Argyrophilic nucleolar organizer region in MIB-1 positive cells in non-small cell lung cancer: clinicopathological significance and survival

Objective:To evaluate the relation between argyrophilic nucleolar organizer region(Ag NOR)-associated proteins and clinicopathological parameters and survival in non-small-cell lung cancer(NSCLC).Methods:A total of 207 surgical specimens diagnosed as NSCLC were included in this study.Double-staining procedures were performed using antigen Ki-67(clone MIB-1)and silver nitrate by immunohistochemical and Ag NOR-staining methods.Results:The Ag NOR area in MIB-1-positive cells of NSCLC is related to clinicopathological parameters under the TNM(tumor,node,and metastasis)system.The survival of patients with small Ag NOR area in MIB-1-positive cells is better than that of patients with large Ag NOR area.Molecular,biological(Ag NOR area in MIB-1-positive cells),and clinicopathological(greatest tumor dimension,metastases to regional lymph nodes,histology,and differentiation)parameters are independent prognostic factors of NSCLC.Conclusion:The Ag NOR area in MIB-1-positive cells is related to clinicopathological parameters and survival in NSCLC.

CORRELATIONSHIP BETWEEN CELLULAR DNA AND AgNOR PROTEIN CONTENT IN THE DEVELOPING COURSE OF COLORECTAL ADENOCARCINOMA

Cellular NDA and AgNOR Protein contents were evaluated byautomatic image analysis in tissue sections stained hy combined Feulgen-AgNOR staining method in 9 normal colonic mucosae, 45 colorectal adenomas and 27 adenocarcinomas. The results indicated that during the course that the normal colonical mucosa developed to colorectal adenocarcinoma via adenoma the DNA and AgNOR protein contents increased gradually and there were very significant correlationships between the DNA and the AgNOR protein contents of adenoma group and adenocarcinoma group. However, there were considerahle overlaping in the DNA or AgNOR Protein content and considerahle overlaping cases between adenoma and normal colonic mucosa groups and between adenoma and adenocarcinoma groups. But the overlaping scope in NDA and AgNOR Protein content and the number of overlaping cases were reduced significantly by assessing the correlationship between the DNA and AgNOR protein content. Therefore, it is much more reliable to distinguish colorectal adenomas from adnocarcinomas by using the correlationship between the cellular DNA and the AgNOR Protein contents in the same specimens.

外周血T淋巴细胞AgNOR检测在食管癌诊断中的应用

背景与目的:评估肿瘤组织分裂间期的AgNOR定量分布已被广泛应用于肿瘤的诊断、疗效判断和预后评估。肿瘤免疫学证实肿瘤可诱发免疫抑制,测定T淋巴细胞核仁区的AgNOR活性表达可以探知T淋巴细胞的免疫活性状态。监测外周血T淋巴细胞AgNOR活性表达在食管癌方面的研究较少。本研究旨在探讨外周血T淋巴细胞AgNOR的活性检测在食管癌患者诊断中的应用价值。方法:检测75例健康人、276例食管癌患者的外周血,利用KL型肿瘤免疫图像分析系统检测AgNOR含量(AgNOR面积与细胞面积的比值,即I/S%);同时用微粒子酶免疫分析技术、双抗体夹心法与化学比色法分别检测癌胚抗原(CEA)、鳞状上皮细胞癌相关抗原(SCC)、恶性肿瘤相关物质群(TSGF)的表达。结果:(1)食管癌患者外周血T淋巴细胞AgNOR的活性表达(5.64±0.89)明显低于健康人(7.07±0.81)(P=0.000),灵敏度0.674,特异度0.920,Youden指数0.59,Roc曲线下面积为0.886。(2)食管癌患者AgNOR阳性率(67.4%)明显高于CEA(12.86%)、SCC(15.04%)、TSGF(36.49%),差异具有显著性意义(P<0.001);AgNOR与CEA、SCC、TSGF间的相关性无统计学意义(P>0.05)。(3)食管癌患者AgNOR阳性率明显高于CEA+SCC+TSGF联合检测的阳性率(54.4%),差异具有显著性意义(P=0.018),而与AgNOR+CEA、AgNOR+SCC。

