广防己挥发油的GC-MS指纹图谱研究

防己药材主要分粉防己和木防己两类,木防己包括广防己和汉中防己.广防己为马兜铃科植物广防己Aristolochia fangchi Y.C.WuexL.D.Chou.et S.M.Hwang的干燥根[1],习称"木防己"、"水防己",主产于广东、广西,具有祛风止痛、清热利水之功效[2].……

广防己的肾毒性及代谢组学研究

目的:采用代谢组学方法研究大鼠予广防己灌胃后尿液代谢产物的改变情况。方法:雄性SD大鼠64只随机分为广防己组和正常对照组,每组32只。广防己组大鼠予广防己8.1g/(kg.d)灌胃,正常对照组灌服等体积蒸馏水,连续灌胃4周。在灌胃前,灌胃2周、4周及停药2周后收集大鼠24h尿液,利用核磁共振(nuclear magnetic resonance,NMR)技术测定大鼠尿液代谢产物1HNMR谱,进行模式识别分析;取血检测血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)和血清肌酐(serum creatinine,SCr)含量;取肾脏组织行病理学检查。结果:与正常对照组比较,给药2周时广防己组大鼠血BUN含量明显升高(P<0.05);肾组织出现肾小管细胞肿胀,肾小球球囊结构破坏,肾间质炎性细胞浸润。给药4周时,BUN和SCr含量显著升高(P<0.05),肾组织病理改变加重。停药恢复2周后,广防己组BUN含量仍较正常对照组明显升高(P<0.05),且病理改变与给药4周时无明显差异。大鼠尿样代谢谱经主成分分析提示,广防己组与正常对照组在各时间点代谢物图谱均有差异,整个给药期间,广防己组柠檬酸含量持续下降,牛磺酸含量持续上升。在给药2周时,伴马尿酸盐含量上升;给药4周时伴马尿酸盐、2-酮戊二酸含量下降,氧化三甲胺和肌酐/肌酸含量上升;停药恢复2周后肌酐/肌酸和2-酮戊二酸含量下降,马尿酸盐和氧化三甲胺含量上升。结论:10倍药典剂量广防己给药2周可造成肾功能损害,随给药时间延长,损伤加重,停药后有一定恢复。广防己可能还具有一定的肝脏毒性作用。

广防己配伍黄芪肾毒性的代谢组学研究

[目的]利用代谢组学技术研究大鼠口服广防己及其配伍黄芪水煎液后尿液代谢图谱的变化,探讨黄芪配伍广防己对肾脏的减毒作用。[方法]雄性wistar鼠24只随机分为正常对照组、广防己组、广芪组,每组8只。广防己组按8.1g/kg,广芪组按9.1g/kg灌胃给药,正常对照组灌服等体积蒸馏水。连续给药4w后,收集大鼠24h尿液,测定尿液1H-NMR谱;取血做BUN、SCr检测;取肾脏行组织病理学检查。[结果]给药4w时,广防己组BUN、SCr显著升高(P<0.01),肾组织呈现明显的病理改变;广芪组SCr水平较广防己组明显降低(P<0.05),肾组织病变范围及程度较广防己组轻。尿代谢图谱经主成分分析表明,广防己组尿中柠檬酸、2-酮戊二酸、马尿酸盐、葡萄糖含量降低;TMAO、肌酸.肌酐含量升高。广芪组上述代谢物的变化呈不同程度地减小。[结论]广防己给药4w可造成肾功能的明显损害,配伍黄芪有一定的对抗其损伤的作用。

生地对广防己减毒作用最佳配伍比例的研究

目的通过测定生地对广防己中马兜铃酸A含量的影响,初步研究生地对广防己减毒作用的最佳配伍比例。方法广防己与生地配伍以95%的乙醇超声提取后,用反相高效液相色谱法测定马兜铃酸A的含量,并观察含量的变化情况。结果加入不同配比的生地后,广防己中马兜铃酸A的含量均降低,其中以广防己∶生地=2∶1的比例最为明显。结论生地可降低广防己中马兜铃酸A的含量,具有减毒作用,以广防己∶生地=2∶1为最佳配伍比例。

