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pEGFP-N1/Arf6-T27N重组真核表达载体的构建及其在人乳腺癌细胞株中的表达
1
作者
李卫星
杜军
胡圳圳
《南京医科大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第11期1587-1592,共6页
目的:构建含有Arf6-T27N基因的重组真核表达载体,并检测Arf6-T27N蛋白在MDA-MB-231人乳腺癌细胞中的表达情况,以期为深入研究Arf6在乳腺癌细胞迁移中的作用机制奠定基础。方法:从含Arf6-T27N基因的真核表达质粒pXS-Arf6-T27N中扩增出Arf...
目的:构建含有Arf6-T27N基因的重组真核表达载体,并检测Arf6-T27N蛋白在MDA-MB-231人乳腺癌细胞中的表达情况,以期为深入研究Arf6在乳腺癌细胞迁移中的作用机制奠定基础。方法:从含Arf6-T27N基因的真核表达质粒pXS-Arf6-T27N中扩增出Arf6-T27N基因,插入pEGFP-N1载体中构建成pEGFP-N1/Arf6-T27N,利用脂质体将其转染MDA-MB-231人乳腺癌细胞。用新霉素筛选稳定表达的细胞系,Western blot确定重组蛋白表达,并用Boyden chamber小室实验检测转染Arf6-T27N的MDA-MB-231人乳腺癌细胞迁移能力的改变。结果:限制性内切酶鉴定和核酸定列测定证实成功构建了含Arf6-T27N的重组真核表达载体pEGFP-N1/Arf6-T27N。以重组质粒稳定转染MDA-MB-231人乳腺癌细胞,能检测到Arf6-T27N蛋白的表达,且Arf6-T27N蛋白能明显抑制MDA-MB-231人乳腺癌细胞的迁移。结论:成功构建了重组质粒pEGFP-N1/Arf6-T27N,稳定转染Arf6-T27N的MDA-MB-231人乳腺癌细胞可检测到其蛋白水平的稳定表达,重组质粒介导的Arf6-T27N蛋白能明显抑制MDA-MB-231细胞的迁移。
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关键词
arf6-t27n
MDA-MB-231人乳腺癌细胞
基因转染
稳定表达
细胞迁移
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题名
pEGFP-N1/Arf6-T27N重组真核表达载体的构建及其在人乳腺癌细胞株中的表达
1
作者
李卫星
杜军
胡圳圳
机构
泰州职业技术学院医学技术学院
南京医科大学基础医学院生理学系
南京医科大学第二附属医院中心实验室江苏南京
出处
《南京医科大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第11期1587-1592,共6页
基金
南京医科大学基础医学院青年教师培养基金(2010),南京医科大学科技发展基金重点项目(2010NJ-MUZ35)
中国博士后科学基金(2011M501254)
文摘
目的:构建含有Arf6-T27N基因的重组真核表达载体,并检测Arf6-T27N蛋白在MDA-MB-231人乳腺癌细胞中的表达情况,以期为深入研究Arf6在乳腺癌细胞迁移中的作用机制奠定基础。方法:从含Arf6-T27N基因的真核表达质粒pXS-Arf6-T27N中扩增出Arf6-T27N基因,插入pEGFP-N1载体中构建成pEGFP-N1/Arf6-T27N,利用脂质体将其转染MDA-MB-231人乳腺癌细胞。用新霉素筛选稳定表达的细胞系,Western blot确定重组蛋白表达,并用Boyden chamber小室实验检测转染Arf6-T27N的MDA-MB-231人乳腺癌细胞迁移能力的改变。结果:限制性内切酶鉴定和核酸定列测定证实成功构建了含Arf6-T27N的重组真核表达载体pEGFP-N1/Arf6-T27N。以重组质粒稳定转染MDA-MB-231人乳腺癌细胞,能检测到Arf6-T27N蛋白的表达,且Arf6-T27N蛋白能明显抑制MDA-MB-231人乳腺癌细胞的迁移。结论:成功构建了重组质粒pEGFP-N1/Arf6-T27N,稳定转染Arf6-T27N的MDA-MB-231人乳腺癌细胞可检测到其蛋白水平的稳定表达,重组质粒介导的Arf6-T27N蛋白能明显抑制MDA-MB-231细胞的迁移。
关键词
arf6-t27n
MDA-MB-231人乳腺癌细胞
基因转染
稳定表达
细胞迁移
Keywords
arf6-t27n
MDA-MB-231 breast ca
n
cer cell
ge
n
e tra
n
sfectio
n
stable expressio
n
cell migratio
n
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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题名
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出处
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1
pEGFP-N1/Arf6-T27N重组真核表达载体的构建及其在人乳腺癌细胞株中的表达
李卫星
杜军
胡圳圳
《南京医科大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2011
0
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已选择
0
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