Comparison between Sulfuric Acid-phenol and Sulfuric Acid-anthrone Methods Used for Determination of Polysaccharides in Shoots of Aralia elata (Miq.) Seem.

Sulfuric acid-phenol and sulfuric acid-anthrone methods were used to detect polysaccharide content in shoots of Aralia elata（ Miq.） Seem.,and the conversion factor to glucose was measured with refined polysaccharides. Comprehensive evaluation was carried out by linear relationship,precision,reproducibility,stability and recovery rate. The results showed that the linear relationship between glucose concentration and absorbance was good when glucose concentration was0-40 μg/ml,and the average recovery rate was equal to or higher than 97. 00% with good reproducibility（ RSD 〈 1. 60%,n = 5）. It revealed that the two methods were accurate and reliable,and suitable for the determination of polysaccharide content in the shoots of A. elata. Polysaccharide content detected by sulfuric acid-phenol and sulfuric acid-anthrone methods was 19. 31% and 20. 40% respectively.

Total Saponins of Aralia elata （Miq.） Seem Leaves （TSAESL） Inhibits Tumor Cell Proliferation and Induces Apoptosis via activating MAPK signaling pathways in MCF-7 human breast cancer cells

Aim Aralia elata （Miq.） Seem is a medicinal plant with a variety of biological activities. Several trier- pene saponins extracted from the leaves of Aralia elata （Miq.） Seem possess potent cytotoxic activity, but the mechanisms remain unclear. Methods In the present study, we examined the anti-tumor activity of total saponins of Aralia elata （Miq.） Seem leaves （TSAESL） using both in vitro and in vivo experiments, and investigated the underlying molecular mechanisms. Results Briefly, TSAESL significantly inhibited the proliferation of five human cancer cell lines and induced apoptosis of MCF-7 cells in a concentration-dependent manner. TSAESL also in- creased the expression level of active caspase-3 and cleaved PARP. In addition, TSAESL dramatically activated the phosphorylation of ERK1/2, p38 and JNK in a concentration-dependent manner. Treatment with the ERK1/2 in- hibitor U0126, p38 inhibitor SB203580, or JNK inhibitor SP600125 prior to TSAESL exposure markedly attenuated TSAESL-induced phosphorylation of ERK1/2 and p38. In mice bearing MCF-7 xenografl, TSAESL markedly inhib- ited tumor growth without significantly affecting spleen coefficient and hematological parameters. Conclusion These results strongly suggest that TSAESL has anti-tumor effect via activating the MAPK-mediated signaling path- ways.

辽东楤木芽多糖乙酰化修饰工艺及其抗氧化活性研究

以辽东楤木芽为原料,采用超声波辅助提取法提取辽东楤木芽多糖,制备辽东楤木芽乙酰化多糖(Ac-AEBP)。以乙酰基取代度为指标,研究反应温度、反应时间和液料比(mL/g)对AEBP乙酰化修饰取代的影响。在单因素实验的基础上,运用Box-Behnken设计响应面实验对乙酰化工艺参数进行优化,并比较乙酰化修饰前后的辽东楤木芽多糖对·OH、·O^(2-)、DPPH·、ABTS+·的清除作用以及还原能力,探讨其抗氧化活性。结果表明辽东楤木芽多糖乙酰化最佳工艺条件为:反应温度52℃,反应时间4 h,液料比43∶1(mL/g),在此条件下,乙酰化辽东楤木芽多糖的取代度为0.4596。抗氧化研究表明,与未经修饰的AEBP相比,Ac-AEBP的抗氧化活性有较大的增强。该研究可为进一步开发利用辽东楤木芽提供科学依据。

反季刺嫩芽水肥一体化控制系统的研发与应用

为保证反季刺嫩芽生产过程中水肥的精准供给,推动刺嫩芽满足反季节市场需求,利用物联网技术和自动控制技术研发出适用于反季刺嫩芽生产的水肥一体化控制系统,并分析反季刺嫩芽生产中的水肥智能管控策略。研究表明,反季刺嫩芽生产水肥一体化控制系统运行稳定、可靠性强、易于操作,能够为反季刺嫩芽的生产提供技术支持。

