含双碱基重复序列146个,数量最多,占ESTs数据库中发现微卫星序列总数的65.86%;三、四、五、六碱基重复序列分别占微卫星序列总数的26.68%、1.68%、0.24%、5.53%。对含有SSR位点符合微卫星引物设计的EST序列利用Primer软件结合人工方法设计合成引物21对,其中13对有扩增产物且均为多态位点。扩增产物变性聚丙烯酰胺胶电泳,统计每个微卫星标记等位基因数目,计算等位基因频率、观测杂合度、期望杂合度等统计学指标的评价。结果表明,在13个微卫星位点上,等位基因的数目从3到8不等,等位基因长度从175—382bp,观测杂合度和期望杂合度分别为0.158—0.650和0.198—0.841,所筛选微卫星标记可于遗传分析。

刺参肠道与养殖池塘环境中异养细菌和弧菌数量周年变化

2008年9月～2009年10月，对刺参肠道与养殖环境中异养细菌和弧茵周年变化进行了初步研究。结果表明：刺参肠道与养殖环境中（水体、底泥、附着基）异养细菌数（HPC）、弧菌数（VBC）均呈现出明显的季节变化，肠道中HPC、VBC分别为1．85×105～2．17×109CFU／g、4．1×104-2．2×108CFU／g，水体中HPC、VBC分别为90～4．67×105CFU／mL、0～5_3×100CFU／mL，底泥中HPC、VBC分别为9．80×104-6．72×106CFU／g、1．01×104～5．75×105CFU／g，附着基中HPC、VBC分别为2．78×105-2．57×107CFU／g、4．6×104-1．31×107CFU／g，夏、秋两季细菌总数较高，冬、春低温季节细菌数量显著下降。通过VBC与HPC的比值可以看出，在冬、春季细菌总数较低的季节，弧菌与异养细菌数量比例较高，最高值达到：43．8％、43．2％，通过对优势菌的分离鉴定，冬、春两季灿烂弧茵（Vibriosplendidus）均占优势，这可能是造成冬、春两季刺参发病的诱因之一。本文通过研究刺参肠道与养殖环境中异养细菌和弧茵的变化规律，以期为刺参的健康养殖提供有益参考。

日本刺参的抗肿瘤及免疫调节作用研究

采用日本刺参(Apostichopus japonicus)匀浆灌胃移植性肿瘤模型小鼠,探讨了日本刺参的抗肿瘤作用及其对免疫功能的调节作用。结果表明,日本刺参各剂量组均能显著抑制小鼠S180肉瘤的生长,提高小鼠脾指数及胸腺指数(P<0.05);显著提高荷瘤小鼠血清溶血素含量(P<0.01)和抗体形成细胞数(P<0.05);提高迟发型变态反应水平和脾淋巴细胞转化能力(P<0.05,P<0.01);促进NK细胞活性和巨噬细胞的吞噬能力(P<0.05,P<0.01)。提示日本刺参能全面调节机体的特异性和非特异性免疫功能,控制和杀灭肿瘤细胞。

两种海参对实验性高脂血症大鼠治疗作用的比较研究

比较研究菲律宾刺参(Pearsonothuria graeffei)和日本刺参(Apostichopus japonicus)对实验性高脂血症大鼠血脂水平和抗氧化能力的影响。结果表明,菲律宾刺参和日本刺参均能明显降低高脂血症大鼠血清TC(P<0.01),LDL-C(P<0.01)含量及LDL-C/HDL-C比值(P<0.01),提高HDL-C及NO(P<0.01)含量;显著降低血清和肝脏中MDA含量(P<0.05,P<0.01),并提高其SOD和GSH-PX活性(P<0.05,P<0.01)。其中,日本刺参对血清TC,LDL-C,LDL-C/HDL-C及肝脏MDA水平降低作用和NO含量提升作用显著优于菲律宾刺参(P<0.05)。提示了菲律宾刺参和日本刺参对大鼠实验性高脂血症均具有显著的治疗作用,日本刺参的治疗效果优于菲律宾刺参。

