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胸膜肺炎放线杆菌ApxⅡ蛋白重组腺病毒载体构建及免疫原性研究
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作者 颜运秋 黎满香 +1 位作者 赵枭健 龙娉 《现代畜牧兽医》 2023年第11期21-25,共5页
研究旨在构建胸膜肺炎放线杆菌ApxⅡ蛋白的复制缺陷型5型腺病毒载体的重组腺病毒。构建包含胸膜肺炎放线杆菌ApxⅡ基因的穿梭质粒pDC316-APXⅡ,并与腺病毒骨架质粒pBHGlox(delta)E13Cre共转染Hek293细胞,获得了重组腺病毒rAd-APXⅡ,将... 研究旨在构建胸膜肺炎放线杆菌ApxⅡ蛋白的复制缺陷型5型腺病毒载体的重组腺病毒。构建包含胸膜肺炎放线杆菌ApxⅡ基因的穿梭质粒pDC316-APXⅡ,并与腺病毒骨架质粒pBHGlox(delta)E13Cre共转染Hek293细胞,获得了重组腺病毒rAd-APXⅡ,将纯化后的重组腺病毒rAd-APXⅡ肌肉注射小鼠进行免疫原性分析。结果显示,试验成功构建了pDC316-APXⅡ质粒以及包装了rAd-APXⅡ病毒。rAd5-Null组未产生特异的APXⅡIgG抗体;低和高浓度rAd-APXⅡ组均可产生较高的APXⅡIgG抗体,其中高浓度组产生的抗体水平显著高于低浓度组(P<0.05);某疫苗组产生的抗体水平显著高于rAd-APXⅡ低浓度组(P<0.05),但低于rAd-APXⅡ高浓度组(P<0.05)。低、高浓度rAd-APXⅡ组和疫苗组的IgG1、IgG2a、IgG2b和IgG3抗体显著高于rAd-Null组(P<0.05);高浓度rAd-APXⅡ组和疫苗组抗体显著高于低浓度rAd-APXⅡ组(P<0.05)。研究表明,rAd-APXⅡ重组腺病毒免疫小鼠能够产生特异性抗体并显示良好的免疫原性。 展开更多
关键词 猪传染性胸膜肺炎 胸膜肺炎放线杆菌 apx 重组腺病毒 免疫原性
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胸膜肺炎放线杆菌分离株血清型的PCR鉴定和Apx毒素基因检测
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作者 卢碧凯 袁秀芳 +7 位作者 徐丽华 余斌 苏菲 叶十一 陈怡洁 蒋利明 张晖 李军星 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期1341-1346,共6页
旨在调查胸膜肺炎放线杆菌流行株的血清型及Apx毒素基因携带情况,采用PCR方法对APP分离株进行血清型鉴定和Apx毒素基因检测。结果表明,64个分离株分别被鉴定为2、5、7、8、12、15、19共7个血清型。7个血清型中发现12种不同的Apx毒力因... 旨在调查胸膜肺炎放线杆菌流行株的血清型及Apx毒素基因携带情况,采用PCR方法对APP分离株进行血清型鉴定和Apx毒素基因检测。结果表明,64个分离株分别被鉴定为2、5、7、8、12、15、19共7个血清型。7个血清型中发现12种不同的Apx毒力因子模式。毒力因子分析结果显示,同一血清型的不同菌株携带的Apx毒素基因存在差异,不同血清型的菌株也可能会携带相同模式的Apx毒素基因。本研究表明,血清8型胸膜肺炎放线杆菌是浙江省的优势血清型,血清19型菌株在国内首次被检测到。血清型与所携带的Apx毒素基因之间不存在必然联系。 展开更多
关键词 胸膜肺炎放线杆菌 血清分型 apx 毒力因子 PCR
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芹菜APX基因家族鉴定及其表达分析
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作者 杜佳庚 周瑾 +3 位作者 李晓燕 张颖 伍丽梅 李梦瑶 《干旱地区农业研究》 CSCD 北大核心 2023年第6期54-63,共10页
抗坏血酸过氧化物酶(Ascorbate peroxidase, APX)是植物活性氧代谢中重要的抗氧化酶之一,在植物抵抗氧化胁迫方面发挥重要作用。利用生物信息学方法对芹菜基因组中的APX基因家族成员进行鉴定和分析,并通过实时荧光定量PCR(quantitative ... 抗坏血酸过氧化物酶(Ascorbate peroxidase, APX)是植物活性氧代谢中重要的抗氧化酶之一,在植物抵抗氧化胁迫方面发挥重要作用。利用生物信息学方法对芹菜基因组中的APX基因家族成员进行鉴定和分析,并通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR, qRT-PCR)验证分析AgAPXs在高温胁迫下的表达情况,为开展芹菜APX基因参与高温胁迫调控机制提供依据。结果表明:芹菜基因组中共有9个APX基因,随机分布在5个染色体上,并出现了基因片段复制现象;大多数基因被定位在细胞质中。系统发育分析表明,AgAPX基因家族可分为3个亚族,同一亚族中的成员具有相似的基因结构和基序。启动子顺式元件分析表明,大多数AgAPX基因含有多种与生长发育、植物激素和逆境胁迫相关的顺式元件。高温胁迫下,芹菜APX活性提高。qRT-PCR分析表明,AgAPXs在不同时间的高温处理下表达具有显著差异,并与转录组表达丰度相一致,AgAPX2、AgAPX3、AgAPX4、AgAPX5、AgAPX7的表达量和APX活性具有显著相关性,推测AgAPXs可能参与了芹菜抵御高温的调控过程。本研究初步鉴定并提供了芹菜APX基因家族成员信息,为今后进一步探索芹菜APX基因功能提供了重要的研究基础。 展开更多