龙牙楤木总皂苷通过调控AMPK/Nrf2信号抑制缺氧/复氧诱导的心肌细胞铁死亡

目的:探究龙牙楤木总皂苷对AMPK/Nrf2信号通路的影响。方法:将人心肌细胞AC16进行体外培养,分为空白对照组、缺氧/复氧模型组、铁离子螯合剂对照组,铁离子螯合剂组、龙牙楤木总皂苷低(0.02μg/mL)浓度组、龙牙楤木总皂苷中(0.1μg/mL)浓度组、龙牙楤木总皂苷高(0.5μg/mL)浓度组,丹参滴丸(50μg/mL)阳性对照组,AMPK抑制剂Compound C(5μg/mL)+龙牙楤木总皂苷(0.5μg/mL)组,Nrf2抑制剂ML385(2μg/mL)+龙牙楤木总皂苷(0.5μg/mL)组。MTT法检测细胞存活率;试剂盒检测细胞内Fe^(2+)、ROS水平;免疫荧光法检测脂质过氧化物及GPX4、ACSL4蛋白表达;qRT-PCR检测GPX4、ACSL4 mRNA表达,Western Blot检测GPX4、ACSL4、p-AMPK、Nrf2蛋白表达;结果:与空白对照组比较,模型组细胞存活率、GPX4 mRNA表达显著降低,Fe^(2+)含量、ROS和脂质过氧化水平、ACSL4 mRNA表达显著升高,p-AMPK、Nrf2蛋白表达显著降低(P<0.01)。与模型组比较,铁离子螯合剂组细胞存活率、GPX4 mRNA表达显著升高,Fe^(2+)、ROS、脂质过氧化水平及ACSL4 mRNA表达显著降低(P<0.01);龙牙楤木总皂苷各组和丹参滴丸组细胞存活率及GPX4、p-AMPK、Nrf2蛋白表达显著升高,心肌细胞中Fe^(2+)、ROS、脂质过氧化水平及ACSL4蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01)。与龙牙楤木总皂苷组比较,Compound C+龙牙楤木总皂苷组和ML385+龙牙楤木总皂苷组细胞存活率显著降低,Fe^(2+)含量显著升高,Nrf2蛋白表达显著降低,Compound C+龙牙楤木总皂苷组ROS和脂质过氧化水平显著升高,p-AMPK蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:龙牙楤木总皂苷可通过激活AMPK/Nrf2信号通路,抑制H/R诱导的心肌细胞铁死亡。

辽宁楤木嫩叶中三萜皂苷的分离与结构鉴定

目的:对辽宁楤木Aralia elata(Miq.)Seem.嫩叶中的三萜皂苷类成分进行分离与鉴定。方法:通过乙醇回流提取,运用硅胶、AB-8型大孔吸附树脂、ODS柱、制备HPLC进行分离纯化,利用NMR和MS谱进行化合物的结构鉴定。结果:从辽宁楤木嫩叶中分离得到15个化合物,分别鉴定为:常春藤皂苷元-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(1)、楤木皂苷A(2)、刺囊酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(3)、齐墩果酸-3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷(4)、齐墩果酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)、anchusosid 2(6)、齐墩果酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷(7)、常春藤皂苷元-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)-β-D-吡喃葡萄糖苷(8)、竹节参皂苷Ⅳa(9)、randianin(10)、macranthoside A(11)、常春藤苷元-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(12)、齐墩果酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖苷(13)、常春藤皂苷元-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖基-28-O-β-D-吡喃葡萄糖酯苷(14)、刺囊酸-3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(15)。结论:其中,化合物4、8、11、13、14为首次从该属植物中分离得到。