广防己致大鼠慢性肾小管-间质损伤的实验研究Ⅰ

目的: 观察广防己醇提取物(RAFE)急性以及不同剂量的RAFE对肾脏慢性毒性。方法:采用常规的急性毒性实验方法和用不同剂量的RAFE(2 5 . 0 ,12 .0 0 ,2 0 0. 0mg·kg-1·d-1)以及马兜铃总酸(10. 0mg·kg-1·d-1)给大鼠间断灌胃13周,分别于给药第4 ,8,13周留取血、尿和肾组织标本,检测相关肾功能和组织学变化。结果:RAFE的LD50 为36. 8g·kg-1,LD50 95 %可信限为38 .8～2 .8 .9g·kg-1;不同剂量的RAFE作用早期,大鼠肾功能改变为氮质血症、大量蛋白尿以及尿NAG酶升高。肾脏组织形态学:中、大剂量和总酸组给药早期主要表现以皮髓质交界为主的急性肾小管坏死,而后可见部分动物肾间质纤维化。结论:NAG可作为大鼠早期肾功能损伤的观测指标之一;RAFE中、大剂量间断灌胃13周均可导致大鼠肾小管功能损害。

中药广防己与粉防己总提取物利尿效应及肾毒性比较研究

目的在药效剂量下,观察中药广防己总提取物利尿效应及其肾脏毒性出现程度,并与粉防己总提取物进行比较。方法采用大鼠代谢笼法,观察广防己和粉防己对正常大鼠尿量和尿液电解质的影响以及与肾功能相关指标的变化,比较两者利尿效应及产生肾毒性情况。结果广防己、粉防己各组在给药第3、5天广防己高、中剂量组在0-2 h时间段及24 h总尿量显著增加,与对照组比较差异有显著性（P〈0.05,P〈0.01）;广防己、粉防己各剂量组大鼠尿液中Na^＋、K^＋、Cl^-浓度及尿渗量（Uosm）与对照组比较未出现明显差异;广防己各剂量组尿素氮（BUN）均显著升高,中、低剂量组尿液肌酐（CR）升高,高剂量、中剂量组均能增加尿液中β2-微球蛋白的表达（P〈0.05）。结论广防己各剂量组单位时间段尿量及总尿量均略高于等剂量粉防己各组,但无统计学意义;相关指标显示广防己在药效剂量范围内就具有一定的肾毒性,且其肾毒性主要与近曲小管病变有关;粉防己在等剂量下未见明显肾脏毒性表现。

广防己肾毒性及配伍解毒实验研究

目的:观察广防己水煎液的慢性肾毒性及其分别与大黄、川芎、桂枝、茯苓、黄芪等中药配伍后肾毒性的改善情况。方法:通过测定血肌酐(Scr)、尿β2-微球蛋白(β2-MG)、尿碱性磷酸酶(AKP)、尿溶菌酶(Lys)的含量,观察肾脏病理形态变化及肾脏表皮生长因子(EGF)、转化生长因子β1(TGF-β1)的蛋白表达,探讨广防己慢性肾毒性及不同配伍药物对其的拮抗作用。结果:与空白组对照,大剂量广防己组尿AKP明显升高(P<0.05);与大剂量广防己组对照,配伍桂枝组、黄芪组尿AKP明显降低(P<0.05)。肾病理检查发现大剂量组肾小管上皮细胞水肿。各组肾脏EGF蛋白的表达基本都是在肾小管呈弱阳性。大剂量组和配伍川芎组个别标本远曲小管TGF-β1蛋白的表达呈强阳性。结论:广防己按药典规定量长期服用未见肾损害,大剂量则对肾小管有轻度损伤;各配伍药物均可减轻其副作用,以桂枝、黄芪最为明显。

广防己慢性肾脏毒性及前列腺素系统异常在其中的作用

目的 :了解长期应用广防己是否可引起慢性肾脏损害及其是否与前列腺素系统异常有关。方法 :实验组正常大鼠每天给 10g/kg广防己灌胃 ,对照组给等量自来水 ,4周后观察肾脏病理、血肌酐 (Scr)和尿素氮(BUN)、尿蛋白定量 ,并测定尿、血浆及肾组织 6-keto -PGF1α和TXB2 含量。结果 :实验组大鼠出现蛋白尿、Scr和BUN升高以及肾小管细胞变性、肾间质纤维化等异常 ,其尿、血浆和肾组织 6-keto -PGF1α/TXB2 均显著下降。结论 :较大剂量和较长时间应用广防己可致肾脏损害 。

