基于单细胞测序数据分析养阴活胃合剂下调AQP3对MC细胞表型的影响及机制

目的 观察养阴活胃合剂对MC细胞(MNNG诱导人胃黏膜上皮细胞GES-1恶性转化)增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响,探讨其下调AQP3抑制IL-10/JAK1/STAT3信号通路激活进而阻断或逆转慢性萎缩性胃炎(CAG)病变的作用机制。方法 选取GEO数据库中的CAG单细胞转录组测序数据,绘制数据的表达矩阵。采用R语言的Seurat 4.3.0包进行处理后分群绘制UMAP可视化图谱。将MC细胞分为养阴活胃合剂组(YYHWM组)、AQP3低表达慢病毒转染组(AQP3低表达组)、养阴活胃合剂+AQP3高表达慢病毒转染组(YYHWM+AQP3高表达组)并以MC细胞和正常人胃黏膜上皮细胞GES-1分别作为模型组(MC组)和空白对照组(Control组)。采用平板克隆、划痕实验、Transwell及流式细胞术检测细胞表型变化情况,采用ELISA检测细胞培养上清IL-10表达水平,Western blot检测酪氨酸激酶1(JAK1)、信号转导和转录激活因子3(STAT3)蛋白表达水平。结果 单细胞测序数据集分析显示AQP3在CAG样本及上皮细胞群中表达升高,AQP3可能通过IL-10抗炎性信号通路影响胃癌前病变病理进程。与MC组相比,AQP3低表达组和YYHWM组细胞侵袭、迁移、增殖能力减弱,凋亡率增加,细胞培养上清中的IL-10水平降低,细胞中JAK1、STAT3蛋白表达下调(P<0.05或P<0.01),YYHWM+AQP3高表达组差异均不显著(P>0.05)。结论 养阴活胃合剂可通过下调AQP3表达抑制IL-10/JAK1/STAT3信号通路激活进而减弱MC细胞侵袭、迁移及增殖能力,促进细胞凋亡进而阻断或逆转CAG病理进程。

芳香化浊调气法对功能性腹泻大鼠AQP3、5-HT水平及血管活性肠肽表达的影响

目的 探究芳香化浊调气法对功能性腹泻大鼠水通道蛋白(AQP)3、5-羟色胺(HT)及血管活性肠肽的影响。方法 将大鼠随机分为正常组、模型组、药物1组、药物2组、药物3组和对照组,每组10只。检测各组一般状态;检测粪便性状指标(BSS评分、稀便率、腹泻指数);检测血清及组织中血管活性肠肽(VIP)含量;检测肠道组织中5-HT含量;免疫荧光检测结肠组织中AQP3表达。结果 造模后大鼠出现活动减少,精神萎靡,呈缩肩拱背样,体质量下降,毛色无泽,粪便湿软或不成形;药物干预后各组一般状态得到明显改善。与正常组相比,模型组BSS评分、稀便率和腹泻指数均显著增加(P<0.05);与模型组相比,药物1组、药物2组和药物3组均不同程度降低,且药物3组降低最为显著(P<0.05)。模型组血清及胃窦、十二指肠、结肠、下丘脑组织中VIP含量较正常组显著降低(P<0.05);和模型组相比,药物1组、药物2组和药物3组均显著升高,且药物3组变化最显著(P<0.05)。与正常组相比,模型组回肠和结肠组织中5-HT含量均显著升高,结肠组织中AQP3水平明显降低(P<0.05);与模型组相比,药物1组、药物2组和药物3组回肠和结肠组织中5-HT含量均显著降低,结肠组织中AQP3水平明显升高,且呈浓度依赖(P<0.05)。结论 芳香化浊调气法可增加功能性腹泻大鼠AQP3水平和血管活性肠肽水平,减少5-HT水平,对肠道水液吸收功能和运动功能进行改善,进而改善腹泻。

