吸烟和β3-肾上腺素能受体基因Trp64Arg、锰超氧化物歧化酶9Ala/Val基因多态性与非酒精性脂肪性肝病的相关性

目的探讨吸烟和β3-肾上腺素能受体（β3-AR））基因Trp64Arg、锰超氧化物歧化酶9Ala/Val（MnSOD9Ala/Val）基因多态性与非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）发病之间的关系。方法采用病例-对照研究的方法,以720例NAFLD患者及720例健康对照者的外周血白细胞为样本,采用聚合酶链反应（PCR）技术分析β3-AR基因Trp64Arg和MnSOD9Ala/Val基因多态性。结果β3-AR基因Trp64Arg（A/A）基因型和MnSOD9Ala/Val（V/V）基因型频率分布分别为39.4%、71.7%（病例组）和21.1%、43.3%（对照组）,差异有统计学意义（P〈0.01;P〈0.01）。Trp64Arg（A/A）基因型者患NAFLD的风险显著增加（OR=2.434,95%CI=1.816～4.075）。MnSOD9Ala/Val（V/V）基因型者患NAFLD的风险也显著增加（OR=3.308,95%CI=1.913～4.509）。基因突变的协同分析发现,Trp64Arg（A/A）/MnSOD9Ala/Val（V/V）基因型者在NAFLD组和对照组中的分布频率分别为32.8%和6.5%,差异有统计学意义（P〈0.01）。Trp64Arg（A/A）/MnSOD9Ala/Val（V/V）基因型者患NAFLD的风险显著增加（OR=9.753,95%CI=4.292～12.426）。病例组的吸烟率显著高于对照组（OR=2.623,95%CI=1.425～4.957）,Trp64Arg（A/A）/MnSOD9Ala/Val（V/V）基因型与吸烟有协同作用（OR=33.764,95%CI=18.907～61.582）。结论 Trp64Arg（A/A）/MnSOD9Ala/Val（V/V）基因型和吸烟是NAFLD的易患因素,三者的联合在NAFLD的发生中起着协同的作用。

单纯肥胖者早期动脉粥样硬化与体脂含量及β3肾上腺素能受体基因Trp64Arg突变

目的:探讨β3-肾上腺素能受体(β3-adrenergicreceptor,β3-AR)基因Trp64Arg突变与单纯肥胖者早期动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的关系。方法:无心血管疾病和代谢性疾病的单纯超重/肥胖者295例,按照腰臀比分成周围性肥胖和中心性肥胖组,172例正常体质量的健康人作为对照组。检测各组β3-AR基因Trp64Arg突变频率和血管内皮依赖性舒张功能(endothelium-dependentdilation,EDD),并测定空腹血糖、胰岛素、内皮素和一氧化氮。按稳态模式评估法公式计算胰岛素敏感性。结果:①周围性肥胖组和中心性肥胖组的EDD均较正常体质量组显著降低犤分别为(9.61±3.45)%,(7.36±3.65)%,(11.97±2.56)%,t=1.82,P<0.05,t=2.76,P<0.01犦,中心性肥胖组的EDD降低更明显(t=1.74,P<0.05)。中心性肥胖组一氧化氮水平较正常体质量组和周围性肥胖组显著下降犤分别为(65.03±19.11),(74.21±20.81),(71.92±17.03)μmol/L,t=2.03,2.15,P<0.05犦。②正常体质量组,周围性肥胖组和中心性肥胖组Trp64Arg突变频率分别为18.89%,17.17%和25.26%,后者与周围性肥胖组和正常体质量组比较差异虽无显著性意义(χ2=2.461,2.140,P>0.05),但有明显升高趋势。③周围性肥胖组EDD降低在β3-AR基因突变与无突变者之间差异无显著性意义。

2型糖尿病痰湿证的β3肾上腺素能受体基因Trp64Arg多态性分析

目的探讨β3肾上腺素能受体基因Trp64Arg多态性(β3-AR)与糖尿病痰湿证的关系。方法选择糖尿病痰湿证患者178例、非痰湿证150例和对照组138例,应用PCR-RFLP方法检测β3-AR基因Trp64Arg多态性。结果 3组TT、TC和CC基因型总的分布有显著性差异(P<0.05);经卡方分割痰湿证组的TC+CC频率(31.46%)高于非痰湿证组(21.33%)和对照组(20.29%),差异显著(P<0.05);多项logistic回归分析,以非痰湿证组为参照系,调整混杂因素后TC+CC型人群患痰湿证的相对危险度为1.428(95%CI:1.011～2.810,P=0.042)。结论β3-AR的TC+CC基因型可能是痰湿证发病的易感因素。