广防己提取物致大鼠慢性肾间质纤维化的机制研究

目的:探讨广防己提取物(RAFE)所致的大鼠慢性肾间质纤维化的作用机制。方法:用广防己提取物(200 mg.kg-1.d-1)和马兜铃酸(AA,10.0 mg.kg-1.d-1)给予大鼠间断灌胃22周,造成大鼠慢性间质纤维化模型,通过免疫组化方法观察肾小管上皮细胞转分化标志性蛋白角蛋白(CK)、平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和波形蛋白(V im entin)以及致纤维化因子-转化生长因子(TGF-β1)在大鼠肾小管间质的表达。结果:经图像分析,RAFE和AA组肾小管上皮细胞CK较对照组表达减弱,而α-SMA在肾小管上皮细胞及肾间质细胞呈弱阳性表达、V im entin表达较对照组明显增多;同时RAFE和AA组大鼠肾小管TGF-β1表达较对照组明显增多,各项指标统计学均有显著性差异。结论:RAFE参与了肾小管上皮细胞转分化,促进了大鼠慢性肾小管上皮纤维化的发生,其中TGF-β1对肾小管上皮细胞转分化起到重要作用。RAFE所致大鼠慢性肾小管上皮细胞转分化机制与AA作用相似。

马兜铃酸所致中草药肾病的医学和药学进展及其引发的思索

通过对引起西方社会广泛关注的中草药肾病的病理学研究、分子作用机制、植物学和生药学研究各方面文献的归纳总结 ,分析了马兜铃酸所致中草药肾病的临床病理 ,深入地探讨了西方社会误用含马兜铃酸的中药材而造成的肾病的原因。并进一步指出了应如何解决当前发生的此类现象以及我国中医药事业发展所面临的几个问题。

黄连配伍降低马兜铃酸A含量的研究

目的通过检测关木通、广防己不同药物配伍组中马兜铃酸A的含量,探寻降低肾毒性的最佳配伍组。方法 (1)色谱柱为symmetry ODS(C18,4.6mm×250mm,5μm);流速:1mL/min;温度:室温;检测波长:250nm;流动相:乙腈-(水+冰醋酸)为58∶42(v/v)。(2)色谱柱为Diamon C18(250mm×4.6mm 5μm);柱温:30℃;流速:1.0mL/min;检测波长:316nm;流动相:乙腈-(醋酸-三乙胺)为45∶55(v/v)。结果 (1)与关木通组比较,木通茯苓组、导赤散+当归组、导赤散组、木通栀子组、木通黄连组和导赤散+黄连组的马兜铃酸A的含量分别为:0.1706、0.1402、0.1219、0.1195、0.0778、0.0442和0.0265mg/L。(2)与广防己组比较,广防己生晒参组、广防己肉桂组、广防己茯苓组、广防己生晒参肉桂茯苓组、广防己黄连组和广防己生晒参肉桂茯苓黄连组的马兜铃酸A的含量分别为:1.6830、0.4960、0.3930、0.3700、0.2930、0.1760和0.0520mg/L。结论配伍黄连后,马兜铃酸A的含量能显著降低,黄连与关木通、黄连与广防己是减毒的最适配伍。

论马兜铃酸与含马兜铃酸的中药

论述含马兜铃酸中药与西药马兜铃酸,以及单味含马兜铃酸中药与其复方的关系,建议对含马兜铃酸中药进行多学科综合基础研究,提出含马兜铃酸中药的不良反应监测、质量控制途径与方法,争取在国际范围内逐步用AAN来取代CHN。

粉防己及其替代广防己的安全性质疑

国家食品药品监督管理局决定,以粉防己替代广防己,但有三点值得注意:1)粉防己中硝基菲类物质的分布特征;2)马兜铃酸Ⅰ以外的其他马兜铃酸类及其衍生物的毒性特性;3)粉防己急性毒性大而快,是否与粉防己与硝基菲类物质叠加的毒性有关。为科学评价粉防己及其替代广防己的安全性提供实验依据。

