槟榔提取物对口腔上皮细胞生物功能影响的研究

目的探讨槟榔提取物(ANE)对人口腔上皮细胞的生物学功能影响。方法本研究首先分析了梯度浓度ANE下对人口腔角质细胞(HOK)增殖的影响;采用第二代RNA测序分析对照组与ANE干预组HOK细胞的差异表达基因。随后,流式细胞术用于检测HOK细胞周期和凋亡;β-半乳糖苷酶(β-Gal)染色试剂盒用于检测细胞衰老;免疫荧光实验检测HOK细胞中Ki67和γH2AX蛋白的表达;实时聚合酶链反应(RT-PCR)用于检测衰老相关表型基因白细胞介素(IL)-6、基质金属蛋白酶-2(MMP2)和TGFB1表达;免疫印迹用于检测自噬相关蛋白(LC3-Ⅰ/Ⅱ和p62)和上皮间充质转化(EMT)相关蛋白(SMAD2、p-SMAD2、E-Cadherin和Vimentin)的表达;酶联免疫吸附实验用于检测HOK细胞外分泌蛋白TGFB1表达。结果测序结果显示ANE可引起HOK细胞细胞周期、p53、自噬、FoxO、细胞衰老等信号通路相关基因异常表达。流式细胞术显示ANE可诱导HOK细胞凋亡和G2/M期阻滞。与对照组相比,ANE处理后的HOK细胞衰老细胞数量增加,衰老相关表型基因IL-6、MMP2和TGFB1表达上调。此外,相较于对照组,ANE组中HOK细胞的γH2AX、LC3-Ⅱ、TGFB1、p-SMAD2和Vimentin蛋白表达增加,Ki67蛋白、LC3-Ⅰ和E-Cadherin蛋白表达下降。结论ANE可诱导HOK细胞凋亡、G2/M期阻滞、衰老、DNA损伤、自噬和EMT,形成促癌的细胞微环境。

中国槟榔习俗研究述评

学界对槟榔习俗的研究持续了近百年,主要集中于对一些地区的槟榔习俗进行调查研究,以及对历史时期中国槟榔习俗的传播与消退及其原因进行探讨。这些研究揭示了中国槟榔习俗流行的主要地区以及槟榔在社会生活中的重要作用,但槟榔习俗形成的原因及其传播机制等关键问题并未得到解决。建议更全面地收集槟榔习俗史料,全面系统地研究嚼食槟榔习俗的原因、中国槟榔习俗形成、传播机制,为解决因嚼食槟榔而引起的社会问题提供历史参考和应对策略。

明胶质量浓度及凝冻强度对槟榔涂膜性能的调控作用

采用明胶对槟榔涂膜处理有助于提高槟榔的光泽和保水性,然而明胶质量浓度及凝冻强度对涂膜性能的影响目前尚不清晰。作者剖析了明胶基薄膜在光学、机械性能与阻水性等方面的差异,并借助红外光谱及X射线衍射探索了涂膜性能差异的原因。结果表明,质量浓度为100~150 g/L的明胶涂膜溶液不仅将槟榔表皮光泽度提高了8~15倍,而且赋予薄膜良好的机械性能和阻水性。虽然明胶凝冻强度的提高有助于增加槟榔涂膜光泽度,但对薄膜机械性能及阻水性无显著影响。薄膜中分子间氢键和三螺旋结构相对含量的差异是明胶成膜后性质不同的重要内因。此外,质量浓度为100~150 g/L的涂膜溶液的黏度与凝固温度更适于提高涂膜的均匀性,为槟榔涂膜性能的调控和涂膜剂的合理选择提供一定的依据。

