外周血T淋巴细胞Ag-NORs检测对恶性肿瘤的免疫学诊断及临床意义

目的:探讨外周血液中T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白(Ag-NORs)在肿瘤免疫学诊断及临床疗效观察中的意义。方法:对100例健康人、145例恶性肿瘤患者的外周血液中T淋巴细胞Ag-NORs进行检测分析。通过培养外周血T淋巴细胞进行细胞病理胶银染色,用KL型肿瘤图像分析系统分析I.S%值。结果:健康人与恶性肿瘤患者的外周血液中T淋巴细胞Ag-NORs检测I.S%值有显著性差异(P<0.05)。结论:检测外周血T淋巴细胞Ag-NORs,可以作为恶性肿瘤诊断及病情监测的重要指标。

Ⅲ.乳腺癌Ag-NORs的研究

对66例乳腺癌进行Ag-NORs定量研究。结果表明,Ag-NORs与肿瘤的组织分化程度及预后密切相关(P<0.01,P<0.001)。直线相关分析Ag-NORs与病人生存年限呈负相关关系(r=-0.467 P<0.01)。表明Ag-NORs定量对估计乳腺癌患者预后有一定价值。

核仁组成区相关嗜银蛋白染色在肿瘤研究中的应用Ⅰ.NHL的Ag-NORs定量研究及与预后的关系

对32例非何杰金氏淋巴瘤石蜡包埋切片进行了Ag-NORs定量研究,探讨了与组织学分型及预后的关系。结果表明恶性程度不同的组织学类型之间以及存活组与死亡组之间的Ag-NORs均数差别均具有高度显著性意义。提示Ag-NORs可望成为NHL组织分型及估计预后的一项新指标。

亚精胺对日本血吸虫成虫培养细胞核仁组织区相关嗜银蛋白的影响

目的以日本血吸虫培养细胞核仁组织区相关嗜银蛋白(Argyrophilicnucleolarorganizerregionassociatedproteins,AgNORs)为评价指标,探讨亚精胺(Spermidine,Spd)对培养细胞的促增殖作用。方法采用联合法将虫龄为24d的日本血吸虫成虫细胞接种于小盖玻片上,培养于常规培养基中。接种后第3天,随机分为实验组和对照组。将实验组细胞用无血清培养基配制的终浓度为75μmol/L的Spd处理48h,对照组细胞则用不含Spd的无血清培养基处理,时间相同;PBS清洗3次后换用常规培养基继续培养。于第7、14、21、28、35天分别对培养细胞进行AgNORs染色。使用HPIAS-2000图像分析系统,计算培养细胞核内AgNORs颗粒数及平均吸光值,并作统计分析。结果经Spd处理,各实验组培养细胞AgNORs着色明显深于对照组;但随着培养时间的延长,实验组与对照组细胞着色均逐渐变浅。各实验组细胞AgNORs颗粒数目与平均吸光值高于对照组,二者比较差异有统计学意义(u7=50.95、43.78;u14=55.23、43.54;u21=36.65、32.25;u28=31.6、32.95;u35=28.86、9.54;P<0.01)。各实验组AgNORs吸光值两两比较,除第7天与第14天之间差异无统计学意义外(q=0.008058,P>0.05),其余差异都有统计学意义(P<0.01)。结论Spd具有促进日本血吸虫培养细胞增殖的能力,每周用Spd处理培养细胞1次,能更大限度地促进血吸虫培养细胞的生长。

T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白在不同人群中表达含量的探讨

目的:探讨T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白(Ag-NORs)在新生儿、正常人和恶性肿瘤患者中免疫功能评价的意义。方法:对培养后的新生儿、恶性肿瘤患者及正常成年人的淋巴细胞进行普通细胞银染色,用KL型肿瘤免疫图像分析仪检测T淋巴细胞核仁银染面积与细胞核面积比值(I.S%)。结果:新生儿的T淋巴细胞Ag-NORs测定值是7.79±0.57%,正常成年人为7.56±0.51%,恶性肿瘤患者为5.15±0.68%。恶性肿瘤患者的T淋巴细胞Ag-NORs较正常人及新生儿均显著降低(均P<0.01),新生儿与正常人相比无显著性差异。结论:恶性肿瘤患者T淋巴细胞的Ag-NORs测定值较低,可能与免疫系统受损有关。