乳酸菌及其代谢产物对刺参幼体肠道菌群和非特异性免疫的影响

以初始体质量为(2.74±0.17)g的刺参(Apostichopus japonicus)为研究对象,在室内养殖池进行60 d饲喂实验,研究饲料中添加乳酸菌制剂和乳酸菌代谢产物对刺参肠道菌群、部分免疫指标及生长的影响。在基础饲料中分别添加乳酸菌制剂和乳酸菌代谢产物各2 mL/m3(按饲养水体折算),配制2种实验饲料。实验结果显示:与对照组比,饲料中添加乳酸菌与乳酸菌代谢产物均显著降低了刺参肠道弧菌数及大肠杆菌数(P<0.05);饲料中添加乳酸菌及其代谢产物能使刺参肠道酸性磷酸酶和碱性磷酸酶活力显著升高,溶菌酶活性有所提升,其中乳酸菌制剂实验组与代谢产物实验组免疫酶活力差异不显著;两实验组刺参的特定生长率显著高于对照组(P<0.05)。上述结果表明,乳酸菌制剂与乳酸菌代谢产物对刺参的肠道菌群平衡、免疫力及生长均具有良好的促进作用,且两者之间差异不显著。

四种重金属对刺参幼参的急性致毒效应

采用静水试验法，在水温18．5℃～20℃的条件下，用Cu^2＋，Zn^2＋，Cd^2＋和Cr^6＋四种重金属对刺参幼参进行了单一急性毒性试验。结果表明：Cu^2＋对刺参幼参的24h，48h，72h和96hLC50分别为0．299，0．176，0．133和0．120mg，L；Zn^2＋的24h，48h，72h和96hLC50分别为6．700，3．624，2．577和1．951mg／L；Cd^2＋的24h，48h和72hLC50分别为4．246，2．588和2．137mgEL；Cr6＊的24h，48h和72hLC50分别为31．974，7,499和3．808mg，L；Cu^2＋,Zn^2＋，Cd^2＋和Cr^6＋对刺参幼参的安全浓度分别为0．018，0．362，0．259和0．750mg/L。四种重金属对刺参幼参的毒性大小依次为Cu^2＋〉Cd^2＋〉Zn^2＋〉Cr^6＋。

基于线性食物网模型估算荣成俚岛人工鱼礁区刺参和皱纹盘鲍的生态容纳量

俚岛人工鱼礁区是中国北方近海典型的海珍品增殖型人工鱼礁生态系统,刺参(Apostichopus japonicus)和皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai)是该生态系的主要增殖放流种类。基于2009年在荣成俚岛人工鱼礁区进行的周年生物资源调查数据,利用EWE软件构建俚岛人工鱼礁区生态系统生态通道模型(Ecopath),对该模型进行了不确定性及输入参数敏感度检验,系统分析了俚岛人工鱼礁区生态系统特征和能量流动规律,估算了俚岛人工鱼礁区生态系统内刺参和皱纹盘鲍的生态容纳量。模型由19个功能组构成,基本涵盖了俚岛人工鱼礁区生态系统能量流动的主要过程。分析结果表明,模型可信度P指数为0.51,小型底层鱼类生产量与生物量的比值(P/B)下降50%会使小型底层鱼类生物量(B)估算值变化1.36,影响最大;系统总流量为10 786.680 t/(km2.a),其中27%流向碎屑,17%以捕捞和沉积的形式流出系统;系统的总初级生产力为4 131.966 t/(km2.a);系统的总能量转换效率为10.5%,流量中来自碎屑的比例为39%,其中的61%直接来源于初级生产者,能流通道以牧食食物链为主导;刺参和皱纹盘鲍的生态容纳量为309.4 t/km2和198.86 t/km2,目前礁区刺参和皱纹盘鲍的生物量分别占估算生态容纳量的31.72%和26.15%,仍具一定的增殖空间。