助阳通便膏影响功能性便秘小鼠AQP3表达的实验研究

目的 检测功能性便秘小鼠使用助阳通便膏治疗前后,结肠组织中水通道蛋白3(aquaporin 3,AQP3)表达的变化,探究助阳通便膏缓解功能性便秘与结肠组织中AQP3的关系。设计梯度浓度的助阳通便膏,为临床治疗浓度提供依据。方法 100只昆明小鼠,随机选取16只设为空白组,余下小鼠制备便秘模型(盐酸洛哌丁胺制备)。便秘小鼠随机分为模型组,助阳通便膏高、中、低浓度组,麻仁软胶囊对照组。各组应用相应药物连续灌胃14 d后观察疗效,应用免疫组化法观察各组小鼠结肠组织AQP3表达。结果 通过免疫组化染色法,与模型组相比,各组AQP3均有减少,差异具有统计学意义(P<0.05),其中助阳通便膏中浓度组小鼠粪便重量、粪便含水比、首次排黑便时间以及结肠组织中AQP3表达与空白组之间差异均无统计学意义(P>0.05),且与麻仁软胶囊对照组之间差异均不具有统计学意义(P>0.05)。结论 助阳通便膏可能是通过减少功能性便秘小鼠结肠组织中AQP3的异常表达,改善便秘。在设计的不同浓度组别中,助阳通便膏中浓度组效果最优。

枳术丸对脾虚证慢传输型便秘小鼠结肠黏膜AQP3、AQP9的影响

目的观察枳术丸对脾虚证慢传输型便秘(slow transit constipation,STC)小鼠结肠AQP3、AQP9表达的影响,探讨枳术丸改善STC症状的可能作用机制。方法将50只SPF级昆明小鼠随机分成正常组(15只)和造模组(35只),造模组采用复合因素法(番泻叶+限水+控制饮食)建立脾虚证STC小鼠模型,造模成功后造模组小鼠按体质量随机分为模型组(10只)、枳术丸组(10只)、莫沙必利组(10只)。连续给药7 d后,检测各组小鼠的粪便含水量、肠道推进率、血清木糖含量及结肠黏膜组织病理学特征;免疫组化及Western blot法检测AQP3、AQP9蛋白表达。结果与正常组相比,模型组小鼠粪便含水量显著减少,肠道推进率显著降低,血清木糖含量显著降低,小鼠结肠黏膜AQP3表达显著增多,AQP9表达显著减少(P<0.01);与模型组相比,枳术丸组小鼠粪便含水量显著增加(P<0.05),肠道推进率显著升高(P<0.01),血清木糖含量显著升高(P<0.01),小鼠结肠黏膜AQP3表达显著减少,AQP9表达显著增加(P<0.01);与莫沙必利组相比,枳术丸组小鼠肠道推进率升高(P<0.05),血清木糖含量显著升高(P<0.01),结肠黏膜AQP3表达显著减少(P<0.01),AQP9表达显著增加(P<0.01),粪便含水量差异无统计学意义(P>0.05)。结论STC的发病与结肠黏膜AQP3上调、AQP9下调有关,枳术丸可以通过下调AQP3的表达、上调AQP9的表达,增加粪便的含水量而改善STC。

西北燥证对糖尿病大鼠AQP1、AQP3和CD4^(+)T、CD8^(+)T细胞表达的影响

目的探讨西北燥证对糖尿病大鼠水通道蛋白-1(Aquaporin-1,AQP1)、水通道蛋白-3(Aquaporin-3,AQP3)和CD4^(+)T、CD8^(+)T细胞表达的影响。方法选取16只正常大鼠,建立2型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus,T2DM)大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为正常环境T2DM组、西北燥证T2DM组,每组8只。另选正常大鼠8只设为正常对照组。观察各组大鼠的一般情况,检测大鼠空腹血糖(Fasting blood glucose,FBG)、空腹血清胰岛素(Fasting serum insulin,FINS)、胰岛素抵抗指数(Homeostasis model assessment for insulin resistance,HOMA-IR)的变化,比较各组大鼠AQP1、AQP3、CD4^(+)T、CD8^(+)T细胞的表达水平,分析血清CD4^(+)、CD8^(+)与AQP1、AQP3表达水平的相关性。结果与正常对照组比较,正常环境T2DM组大鼠和西北燥证T2DM组大鼠FBG、FINS、HOMA-IR、AQP1、AQP3、CD4^(+)T、CD8^(+)T表达差异均有统计学意义(P<0.05);与正常环境T2DM组比较,西北燥证T2DM组大鼠FBG、FINS、HOMA-IR、AQP1、AQP3、CD4^(+)T、CD8^(+)T表达差异均有统计学意义(P<0.05)。结论西北燥证外环境可影响T2DM大鼠的血糖水平,其作用机制可能与调控AQP1、AQP3、CD4^(+)T、CD8^(+)T细胞表达有关。