青年与老年人胃癌中PCNA和AgNOR计数表达的对比研究

目的 探讨青年人与老年人胃癌不同临床特点的分子生物学基础。方法 对 6 5例胃癌 (其中青年组 35例 ,老年组 30例 )标本连续切片分别作增殖细胞核抗原 (PCNA)免疫组化染色及核仁组成区相关的嗜银蛋白 (AgNOR)的胶体银染色 ,前者结果进行 χ2 检验 ,后者采用t检验。结果 在非选择人群 ,PCNA的阳性表达率及AgNOR计数均随胃癌分化程度降低而提高 ,AgNOR数目还随浸润深度的增加而增多 (P <0 .0 5 )。在具有相同的组织学分化程度、浸润深度或局部淋巴结转移情况的胃癌中 ,青年组中PCNA的阳性率及AgNOR数目均显著高于老年组 (P <0 .0 5 )。 结论 PCNA及AgNOR在青年人胃癌细胞中的高表达提示青年人胃癌细胞具有更强的增殖活性及浸润转移能力。

老年慢性阻塞性肺疾病不同病情分级对T淋巴细胞核仁区酸性非组蛋白的影响

目的通过检测老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血T淋巴细胞核仁区酸性非组蛋白的含量,探讨老年COPD患者不同病情分级对T淋巴细胞核仁区酸性非组蛋白的影响。方法利用免疫图像分析系统、细胞培养、硝酸银染色等方法,对30例吸烟老年COPD稳定期患者和15例同年龄段吸烟健康体检者外周血T淋巴细胞核仁区酸性非组蛋白进行染色分析,计算淋巴细胞核仁银染面积与核面积的比值(I/S%)。结果 (1)老年COPD重度以上组与轻中度组、健康对照组比较,外周血T淋巴细胞Ag-NORs的含量均明显降低(P<0.05);(2)老年COPD轻中度组与健康对照组比较,外周血T淋巴细胞Ag-NORs的含量无明显变化(P>0.05)。结论随着病情程度的加重,老年COPD患者外周血T淋巴细胞Ag-NORs含量逐渐降低,细胞免疫功能水平下降。

滋养细胞增生与病变恶性程度相关性研究进展

妊娠滋养细胞肿瘤是一组早期即可出现转移的肿瘤,如何及早、准确的预测此类疾病发展预后受到很多学者的关注。目前,增殖标记物在肿瘤预后的预测方面的意义受到越来越多的重视。该文分析了近几年对K i-67、增殖细胞核抗原、核仁组成区相关嗜银蛋白等3种细胞增殖标记物在滋养细胞疾病中的研究成果,综述其在滋养细胞疾病中增殖程度与病变恶性程度的关系。

AgNOR染色在淋巴结病变针吸细胞学定量诊断中的应用

目的 探讨 Ag NOR染色技术在淋巴结病变针吸细胞学涂片染色效果及对淋巴结病变定量诊断的价值。方法 应用胶银染色法 ,对 2 0 8例淋巴结病变针吸细胞学涂片进行 Ag NOR染色 ,油镜下行 Ag NOR颗粒计数和形态、分布观察。结果 Ag NOR颗粒均值在 81例淋巴结转移癌为( 8.84± 3.1 2 ) ;30例非霍奇金病 ( NHL)为 ( 9.42± 2 .78) ;1 1例霍奇金病 ( HL)为 ( 4 .69± 1 .0 8) ;34例慢性淋巴结炎为 ( 1 .32± 0 .2 8) ;2 8例淋巴结结核为 ( 1 .46± 0 .34) ;2 4例增生性淋巴结炎为 ( 2 .2 6± 0 .45 )。良恶性淋巴结病变细胞 Ag NOR颗粒数之间存在高度显著性差异 ( P <0 .0 1 ) ,并且二者之间的 Ag NOR颗粒大小及分布亦呈现明显的不同。结论 Ag NOR染色技术是定量鉴别良恶淋巴结病变 ,尤其是

单纯性甲状腺肿患者血、尿碘及硫氰酸盐的检测研究

对23例正常人及43例单纯性甲状腺肿患者进行血、尿碘及硫氰酸盐检测研究，结果表明：①宁波地区正常居民碘水平接近国家规定标准范围；②单纯性甲状腺肿患者血碘略低于正常组，尿碘及血、尿硫氰酸盐均明显高于正常组（P＜0．05-0．01），尿碘／硫氰酸盐比值明显小正常组；③宁波地区的单纯性甲状腺肿属散发病例，其中20％左右可能系碘摄入不足所致，80％左右不属低碘．尚有其它致病因素。高水平的硫氰酸盐和低比值的尿碘／硫氰酸盐是致病因素之一。