β_3肾上腺能受体基因Trp64Arg变异与2型糖尿病慢性并发症的关系

目的 探讨β3肾上腺能受体 (β3AR)基因 Trp6 4 Arg变异与 2型糖尿病慢性并发症的关系。方法 对 132例无亲缘关系的山东汉族 2型糖尿病患者进行了 β3AR基因多态性分析 ,按有无基因变异分为两组 ,比较两组间糖尿病慢性并发症患病率的差异。结果 基因变异组冠心病 (CHD)、糖尿病下肢血管病变 (DL EVD)的患病率显著高于无基因变异组 (P <0 .0 5 )。

中国人群中XRCC1Arg194Trp位点多态性和结直肠癌易感性关系的Meta分析

目的：探讨中国人群中X射线交叉互补修复基因1（XRCC1）的194位点（Arg194Trp）多态性与结直肠癌（CRC）易感性的关系。方法：检索万方数据知识服务平台、中国生物医学数据库（CBM）、中国知网（CNKI）、维普数据库（VIP）、Pub Med、EBASE等数据库,获取有关XRCC1 Arg194Trp位点多态性与结直肠癌易感性关系的文献,应用Meta分析软件Review Manager 5.1对最终纳入的文献进行综合定量评价,并进行异质性分析、敏感性分析、发表偏倚分析及亚组分析。结果：经过筛选最终纳入10个研究。Meta分析结果示纯合子模型的合并OR=1.40,95%CI（1.13-1.73）,P=0.002;显性模型的合并OR=1.22,95%CI（1.01-1.47）,P=0.04;隐性模型的合并OR=1.30,95%CI（1.06-1.60）,P=0.01;杂合子模型的合并OR=1.19,95%CI（1.00-1.42）,P=0.05。在亚组分析中,病例组吸烟者和对照组吸烟者的OR=1.04,95%CI（0.84-1.29）,P=0.72;病例组饮酒者和对照组饮酒者的OR=1.08,95%CI（0.81-1.44）,P=0.60。结论：XRCC1 Arg194Trp位点多态性和结直肠癌易感性有关系,在纯合子模型、显性模型及隐性模型中携带194Trp基因型个体发生结直肠癌的危险性会增加,吸烟、饮酒与结直肠癌发病率无明显关联。

2型糖尿病与β_3肾上腺素能受体基因Trp64Arg多态性的相关性探讨

目的:探讨β_3肾上腺素能受体基因Trp64Arg突变在2型糖尿病发病中的意义。方法:PCR扩增52例2型糖尿病患者及123例对照者的β_3肾上腺素能受体基因Trp64Arg突变点,经限制性内切酶消化后行凝胶电泳确定其基因型。结果:β_3肾上腺素能受体基因Trp64Arg各种基因型频率在患者组与正常对照组之间的差异无显著性。结论β_3肾上腺素能受体基因Trp64Arg突变可能不是2型糖尿病的主要决定因素。

双重杂合性突变Arg304Gln和Arg304Trp导致的遗传性凝血因子Ⅶ缺陷症

目的:探讨一例遗传性凝血因子Ⅶ(coagulation factor Ⅶ,FⅦ)缺陷症家系基因突变的类型。方法:检测凝血指标以明确诊断;用DNA直接测序法对先证者及其家庭成员FⅦ基因的全部外显子和其侧翼以及启动子进行分析,寻找基因突变;将含突变序列克隆入pGEM T—easy质粒载体中,对所得两条染色体相应序列分别测序,以确定不同突变在染色体上的分布。应用限制性内切酶MspⅠ对先证者及家系成员相应基因片段进行酶切分析,证实测序所发现的突变。结果:先证者在8号外显子上有两种基因突变:11348位C→T突变和11349位G→A突变。pGEM T—easy质粒克隆测序结果显示上述两种突变位于不同的染色体上。为不同染色体同一编码区Arg(CGG)304Trp(TGG)和Arg(CGG)304Gln(CAG)双重杂合性突变。其父亲、母亲分别为11349位G→A和11348位C→T杂合突变;先证者的弟弟FⅦ基因为正常野生型;其哥哥和3个子女均为杂合性突变。PCR辅助限制性酶切证实了先证者及其家系成员的基因突变。结论:先证者FⅦ基因突变为不同染色体同一编码区Arg304Trp和Arg304Gln双重杂合性突变,此种突变类型的组合尚属首例。