关键词 芹菜 apx 系统进化 顺式元件 高温胁迫应答
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Genome-wide and transcriptome-wide identification of the APX gene family in rapeseed (Brassica napus L.) and their expression features under low temperature stress
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作者 Xuan Sun Guomei Liu +1 位作者 Lin Yao Chunfang Du 《Oil Crop Science》 CSCD 2023年第4期259-265,共7页
Ascorbate peroxidase(APX)is a crucial H2O2 scavenger that utilizes ascorbic acid as an electron donor and plays a significant role in plant stress resistance.This study aims to identify and characterize the Brassica n... Ascorbate peroxidase(APX)is a crucial H2O2 scavenger that utilizes ascorbic acid as an electron donor and plays a significant role in plant stress resistance.This study aims to identify and characterize the Brassica napus L.APX gene family through genome and transcriptome sequencing,while also revealing their expression profile under low-temperature stress via transcriptome and proteome analysis.The results indicate the presence of 18 genes with three different conserved domains distributed in Brassica napus L.,which can be classified into three major branches based on phylogenetic analysis.Eleven members were predicted to have the low-temperature response component(LTR).Most APX genes exhibit up-regulated transcriptional expression under low temperature stress,particularly APX2,APX4,APX12,and APX18.In terms of proteomics data,only six members(APX2,APX4,APX8,APX12,APX17,and APX18)showed temporal specificity in their expression patterns.Therefore,this study provides valuable insights into the complexity of the APX family in the functional characterization of its genes for future research. 展开更多
关键词 Brassica napus Low-temperature stress apx Bioinformatics
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白菜型冬油菜抗坏血酸过氧化物酶(APX)基因的克隆、表达及其活性分析 被引量:24
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作者 曾秀存 孙万仓 +10 位作者 方彦 刘自刚 董云 孙佳 武军艳 张鹏飞 史鹏辉 孔德晶 张腾国 何丽 赵彩霞 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1400-1408,共9页
