新发突变基因的新生儿X-连锁肌小管肌病1例并文献回顾

X-连锁肌小管肌病(X-linked myotubular myopathy,XLMTM)是一种罕见的先天性肌病。四川大学华西第二医院于2021年2月收治1例临床表现为肌张力低下、伴有特殊面容、需持续呼吸机辅助通气的男性新生儿,36~(+2)周早产,出生后出现呼吸困难及治疗后撤机困难,伴有四肢肌张力低下、吞咽功能障碍及特殊外貌特征(四肢细长、面部狭长、高腭弓、双手垂腕、阴囊空虚、细长指/趾等),经基因检测确诊为XLMTM。其全外显子家系测序结果提示父亲、外公、外婆均无变异,母亲存在杂合变异,致病突变为MTM1(OMIM:300415),染色体位置为chrX-150649714,核苷酸变化为c.868-2A>C。该患儿具有典型的外貌特征,且经基因检测发现为新发的突变基因。对存在肌张力异常及特殊面容的患儿,早期进行基因检测对准确诊断XLMTM有重要意义。

X-染色体连锁凋亡抑制蛋白相关因子1通过自噬途径调控Caspase 1介导的胃肠道间质瘤细胞焦亡

目的:探究X-染色体连锁凋亡抑制蛋白相关因子1(XAF1)对人胃肠道间质瘤(GIST)细胞中半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase 1)介导的细胞焦亡的影响及机制。方法:实时荧光定量PCR和Western blot检测人正常胃黏膜上皮细胞系(RGM-1)和GIST细胞系(GIST-T1、GIST-430、GIST-882)中XAF1的表达水平;采用脂质体介导转染法将pcDNA3.1-XAF1重组质粒染进GIST-882细胞,以构建高表达XAF1的GIST-882细胞。GIST-882细胞分为对照组、pcDNA3.1组(转染pcDNA3.1空载体质粒)、pcDNA3.1-XAF1组(转染pcDNA3.1-XAF1重组质粒)、pcDNA3.1-XAF1+Rap组(转染pcDNA3.1-XAF1重组质粒并给予自噬激活剂雷帕霉素处理),免疫荧光染色检测各组细胞内微管相关蛋白1轻链3(LC3)表达情况,Western blot检测各组细胞中LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值与Beclin1蛋白表达水平,ELISA法检测各组细胞上清中白细胞介素,IL-1β、IL-18含量,乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测各组细胞LDH释放率,Western blot检测各组细胞中Caspase-1及其活化形式cleaved-Caspase-1、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、消皮素D(GSDMD)蛋白表达水平。结果:与RGM-1细胞比较,GIST-T1、GIST-430、GIST-882细胞中XAF1 mRNA和蛋白相对表达量显著减少(P<0.05);细胞转染后,pcDNA3.1-XAF1组GIST-882细胞中XAF1 mRNA和蛋白相对表达量均显著高于pcDNA3.1组、对照组(P<0.05)。与对照组比较,pcDNA3.1-XAF1组GIST-882细胞内LC3荧光强度明显减弱,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、Beclin1蛋白相对表达量显著减少(P<0.05),细胞上清液IL-1β、IL-18含量及LDH释放率显著升高(P<0.05),Caspase-1、cleaved-Caspase-1、NLRP3、GSDMD蛋白相对表达量也显著增加(P<0.05);与pcDNA3.1-XAF1组比较,pcDNA3.1-XAF1+Rap组GIST-882细胞内LC3荧光强度明显增强,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、Beclin1蛋白相对表达量显著增加(P<0.05),同时,细胞上清液IL-1β、IL-18含量及LDH释放率显著下降(P<0.05),Caspase-1、cleaved-Caspase-1、NLRP3、GSDMD蛋白相对表达量也显著减少(P<0.05)。结论:XAF1在GIST细胞中表达下降,提高XAF1表达能通过抑制自噬从而促进Caspase 1介导的GIST细胞焦亡,发挥抗肿瘤作用。

辛硫磷降解菌X-1的分离鉴定及降解性状的初步研究

通过富集培养从南京周围土壤中分离到一株辛硫磷降解菌X 1.X 1能以辛硫磷为唯一碳源生长 ,初步鉴定为邻单胞菌属 (Plesiomonassp .) .X 1有广泛的碳、氮源利用谱 ,在 2 5— 30℃长势较好 ,最适生长pH是 7 0 .X 1能在 2 4h内 ,使辛硫磷降解 96 % .质粒检测发现有两条大的质粒条带 .

Approximate Well Width and Optical Gain Formulas of 1 .555μm In_(1-x-y )Ga_y Al_x As Compressively Strained Quantum- Well Laser

Using Harrison's model and anisotropic parabolic approximation,the band structure of In1- x- y Gay Alx As compressively strained quantum wells is calculated.To design lasers with1.55μm wavelength,it is necessary to an- alyze the well width,differential gain,transparency carrier density and the characteristic gain for an arbitrary com- position.Some useful empirical formulas are also presented.