T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白(Ag-NORs)检测对恶性肿瘤临床意义的探讨

目的 探讨T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白 (Ag NORs)在恶性肿瘤诊断及疗效观察中的临床价值。方法 制作银染T淋巴细胞涂片 ,显微镜下选取转化良好的T淋巴细胞 ,利用KL型肿瘤免疫图像分析系统检测其Ag NORs含量 (Ag NORs面积与细胞核面积的比值 ,即I /S % )。结果 检测 6 6例正常人、117例恶性肿瘤患者和 2 5例良性肿瘤患者 ,发现 :(1)正常人的T淋巴细胞Ag NORs含量与良性肿瘤患者和恶性肿瘤患者均有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,其均值分别为 :7.0 9± 0 .79、6 .31± 0 .75、5 .4 4± 1.13。 (2 )正常人和良性肿瘤患者的T淋巴细胞AgNORs含量与鼻咽癌、食管癌、乳腺癌、肝癌患者之间有显著性差异(P <0 .0 5 )。鼻咽癌、食管癌、乳腺癌、肝癌患者T淋巴细胞AgNORs检测的阳性率分别为 6 2 .86 %、71.4 3%、6 6 .6 7%、70 %。 (3)观察 6 7例鼻咽癌患者放疗过程的不同阶段 ,发现放疗中和放疗结束患者的T淋巴细胞Ag NORs均值分别为 4 .38± 1.16和 4 .16± 1.2 7,较放疗前 (均值 5 .5 5± 1.2 0 )低 ,但放疗一年后有所上升 (均值 5 .75± 0 .4 8)。 (4)观察 2 8例食管癌患者的不同治疗阶段 (术前、术后七天和术后一月 ) ,发现其T淋巴细胞AgNORs值没有显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,分别为 :5 .2 3± 1.16、5 .11±

肺结核患者外周血T淋巴细胞亚群与核仁组成区嗜银蛋白的关系及临床应用的研究

目的 探讨肺结核患者T淋巴细胞亚群与核仁组成区嗜银蛋白 (AgNORs)的关系 ,并动态观察临床应用的价值。方法 采用碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶 (APAAP)法及AgNORs测定方法 ,对 98例肺结核患者 ,3 9例肺炎患者和 41名正常人分别测定外周血T淋巴细胞亚群和AgNORs,并对 71例初治肺结核患者进行了动态观察。结果 肺结核患者的CD+ 3 、CD+ 4 、CD+ 4 /CD+ 8比值均明显降低 ,CD+ 8升高 ;AgNORs的I.S %值明显降低 ,与健康人及肺炎患者相比有显著性差异 (P <0 .0 1 )。随着肺结核患者病情的好转此两项指标逐渐上升。结论 肺结核患者T淋巴细胞亚群与AgNORs检测结果一致 ,可动态地反映结核病人的免疫状态 ,并与病情发展呈良好的相关性 。

亚精胺对日本血吸虫成虫培养细胞核仁组织区相关嗜银蛋白的影响

目的以日本血吸虫培养细胞核仁组织区相关嗜银蛋白(Argyrophilicnucleolarorganizerregionassociatedproteins,AgNORs)为评价指标,探讨亚精胺(Spermidine,Spd)对培养细胞的促增殖作用。方法采用联合法将虫龄为24d的日本血吸虫成虫细胞接种于小盖玻片上,培养于常规培养基中。接种后第3天,随机分为实验组和对照组。将实验组细胞用无血清培养基配制的终浓度为75μmol/L的Spd处理48h,对照组细胞则用不含Spd的无血清培养基处理,时间相同;PBS清洗3次后换用常规培养基继续培养。于第7、14、21、28、35天分别对培养细胞进行AgNORs染色。使用HPIAS-2000图像分析系统,计算培养细胞核内AgNORs颗粒数及平均吸光值,并作统计分析。结果经Spd处理,各实验组培养细胞AgNORs着色明显深于对照组;但随着培养时间的延长,实验组与对照组细胞着色均逐渐变浅。各实验组细胞AgNORs颗粒数目与平均吸光值高于对照组,二者比较差异有统计学意义(u7=50.95、43.78;u14=55.23、43.54;u21=36.65、32.25;u28=31.6、32.95;u35=28.86、9.54;P<0.01)。各实验组AgNORs吸光值两两比较,除第7天与第14天之间差异无统计学意义外(q=0.008058,P>0.05),其余差异都有统计学意义(P<0.01)。结论Spd具有促进日本血吸虫培养细胞增殖的能力,每周用Spd处理培养细胞1次,能更大限度地促进血吸虫培养细胞的生长。