抗坏血酸过氧化物酶(APX)是一种在逆境条件下清除细胞内氧自由基、增强植物抗逆性的关键酶。本研究根据已发表植物抗坏血酸过氧化物酶基因APX的同源保守序列设计引物,采用RT-PCR扩增超强抗寒白菜型冬油菜陇油7号的DNA,获得APX基因开放... 抗坏血酸过氧化物酶(APX)是一种在逆境条件下清除细胞内氧自由基、增强植物抗逆性的关键酶。本研究根据已发表植物抗坏血酸过氧化物酶基因APX的同源保守序列设计引物,采用RT-PCR扩增超强抗寒白菜型冬油菜陇油7号的DNA,获得APX基因开放阅读框,长度为753 bp,编码250个氨基酸残基,推导的氨基酸序列具有APX蛋白的典型特征。生物信息学分析显示,与已报道的大白菜的APX氨基酸序列同源性达99%,该酶蛋白具有高度的进化保守性,其保守序列属于植物的POD超家族,APX相对分子质量和理论等电点依次为27.7 kD和5.58;APX基因无信号肽,是一个亲水性蛋白,可推测其定位于细胞质中;二级结构预测表明陇油7号的APX是由不规则卷曲和α-螺旋组成的稳定蛋白。实时荧光定量PCR和酶活性分析显示,该基因表达和酶活性受低温胁迫诱导,表明该基因在白菜型冬油菜陇油7号适应低温胁迫过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 白菜型油菜 低温 apx基因克隆 表达分析 apx活性
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音频分析仪APX515在SW100H型广播发射机指标测试中的应用
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作者 袁林云 《产品可靠性报告》 2023年第7期129-131,共3页
在大功率调幅广播传输系统中,发射机的运行指标是衡量技术维护工作质量高低的重要标志。在实际工作中,通常使用ATS-1音频分析仪、R&S FMAB调制分析仪等仪器来测量发射机的三大指标。由于专业测量仪器更新和产品迭代,一款性能高、经... 在大功率调幅广播传输系统中,发射机的运行指标是衡量技术维护工作质量高低的重要标志。在实际工作中,通常使用ATS-1音频分析仪、R&S FMAB调制分析仪等仪器来测量发射机的三大指标。由于专业测量仪器更新和产品迭代,一款性能高、经济便捷的APx系列音频分析仪设备APx515应用于广播发射机指标测试是最好的选择。本文结合广播发射机维护实践,以APx515型音频分析仪在SW100H型广播发射机指标测试操作为例,介绍其配套软件APx500的参数设置、测试步骤,并总结操作方法和注意事项。 展开更多
关键词 调幅广播 音频分析 apx515 发射机 指标测试
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盐地碱蓬(Suaedasalsa)APX基因的克隆及盐胁迫下的表达 被引量:28
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作者 马长乐 王萍萍 +2 位作者 曹子谊 赵彦修 张慧 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 2002年第4期261-266,共6页
从盐地碱蓬 (Suaedasalsa)中克隆了抗坏血酸过氧化物酶 (ascorbateperoxidase ,APX)的全长cDNA(SsAPX) ,基因注册号为AY0 34 893。SsAPX全长 1.1kb ,推导的氨基酸序列长为 2 5 0个氨基酸残基。BLAST同源性分析表明 ,该cDNA与已报告的菠... 从盐地碱蓬 (Suaedasalsa)中克隆了抗坏血酸过氧化物酶 (ascorbateperoxidase ,APX)的全长cDNA(SsAPX) ,基因注册号为AY0 34 893。SsAPX全长 1.1kb ,推导的氨基酸序列长为 2 5 0个氨基酸残基。BLAST同源性分析表明 ,该cDNA与已报告的菠菜(Spinaciaoleracea)细胞质抗坏血酸过氧化物酶基因同源性最高 ,在核苷酸水平上一致性为 87% ,在氨基酸水平上一致性为 89%。Southern杂交表明APX基因在盐地碱蓬基因组中只有 1个拷贝。盐 (NaCl 40 0mmol/L)处理不同时间后的Northern杂交分析表明盐地碱蓬中SsAPX基因在盐胁迫下表达量增加 ,而且在盐胁迫下抗坏血酸过氧化物酶的活性也显著地增加 ,说明该基因受盐诱导。 展开更多
关键词 盐地碱蓬 CDNA apx 活性氧 盐胁迫
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琯溪蜜柚汁胞在发育与粒化过程中APX活性变化及同工酶分析 被引量:7
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作者 钟凤林 郭志雄 +2 位作者 李开拓 王江波 潘东明 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期27-31,共5页