黑曲霉X-1产木聚糖酶液体发酵工艺研究

目的:提高黑曲霉X-1菌株液体发酵木聚糖酶的产量。方法:采用单因素和正交试验对黑曲霉X-1菌株产木聚糖酶液体发酵培养基和培养条件进行了优化。结果:通过正交试验找出最大影响因素为玉米芯和葡萄糖的供应,优化后的最佳培养基和培养条件为:玉米芯粉3%,葡萄糖0.5%,蛋白胨1%,KH2PO40.5%,MgSO4.7H2O 0.1%,Tween-80 0.1‰,pH 6.5,30℃、200r/min摇瓶培养120h。结论:黑曲霉X-1菌株在优化后的培养基和培养条件下,木聚糖酶活力高达1630.78U,比优化前木聚糖酶活力(724.63U)提高了125.05%。

卵巢癌组织即刻早期基因IEX-1的表达

目的检测即刻早期基因X-1(IEX-1)在卵巢癌、卵巢良性肿瘤组织及交界性卵巢肿瘤组织中的表达,初步探讨其与卵巢癌发生发展的关系。方法应用免疫组化法对105例卵巢组织(良性肿瘤21例、交界性肿瘤24例、恶性肿瘤60例)进行IEX-1蛋白检测。结果IEX-1蛋白在卵巢癌组织中的阳性表达率[38.3%(23/60)]均明显低于良性[80.9%(17/21)]和交界性[62.5%(15/24)]卵巢肿瘤组织(P<0.01),IEX-1在不同年龄、组织学类型的卵巢癌中阳性表达率差异无统计学意义;FIGO分期晚期(Ⅲ～Ⅳ期)及组织分化程度低者(G3)IEX-1阳性表达率低于FIGO分期早期(Ⅰ～Ⅱ)及中高分化者(G1～G2),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论IEX-1蛋白低表达可能与卵巢癌的发生发展有关。

X-盒结合蛋白1的生理及病理生理学作用

X-盒结合蛋白1(XBP-1)是未折叠蛋白反应的重要组分,有剪接型XBP-1(XBP-1S)和非剪接型XBP-1(XBP-1U)两种形式。当细胞处于内质网应激状态时,XBP-1由活化转录因子6(ATF6)诱导,经IRE1α非传统剪接,转录有功能的XBP-1S,活化未折叠蛋白反应。XBP-1是一种重要的转录因子,对细胞生长和分化具有重要调控作用,并与人类多种疾病的发生和发展相关。

黑洞候选体X射线双星Cyg X-1光变曲线的研究

利用Rossi X-ray Timing Explorer(RXTE)卫星从1996年1月到2005年5月的公共资料,研究了黑洞候选体X射线双星Cyg X-1光变曲线的周期性,并且发现了一些有趣的周期特性(T=1．0±0．2天和T=18．0±3．0天)．在硬态时,T=1．0±0．2天和T=18．0±3．0天的周期特性同时出现在它的光变曲线之中,但在软态时仅有T=1．0±0．2天的周期出现．采用一种新的方法(即微分法),同时为了检验微分法的正确性,还利用传统的方法(即快速傅立叶变换和叠加法)分析了相同的资料,并得到了与微分法相同的结果．另外也对Cyg X-1的轨道周期进行了研究,结果发现T=5．6天的轨道周期不仅出现在硬态,同时也出现在软态,只是在硬态时比在软态时明显．

黑洞候选体X射线双星Cyg X-1硬度比周期特性研究

利用离散傅里叶分析法,基于RXTE(Rossi X-ray Timing Explorer)/ASM(All-Sky Monitor,1.5～12 keV)观测数据,对黑洞候选体X射线双星Cyg X-1硬度比HR(5～12 keV/3～5 keV)(简写HR)的时变特性进行了分析,结果表明黑洞候选体X射线双星Cyg X-1硬度比HR存在明显的周期特性:(1)混合态(硬态+软态,本文指MJD=50087～55841期间所有的观测数据)时,HR存在T≈5.6 d、40.0 d、78.4 d、173.8 d以及400/800 d的时变周期;(2)硬态时,HR存在T≈5.6 d、33.7/67.6 d、45.3 d和165.3 d的周期特性;(3)软态时,HR出现了T≈38.5 d、48.1 d和128.3 d的周期性变化.并利用粘滞理论和Zdziarski吸积盘模型讨论了以上周期特性的物理机制.