神经上皮组织起源的脑肿瘤增殖活性与表皮生长因子受体基因表达的相关性研究

目的 探讨表皮生长因子受体 (EGFR)基因表达与神经上皮组织起源的脑肿瘤增殖活性的关系。 方法 利用EGFR和Ki-67单抗免疫组化染色及核仁组成区嗜银蛋白 (AgNOR)染色对8例正常脑组织、50例神经上皮组织起源的脑肿瘤和 4个恶性脑肿瘤体外细胞系进行检测。 结果 神经上皮组织起源的脑肿瘤中EGFR蛋白表达阳性率为 54% ,WHO分级与EGFR蛋白表达呈正相关 (r =0 5597,P <0 0 1 )。Ki-67标记指数 (Ki-67LI)及AgNOR平均数均与神经上皮组织起源的脑肿瘤的分级有明显关系 (r分别为 0 8971和 0 880 1 ,P <0 0 1 ) ,且Ki-67LI与Ag NOR平均数有显著相关性 (r=0 9896,P <0 0 1 )。EGFR蛋白表达阳性的肿瘤组织及细胞系中高Ki-67LI及高AgNOR平均数者占 64 5% ,而无EGFR蛋白表达的肿瘤组织和正常脑组织中高Ki-67LI及高AgNOR平均数者仅为 2 2 6% ,二者间差别有统计学意义 (P <0 0 1 )。

卵巢癌患者外周血T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白的研究

目的 :研究卵巢癌患者外周血T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白 (AgNORs)与卵巢癌的临床特点及生物学行为的关系。方法 :以卵巢癌患者 36例为研究组 ;以良性卵巢肿瘤患者 17例及健康妇女 2 0例为对照组。利用KL型肿瘤免疫图像分析系统计数T淋巴细胞核仁银染面积与细胞核面积比值 (integratedsquare ,IS)。结果 :卵巢浆液性腺癌、子宫内膜样腺癌、粘液性腺癌及未分化腺癌的IS均值分别为 9.31± 1.96 %、7.4 1± 0 .39%、7.98± 2 .95 %、6 .78± 0 .70 % ;高分化、中分化、低分化卵巢癌患者IS均值分别为 9.6 6±1.85 %、8.37± 1.95 %、8.16± 2 .0 5 % ;Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期及Ⅳ期卵巢癌患者的IS均值分别为 8.80± 1.35 %、10 .6 5± 0 .96 %、9.12± 1.6 3%、6 .0 1± 0 .4 5 % ;良性卵巢肿瘤及健康妇女的IS均值分别为 9.0 9± 1.83%、9.6 3± 1.5 2 %。不同组织学类型、不同分化级别卵巢癌患者其外周血T淋巴细胞AgNORs表达差异无显著性 (P >0 .0 5 )。Ⅳ期卵巢癌与Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期卵巢癌及对照组患者的外周血T淋巴细胞AgNORs表达有高度显著性差异 (P <0 .0 1)。结论 :Ⅳ期卵巢癌患者较Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期卵巢癌及对照组患者外周血T淋巴细胞rD NA转录活性及细胞免疫功能明显降低 。

T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白在不同人群中表达含量的探讨

目的:探讨T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白(Ag-NORs)在新生儿、正常人和恶性肿瘤患者中免疫功能评价的意义。方法:对培养后的新生儿、恶性肿瘤患者及正常成年人的淋巴细胞进行普通细胞银染色,用KL型肿瘤免疫图像分析仪检测T淋巴细胞核仁银染面积与细胞核面积比值(I.S%)。结果:新生儿的T淋巴细胞Ag-NORs测定值是7.79±0.57%,正常成年人为7.56±0.51%,恶性肿瘤患者为5.15±0.68%。恶性肿瘤患者的T淋巴细胞Ag-NORs较正常人及新生儿均显著降低(均P<0.01),新生儿与正常人相比无显著性差异。结论:恶性肿瘤患者T淋巴细胞的Ag-NORs测定值较低,可能与免疫系统受损有关。