喉鳞状上皮良、恶性肿瘤核仁组成区相关嗜银蛋白的研究

采用胶银染色技术,对70例喉鳞状细胞癌和25例喉乳头状瘤进行核仁组成区相关嗜银蛋白(AgNORs)的定量研究。结果表明,喉鳞状细胞癌的AgNORs计数高于对照组,喉乳头状瘤的AgNORs计数介于二者之间,差异有高度显著性意义(P<0.01)。在喉鳞状细胞癌中,分化较低者AgNORs计数高于分化较高者,声门上癌AgNORs计数高于声门癌,晚期者AgNORs计数高于早期者,有颈淋巴结转移者AgNORs计数高于无转移者,差异均有高度显著性意义(P<0.01)。提示AgNORs技术是喉肿瘤研究中有价值的手段。

硫丹对小鼠子宫内膜细胞的增殖作用

目的 研究硫丹对小鼠子宫内膜细胞的增殖作用。方法 将成年雌性小鼠去势后 ,给予不同剂量的硫丹0 5、1 5、3 0mg (kg·d)连续 5d ,观察子宫内膜细胞有丝分裂指数和嗜银染色颗粒数。结果 给硫丹低、中、高 3个剂量组有丝分裂指数的中位数分别为 3 0、3 5和 4 75 ,均高于阴性对照组 (2 0 ) ,差异有显著性 (P <0 0 1) ,且有明显的剂量 效应关系。同时各组之间的嗜银染色颗粒数差异有显著性 (P <0 0 1) ,阴性对照组、硫丹低、中、高剂量组和阳性对照组的均值分别为 2 12、2 77、3 3 9、3 88、4 44 ,给硫丹的各剂量组都比阴性对照组高 ,并有明确的剂量 效应关系。结论 硫丹能促进子宫内膜细胞DNA的转录和复制 ,加速细胞的分裂和增殖 ,因此 。

核仁组成区嗜银蛋白和肾肿瘤临床关系的研究

目的：探讨核仁组成区嗜银蛋白（ＡｇＮＯＲ）和肾肿瘤的分类、临床分期的关系。方法：用胶体银技术对１１６例肾肿瘤和１１例正常肾组织进行ＡｇＮＯＲ计数并进行分析。结果：ＡｇＮＯＲ计数在肾盂癌、肾细胞癌和Ｗｉｌｍ氏瘤中分别为５．２３±１．４、４．１２±１．２和３．９８±０．９；肾错钩瘤和正常肾组织分别为１．８６±０．９和１．６３±０．７；ＡｇＮＯＲ计数在肾脏良恶性肿瘤之间差异非常显著（Ｐ＜０．０１），肾细胞癌临床Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期ＡｇＮＯＲ数目分别为３．６５±０．３、４．０２±０．５、４．６２±０．３和４．５８±０．４。结论：ＡｇＮＯＲ计数随肾细胞癌的临床分期升高而增加。

核仁组成区嗜银蛋白染色在非霍奇金淋巴瘤骨髓涂片中的价值探讨

目的探讨核仁组成区嗜银蛋白染色在非霍奇金淋巴瘤骨髓涂片中的价值。方法用经钟氏等报道[1]的双层滤纸垫染法对117例NHL骨髓涂片进行染色后检测,并另做17例大致正常骨髓片做对照。结果NHL组、NHL晚期组二者的银染颗粒含量和银染颗粒阳性率均较正常对照组有显著性差异(两组P<0.05);NHL晚期组的银染颗粒含量和银染颗粒阳性率均较NHL早期组有显著性差异(两者P<0.05);而NHL早期组的银染颗粒含量和银染颗粒阳性率均与正常对照组无显著性差异(P均>0.05)。结论AgNOR染色在NHL骨髓涂片的诊断中具有较大的应用价值。

严重急性呼吸综合征患者外周血T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白表达活性的变化

目的:研究严重急性呼吸综合征(SARS)患者外周血T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白(Ag-NORs)表达活性的变化。方法:根据卫生部《传染性非典型肺炎(SARS)诊疗方案》标准,将符合条件的SARS患者100例(其中重型24例、普通型76例),应用KL型肿瘤免疫图像分析仪检测外周血T淋巴细胞Ag-NORs;取31例健康体检者做为对照组,采用相同方法检测。结果:与对照组相比,SARS患者外周血T淋巴细胞百分数及其Ag-NORs表达活性均显著降低(P<0.05),但降低的程度与疾病严重程度无关;不同性别、年龄组SARS患者的外周血T淋巴细胞Ag-NORs表达活性无显著差异。结论:SARS患者体内细胞免疫功能明显减低。Ag-NORs的检测可以客观地反映机体T淋巴细胞的功能,对SARS患者病情观察及预后判断有重要意义。