内质网应激相关因子X-盒结合蛋白-1在人体肝癌组织中的表达

目的研究内质网应激(ERS)相关因子X-盒结合蛋白(XBP)-1在肝癌组织中的表达情况,以此证实肝癌演进中是否存在ERS反应的活化。方法病理学诊断确定的45例肝癌组织、15例癌旁组织和15例正常肝组织,采用逆转录(RT)-聚合酶链反应(PCR)和Western印迹法检测XBP-1 mRNA和蛋白表达。结果 RT-PCR结果表明,肝癌组织中XBP-1 mRNA表达(0.444 6±0.035 7)显著高于癌旁组织(0.421 8±0.033 8)、正常肝组织(0.402 7±0.026 9)(P<0.05)。Western印迹结果表明肝癌组织中XBP-1蛋白的表达量显著高于癌旁组织和正常肝组织(P<0.05)。结论肝癌发生及发展过程中存在ERS反应的激活。

新生大鼠缺血缺氧性脑损伤组织中HAX-1、Caspase-3、bcl-2表达变化及意义

目的观察新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)组织中血细胞特异蛋白1相关蛋白X-1(HAX-1)、Caspase-3、bcl-2的表达,并探讨其意义。方法 128只大鼠随机分为观察组和对照组各64只,观察组采用Rice法制备HIBD模型,对照组仅分离左侧颈总动脉不结扎。分别于造模后0、2、6、12、24、48、72 h断头取脑,采用Western blot法检测大脑皮层HAX-1、Caspase-3、bcl-2蛋白。结果与对照组同时点比较,观察组HAX-1于造模后6、12、18、48 h表达升高,Caspase-3于造模后6、12、18 h表达升高,bcl-2于造模后2、6、12 h表达升高,P均<0.05;观察组造模后12、18 h的HAX-1的表达水平均高于造模后6 h,P均<0.05。结论新生大鼠HIBD模型大脑皮层中存在HAX-1、Caspase-3、bcl-2高表达,三者共同参与了HIBD的发生、发展。

TZ5X-1大斜度定向井小井眼取心技术

在塔里木油田的大斜度、小井眼中取心还是首次。介绍了塔里木油田TZ5X - 1井的取心情况 ,TZ5X - 1井最大井斜 70 .5° ,井眼直径 15 2 .4mm ,取心地层为奥陶系灰岩和白云岩 ,可钻性差、易破碎。根据地质情况 ,优选了LC - 15 2取心工具 ,与常规 2 5 0P取心工具相比 ,有独特的内外筒扶正功能 ,平均取心收获率达到 94 .9%。

天鹰座X-1能谱和千赫兹准周期振荡频率的相关

通过分析1997年2月27日和3月1日对天鹰座X-1的两次空间数据观测．发现千赫兹QPO频率同X射线能诺有一定相关，其行为类似于另一个X射线暂现源4U1608-52，讨论了分析结果对了解吸积及QPO产生过程的意义．

内质网应激前后肝癌细胞中C/EBP同源蛋白及X-盒-结合蛋白-1的表达

目的:观察内质网应激(ERS)标志蛋白X-盒-结合蛋白-1(XBP-1)和C/EBP同源蛋白(CHOP)在正常肝细胞及不同分化程度肝癌细胞中的表达。方法:将培养获得的正常肝细胞LO2、高分化肝癌细胞株Hep G2及低分化肝癌细胞株SMMC-7721细胞分为无水乙醇未处理组(ERS前组)和无水乙醇处理组(ERS组),ERS组的3种细胞分别给予无水乙醇处理获得ERS细胞模型;采用Western Blot方法检测3种细胞ERS前后XBP-1、CHOP表达。结果:在ERS前组中,XBP-1表达从高到低依次为LO2、Hep G2、SMMC-7721;ERS组中,XBP-1在3种细胞中的表达都上调,与ERS前组比较差异有统计学意义(P<0.05),增加量从高到低依次为SMMC-7721、LO2及Hep G2,3种细胞间两两比较差异无统计学意义(P>0.05);ERS前后,Hep G2细胞中均无CHOP表达;ERS前组中,CHOP表达高低依次为SMMC-7721、LO2;ERS组中,CHOP在LO2细胞及SMMC-7721细胞表达均上调,与ERS前组比较差异有统计学意义(P<0.05),而在SMMC-7721细胞中表达上调更明显(与LO2细胞比较,P<0.05)。结论:发生ERS后,LO2、Hep G2及SMMC-7721细胞中XBP-1的表达水平都升高,分化程度低的SMMC-7721细胞中的XBP-1及CHOP的表达升高更明显。