对不同发育时期的琯溪蜜柚(Citrus grandis‘Guanximiyou’)汁胞进行APX活性测定及同工酶分析。结果表明,随着汁胞的发育,APX活性增大;而柚子衰老腐烂时,APX活性迅速降低。APX同工酶随着汁胞发育而发生变化,花后150d的APX同工酶增加了1... 对不同发育时期的琯溪蜜柚(Citrus grandis‘Guanximiyou’)汁胞进行APX活性测定及同工酶分析。结果表明,随着汁胞的发育,APX活性增大;而柚子衰老腐烂时,APX活性迅速降低。APX同工酶随着汁胞发育而发生变化,花后150d的APX同工酶增加了1个组分(迁移率0.66),且随着汁胞的成熟,其表达量增加。花后230d时柚子开始衰老腐烂,花后242d已难以看到大部分APX同工酶酶谱。粒化汁胞的APX活性比正常汁胞大,同工酶酶谱亮度和清晰度也大,推测溪蜜柚汁胞在粒化过程中APX可清除活性氧自由基,抵抗氧化损伤。 展开更多
关键词 蜜柚 汁胞 发育 粒化 apx 同工酶
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胸膜肺炎放线杆菌ApxII毒素结构基因的原核表达以及重组蛋白的免疫原性分析 被引量:7
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作者 王春来 刘思国 +3 位作者 王牟平 彭永刚 宫强 孔宪刚 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期63-66,共4页
猪传染性胸膜肺炎(Porcine infectious pleuropneumonia)是由胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)引起的猪的一种呼吸道疾病。本实验以APP血清7型的一株现地分离株L25-4株为研究对象,对其分泌的ApxⅡ毒素的结构基因... 猪传染性胸膜肺炎(Porcine infectious pleuropneumonia)是由胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)引起的猪的一种呼吸道疾病。本实验以APP血清7型的一株现地分离株L25-4株为研究对象,对其分泌的ApxⅡ毒素的结构基因apxⅡA进行了全基因克隆和测序,并利用原核表达载体pGEX-6P-1在E.coli中进行了原核表达。表达产物以包涵体形式存在,包涵体蛋白经过洗涤后作为抗原用于Western-blotting免疫印迹实验,结果表明重组的ApxⅡA蛋白具有良好的免疫原性。 展开更多
关键词 胸膜肺炎放线杆菌 apxⅡ毒素 原核表达 免疫原性
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龙眼胚性愈伤组织维生素C过氧化物酶基因(apx)及NADH脱氢酶基因(nad2)部分序列的克隆 被引量:8
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作者 王凤华 赖钟雄 +1 位作者 郑金贵 吕柳新 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期45-48,共4页
 采用PCR技术从龙眼胚性愈伤组织中扩增出维生素C过氧化物酶基因 (apx)的部分cDNA序列longan1及NADH脱氢酶基因(nad2)的部分cDNA序列longan31,其中longan31是首次从体胚中克隆到的NADH脱氢酶基因(nad2).杂交结果显示,longan1与胚性愈...  采用PCR技术从龙眼胚性愈伤组织中扩增出维生素C过氧化物酶基因 (apx)的部分cDNA序列longan1及NADH脱氢酶基因(nad2)的部分cDNA序列longan31,其中longan31是首次从体胚中克隆到的NADH脱氢酶基因(nad2).杂交结果显示,longan1与胚性愈伤组织和球形胚的RNA具有明显杂交信号,说明longan1在胚性愈伤组织和球形胚阶段特异表达. 图 3参 展开更多
关键词 龙眼 体细胞胚胎发生 apx nad2
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NaCl和等渗PEG对荞麦SOD及APX活性的影响 被引量:13
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作者 战伟龑 张学杰 +2 位作者 杨德翠 马德源 杨洪兵 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2009年第5期101-102,共2页
采用不同浓度NaC l和等渗PEG对2个荞麦品种进行处理,低浓度NaC l能明显促进2个荞麦品种根和叶的SOD及APX活性,等渗PEG处理时增加幅度较小;高盐度处理时苦荞根和叶的SOD及APX活性仍保持较高的水平,甜荞正相反,说明苦荞的耐胁迫性大于甜荞。
关键词 荞麦 NACL处理 等渗PEG SOD活性 apx活性