槟榔籽提取物对血管紧张素转化酶(ACE)活性的抑制作用研究

以嫩果期槟榔籽为研究对象,采用75%乙醇浸提制得槟榔籽提取物(areca nut extract,ANE),再分别用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇依次对总提取物进行萃取,依次得到嫩果期槟榔籽75%乙醇提取物的石油醚部位(PE-ANE)、乙酸乙酯部位(EAC-ANE)、正丁醇部位(BU-ANE)、水部位(W-ANE)的萃取部分。通过体外抑制血管紧张素转化酶(ACE)活性抑制试验测定槟榔提取物各极性部位对高血压的抑制潜力;通过酶动力学实验分析ACE抑制活性最好的极性部位对ACE活性的抑制作用类型;测定不同极性部位蛋白质、总糖及多酚的总含量,并分析其与ACE半抑制浓度(IC50)之间的相关性;最后对4种不同极性部位萃取物中的多酚组分进行初步定量。结果表明:嫩果期槟榔籽提取物各极性部位均具有一定的ACE抑制活性,其中EAC-ANE的ACE抑制活性最好。酶动力学实验表明,EAC-ANE对ACE活性的抑制作用类型为竞争与非竞争的混合型抑制。相关性分析表明,各极性部位ACE的IC50值与多酚、总糖及蛋白质含量均呈显著负相关,且与多酚含量之间具有极强相关性(r=‒0.912)。在4个极性部位中定量了儿茶素、L-表儿茶素、原花青素B2、原儿茶酸、槲皮素等多种多酚组分,且EAC-ANE中的相关多酚组分含量最高。综上所述,槟榔提取物具有一定的降血压潜力,且乙酸乙酯萃取部位最好,多酚含量与各萃取部位的ACE抑制活性具有极强的相关性,可初步推断多酚是槟榔提取物中抑制ACE活性的重要物质。

1例微小膜壳绦虫患者的诊断治疗病例报道

景洪市第一人民医院于2016年6月23日收治1例18岁男性泌尿系疾病患者,因尿急、尿频、尿痛、血尿就诊,入院后查体一般情况良好。实验室检查血常规和肝、肾脏等功能指标无异常,粪便常规检查见微小膜壳绦虫卵,泌尿系疾病治愈后,患者自觉无明显消化道症状出院。2019年2月12日随访患者自诉近1年消化功能差,腹泻,偶有腹痛。粪便常规显示微小膜壳绦虫卵密度较前明显增加,并查见大量蓝氏贾第鞭毛虫包囊,确诊微小膜壳绦虫和蓝氏贾第鞭毛虫混合感染。先后通过替硝唑、槟榔南瓜子及吡喹酮等手段进行驱虫治疗,根据显微镜检查结果比较不同驱虫方法的利弊,结果显示,替硝唑仅对蓝氏贾第鞭毛虫治疗有效;吡喹酮可有效杀灭肠道中微小膜壳绦虫成虫和肠黏膜内的似囊尾蚴,具有较好的治疗效果;通过追踪患者生活环境,分析感染来源及预防措施,提示未经无害化处理的农肥和不良生活卫生习惯可能是寄生虫感染的主要因素。

槟榔化学成分及其生物活性研究进展

槟榔是热带亚洲和我国流行的咀嚼物品,国内外文献报道槟榔含有生物碱、黄酮、单宁、萜烯类、类固醇和脂肪酸等化学成分,具有抗寄生虫、抗抑郁、抗疲劳、抗氧化、抗衰老、抗菌、抗病毒、抗炎、促消化、降血糖和治疗心血管疾病等作用。随着槟榔销售市场的扩大和人们健康意识的提高,槟榔副作用不断被放大,其活性和副作用的物质基础仍无权威结论,探明槟榔活性及副作用的物质来源已成为槟榔产业可持续发展和食用安全的关键。通过综述槟榔的化学成分和生物活性,为后续槟榔研究提供理论支撑。