槐角苷通过调控AQP1、AQP3表达对萎缩性阴道炎大鼠的保护作用

目的观察槐角苷对萎缩性阴道炎大鼠的保护作用。方法将50只大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性药组、赋型剂组、槐角苷组,切除卵巢进行造模,假手术组和模型组不给药,其余组连续阴道给药14 d后,观察用药前后大鼠一般体征变化(体质量、阴道pH、阴道健康状况、乳酸杆菌、内糖原),血清E2和FSH水平,阴道上皮黏膜中AQP1、AQP3蛋白和mRNA表达。结果与模型组比较,槐角苷组大鼠体质量、血清E2和FSH水平无明显变化(P>0.05),阴道健康评分、乳酸杆菌数量、上皮细胞数量、内糖原表达、AQP1、AQP3蛋白和mRNA表达升高(P<0.05),炎细胞数量、阴道pH降低(P<0.05)。结论槐角苷对萎缩性阴道炎大鼠具有保护作用,其机制与提高大鼠阴道上皮黏膜AQP1和AQP3表达有关。

健脾解毒汤对脾虚湿盛证银屑病大鼠皮肤组织AQP3蛋白表达的影响

目的研究健脾解毒汤对脾虚湿盛证银屑病大鼠皮肤组织水通道蛋白3(AQP3)表达的影响,探讨健脾解毒汤修复皮肤屏障功能的作用机制。方法按照随机数字表将72只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、甲氨蝶呤组、健脾解毒汤低剂量组、健脾解毒汤中剂量组、健脾解毒汤高剂量组,每组12只。除空白组大鼠外,其余组大鼠采用咪喹莫特乳膏涂抹及大黄配方颗粒剂灌胃方法诱导建立脾虚湿盛证银屑病模型。造模结束后,甲氨蝶呤组给予甲氨蝶呤片0.97 mg/kg灌胃,健脾解毒汤低、中、高剂量组给予健脾解毒汤2.32 g/kg、4.64 g/kg、9.26 g/kg灌胃,均1次/d,连续14 d。观察各组大鼠表征特点,HE染色观察皮肤组织病理形态,Western blot法检测皮肤组织中AQP3蛋白表达情况。结果灌胃结束后,模型组大鼠进食量减少,排便次数增加,粪便稀;健脾解毒汤各组大鼠进食量明显改善,排便次数明显减少,粪便质地适中。HE染色显示模型组大鼠表皮增生肥厚,显著角化不全伴角化过度,表皮突延长,部分表皮细胞间水肿,表皮内及角质层内较多中性粒细胞浸润,真皮浅层内血管扩张,慢性炎细胞散在或灶状浸润;健脾解毒汤各组大鼠皮肤组织结构较模型组明显改善。模型组大鼠皮肤组织中AQP3蛋白表达量明显低于空白组(P<0.05),甲氨蝶呤组和健脾解毒汤各组大鼠AQP3表达量均明显高于模型组(P均<0.05),甲氨蝶呤组和健脾解毒汤各组间比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论健脾解毒汤可能通过促进脾主运化水液功能的恢复来调节脾虚湿盛证银屑病大鼠皮肤AQP3蛋白的表达,恢复皮肤屏障功能。