辽东楤木药理作用研究进展

中国传统药材辽东楤木[Aralia elata(Miq.)Seem.]又称龙牙楤木,具有“补气安神,强精滋肾,祛风活血”的功效,用于治疗神经衰弱、阳虚气弱、肾气不足、脾阳虚衰之水湿停滞、消渴、跌打损伤等症。楤木皂苷类化合物是其发挥药理作用的主要物质基础。辽东楤木具有广泛的现代药理学作用,主要包括通过调控离子稳态及抑制炎症发挥抗心肌缺血和缓解继发性心肌缺血再灌注损伤的作用;通过抑制肿瘤细胞增殖促进肿瘤细胞凋亡及增强机体免疫来发挥抗肿瘤作用;通过调控机体糖脂代谢发挥降血糖、调血脂药理作用;以及保肝护肝、神经保护和抗炎、镇痛作用。未来,辽东楤木药理作用机制的深入研究将有利于促进其开发及利用。本文综述了国内外近二十年来对辽东楤木的相关研究,并提出了针对辽东楤木的药理研究新思路,旨在为同行提供参考。

辽东楤木三萜皂苷PDR转运蛋白筛选与表达模式分析

植物多向耐药性(Pleiotropic drug resistance,PDR)蛋白属于三磷酸腺苷结合盒(ATP-binding cassette,ABC)转运蛋白ABCG亚族,在植物次生代谢产物转运特别是萜类物质跨膜转运中发挥重要作用。基于辽东楤木全基因组测序鉴定出21个PDR转运蛋白,且主要为细胞膜蛋白,该基因在12对染色体上均有分布,其中5号染色体上分布较多。共线性分析结果表明,部分PDR基因在进化过程中发生基因串联复制事件,并可能存在基因多拷贝扩增现象。基因结构分析结果表明,17个基因含有PDR基因特有结构域,且启动子上含有多种激素和非生物胁迫响应相关顺式作用元件。组织特异性表达模式分析结果表明,PDR基因主要在辽东楤木叶片中高表达。为筛选与辽东楤木三萜皂苷转运相关的PDR转运蛋白,对基因编码区序列、蛋白结构、跨膜螺旋等进行分析,初步筛选出7个结构完整的PDR转运蛋白。进一步通过系统进化分析、基因表达与皂苷含量的关联分析筛选出2个可能与楤木皂苷转运相关的PDR基因(AE02G00218和AE12G01725)。两个基因均受外源激素MeJA、SA和机械损伤诱导上调表达。以上研究为萜类物质转运相关蛋白鉴定与功能研究提供新思路和基因资源。

培养因素对龙牙楤木体细胞胚胎发生的影响

对龙牙楤木Araliaelate(Miq.)Seen幼芽体细胞胚胎发生过程中培养基的种类、2,4 D、BA、蔗糖浓度及活性碳等五个培养因素的影响进行了比较研究.结果表明,诱导体细胞胚胎发生的适宜基本培养基为MS培养基;蔗糖浓度从2%提高到3%诱导率逐渐下降;当2,4 D/BA比值低时,有利于体细胞胚胎发生频率的提高,但不利于胚状体的产生;当该比值高时,必须添加活性碳才有利于提高体细胞胚胎发生的数量和质量.

星点设计-效应面法优化龙芽楤木叶提取工艺

目的:星点设计-效应面法优化龙芽楤木叶的提取工艺。方法:以乙醇体积分数、提取时间、溶媒比为自变量,龙芽楤木叶总皂苷含量得率为因变量,通过对自变量各水平的多元线性回归及二项式拟合,用效应面法选取较佳工艺,并进行预测分析。结果:确定最优提取工艺为20倍量70%乙醇,提取3次,每次2.5 h,提取预测值与理论值偏差为-2.41%,二项式拟合复相关系数r=0.9617。结论:星点设计-效应面法优化的龙芽楤木叶提取工艺,方法简便,精密度更高,可预测性较优。