槟榔活性成分诱导口腔黏膜下纤维化的机制:基于网络药理学结合临床样本验证

目的探究槟榔的成分及其促进口腔黏膜下纤维化的机制。方法采用Thermo QE plus液相色谱串联高分辨质谱仪和Compound discover 3.2数据处理软件进行槟榔中药化学成分分析,将检测到的化合物以质谱响应值排序,分析排名前20化合物的活性。化合物活性来源根据《中国药典(2015版)》汇总,数据查询基于PubChem、Chemical book以及Scifinder数据库。借助网络药理学方法分析槟榔影响口腔黏膜下纤维化(OSF)的潜在活性成分、核心靶点及主要影响的生物功能、信号通路。通过整合人类基因数据库(Genecards)、基因组百科全书数据库(KEGG)等数据库获取OSF的作用靶点。以OB≥30%为条件,在中药系统药理学技术平台(TCMSP)中筛选出槟榔可作用于靶点的化合物,并构建靶点-化合物、化合物-中药、靶点-化合物-中药网络。运用MOE软件的分子对接技术,分析成分-靶点结合的可能性,再利用Pymol软件进行分子对接可视化。最后通过免疫组化在临床样本中验证槟榔是否影响PI3K-Akt、MAPK两条通路涉及的主要蛋白,初步验证槟榔诱导OSF的潜在作用机制。结果基于网络药理学和槟榔粗提物中筛选出前10的化合物与OSF核心靶点中核心交集基因,确定了槟榔可能通过调控PI3K-Akt与MAPK通路。通过免疫组化在临床样本中验证,细胞膜上的PI3K蛋白表达量在OSF患者组中表达下降(P=0.0002),p-PI3K(P=0.0002)表达量上升,进一步激活下游的AKT1蛋白表达增加(P=0.0006),加剧磷酸化蛋白p-AKT蛋白的表达及堆积(P=0.0013);而在MAPK通路中,OSF患者组对比正常组,通过上调JNK蛋白(P=0.0130),诱导下游AP-1复合蛋白c-jun及c-fos转录因子的活性增加,促使其向细胞核聚集;且OSF患者组较正常组血浆的IL-6(P<0.0001)与IL-8(P=0.0095)含量均上升。结论槟榔碱、槟榔次碱、异去甲槟榔碱等槟榔中的主要活性成分可能通过刺激PI3K-Akt与MAPK信号通路,促进炎症介质IL-6及IL-8的表达,诱导胶原增生,导致口腔黏膜下纤维化病变。

草甘膦、草铵膦喷施对槟榔根系形态及生理的影响

除草剂防除杂草的同时会对非靶标作物造成一定危害,频繁使用除草剂的海南槟榔园叶片黄化症状更明显,我们推测除草剂可能导致槟榔根系退化,从而引起叶片黄化。为验证这一推断,以幼龄期与成龄期槟榔为试验材料,施用不同浓度草甘膦和草铵膦后,测定分析槟榔根系生长发育形态指标、根系活力、气生根组织结构、不同类型根系占比等。结果表明,幼龄期槟榔根系以直径0~1.5 mm根系为主,数量占总根的88%以上,表面积占总根的63%以上。与人工除草、对照(不除草)相比,喷施草甘膦和草铵膦显著降低槟榔幼苗根系鲜干质量、白色吸收根比例、吸收根活力。对于成龄期槟榔气生根,喷施草甘膦和草铵膦均引起气生根药剂残留,且农残量随施用浓度增加而增加,并阻碍槟榔气生根发育;草甘膦处理后14 d气生根死亡数达到最大,草铵膦处理后28 d达到最大。草铵膦损害气生根组织结构,使新根内皮层排列稀疏,表皮组织厚度增加,木栓化程度加深,导致根表皮细胞大量死亡,抑制气生根伸长与增粗。说明喷施草甘膦和草铵膦会导致槟榔根系木栓化,加速根系死亡,从而抑制其根系生长与发育,引起槟榔园叶片黄化。

咀嚼槟榔与胃食管反流病内镜下食管黏膜损伤程度分级及组织病理的关系分析

目的探讨咀嚼槟榔与胃食管反流病(GERD)内镜下食管粘膜损伤程度分级及组织病理的关系。方法选取2020年8月至2023年8月收治的196例GERD患者作为研究对象,所有患者均进行内镜检查,根据患者咀嚼槟榔情况分为轻度组、中度组和重度组,比较3组内镜下食管黏膜损伤程度分级和组织病理情况,并分析咀嚼槟榔与GERD内镜下食管黏膜损伤程度分级及组织病理的关系。结果轻度组食管黏膜损伤程度优于中度组和重度组(Z=38.85,P<0.05);轻度组病理组织学结果优于中度组和重度组(Z=31.99,P<0.05);Spearman相关性检验显示,咀嚼槟榔与GERD内镜下食管黏膜损伤程度分级和组织病理学结果均呈正相关(r=0.346;r=0.281,P<0.05)。结论咀嚼槟榔与GERD内镜下食管黏膜损伤程度分级和组织病理相关,可为临床GERD的诊断提供参考。