ICU急性呼吸衰竭患者外周血HCAR、DcR3、AQP-5水平与机械通气撤机结局的关系及价值分析

目的 探究重症监护室(ICU)急性呼吸衰竭患者外周血超敏C反应蛋白与白蛋白比值(HCAR)、诱骗受体3(DcR3)、水通道蛋白-5(AQP-5)水平与机械通气撤机结局的关系及临床价值。方法 选取连云港市第二人民医院2018年8月—2021年8月ICU急性呼吸衰竭患者120例,均行机械通气治疗,在符合自主呼吸试验(SBT)指征且通过30 min SBT后撤机,根据撤机后48 h内是否再插管分为撤机成功组(87例)和撤机失败组(33例),撤机前采集外周血检测HCAR、DcR3、AQP-5水平,分析外周血HCAR、DcR3、AQP-5水平与撤机结局的关系及预测价值。结果 两组呼吸衰竭类型、合并器官功能障碍综合征(MODS)、肺部超声评分(LUS)、急性生理与慢性健康评价系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分差异有统计学意义(P<0.05);撤机失败组外周血HCAR、DcR3高于撤机成功组,AQP-5低于撤机成功组(P<0.05);Pearson相关性分析显示外周血HCAR、DcR3与LUS、APACHEⅡ评分呈正相关,AQP-5与LUS、APACHEⅡ评分呈负相关(P<0.05);单因素、多因素分析均显示,外周血HCAR、DcR3、AQP-5影响撤机结局(P<0.05);外周血HCAR、DcR3、AQP-5预测撤机失败的截断值分别为4.10 mg/g、14.55μg/L、7.91μg/L,联合预测撤机失败的曲线下面积(AUC)为0.915(95%CI:0.850~0.958),大于各指标单独预测;以截断值为界分为低水平与高水平,外周血HCAR、DcR3高水平患者30 d生存率低于低水平患者,外周血AQP-5高水平患者30 d生存率高于低水平患者(P<0.05)。结论 ICU急性呼吸衰竭患者外周血HCAR、DcR3、AQP-5水平与撤机结局密切相关,联合检测可作为预测撤机失败的重要辅助手段,还能帮助临床判断死亡风险,为临床提供可靠的数据支持。

参苓白术散通过ERK/p38 MAPK信号通路干预溃疡性结肠炎大鼠结肠组织AQP3、AQP4的表达

目的探讨细胞外信号调节激酶/p38丝裂原活化蛋白激酶(ERK/p38MAPK)信号通路在参苓白术散调控脾虚湿困型溃疡性结肠炎大鼠结肠组织水通道蛋白(aquaporin,AQP)3、AQP4表达中的作用。方法将60只Wistar大鼠按照随机数字表均分为正常组、模型组(氯化钠注射液)、参苓白术散组、U0126+参苓白术散组、SB203580+参苓白术散组。除正常组外,脾虚湿困型溃疡性结肠炎大鼠采用2,4,6-三硝基苯磺酸/乙醇灌肠,结合环境与饮食干预复制。14 d后采用蛋白质印迹法检测各组大鼠结肠组织AQP3、AQP4蛋白的表达,实时荧光定量PCR法检测其mRNA表达情况。结果模型组大鼠AQP3、AQP4蛋白表达及其mRNA的表达水平明显低于正常组(P<0.05),参苓白术散组大鼠结肠组织AQP3、AQP4蛋白及mRNA表达较模型组明显升高,组间比较有显著性差异(P<0.05),SB203580+参苓白术散组及U0126+参苓白术散组大鼠结肠组织AQP3、AQP4蛋白及mRNA表达较模型组有较小幅度升高,与正常组和参苓白术散组相比均有显著性差异(P<0.05)。结论参苓白术散可显著改善大鼠结肠组织AQP3、AQP4蛋白及mRNA表达,ERK/p38 MAPK信号通路参与了参苓白术散对脾虚湿困型溃疡性结肠炎大鼠结肠组织AQP3、AQP4表达的调节作用。