HgCl2、CdCl2对去卵巢大鼠的雌激素样作用

目的:评价HgCl2、CdCl2的雌激素样作用。方法:将成年雌性SD大鼠48只随机分为8组,去卵巢后,给予低、中、高剂量的HgCl2(0.04mg/kg、0.20mg/kg和1.00mg/kg)和CdCl2(0.08mg/kg、0.40mg/kg和2.00mg/kg),阴性对照给予蒸馏水,阳性对照给予雌二醇,连续3d,观察子宫增重作用、子宫内膜细胞有丝分裂指数和嗜银染色颗粒数。结果:HgCl2和CdCl2高剂量组可诱导去卵巢SD大鼠子宫明显增重,与阴性对照组相比,差异有统计学意义(P均<0.05)。HgCl2低、中、高剂量组和CdCl2中、高剂量组有丝分裂指数均高于阴性对照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。HgCl2和CdCl2高剂量组嗜银染色颗粒数高于阴性对照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论:HgCl2、CdCl2在体内可能有雌激素样作用。

胃癌细胞核仁组成区和DNA含量FCM检测及相互关系的研究

本文对16例胃癌手术切除标本(其中高分化癌4例,中分化癌2例,低分化癌7例,未分化癌3例)进行Ag-NORs计数和细胞核DNA含量的FCM测定,探索这两种指标的相关性以及在胃癌病理诊断中的意义。研究结果发现胃癌细胞的Ag-NORs值随着细胞周期中增殖细胞百分比数的增加而增加,呈显著相关性(r=0.67,P<0.01),但它与胃癌的分化程度及DNA倍体无显著关系(P>0.05)。本文的研究结果提示:Ag-NORs技术同样可反映细胞的增殖状态,可作为一种定量指标。如能把Ag-NORs技术和流式细胞仪技术结合起来,联合应用,可以更精确地反映细胞的增殖情况。至于它们与胃癌预后的关系尚待进一步研究。

氯化汞对大鼠子宫内膜细胞的增殖作用

目的研究氯化汞对去卵巢大鼠子宫内膜细胞的增殖作用。方法将成年雌性大鼠去卵巢后,给予不同剂量的HgCl2(0.04mg/kg、0.20mg/kg和1.00mg/kg)连续3d,观察子宫内膜细胞有丝分裂指数和嗜银染色颗粒数。结果氯化汞低、中、高3个剂量组有丝分裂指数,均高于阴性对照组,差异有显著性(P<0.05),且有明显的剂量-效应关系。同时氯化汞高剂量组嗜银染色颗粒数,与阴性对照组相比,差异有显著性(P<0.05)。结论氯化汞能加速细胞的分裂和增殖,因此,推断它在大鼠体内可能具有雌激素样作用。

90例子宫胎盘绒毛良恶性病变AgNOR的研究

用AgNOR定量法,对90例子宫不同部位(子宫颈、子宫肌壁、子宫内膜)及胎盘绒毛的良恶性病变进行了研究。结果表明,子宫各部及胎盘绒毛良恶性病变之间AgNOR均数比较有显著性差异,P均<0.001。同时提示在刮宫标本,区分侵袭性葡萄胎与葡萄胎是可能的。作者将AgNORs分为4种形态:小圆形、大圆形、粗颗粒形及聚合形。AgNORs在核区内分布形式有:核仁内型和散在型。并指出AgNORs的形态及其分布形式与病变性质有关。

替比夫定治疗前后乙型病毒性肝炎后肝硬化患者T淋巴细胞嗜银蛋白含量变化的研究

目的:通过对替比夫定治疗前后乙型病毒性肝炎后肝硬化患者肝脏功能评分、T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白(AgNORs)的测定,探讨替比夫定治疗后乙型病毒性肝炎后肝硬化患者的肝功能状况及机体免疫功能的改变。方法:对50例乙型病毒性肝炎后肝硬化患者用替比夫定治疗前及治疗后6个月分别检测肝功能、AgNORs,从而比较使用替比夫定治疗前及治疗6个月后患者AgNORs含量以及Child-Push评分的改变。结果:在使用替比夫定治疗6个月后乙型病毒性肝炎后肝硬化患者肝脏Child-Pugh分级计分显著降低(P<0.05),而AgNORs显著升高(P<0.05)。结论:替比夫定可明显抑制乙型肝炎病毒复制,改善乙型病毒性肝炎后肝硬化患者肝功能,缓解病情,患者在使用替比夫定治疗6个月后T淋巴细胞免疫活性得到明显改善。