ERCC2/XPD和XRCC1基因多态性与鼻咽癌放化疗患者临床转归的相关性研究

目的探讨D组着色性干皮病偶联因子(XPD)的核苷酸切除修复交叉互补基因2(ERCC2/XPD) Lys751Gln和XRCC1 Arg194Trp基因多态性与鼻咽癌(NPC)患者放化疗敏感性及预后相关性。方法选择2015年1月至2016年12月在海南医学院第一附属医院首次接受治疗的NPC患者128例,其中男性82例,女性46例;年龄35~77岁,平均年龄56.28岁。根据放化疗是否敏感分为敏感组和不敏感组。记录所有患者临床资料。采用聚合酶链反应(PCR)检测2组患者ERCC2/XPD Lys751Gln和XRCC1 Arg194Trp基因多态性,采用Hardy-Weinberg遗传平衡吻合度检验法计算各基因型的理论值。Logistic回归分析影响NPC放化疗敏感性的因素,Kaplan-Meier分析不同基因型组间总生存期(OS)的差异。结果敏感组72例,不敏感组56例。敏感组与不敏感组性别、年龄、吸烟习惯、Karnofsky(KPS)评分、化疗方式、T分期比较,差异无统计学意义(P> 0.05),两组患者N分期、美国癌症联合委员会(AJCC)分期、分化程度、淋巴结转移比例、放疗前肿瘤靶区体积(GTVnx)及淋巴结靶区体积(GTVnd)差异有统计学意义(P <0.05);两组间ERCC2/XPD Lys751Gln和XRCC1 Arg194Trp的3种基因型均符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律(P> 0.05);两组患者ERCC2/XPD Lys751Gln基因和XRCC1 Arg194Trp基因的不同基因型分布比较,差异有统计学意义(P <0.05);多因素Logistic回归分析显示,N分期N2+N3期、放疗前GTVnx、放疗前GTVnd、淋巴结转移及ERCC2/XPD Lys751Gln的携带Gln基因型和XRCC1Arg194Trp的携带Trp基因型是影响NPC患者放化疗的独立危险因素;携带ERCC2/XPD Lys751Gln基因Gln等位基因患者3年OS为60.00%,不携带Gln等位基因患者3年OS为79.17%,两者差异具有统计学意义(P <0.05);携带XRCC1 Arg194Trp基因Trp等位基因患者3年OS为58.14%,不携带Trp等位基因患者3年OS为73.81%,两者差异具有统计学意义(P <0.05)。结论 ERCC2/XPD Lys751Gln和XRCC1 Arg194Trp基因多态性与NPC患者放化疗敏感性有关,分别携带Gln、Trp等位基因是放化疗敏感性的危险因素,且患者OS明显降低。

修复基因XRCC1 Arg194Trp位点多态性与结直肠癌易感性的相关性分析

目的探讨DNA损伤修复基因XRCC1 Arg194Trp位点多态性与结直肠癌易感性的关系。方法选取120例结直肠癌患者与120例正常对照者进行对比研究。取外周血提取DNA,采用限制性片段长度多态性聚合酶链反应(PCR-RFLP)技术对XRCC1 Arg194Trp基因多态性进行检测分析,比较不同基因型与结直肠癌易感性的关系。结果 2组观察对象在年龄、性别、吸烟、饮酒、饮食特点等常见暴露因素方面的差异均无统计学意义(P>0.05),变异基因型Arg/Trp+Trp/Trp出现频率在2组观察对象中分别为30.00%和24.17%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 XRCC1 Arg194Trp位点多态性与结直肠癌的易感性并无显著相关性。