湿阻中焦证模型大鼠胃肠水通道蛋白3(AQP3)的病理特征性表达分布谱以及平胃散干预的研究

目的:研究湿阻中焦证动物模型胃肠组织AQP3的分布和含量以及平胃散的干预,揭示湿阻中焦证动物模型水通道蛋白病理特征性表达分布谱。方法:SD大鼠60只,雌雄各半,随机分空白组、空白给药组、模型组、平胃散组和自然恢复组,每组12只。用免疫组化技术测定胃肠组织AQP3的分布,用酶联免疫法(ELISA)测定胃肠组织AQP3的含量。结果:模型组AQP3分布在胃贲门和小肠中段的黏膜增加,在小肠中段的外膜增加。经平胃散干预后,AQP3分布在胃贲门的黏膜减少,与自然恢复组比较,在小肠中段的黏膜有所增加。结论:AQP3在湿阻中焦证胃肠特征性表达分布谱可能是湿阻中焦证的分子基础之一。平胃散对湿阻中焦证胃肠AQP3表达的增强可能是平胃散治疗湿阻中焦证的分子机理之一。

AQP3在不同年龄段正常人皮肤组织中的表达及意义

目的探讨水通道蛋白3(AQP3)与人皮肤自然衰老的关系。方法收集55例整形外科手术患者非曝光部位皮肤标本,根据年龄分为3组:青年组(<20岁)、中年组(30～45岁)和老年组(>55岁),用RT-PCR及Western blot检测每例皮肤组织中AQP3 mRNA和蛋白的表达量,分析不同年龄组之间AQP3表达水平的差异。结果老年组皮肤中AQP3 mRNA、蛋白的表达量较青年组和中年组均显著性减少(P<0.01)。结论 AQP3的表达下调可能是导致皮肤自然衰老的原因之一。

洛哌丁胺构建大鼠便秘模型对水通道蛋白AQP3和AQP8的影响

目的:观察洛哌丁胺构建的大鼠便秘模型中水通道蛋白家族中AQP3和AQP8蛋白及其mRNA定量表达,探讨洛哌丁胺构建大鼠便秘模型对AQP3和AQP8的影响.方法:SD♂大鼠30只,随机分为5组,造模开始时处死1组大鼠,检测结肠传输功能及结肠组织的AQP3,8表达水平,作为基准参考线.剩余4组予以洛哌丁胺1.5 mg/(kg·d)灌胃,诱导造模.分别于造模的第3、7天和造模成功后第3、7天各处死一组模型大鼠,检测结肠传输及AQP3,AQP8蛋白及其mRNA定量表达.结果:大鼠粪便含水量在诱导便秘模型的过程中明显减少,停药后7 d,粪便内的水分并不能自发恢复至正常(2.29 g±1.17 g vs 0.80 g±0.27 g,P=0.01<0.05).试验过程中,大鼠结肠传输功能未发生改变(67.72%vs 58.64%,P=0.971>0.05).AQP8远端表达停药7 d上升,与造模7 d时相比,差异有统计学意义(0.43±0.31vs 2.66±0.87,P=0.008).AQP8近端表达给药后迅速上升至较高水平,与正常组对照具有统计学意义(15.96±2.13,P=0.00),停药7 d后其表达再次上升,与给药7 d相比,差异有统计学意义(6.37±0.23 vs 0.79±0.13,P=0.015).停药后,AQP3在结肠近端持续表达下降,与正常对照组相比,差异有统计学意义(0.20±0.06,P=0.04).结论:洛哌丁胺能够提高模型大鼠结肠AQP8表达,促进肠道跨膜水运输,减少粪便含水量而导致便秘.

基于水通道蛋白AQP1/AQP3的表达探讨石膏对急性软组织损伤大鼠模型的影响

目的研究生石膏和煅石膏对急性软组织损伤大鼠模型水通道蛋白AQP1、AQP3表达的影响,对石膏消肿的作用机制进行初步研究。方法采用砝码自由落体运动制备急性软组织损伤大鼠模型,造模成功后将动物随机分为模型组,阳性药组(双氯芬酸0.75 g/kg),煅石膏高、中、低剂量组(1.0、0.5、0.25 g/kg)、生石膏高、中、低剂量组(1.0、0.5、0.25 g/kg),另设空白对照组,每组10只。除模型组与空白对照组外,其余各组均给予相应药物,每天换药1次,连续7 d。采用Western blotting和免疫组化法检测各组大鼠损伤组织中AQP1/AQP3表达变化。结果与空白对照组比较,模型组大鼠损伤骨骼肌中AQP1/AQP3表达明显下降(P<0.01);与模型组比较,煅石膏高、中、低剂量组和阳性药组大鼠损伤骨骼肌中AQP1/AQP3表达明显增加(P<0.01),生石膏组无明显差异。结论石膏煅制后可能通过调节急性软组织损伤模型骨骼肌中AQP1/AQP3的表达从而发挥消肿的作用。