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猪传染性胸膜肺炎放线杆菌ApxⅣ毒素基因的克隆与表达 被引量:14
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作者 王方昆 王一成 +1 位作者 袁秀芳 徐丽华 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期657-660,共4页
以猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)血清2型标准菌株基因组DNA为模板,用PCR方法扩增ApxⅣ毒素基因特异片段1.5 kb左右,将PCR产物纯化后与pMD18-T连接并测序,结果该片段的碱基序列与GenBank中标准株序列的同源性为98%。随后将该片段亚克隆... 以猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)血清2型标准菌株基因组DNA为模板,用PCR方法扩增ApxⅣ毒素基因特异片段1.5 kb左右,将PCR产物纯化后与pMD18-T连接并测序,结果该片段的碱基序列与GenBank中标准株序列的同源性为98%。随后将该片段亚克隆到原核表达载体pET-28a(+)的多克隆位点,经鉴定后得到重组质粒pET-ApxⅣ,将此重组质粒转化到受体菌BL21-DL3中,并用诱导剂乳糖进行诱导表达,5 h后表达达到高峰。经12%SDS-PAGE电泳检测,表达得到的融合蛋白约为61 000。经Western blotting分析,表达蛋白能与APP阳性血清发生特异性反应,而与阴性血清不反应。 展开更多
关键词 猪胸膜肺炎放线杆菌 apx 克隆 表达
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猪传染性胸膜肺炎放线杆菌毒素apxⅢA基因的克隆和表达 被引量:8
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作者 邵美丽 刘思国 +4 位作者 王春来 郭洋 张秀华 郭设平 佟恒敏 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期139-141,共3页
以猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清2型参考株基因组DNA为模板,PCR方法扩增出apxⅢA基因3.1kb的片段,扩增产物克隆于pMD18-T中,重组质粒经酶切鉴定后进行核苷酸序列测定,并与GenBank中不同血清型胸膜肺炎放线杆菌apxⅢA基因进行比较,结果... 以猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清2型参考株基因组DNA为模板,PCR方法扩增出apxⅢA基因3.1kb的片段,扩增产物克隆于pMD18-T中,重组质粒经酶切鉴定后进行核苷酸序列测定,并与GenBank中不同血清型胸膜肺炎放线杆菌apxⅢA基因进行比较,结果显示核苷酸同源性均在96%以上。将该基因片段亚克隆到原核表达载体pGEX-6P-1的BamHⅠ/SalⅠ位点,成功构建了重组表达载体pGEX-apxⅢA,转化大肠杆菌BL-21(DE3)中并获得表达。SDS-PAGE结果显示,表达的融合蛋白分子量约为140Ku,与预测相符,Westernblot证明该融合蛋白具有免疫学活性。该融合蛋白的成功表达为猪传染性胸膜肺炎亚单位疫苗的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 猪胸膜肺炎放线杆菌 apxⅢA基因
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猪胸膜肺炎放线杆菌ApxIVA基因特异片段的克隆和表达 被引量:7
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作者 彭永刚 刘思国 +3 位作者 王牟平 宫强 王春来 沈国顺 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期103-106,共4页
以猪胸膜肺炎放线杆菌的血清7型国内分离株25_4株基因组DNA为模板,PCR方法扩增apxIVA特异片段,PCR产物经纯化后与载体PMD18_T进行连接、转化,经酶切及序列分析鉴定后,亚克隆到原核表达载体pGEX_6P_1中,构建成重组表达质粒pGEX_apxI... 以猪胸膜肺炎放线杆菌的血清7型国内分离株25_4株基因组DNA为模板,PCR方法扩增apxIVA特异片段,PCR产物经纯化后与载体PMD18_T进行连接、转化,经酶切及序列分析鉴定后,亚克隆到原核表达载体pGEX_6P_1中,构建成重组表达质粒pGEX_apxIVA,转入到大肠杆菌BL21中,以IPTG进行诱导,进行SDS_PAGE电泳。结果表明,25_4株apxIVAgene与基因库中标准7型apxIVAgene同源性达97%,所表达的融合蛋白相对分子量为44kD,与实际预测相符。apxIVA毒素特异片段的成功表达为猪胸膜肺炎放线杆菌病的诊断打下基础。 展开更多