汞、镉、硒对刺参(Apostichopus japonicus)幼参的单一毒性与联合毒性

在水温15.5—17.0℃的静水条件下,以Hg2+、Cd2+和Se4+对刺参幼参进行了单一毒性和联合毒性实验。联合毒性实验采用等毒性配比法,并以Marking相加指数评价联合毒性效应。单一毒性实验结果表明,Hg2+、Cd2+、Se4+对刺参幼参急性毒性的96h半致死质量浓度(LC50)分别为0.0912、4.6433和0.7413mg/L,三者对幼参的毒性大小依次为Hg2+>Se4+>Cd2+。Hg2+、Cd2+、Se4+对刺参幼参的最大容许质量浓度分别为0.0009、0.0464、0.0074mg/L。联合毒性实验结果表明,当Hg2+-Cd2+、Hg2+-Se4+以及Cd2+-Se4+分别以等毒性混合物共存时,它们对刺参幼参在24h、48h、72h和96h的联合毒性均为拮抗作用;当Hg2+-Cd2+-Se4+三者以等毒性混合共存时,它们对刺参幼参在24h、48h、72h和96h的联合毒性仍为拮抗作用。讨论了Hg2+、Cd2+、Se4+对刺参幼参联合毒性效应的机制。

几种卤素类消毒剂对刺参幼参的急性毒性作用

在水温18．5～20℃的静水条件下，用4种卤素类消毒剂对刺参幼参进行了急性毒性试验。结果表明，三氯异氰尿酸（trichloroisocyanuric acid，简称TCCA）对刺参幼参的24h LC50、48h LC50和安全质量浓度（Cs）分别为33．22、25．32、4．41mg／L，二溴海因（dibromodimethyl hydantoin，简称DBDMH）的24h LC50、48h LC50和Cs分别为371．17、339．65、85．32mg／L，聚维酮碘（povidone-iodine，简称PVP—I）的24h LC50、48h LC50和Cs分别为3．14、1．45、0．09mg／L，季铵盐络合碘（quaternary ammonium salt—iodine，简称QASI）的24h LC50、48h LC50和Cs分别为4．24、2．02、0．14mg／L。研究表明，4种消毒剂对幼参的毒性大小依次为聚维酮碘〉季铵盐络合碘〉三氯异氰尿酸〉二溴海因。

日本刺参胶原肽对B16黑素瘤细胞黑素合成的影响

目的:研究不同分子量日本刺参胶原肽A1(6000U<Mr<10000U)、A2(Mr<6000U)对小鼠B16黑素瘤细胞黑素生成、酪氨酸酶活性及酪氨酸酶基因表达的影响。方法:采用MTT法测定细胞增殖活性,NaOH裂解法测定黑素生成量,多巴氧化法测定酪氨酸酶活性,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定酪氨酸酶mRNA表达。结果:不同分子量日本刺参胶原肽均能显著促进B16细胞增殖,抑制B16细胞黑素合成和酪氨酸酶活性,下调酪氨酸酶mRNA表达,且剂量效应关系明显。结论:不同分子量日本刺参胶原肽均具有显著抑制B16黑素瘤细胞黑色合成的作用。其中,A1的抑制效果较A2显著。

全营养破壁酵母对仿刺参非特异性免疫及肠道菌群的影响

仿刺参(Apostichopus japonicus)体质量(0.65±0.03)g,基础饲料中添加5%(质量分数)全营养破壁酵母为实验饲料,以基础饲料为对照。分别于投喂后第15天和第30天检测仿刺参体腔细胞数量、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、过氧化氢酶(CAT)活性,于第30天计数肠道菌群。结果显示,实验组仿刺参体腔细胞数量与对照组差异不显著;ACP、AKP、CAT活性均比对照组有所增高,其中第15天CAT活性和第30天AKP活性与对照组具有显著性差异(P<0.05)。投喂破壁酵母对仿刺参肠道菌群有一定影响,可显著降低肠道内异养菌总数及弧菌数量。研究表明,全营养破壁酵母对仿刺参非特异性免疫活性有增强作用,且对肠道有害菌群有一定抑制作用,但其对肠道菌群的影响及适宜添加量等需进一步研究。本研究旨在探索全营养破壁酵母在海参育保苗中的作用机理,以期为仿刺参安全健康养殖开发新型绿色添加剂提供科学依据。