乐胃饮对慢性萎缩性胃炎大鼠AQP3、AQP4蛋白表达的影响

目的:观察乐胃饮对慢性萎缩性胃炎大鼠胃黏膜AQP3、AQP4蛋白表达的影响。方法:60只Wistar大鼠,随机分为正常对照组、模型组、维酶素组、乐胃饮低、中、高剂量组,除正常对照组外,其余大鼠用2%水杨酸钠灌胃、自由饮用MNNG溶液结合饥饱失常等综合因素诱发慢性萎缩性胃炎模型。造模后各组予以灌胃治疗4周。结果:与模型对照组比较,乐胃饮各剂量组胃黏膜AQP3、AQP4蛋白表达显著升高(P<0.01或P<0.05)。结论:乐胃饮可增强慢性萎缩性胃炎大鼠胃黏膜AQP3、AQP4蛋白的表达,可能通过改善胃黏膜水盐代谢,调节胃酸分泌,进而达到治疗CAG的作用。

基于大肠主津理论下助阳通便膏对便秘模型小鼠结肠组织中MUC2、AQP3的影响

目的通过观察助阳通便膏对便秘模型小鼠结肠黏膜蛋白2(MUC2)、水通道蛋白3(AQP3)的影响,探讨助阳通便膏改善功能性便秘的作用机制。方法将120只雄性巴比西小鼠随机分成5组,每组24只。即正常组、模型组、助阳通便汤组、助阳通便膏组、麻仁软胶囊组。除正常组外,其余各组造模便秘小鼠模型,采用复方地芬诺酯灌胃的方法造模。造模成功后各组分别给予相应的药物,连续灌胃给药14 d后取材,应用免疫组化、Wester Blot的方法观察各组小鼠结肠黏膜蛋白2(MUC2)和水通道蛋白3(AQP3)的含量。结果通过免疫组化的方法发现,与模型组比较,各组MUC2、AQP3平均光密度值均有不同程度增高,且助阳通便膏组与汤剂组比较MUC2平均光密度值差异有统计学意义(P<0.05)。通过Wester Blot的方法发现,与模型组比较,各组MUC2、AQP3蛋白相对表达水平灰度值均有不同程度增高。且AQP3助阳通便膏剂组与汤剂组比较(P<0.05)。结论助阳通便膏可提高MUC2、AQP3含量,改善便秘。助阳通便膏剂增加便秘小鼠结肠AQP3蛋白表达水平的作用及增加便秘小鼠结肠MUC2阳性细胞数量的作用明显优于助阳通便汤。

便塞通合剂对便秘大鼠模型AQP3表达的影响

目的:采用复方地芬诺酯灌胃建立慢性便秘大鼠模型,观察便塞通合剂对慢性便秘模型大鼠AQP3表达的影响。方法:健康SD大鼠60只,随机分为5组,空白对照组、模型组、麻仁丸治疗组、莫沙比利治疗组、便塞通合剂治疗组。模型组及各治疗组采用配制好的含复方地芬诺酯10 mg/kg混悬液4 mL灌胃,建立大鼠慢性便秘模型。正常对照组则以等量生理盐水替代复方地芬诺酯进行灌胃。模型建立后,治疗组分别以麻仁丸、莫沙比利和便塞通合剂灌胃治疗。治疗结束后,采用免疫组织化学SP法检测正常对照组、模型组及治疗各组AQP3在结肠的分布和表达情况,应用彩色病理图像分析系统对阳性表达的平均光密度值(MD)进行半定量比较分析。结果:①发现在正常对照组和慢传输便秘模型组大鼠的结肠黏膜层均有AQP3表达;②模型组AQP3平均光密度值高于空白对照组,两组比较有显著差异(P<0.05)。③与模型组相比,便塞通合剂治疗组能能抑制AQP3在大鼠结肠黏膜层的表达(P<0.05)。结论:便塞通合剂能抑制AQP3在大鼠结肠黏膜层的表达,其表达降低可能导致结肠对水分的吸收减少和(或)肠液分泌增加,从而治疗慢性便秘。