X射线损伤修复交叉互补基因1 Arg399Gln、Arg280His和Arg194Trp位点多态性与胃癌易感性的相关性分析

目的探讨X射线损伤修复交叉互补基因1(XRCC1)Arg399Gln、Arg280His和Arg194Trp位点多态性与胃癌易感性的关系。方法选取120例胃癌患者(胃癌组)与120名健康体检自愿者(对照组)作为正常对照进行对比研究。取外周血提取DNA,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术对XRCC1 Arg399Gln、Arg280His和Arg194Trp位点基因多态性进行检测分析,分析不同基因型与胃癌易感性的关系。结果 1 2组在性别、年龄、吸烟、饮酒、饮食特点等常见暴露因素比较差异均无统计学意义(P>0.05)。2胃癌组患者的XRCC1基因194位点Arg/Arg多态基因型出现频率低于对照组(P<0.05),Arg/Trp、Trp/Trp多态基因型及Arg/Trp+Trp/Trp变异基因型出现频率均明显高于对照组(P<0.05)。3胃癌组患者的XRCC1基因280和399位点多态基因型及变异基因型出现频率与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论从本研究结果初步得出,XRCC1 Arg399Gln和Arg280His位点多态性与胃癌易感性无关,而Arg194Trp位点多态性与胃癌的易感性有关。

β3肾上腺素能受体基因多态与新疆

近年来，国内外关于β3肾上腺素能受体Trp64Arg（β3—adrenergicreceptor，β3-AR）基因多态性与高血压病的关系已有报道，但结果不一，主要原因是人群分层偏倚。我们对新疆博尔塔拉州的蒙古族人群检测β3-ARTrp64Arg基因多态性。进行病例一对照研究，探讨这一多态位点在蒙古族人群高血压病发生中的意义。

单纯肥胖与代谢综合征患者β_3-肾上腺素能受体基因Trp64Arg突变的比较

目的 研究单纯肥胖和代谢综合征 (MS)患者 β3 肾上腺素能受体 (β3 AR)基因Trp6 4Arg突变的发生率及其性别、体脂含量和分布的差异。方法 选择单纯性肥胖症患者 2 95例和MS患者2 19例 ,并以 172例非肥胖者作为对照 ,进行 β3 AR基因Trp6 4Arg突变检测。并进一步比较基因突变的性别差异和对肥胖者按体重指数 (BMI)及腰围分组后的基因突变率。结果 MS组 β3 AR基因Trp6 4Arg突变频率高于单纯肥胖症组和对照组 ,主要表现在男性 (分别为 32 2 5 % ,2 1 0 1%和 19 91% ,P值均 <0 0 5 ) ,并高于本组女性 (32 2 5 %vs 2 3 4 6 % ,P <0 0 1)。进一步分组后发现 ,MS组中男性轻度肥胖者基因突变频率高于本组女性及单纯肥胖组男性轻度肥胖者 (分别为 32 83%vs 17 35 % ,P <0 0 5和 32 83%vs 2 0 4 1% ,P <0 0 5 )。男性腹部脂肪重度堆积者基因突变频率也以MS组高于单纯肥胖组 (35 71%vs 2 0 16 % ,P <0 0 5 )。结论 β3 AR基因Trp6 4Arg突变频率在体脂向心性分布较明显的MS组男性明显升高 。

中国人群β_3肾上腺素能受体基因Trp64Arg突变与冠心病关系的研究

目的 研究中国人群 β3肾上腺素能受体 (β3AR)基因Trp64Arg突变频率以及该突变对冠心病患者临床特征的影响。方法 应用PCR/RFLP技术检测 2 52例中国人 (健康体检者 1 2 0例 ,冠心病患者 1 32例 )的 β3AR基因Trp64Arg突变基因型 ,并比较两组的临床特征。结果 (1 )冠心病组与对照组 β3AR基因Trp64Arg突变频率分别为 1 5 9%与 1 6 7% ,两者差异无显著性 (P >0 0 5)。β3AR基因Trp64Arg突变者的体重指数显著高于正常基因型 (P <0 0 5)。 (2 )突变与否间的临床特征差异无显著性 (P >0 0 5)。结论 β3AR基因突变杂合子型 (Trp/Arg)可能不是冠心病发生的决定因素。但Trp/Arg杂合子与Trp/Trp纯合子人群间体重指数差异有显著性 。