急性白血病儿童缓解前后血T淋巴细胞嗜银蛋白检测的意义

目的通过对急性白血病(AL)儿童T淋巴细胞(T细胞)增殖活性的rDNA和rRNA的核仁组成区嗜银蛋白(Ag-NORs)测定,以了解患儿T细胞功能状态。方法分别对42例初发AL儿童化疗前与临床完全缓解后及30例正常儿童(对照组),用图像分析法测定血T细胞Ag-NORs(银染区)/细胞核面积(I.S%)。结果AL化疗前I.S%为5.06%±1.36%,与对照组7.51%±1.06%比较有显著差异(t=8.238 P<0.001),但在完全缓解后I.S%升至7.17%±0.98%,与化疗前比较(t=7.073 P<0.001);与对照组比较无差异(t=1.403 P>0.05)。结论在初发未化疗AL儿童中,Ag-NORs水平降低,提示患儿有T细胞免疫功能下降。

肾移植受者T淋巴细胞核仁区酸性非组蛋白表达活性研究

目的 :探讨T淋巴细胞核仁区酸性非组蛋白表达活性 (Ag -NORs)对肾移植受者术前及术后用药病情监测的应用价值。方法 :应用普通细胞银染技术对 32例肾移植患者术前及术后使用免疫抑制剂 1,2 ,3周外周血T淋巴细胞染色 ,通过计算机显微图像分析技术 ,计算硝酸银染色酸性非组蛋白 (Ag -NORs)面积与核面积的比值 (I·S % )。结果 :肾移植患者术前Ag -NORs的I·S %为 (6 .31± 0 .86 ) ;术后使用免疫抑制剂 1,2 ,3周Ag -NORs的I·S %分别为 (4.72± 0 .93) ,(4.2 8± 1.0 5 ) ,(4.6 6± 1.2 1)。肾移植术后各期与术前Ag -NORs的I·S %差异有显著性意义 (P <0 .0 1) ;术后各期之间Ag -NORs的I·S %差异无显著性意义 (P >0 .0 5 )。结论 :T淋巴细胞核仁酸性非组蛋白表达活性在肾移植及其术后用药病情监测中具有重要的意义。

再生障碍性贫血患者骨髓细胞酶学研究

用图像分析技术，对30例再生障碍性贫血（AA）患者治疗前后骨髓细胞内细胞色素氧化酶（CCO）、琥珀酸脱氢酶（SDH）、中性粒细胞碱性磷酸酶（NAP）、脱氧核糖核酸（DNA）、核仁组成区嗜银蛋白（AgNORS）进行定量测试，并与正常对照作了比较分析。结果：CCO、SDH、DNA、AgNORs治疗前含量明显低于正常对照；NAP含量显著增高，差异非常显著（P＜0．01）。病情缓解或痊愈后，其含量分别接近正常人（P＞0．05）。提示生物氧化酶、DNA代谢紊乱，AgNORs、NAP异常，在AA发病中有着重要作用。

青年与老年人胃癌中PCNA和AgNOR计数表达的对比研究

目的 探讨青年人与老年人胃癌不同临床特点的分子生物学基础。方法 对 6 5例胃癌 (其中青年组 35例 ,老年组 30例 )标本连续切片分别作增殖细胞核抗原 (PCNA)免疫组化染色及核仁组成区相关的嗜银蛋白 (AgNOR)的胶体银染色 ,前者结果进行 χ2 检验 ,后者采用t检验。结果 在非选择人群 ,PCNA的阳性表达率及AgNOR计数均随胃癌分化程度降低而提高 ,AgNOR数目还随浸润深度的增加而增多 (P <0 .0 5 )。在具有相同的组织学分化程度、浸润深度或局部淋巴结转移情况的胃癌中 ,青年组中PCNA的阳性率及AgNOR数目均显著高于老年组 (P <0 .0 5 )。 结论 PCNA及AgNOR在青年人胃癌细胞中的高表达提示青年人胃癌细胞具有更强的增殖活性及浸润转移能力。