探讨AQP1、AQP3及IL-1β在膝关节炎滑膜中的表达及意义

目的:探讨水通道蛋白l(AQP1)、水通道蛋白3(AQP3)和白介素-1β(IL-1β)在膝关节炎滑膜组织中的表达意义及与膝关节滑膜炎症的关系。方法:选取收治的80例膝关节炎患者作为研究对象,采用免疫组织化学法检测患者关节滑膜阻滞中AQP1、AQP3以及IL-1β的表达水平,并采用双盲法测定累积光密度,分析各因子表达水平之间的相关性以及临床意义。结果:不同病情程度的滑膜炎患者AQP1、AQP3及IL-1β指标比较差异存在统计学意义(P<0.05),并且随着病情的加重,AQP1、AQP3及IL-1β指标均呈上升趋势;相关性分析结果显示AQP1、AQP3及IL-1β与滑膜炎症程度分度呈正相关性(P<0.05),AQP1表达与IL-1β表达呈正相关(P<0.05),AQP3表达与IL-1β表达呈正相关(P<0.05)。结论:AQP1、AQP3及IL-1β在滑膜炎的发生发展过程中具有重要的应用,但其具体的临床病理机制仍需进一步深入研究。

版纳微型猪近交系AQP3克隆、序列分析及组织表达

目的克隆版纳微型猪近交系aquaporin 3(AQP3)基因,并利用生物信息学方法分析其序列特征,研究其在猪各组织中的表达情况。方法从版纳微型猪近交系脾脏中提取总RNA,利用RT-PCR方法扩增猪AQP3编码区序列,将纯化的片段与pMD18-T载体连接,转化宿主菌DH 5α,筛选阳性克隆进行测序。并采用半定量RT-PCR方法分析版纳微型猪近交系不同组织中AQP3基因的表达情况。结果成功克隆出AQP3基因编码区全长873 bp的序列,GenBank登录号为HQ888860,其编码290个氨基酸。氨基酸序列同源性分析表明,与牛的AQP3基因同源性最大,达99%。多组织半定量RT-PCR研究表明AQP3 mRNA在BMI猪的脾脏、肾脏、肺、小肠中均有表达,其中脾脏中表达最高。结论成功克隆出了版纳微型猪近交系AQP3基因全长编码区,并对其编码的蛋白质功能进行了预测,为进一步的功能研究奠定了基础。

匹维溴胺对腹泻型肠易激综合征模型大鼠结肠组织AQP3表达影响

目的观察匹维溴胺对腹泻型肠易激综合征(D-IBS)模型大鼠血清以及结肠组织血管活性肠肽(vasoactiveintestinal peptide,VIP)含量、结肠组织水通道蛋白3(aquaporin 3,AQP3)表达的影响,探讨其治疗D-IBS的作用机制。方法采用慢性应激与束缚相结合方法建立D-IBS大鼠模型。采用ELISA法检测VIP含量;采用Real time-PCR法和SABC免疫组化法检测AQP3的表达。结果在血清和结肠组织中VIP的含量,与对照组[(3.092±0.613)ng/ml,(3.811±0.275)ng/ml]比较,模型组[(10.460±1.666)ng/ml,(4.495±0.341)ng/ml]与匹维溴胺组[(5.639±1.163)ng/ml,(4.063±0.534)ng/ml]均升高(P<0.05),尤以模型组升高的更为明显(P<0.01);两组AQP3的表达均下调(P<0.01),尤以模型组AQP3蛋白表达下调显著。结论匹维溴胺治疗D-IBS的作用机制之一,可能与抑制结肠组织中VIP分泌和上调AQP3表达有关。