关键词 猪胸膜肺炎放线杆菌 分泌蛋白 载体 克隆 表达 apxⅣA
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猪胸膜肺炎放线杆菌ApxⅡ-ELISA抗体检测试剂盒的研制与应用 被引量:4
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作者 贾凡 王建银 +4 位作者 胡军勇 石碧 李树清 陈焕春 周锐 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期283-287,共5页
根据胸膜肺炎放线杆菌ApxⅡ毒素的特点,建立了一种能够诊断猪传染性胸膜肺炎和进行免疫后效果评估的血清学方法ApxⅡ-ELISA。本研究将该诊断方法进一步研制成试剂盒,对其特异性、敏感性、重复性和稳定性进行了测试,与间接血凝试验试剂... 根据胸膜肺炎放线杆菌ApxⅡ毒素的特点,建立了一种能够诊断猪传染性胸膜肺炎和进行免疫后效果评估的血清学方法ApxⅡ-ELISA。本研究将该诊断方法进一步研制成试剂盒,对其特异性、敏感性、重复性和稳定性进行了测试,与间接血凝试验试剂盒进行了对比研究,并用该试剂盒检测了来自中国、英国、丹麦、美国、加拿大和澳大利亚的临床猪血清1 453份。结果表明,ApxⅡ-ELISA试剂盒具有很高的特异性和敏感性;3批试剂盒的批内和批间的重复性良好(变异系数均<15%);试剂盒在2~8℃保存9个月,稳定性良好;ApxⅡ-ELISA试剂盒能够有效的诊断猪传染性胸膜肺炎,同时也可作为一种评价猪群免疫后免疫效果的有效方法。 展开更多
关键词 胸膜肺炎放线杆菌 apxⅡ—ELISA 诊断 免疫效果评估
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玉米APX基因的克隆及其原核表达研究 被引量:4
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作者 任瑛 赵美爱 +2 位作者 郭新梅 裴玉贺 宋希云 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2014年第4期49-55,共7页
为了研究冷胁迫处理下的玉米抗坏血酸过氧化物酶的作用,根据GenBank发表的APX基因的ORF序列设计引物,利用RT-PCR从冷胁迫后的玉米自交系(E28)叶片总RNA中经cDNA转化,pMD19-T载体的亚克隆,获得APX基因开放阅读框,长度为753 bp,编码250个... 为了研究冷胁迫处理下的玉米抗坏血酸过氧化物酶的作用,根据GenBank发表的APX基因的ORF序列设计引物,利用RT-PCR从冷胁迫后的玉米自交系(E28)叶片总RNA中经cDNA转化,pMD19-T载体的亚克隆,获得APX基因开放阅读框,长度为753 bp,编码250个氨基酸残基。生物信息学分析显示,APX相对分子质量和理论等电点依次为27.3 kDa和5.56。将携带完整的ORF序列连入表达载体pET-28a(+)中,APX基因经IPTG诱导后高效表达,SDS-PAGE电泳检测到目标蛋白的大小约为27.3 kDa,与预测结果一致。抗盐分析显示,重组大肠杆菌BL21(pET28-APX)的抗盐性明显高于对照菌株BL21(pET28)且其抗NaCl的临界浓度为0.6 mol/L,这为后期对作物的抗逆研究提供了科学依据。 展开更多
关键词 apx 原核表达 pET28a(+) IPTG BL21(DE3)
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胸膜肺炎放线杆菌apxⅡCA基因的克隆、表达及ApxⅡ-ELISA检测方法的初步建立 被引量:8
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作者 徐晓娟 何启盖 +1 位作者 徐高原 陈焕春 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期335-337,共3页
根据国外已发表的胸膜肺炎放线杆菌 (APP) Apx 的基因序列设计了 1对引物 ,从我国 APP武汉株扩增出约3.5 kb的 apx CA基因。测序结果表明 ,该基因的大小与国外已报道的 1型和 9型 APP的 apx CA基因大小一致 ,同源性达 99%。将该基因连... 根据国外已发表的胸膜肺炎放线杆菌 (APP) Apx 的基因序列设计了 1对引物 ,从我国 APP武汉株扩增出约3.5 kb的 apx CA基因。测序结果表明 ,该基因的大小与国外已报道的 1型和 9型 APP的 apx CA基因大小一致 ,同源性达 99%。将该基因连接到原核表达载体 p ET- 17b,构建了原核表达质粒 p ET- apx CA,并在大肠杆菌 BL 2 1(DE3)中表达出了大小约 10 5 0 0 0的 Apx 蛋白。提取包涵体蛋白作为抗原包被 EL ISA酶标板 ,对已知阳性、阴性血清和临床送检血清样品进行了 EL ISA检测 ,从而为最终建立 Apx - EL 展开更多