基于计算机视觉技术的槟榔核中心检测方法研究

在槟榔的自动化加工工艺中去核与点卤是非常重要的环节,为提高生产效率,需要准确检测出槟榔核中心的位置,才能高效地实现槟榔的去核与点卤。针对目前槟榔自动化生产过程中槟榔内轮廓检测效率不高、检测结果适用性差等问题,提出了一种基于计算机视觉技术的槟榔核中心自动化检测方法。采集到的槟榔图片经过预处理后,采用自适应阈值分割的方法获取槟榔的前景信息并检测槟榔的边缘信息,在此基础上根据槟榔椭圆形状的代数描述计算出槟榔核中心位置坐标。结果表明,该方法可以精确检测出不同背景下多种形貌的槟榔核中心位置,在摆盘的槟榔图片中,槟榔核中心位置的检出率为100%,平均检测时间为0.39 ms,检测效果良好。

槟榔果仁油提取及其脂肪酸分析

槟榔果仁含有约14%左右的油脂,为探讨槟榔脂肪酸的主要种类,用不同的溶剂对槟榔种子中的脂肪酸进行提取,确定了乙酸乙酯为较好的提取溶剂,考察了提取温度、提取时间和料液比三个因素对提取槟榔种子油的影响,确定了最佳工艺参数为:提取温度为60℃,提取时间是2 h,料液比为1∶8。将提取油脂甲酯化后,利用气相色谱质谱联用法鉴定出了11种成分及各种成分的相对含量。结果表明:槟榔果仁中含量较高的脂肪酸是亚油酸32.12%,油酸29.50%,棕榈酸27.70%,表明槟榔的脂肪酸中既含高含量的饱和脂肪酸棕榈酸,有含高含量的多不饱和脂肪酸(亚油酸)。

槟榔不同株行距间作香草兰对土壤养分和微生物的影响

为了揭示槟榔不同株行距间作香草兰对土壤微生物和土壤养分的影响,以生产上槟榔3个种植密度间作香草兰为处理,人工荫棚单作香草兰为对照,测定和分析土壤中微生物的数量和土壤养分的含量。结果表明,槟榔间作香草兰可显著提高土壤微生物的数量,改良土壤微生物群落中真菌、细菌和放线菌的比例。槟榔株行距为2.0m×2.5 m(Tr2)的处理,土壤pH值及有机质、全K、碱解N、速效P、速效K、交换性Ca、有效Fe、有效B含量均显著提高。Pearson积矩相关分析表明,土壤中各类微生物的数量与土壤养分含量之间存在着多种显著的相关关系。槟榔株行距为2.0 m×2.5 m间作香草兰对土壤微生物数量及其比例与土壤养分含量具有良好的调节作用,且彼此具有显著相关性。

超临界CO_2流体萃取槟榔中的槟榔碱

为了优化超临界CO2萃取槟榔碱的工艺参数,通过三元二次通用旋转组合设计实施试验,考察了萃取温度、萃取压力和萃取时间因素对槟榔碱萃取量的影响。试验结果表明:超临界萃取的温度对槟榔碱萃取量有极显著的影响,萃取时间和压力的影响较小。同时确定了槟榔碱萃取的最佳工艺参数为萃取温度72℃,压力57MPa,时间26min。在此条件下,槟榔碱的萃取量为6143.71μg/g,达到理论最大萃取量的95.3%,所得萃取物中槟榔碱的百分含量为(25.85±0.41)%。

槟榔生物碱的研究现状及展望

槟榔中的生物碱是槟榔的主要药理活性成分,在阅读了大量文献的基础上对到目前国内外学者有关槟榔生物碱的提取分离、定量测定方法、结构鉴定、保健和药理功效及毒性副作用等进行了综述,并就所存在的问题和发展前景作了初步探讨,目的是对槟榔的深度开发与综合利用起到指导作用。

海南槟榔黄化病病原物的分子鉴定

槟榔黄化病是槟榔上的一种重要病害,如何快速检测该病原菌是防治该病的重要基础。利用植原体16SrDNA通用引物对海南感染黄化病的槟榔花苞总DNA进行巢式PCR扩增,获得约1.2kb的特异片段,并对扩增产物进行核苷酸序列测定。通过BLAST程序比较、系统进化树构建及iPhyClassifier分析表明,引起海南槟榔黄化病病原植原体属于翠菊黄化植原体组(16SrⅠ组),且为该组中一个新的亚组,即G亚组,现将其暂命名槟榔黄化植原体(Arecanut yellow leaf phytoplasma,AYL)。