HPLC法测定辽东楤木根皮中木皂苷C的含量

目的建立HPLC法测定辽东楤木根皮中楤木皂苷C含量的方法。方法固定相为Diamonsin C18柱（250mm×4．6mm，5μm），流动相为甲醇-水-磷酸（体积比为67．0：33．0：0．2），流速为0．8mL·min^-1。检测波长为206nm，柱温为30℃。结果楤木皂苷C在20～40μg内呈良好的线性关系（r=0．9999）。平均回收率为99．7％，RSD为3．2％（n=6）。结论可用于楤木皂苷C的定量分析。

辽东楤木叶中3个皂苷的鉴定

目的对辽东楤木叶中分离得到的3个皂苷类化合物的结构进行鉴定。方法利用多级串联电喷雾质谱结合其它色谱方法对其结构进行分析。结果分别鉴定为辽东木皂苷、辽东木皂苷、辽东木皂苷。结论3个皂苷类化合物均为首次从该植物叶中得到。

辽东楤木叶化学成分的分离与鉴定

目的对辽东楤木叶的化学成分进行研究。方法通过硅胶柱色谱、ODS柱色谱和制备HPLC等手段进行分离和纯化,利用理化性质和波谱数据进行结构鉴定。结果从辽东楤木叶中分离得到5个化合物,分别鉴定为glucocaulophyllogenin(1)、glycoside st-B(2)、silphioside E(3)、山萘酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(4)、槲皮素(5)。结论化合物1为新天然产物,化合物2～4为首次从楤木属植物中分离得到,化合物5为首次从辽东楤木中分离得到。

速冻终温对刺嫩芽水分结晶及质构的影响

为了探究速冻终温对刺嫩芽品质的影响及确定最佳的速冻终温,实验设定-20、-30、-40℃不同的速冻终温,测定不同速冻终温下刺嫩芽的速冻降温曲线、刺嫩芽表面水分冰晶结晶状态及质构参数。结果表明:-20℃速冻终温的刺嫩芽通过最大冰晶生成带的时间大约为120 s左右,-30、-40℃速冻终温的刺嫩芽通过最大冰晶生成带的时间大约为105 s左右;-30、-40℃速冻终温的刺嫩芽的表面水分冰晶结晶状态优于-20℃速冻终温刺嫩芽的表面水分冰晶结晶状态;-20℃速冻终温的刺嫩芽的脆度、硬度和咀嚼度下降率大约为30%、25%和30%左右,-30、-40℃速冻终温的刺嫩芽的脆度、硬度和咀嚼度下降率大约为20%、15%和15%。-30℃为速冻刺嫩芽的最佳速冻终温。

龙牙楤木体细胞胚胎发生的细胞组织学研究

以龙牙楤木幼芽为外植体,在改良MS培养基上以体细胞胚胎发生获得了再生植株并对其发生过程进行了组织切片和扫描电镜观察。结果表明:龙牙楤木体细胞胚胎发生为典型的单细胞起源。其胚性原始细胞既有内起源,又有外起源。

辽东楤木叶总皂苷对人胃癌BGC细胞凋亡的影响

目的:探讨辽东楤木叶总皂苷(ETS)对人胃癌BGC细胞凋亡的影响。方法:采用MTT比色法测定辽东楤木叶总皂苷在体外对人胃癌BGC细胞增殖的影响;激光共聚焦显微镜观察FITC-Annexin V/PI双染法检测辽东楤木叶总皂苷作用于人胃癌BGC细胞后引起细胞凋亡的形态特征。结果:MTT比色法结果表明,辽东楤木叶总皂苷各剂量组能不同程度抑制人胃癌BGC细胞的增殖,激光共聚焦FITC-Annexin V/PI双染法检测辽东楤木叶总皂苷可诱导人胃癌BGC细胞出现凋亡早、中、晚期的细胞形态。凋亡早期仅细胞膜呈绿色,细胞核不染色;凋亡中、晚期则细胞膜呈绿色,细胞核呈红色。结论:辽东楤木叶总皂苷能够有效抑制癌细胞增殖、诱导凋亡,具有明显的抗肿瘤作用。