肺结核病人T淋巴细胞核仁区酸性非组蛋白表达活性的研究

目的 探讨结核病人T淋巴细胞核仁区酸性非组蛋白 (Ag NORs)的数量 ,间接反映T淋巴细胞的功能 ,及其在结核病诊断及发病中的意义。方法 使用北京开隆公司提供的KL型免疫图像分析系统对 4 1例正常人 ,77例肺结核病人和 32例肿瘤病人的T淋巴细胞核仁区酸性非组蛋白表达活性进行对比 ,以核仁染色区面积与细胞核面积之比 (I.S % )定量反映Ag NORs的多少。结果 正常人I .S %为 (7.2 0± 0 .95 ) % ,肺结核病人为 (5 .5 9± 1.4 7) % ;肿瘤病人为 (5 .0 4± 1.5 2 ) % ,二者与正常人相比有显著性差异 (P <0 .0 0 1)。结核病人略高于肿瘤病人 ,他们之间无显著性差异。结论 结核病人酸性非组蛋白表达检测 ,可用于对结核病人免疫功能的检测 ,对估计病人的预后有临床指导意义。

女性激素和AgNOR在胆囊癌中表达的研究

目的 :研究雌激素受体 (ER)、孕激素受体 (PR)在 40例胆囊癌中表达和AgNOR在胆囊癌中含量及形态变化的关系。方法 :用免疫组化ABC法和AgNOR技术对胆囊正常上皮和癌上皮进行实验测定。结果 :胆囊正常上皮ER、PR为阴性 ,癌上皮ER2 6例 (6 5 %)阳性 ,PR2 0例 (5 0 %)阳性 ,核仁组成区相关蛋白 (AgNOR)表示颗粒类型 ,正常上皮为单一型 ,癌上皮主要表现为弥散型 ,其次为混合型。结论 :胆囊癌的发生发展对女性激素有一定的依赖性 ,AgNOR计数及形态分类对胆囊癌的生物学行为、预后、病理诊断及治疗均有一定的参考价值。

急性非淋巴细胞白血病细胞核仁组织区相关嗜银蛋白的研究

目的研究核仁形成区相关嗜银蛋白(Ag-NORs)对评估急性非淋巴细胞白血病(AML)细胞增殖分化水平的价值。方法用嗜银染色方法检测AML细胞的嗜银颗粒数目和形态,观察Ag-NORs形态与细胞形态学之间的关系,Ag-NORs分数与染色体、荧光分子原位杂交(FISH)检查以及AML预后的关系。结果不同Ag-NORs形状特征的细胞比例与细胞形态学的原幼稚细胞比例有显著相关性。Ag-NORs分数比较,染色体和FISH检查异常组高于正常组;治疗前未缓解组高于缓解组;持续缓解1年以上组高于1年内复发组;生存期1年以上组高于1年内死亡组(均P<0.01)。结论用嗜银染色方法检测AML细胞Ag-NORs分数和形态可观察白血病细胞的增殖状况,可作为白血病细胞动力学研究的一项指标,由于操作简便和易于普及,可为白血病的临床诊治提供快捷有效的实验依据。