IEX-1蛋白在胃癌中的表达及其意义

目的揭示即刻早期反应X-1(IEX-1)蛋白在胃癌组织及细胞系中的表达,探讨其对人胃癌细胞凋亡和增殖的影响。方法采用免疫组织化学法检测100例胃镜活检标本中IEX-1蛋白的表达,用实时荧光定量聚合酶链反应和Western blot检测人正常胃黏膜细胞GES-1和胃癌细胞MKN28中IEX-1基因和蛋白的表达,同时转染IEX-1的过表达质粒pc DNA3-FLAG-IEX-1和干扰质粒p LL3.7-si-IEX-1,分别采用流式细胞术及四甲基偶氮唑盐比色法检测IEX-1对细胞周期、凋亡及增殖的影响。结果胃癌组织中IEX-1蛋白表达水平高于正常胃组织和慢性胃炎组织(P<0.05),且随着病情进展,IEX-1表达水平有逐渐升高的趋势。相对于人正常胃黏膜细胞GES-1,胃癌细胞MKN28中IEX-1基因和蛋白表达更高(P<0.05)。与对照组相比,IEX-1蛋白表达增高后S期细胞比例升高,G2期细胞比例降低,细胞增殖率升高,凋亡减少(P<0.05),而干扰IEX-1蛋白表达后,G1期细胞升高,G2期细胞比例下降,细胞增殖率下降,细胞凋亡增加(P<0.05)。结论 IEX-1蛋白在胃癌组织中呈高表达,在人胃癌细胞中上调IEX-1蛋白能促进细胞增殖,发挥抗凋亡能力,干扰IEX-1蛋白表达能阻滞细胞周期进程,并诱导凋亡。

β-CD与Triton X-100超分子包络物的研究

通过荧光光谱法和1HNMR研究了水溶液中β-环糊精(β-CD)与TritonX-100形成的超分子包络物.结果表明,在溶液中β-CD与Triton X-100形成了1∶1二元包络物.25℃时超分子包络物的表观稳定常数为(3.04±0.22)×104L/mol.Triton X-100疏水性端包结在β-CD空腔内.

PRPS1基因功能缺失性突变导致X-连锁非综合征性DFN2型耳聋

本文报道了一个X连锁非综合征型语后聋的中国家系,该家系的致聋基因定位于X染色体一个遗传间距为5.41cM、物理距离为15.1Mb的区域,与已知的DFN2位点重叠。对此家系及以前报道的3个国内外DFN2家系进行PRPS1基因突变筛查,鉴定出PRPS1基因的4种不同错义突变。通过对酶分子结构的分析,及来自于患者的红细胞和成纤维细胞的体外酶活性测定,证实这些突变可导致磷酸核糖焦磷酸(PRPP)合成酶1活性下降。通过原位杂交,我们证实Prps1在小鼠的前庭和耳蜗毛细胞中皆有表达,并且在毛细胞中持续表达,出生后在螺旋神经节中仍有表达。PRPS1作为第二个X染色体上发现的非综合征型耳聋基因,是进行X连锁遗传性聋基因诊断很好的候选基因。

对孤立中子星1E1207．4—5209 X-射线回旋吸收线的理论分析

近来的观测表明,在射电宁静孤立中子星1E1207．4-5209的X-射线连续谱中存在几条等间隔的吸收线,能量分别为0．7、1．4和2．1keV．根据近年发展的四极近似下的量子回旋辐射理论,澄清了目前的一些疑问,肯定了它们是电子回旋吸收线,而不是质子回旋线．并从理论上确定了该中子星自转轴的空间取向．

HAX-1调控人宫颈癌Hela的细胞增殖

目的探讨造血细胞特异性蛋白1(HS-1)相关蛋白X-1(HAX-1)对宫颈癌Hela细胞增殖的调控作用。方法以人宫颈癌Hela细胞系为研究模型,采用脂质体介导法将HAX-1 siRNAs和阴性对照siRNA转染Hela细胞并构建HAX-1沉默细胞系(HAX-1沉默组),以HAX-1高表达质粒和pcDNA3.1空载质粒转染Hela细胞并构建HAX-1过表达细胞系(HAX-1过表达组)。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot检测转染后Hela细胞中HAX-1的表达情况;EdU试验检测转染后的细胞增殖能力;MTT试验检测转染后的细胞活力;流式细胞术检测HAX-1对转染后Hela细胞周期和细胞凋亡的变化;RT-qPCR检测转染后Ki-67、c-Myc、BCL-2/BAX基因的表达水平。结果沉默HAX-1后,Hela细胞中HAX-1 mRNA和蛋白质的水平显著降低,而过表达HAX-1后,Hela细胞中HAX-1 mRNA和蛋白质的水平显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。过表达HAX-1后,HAX-1过表达组中EdU阳性细胞数目下降,细胞活力降低,G1期细胞比例增加,S期细胞比例降低,细胞凋亡率上升,增殖相关基因Ki67表达降低,BCL-2/BAX基因显著降低(P<0.05),而HAX-1沉默组则具有相反的表现。结论HAX-1的表达抑制了Hela细胞增殖,并通过BCL-2/BAX途径诱导其凋亡。