关键词 胸膜肺炎放线杆菌 apxⅡCA基因 克隆 表达 ELISA
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转逆境诱导型启动子SWPA2驱动Cu/ZnSOD和APX基因甘薯(Ipomoea batatas(L.)Lam.)耐盐性 被引量:12
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作者 王欣 过晓明 +3 位作者 李强 唐忠厚 郭尚洙 马代夫 《分子植物育种》 CAS CSCD 2011年第6期754-759,共6页
本研究以盐胁迫下逆境诱导型启动子SWPA2驱动转Cu/Zn SOD和APX基因甘薯叶片一些生理指标的变化研究转基因甘薯耐盐性。结果表明:无胁迫时,转基因甘薯叶的生理指标与未转基因植株无明显差异。相同胁迫条件下,转基因甘薯叶的超氧化物歧化... 本研究以盐胁迫下逆境诱导型启动子SWPA2驱动转Cu/Zn SOD和APX基因甘薯叶片一些生理指标的变化研究转基因甘薯耐盐性。结果表明:无胁迫时,转基因甘薯叶的生理指标与未转基因植株无明显差异。相同胁迫条件下,转基因甘薯叶的超氧化物歧化酶(SOD),抗坏血酸过氧化物酶(APX),过氧化物酶(POD),过氧化氢酶(CAT)活性均高于未转基因甘薯叶,尤以100mmol/LNaCl胁迫下差异最显著;转基因植株的根长也大于未转基因植株;转基因植株的叶绿素下降幅度和MDA含量则低于未转基因植株。这说明转基因甘薯具有一定的耐盐性。因此开发种植转基因耐盐甘薯对有效利用盐渍化土地和缓解能源危机有重大的意义。 展开更多
关键词 逆境诱导型启动子SWPA2 Cu/ZnSOD-apx基因 转基因甘薯 耐盐性
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转抗坏血酸过氧化物酶基因(APX)菊苣抗旱相关生理特性 被引量:6
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作者 程林梅 孙毅 +1 位作者 张丽君 程丹 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期124-130,共7页
在获得转抗坏血酸过氧化物酶基因(APX)菊苣株系的基础上,对3个转基因株系的抗旱相关生理特性进行分析。结果表明:正常供水条件下,转基因株系与非转基因植株各项生理指标差异不显著;干旱条件下,3个转基因株系菊苣叶片APX质量摩尔浓度均... 在获得转抗坏血酸过氧化物酶基因(APX)菊苣株系的基础上,对3个转基因株系的抗旱相关生理特性进行分析。结果表明:正常供水条件下,转基因株系与非转基因植株各项生理指标差异不显著;干旱条件下,3个转基因株系菊苣叶片APX质量摩尔浓度均显著高于非转基因对照。3个转基因株系中有2个株系丙二醛(MDA)质量摩尔浓度低于非转基因对照,表明APX基因可显著提高菊苣APX活性,降低氧自由基浓度,减轻对细胞的伤害。3个转基因株系叶片相对含水量、脯氨酸质量分数、叶绿素质量分数、单株幼苗的根系生长量,均高于非转基因对照。可见,转APX基因菊苣具有较强的抗旱能力,从而验证APX基因的抗旱功能,为转基因材料应用于菊苣的抗旱育种提供依据。 展开更多
关键词 菊苣 apx基因 抗旱性
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低温胁迫对茄子幼苗APX活性的影响及cDNA序列克隆研究 被引量:3
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作者 王凤华 李光远 +1 位作者 刘宝国 郭旭彬 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第13期5272-5273,5277,共3页
[目的]探讨低温胁迫对茄子基因表达的影响。[方法]以三叶期茄子幼苗为材料,于(8±1)℃的低温下胁迫24、48、72、961、20 h,取茄子第2片叶测定APX活性及进行APX基因的cDNA克隆。[结果]结果表明:低温胁迫下APX活性先上升后下降,以胁... [目的]探讨低温胁迫对茄子基因表达的影响。[方法]以三叶期茄子幼苗为材料,于(8±1)℃的低温下胁迫24、48、72、961、20 h,取茄子第2片叶测定APX活性及进行APX基因的cDNA克隆。[结果]结果表明:低温胁迫下APX活性先上升后下降,以胁迫处理72 h时酶活性最高;APX基因的cDNA序列测序结果显示该序列与烟草(Nicotiana tabacum L.)、菠菜(Spinacia oleracea L.)、辣椒(Capsicum annuum L.)、番茄(Lycopersicon esculentum L.)、长豇豆(Vigna unguiculata L.)、龙眼(Dimocarpus longan L.)等具有较高的同源性。[结论]APX在进化中具有较高的保守性。 展开更多
关键词 茄子 低温 胁迫 apx 克隆
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