鼻咽癌及癌旁上皮细胞的AgNORs定量分析及其生物学意义

目的 通过鼻咽癌及癌旁上皮的细胞核仁组成区蛋白 (NORs)图像定量分析 ,评价其反映细胞群体增生能力及分化程度等生物学意义。方法 对 70例鼻咽癌石蜡切片进行银染 (AgNORs) ,应用CAS2 0 0图像分析仪分别测定 2 9例癌旁正常腺上皮、 19例增生 /异型增生柱状上皮、 10例增生 /异型增生鳞状上皮、 5 4例分化性非角化性癌和 16例未分化癌的细胞群体AgNORs参数值并作比较分析 ;结果 每核AgNOR计数、每核AgNOR面积和平均AgNOR面积 /粒从正常腺上皮至增生 /异型增生柱状上皮至分化性非角化性癌或未分化癌呈现显著增加 ,平均核面积、每核AgNOR面积和平均AgNOR面积 /粒从正常腺上皮至增生 /异型增生鳞状上皮至未分化癌呈现显著增加 ,差异均有显著性 ,但增生 /异型增生鳞状上皮与分化性非角化性癌的AgNOR数值差异没有显著差异 ;与分化性非角化性癌比较 ,未分化癌的平均核面积、每核AgNOR面积和平均AgNOR面积 /粒显著增加。结论 AgNORs形态定量分析反映了鼻咽癌及癌旁不同类型鼻咽上皮的细胞增生活性和组织细胞分化程度 ,但不能反映细胞是否恶性转化 ;不同组织类型鼻咽癌细胞存在增殖能力的差异 ,其增生差异程度可能是影响病人对放射线治疗敏感性及其预后的重要因素之一。

T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白含量的对比

目的 探讨核仁形成区嗜银蛋白 (Ag -NORs)含量检测对肺癌和肺结核患者的诊断及鉴别诊断的意义。方法 采用KL型免疫分析系统检测正常人、肺癌和肺结核患者外周血T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白含量 ,用I .S %表示。以反映T淋巴细胞核内rDNA的转录活性。结果 肺癌患者和肺结核患者的I.S值均明显低于正常人 (P<0 0 1) ;肺癌患者的I .S %值显著低于肺结核患者 (P <0 0 1)。结论 Ag -NORs检测对于鉴别正常人、肺癌。

维甲酸对实验性大肠癌的逆转治疗作用

目的;观察维甲酸(RA)对实验性大肠癌的逆转治疗作用。方法:应用维甲酸对大鼠大肠癌的诱发过程进行干预治疗,观察癌变率及增殖细胞核抗原(PCNA)和核仁组成区嗜银蛋白(AgNOR)的表达。结果:维甲酸治疗组(Ⅱ组)大肠癌的发生率显著低于未加维甲酸治疗的对照组(Ⅰ组)。在诱癌的中晚期PCNA指数及AgNOR数亦显著低于Ⅰ组(P<0.01)。Ⅰ、Ⅱ组的PCNA指数及AgNOR数显著高于未用诱癌剂的Ⅲ、Ⅳ组(P<0.01)。组内对比结果显示,Ⅰ组PCNA指数及AgNOR数有随着诱癌时间延长而增加的趋势,差异有显著性(P<0.05),而Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组内比较差异无显著性(P>0.05)。结论:维甲酸可完全或部分阻逆实验性大肠癌的癌变过程,降低其发生率,为临床应用维甲酸防治大肠癌提供了理论资料。

临床肿瘤细胞学研究的历史回顾与展望

中国临床肿瘤细胞学(Chinaclinicaloncocytology)工作起始于20世纪50年代初,历经了半个多世纪艰难曲折的发展。在各种新技术、新方法的推动下出现了突飞猛进的局面。巴氏涂片的临床应用也始于当时。由于全国开展了宫颈癌的普查,宫颈癌的发病率和死亡率都有明显的下降。在各种宫颈癌筛查试验中,液基细胞学检查的诊断价值最高。细针穿刺细胞学的应用,目前已遍及人体各个脏器和部位,根据数万例的观察,尚未发现肿瘤沿针道扩散的证据。过去30年间,我国进行食管拉网细胞学检查36万人次,检出食管上皮细胞重度增生近万例,食管癌和贲门癌27000余例,早期癌2800多例,食管拉网法发现无症状的早期食管癌占食管癌的80%以上,食管拉网法的阳性准确率高达98.5%。核仁组成区嗜银染色的临床应用十分广泛,我国发表的有关这方面的研究论文已超过500篇,内容包括常见的各种肿瘤,如:胃、肺、肝、大肠、乳腺等各种恶性肿瘤,在良恶性肿瘤的鉴别诊断中以恶性淋巴瘤和淋巴结良性疾患的鉴别最有价值。对临床肿瘤细胞学工作的今后发展,本文提出了四点建议。