槟榔果及其制品中总酚和单宁含量的测定

以分光光度法对槟榔果果实及其加工后制品中的总酚、缩合单宁和原花青素进行了测定。结果表明,不同槟榔青果间酚类物质含量差异明显,榔玉的酚类物质含量远高于槟榔青果和槟榔外壳。经加工后的槟榔制品中,酚类物质含量明显减少。

槟榔提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用研究

研究槟榔提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,并采用Lineweaver-Burk双倒数法分析其动力学性质。结果表明,槟榔壳、槟榔籽和槟榔花提取物对α-葡萄糖苷酶活性均具有一定的抑制作用,其半数抑制浓度IC50分别为(2.87±0.48)mg/mL、(1.50±0.31)μg/mL和(4.00±0.53)mg/mL,其中槟榔籽提取物的抑制作用明显高于阳性对照阿卡波糖[IC50为(0.71±0.09)mg/mL]。对提取物中多酚、多糖等成分进行分析,发现槟榔籽提取物中具有较高含量的多酚及多糖,含量分别为(441.73±4.79)mg/g和(411.47±6.01)mg/g。动力学试验结果表明,槟榔壳及槟榔籽提取物对酶活性的抑制作用类型为竞争与非竞争的混合型抑制,而槟榔花提取物对酶活性的抑制作用类型为竞争与反竞争的混合型抑制。试验结果表明槟榔籽提取物对α-葡萄糖苷酶活性的抑制效果显著,具有很好的开发利用价值。

槟榔提取物对小白鼠体内抗氧化作用的研究

以海南产槟榔鲜果为原料,制备槟榔提取物,研究槟榔提取物对小白鼠体内的抗氧化作用,通过体外实验筛选出来活性较好的提取物,将其作为受试物,以血清SOD及血清MDA水平为评价指标,进行小白鼠体内抗氧化作用研究。结果表明,槟榔粗提取物、乙酸乙酯萃取物和水溶出物三种组分对羟自由基(·OH)具有良好的清除作用,清除率均在53%以上。三种受试物的各个剂量均能显著提高小白鼠的血清SOD水平(p<0.05);而除乙酸乙酯萃取物高剂量作用效果不显著外(p>0.05),其他各受试物的各个剂量均能显著降低实验动物的血清MDA浓度(p<0.05)。槟榔提取物在小白鼠体内具有良好的抗氧化活性作用。

不同槟榔果常规营养成分和槟榔碱含量分析

对海南产的新鲜槟榔、槟榔烟果、槟榔籽3种样品作槟榔碱含量和常规营养成分分析。结果显示：不同样品中各槟榔碱及营养成分存在一定差异，槟榔碱在0—12．5mg／L范围内呈线性关系，线性回归方程为Y=0．0252x＋0．0632，测得新鲜槟榔、槟榔烟果、槟榔籽的槟榔碱含量分别是0．422％、0．184％、0．329％：新鲜槟榔：蛋白质6．23％，粗脂肪17．52％，粗纤维17．87％，灰分4．09％，Vc13．29mg／g，还原糖13．35％，水分21．32％；槟榔烟果：蛋白质12．05％，粗脂肪13．23％，粗纤维23．31％，灰分4．67％，Vc2．64mg/g，还原糖2．86％，水分7．65％；槟榔籽：蛋白质22．78％，粗脂肪26．52％，粗纤维2．45％，灰分3．94％，Vc7．68mg／g，还原糖17．19％．水分12．56％。未加工的槟榔、加工后的槟榔及槟榔的不同部位的槟榔碱含量和常规营养成分含量存在一定差异。

槟榔及其产品中生物碱成分的反相离子对高效液相色谱法测定

通过反相离子对高效液相色谱法测定了槟榔及其产品中的生物碱。采用HypersilBDSC18(250×4.6mm,5μm)色谱柱,柱温60℃;流动相为水-甲醇-磷酸-SDS(55ml∶45ml∶0.1ml∶1g),流速为1.0ml/min;采用SPD-20A紫外检测器,检测波长为215nm。结果显示,槟榔碱和槟榔次碱在25min内分离良好。测定的精密度为0.87%～1.58%,加标回收率为96.77%～100.23%。应用该方法对槟榔及其产品中槟榔碱和槟榔次碱的含量进行了测定分析。