龙牙葱木皂苷对大鼠酒精性肝病的防治作用

目的 :探讨龙牙葱木皂苷 -齐墩果酸 (OL A)对大鼠酒精性肝病 (AL D)的防治作用及其机制。方法 :以高脂饮食和酒精灌胃法诱发大鼠 AL D模型 ,同时采用 OL A进行干预 ,造模 3个月后观察肝脏的病理变化 ;检测肝组织中丙二醛 (MDA)、超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽 (GSH)的变化 ;测定血清转氨酶 (AST、AL T)、胆碱脂酶 (Ch E)、甘油三酯 (TG)、总蛋白 (TP)、白蛋白 (AL B)、胆红素 (BIL)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH-Px)以及 MDA。结果 :OL A能使模型组大鼠血清 AL T、 AST、TG、Ch E、MDA和肝组织 MDA降低 ,并且能使血清 GSH- Px和肝组织的 SOD、 GSH升高 ,减轻肝脏病理损伤。结论 :OL A通过清除自由基、降酶、降血脂而起到保护肝脏、预防 AL D的作用 ,自由基和脂质过氧化损伤是 AL D重要的发病学因素。

辽东楤木叶有效部位中楤木皂苷Ⅴ、Ⅵ及总皂苷质量控制

目的建立HPLC-ELSD法测定辽东楤木叶中楤木皂苷Ⅴ和Ⅵ量及可见分光光度法测定辽东楤木叶总皂苷量的方法。方法采用HPLC-ELSD法测定楤木皂苷Ⅴ和Ⅵ,Diamonsil-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为水-乙腈,体积流量0.7 mL/min,柱温35℃,漂移管温度115℃,载气体积流量3.2 L/min。采用可见分光光度法测定辽东楤木叶总皂苷量,检测波长550 nm。结果楤木皂苷Ⅴ、Ⅵ、辽东楤木叶总皂苷分别在1.253～8.768μg(r=0.999 7),1.251～8.767μg(r=0.999 7),0.1549～1.549 mg(r=0.999 8)呈良好的线性关系;加样回收率分别为99.67%(RSD为1.30%),99.17%(RSD为0.97%),99.57%(RSD为0.53%)。结论本实验采用的方法简便快速、准确、重复性好,可用于辽东楤木叶有效部位中皂苷类成分的质量控制。

头序木叶中三萜化学成分的研究

从头序木（ＡｒａｌｉａｄａｓｙｐｈｙｌａＭｉｑ）叶中分离到６个三萜化合物，用化学方法和波谱（ＵＶ，ＩＲ，ＭＳ，１ＨＮＭＲ，１３ＣＮＭＲ，１３ＣＤＥＰＴ，ＨＭＱＣ，ＨＭＢＣ）分析，确定其中４种化合物的结构，分别为齐墩果酸（Ｉ），１６β羟基１８βＨ齐墩果酸（Ｉ），齐墩果酸２８ＯβＤ吡喃葡萄糖甙（ＩＩ）和１６β羟基１８βＨ齐墩果酸２８ＯβＤ吡喃葡萄糖甙（ＩＶ）。用ＮＯＥＳＹ谱确定化合物Ｉ的立体构型。以上４个化合物均为首次从该植物中分离到，化合物ＩＶ为新化合物。

龙芽楤木体细胞胚状体发生及成苗的调控研究

利用龙芽楤木叶片、叶柄、嫩茎及根为试材,研究了2,4-D、6-BA、NAA、糖种类对胚性愈伤组织及胚状体的诱导、芽分化和成苗的影响。以2,4-D1.0 mg/L,确定诱导胚性愈伤组织及胚状体的最适外植体为嫩茎,诱导的胚性愈伤组织及胚状体质量、数量均高于叶片、叶柄和根;经直观分析、方差分析和多重比较,结合对比试验,结果表明:6-BA是龙芽楤木芽分化及成苗的主要因素。以蔗糖30 g/L作碳源,芽分化最适培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.02 mg/L;成苗最适培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.04 mg/L,芽分化率和成苗率达88.02%和79.62%。