TNNT2基因Arg92Trp突变导致小鼠肥厚型心肌病的表型研究

目的编码心脏肌钙蛋白T的TNNT2基因是肥厚型心肌病(hypertrophic cardiomyopathy,HCM)的主要致病基因之一,其Arg92Trp变异是HCM的常见致病突变,但是目前尚未有TNNT2突变的基因敲入小鼠模型。本研究的目的是通过建立基因敲入小鼠模型,研究Arg92Trp突变对心脏结构功能的影响,观察是否能够复制人类HCM表型,为研究TNNT2突变导致HCM的机制以及干预治疗奠定基础。方法使用CRISPR/Cas9技术建立TNNT2基因Arg92Trp突变敲入小鼠,分别于8月龄、12月龄和22月龄通过超声心动图在体检测杂合型(TNNT2^(Arg92Trp/+))与野生型(wild type,WT)小鼠的心脏结构和功能,并于22月龄测量小鼠心重体重比及心肌病理改变。结果与人HCM表型相似,与WT小鼠相比,8月龄、12月龄和22月龄TNNT2^(Arg92Trp/+)小鼠左心室前壁和后壁均显著肥厚,心脏收缩功能增强。22月龄小鼠的Masson染色显示心脏出现纤维化,H-E染色显示肌纤维排列紊乱,WGA染色显示心肌细胞显著增大;但ANP和BNP表达未见显著改变。结论本研究首次建立了TNNT2基因突变的基因敲入小鼠模型。该小鼠模型基本能够模拟人类HCM表型。

β3肾上腺素能受体基因Trp64Arg多态性与冠心病发病风险的Meta分析

目的研究β3肾上腺素能受体(β3-AR)基因Trp64Arg多态性与冠心病发病风险的相关性,为冠心病的个体化防治提供参考。方法通过系统的电子检索方法在Pub Med、Cochrane Library、Embase、中国生物医学文献数据库、中国知网和万方数据库中收集研究冠心病与β3-AR基因Trp64Arg多态性关系的文献,检索日期为1990年1月至2017年5月。根据纳入和排除标准选择合适的研究,采用Revman5.0软件进行Meta分析。结果纳入16项研究,共5 479例冠心病、心肌梗死患者和7 571名健康对照者。等位基因Arg64变异不增加冠心病、心肌梗死发病风险(OR=1.08,95%CI:0.95~1.23,P=0.25)。在基因型比较中,相较于野生型Trp64Trp纯合子,Trp64Arg杂合子同样不增加冠心病、心肌梗死的发病风险(OR=1.04,95%CI:0.94~1.14,P=0.47);但Arg64Arg纯合子显著增加冠心病、心肌梗死的发病风险(OR=1.79,95%CI:1.30~2.45,P<0.01)。结论 Arg64等位基因变异及Trp64Arg基因型不增加冠心病、心肌梗死风险,但Arg64Arg纯合子可能与冠心病、心肌梗死的发病风险关系更加密切。

双重杂合性突变Arg304Gln和Arg304Trp导致的遗传性凝血因子缺陷症

目的 探讨 1例遗传性凝血因子 (coagulation factor ,F )缺陷症及其家系基因突变的类型。方法 检测凝血指标以明确诊断 ;用 DNA直接测序法对先证者及其家庭成员 F 基因的全部外显子和其侧翼以及启动子进行分析 ,寻找基因突变 ;将含突变序列克隆入 p GEM T- easy质粒载体中 ,对所得两条染色体相应序列分别测序 ,以确定不同突变在染色体上的分布。应用限制性内切酶 Msp 对先证者及家系成员相应基因片段进行酶切分析 ,证实测序所发现的突变。结果 先证者在第 8外显子上有两种基因突变 :11348位 C→ T突变和 11349位 G→ A突变。 p GEM T- easy质粒克隆测序结果显示上述两种突变位于不同的染色体上。为不同染色体同一编码区 Arg(CGG) 30 4 Trp(TGG)和 Arg(CGG) 30 4 Gln(CAG)双重杂合性突变。其父亲、母亲分别为 11349位 G→ A和 11348位 C→ T杂合突变 ;其弟弟 F 基因为正常野生型 ;其哥哥和先证者的 3个子女均为杂合性突变。聚合酶链反应辅助限制性酶切证实了先证者及其家系成员的基因突变。结论 先证者 F 基因突变为不同染色体同一编码区 Arg30 4 Trp和 Arg30 4 Gln双重杂合性突变 ,此种突变类型的组合尚属首例。