广防己提取物在大鼠体内的毒代动力学及组织分布研究

目的:建立检测广防己提取物中的马兜铃酸-I(AA-I)和马兜铃内酰胺-I(AL-I)的HPLC方法,观察毒性剂量下广防己提取物中AA-I及其代谢物AL-I在大鼠体内的变化规律。方法:广防己提取物单次灌胃125、62.5、12.5mg/kg,按规定时间采集大鼠血浆、胆汁、尿、粪便及组织样品,HPLC法测定样品中AA-I和AL-I的浓度。同时监测大鼠肝、肾功能及肝、肾的组织形态学变化。结果:毒性剂量下的广防己提取物的代谢符合非线性代谢动力学特征,属血管外给药二室开放模型。大、中剂量组的主要代谢参数如下:t1/2α分别为1.03h、0.45h,t1/2β分别为6.10h、6.54h,CL分别为3.02、1.41m l/m in.kg,AUC分别为33.10、35.22 m in/μgom l,Tpeak分别为0.62、1.35h,V/F分别为16.09、11.26。AA-I和AL-I在大鼠体内特异分布并蓄积。广防己提取物对大鼠肾脏的损害呈剂量依赖性。结论:毒性剂量下的广防己提取物在大鼠体内的代谢符合非线性代谢动力学特征,大鼠肾损害的程度与肾脏中AL-I浓度的相关性较好。

广防己及其混伪品的薄层色谱鉴别

采用薄层色谱法对广防己及其混伪品进行定性鉴别。方法简便 ,结果明显。

粉防己与广防己的鉴别及临床应用研究

粉防己与广防己因药名、功效较为相似,常混淆使用。本文在总结近几年文献资料的基础上,从基源、原植物性状、药材性状、显微特征、饮片特征、化学成分等方面,比较两者的相同点与不同点,并对其临床应用进行总结,为澄清药源,保证用药安全提供依据。

广防己致大鼠慢性肾小管-间质损伤的实验研究Ⅱ

目的:接前报继续观察广防己提取物诱导大鼠慢性肾损害作用,进一步了解不同剂量的广防己提取物(RAFE)可否引起慢性肾小管-间质损伤。方法:分别用广防己醇提取物25.0,120.0,200.0 mg.kg-1.d-1和马兜铃总酸10.0 mg.kg-1.d-1给大鼠间断(连续2周,停药1周)灌胃给药22周后,停药4周;分别于给药第17,22,26周留取血、尿和肾组织标本,检测相关肾功能指标;并取肾脏进行形态组织学观察,于给药第17,22,26周对肾组织进行Masson染色,并与马兜铃总酸进行比较。结果:RAFE作用肾组织形态学病变:小、中、大剂量和总酸组主要表现为肾小管功能损害———慢性间质纤维化,这些病理表现与马兜铃总酸所致肾损害极为相似。结论:RAFE小、中、大剂量灌胃给药13周以上可致大鼠慢性肾小管-间质纤维化,其肾功能和肾组织形态表现上与马兜铃总酸所致肾损伤相似,结果提示马兜铃酸是RAFE主要毒性成分。

粉防己和木防己多糖的含量测定

目的 :测定中药粉防己和木防己中单糖和寡糖 (寡糖的量以单糖表示 )的总含量以及多糖的含量。方法 :单糖和寡糖的提取 :用 2 0倍溶媒 (6 0 %乙醇 )浸泡 2 4h后 ,于 5 0℃提取 4h ,共提取 3次 ,每次提取用 2 0倍溶媒。多糖的提取 :用 2 0倍溶媒 (水 )浸泡提尽单糖和寡糖的残渣 2 4h ,于 10 0℃提取 3h ,重复提取一次。检测方法为硫酸 -苯酚法。结果 :粉防己和木防己中单糖和寡糖 (寡糖的量以单糖表示 )的总含量分别为 10 .2 0 %和 7.75 % ;多糖的含量分别为36 .83%和 38.4 4%。结论 :粉防己和木防己中含有大量的多糖 ,为开辟防己类药材新的用途提供理论依据。

HPLC法测定静态加压溶剂提取马兜铃属植物中马兜铃酸

目的建立并优化从马兜铃药材中提取马兜铃酸和的静态加压溶剂提取方法,考察各因素对提取效率的影响,并测定马兜铃、关木通、青木香和广防己中两成分的量。方法以马兜铃酸和的量为指标,采取单因素考察的方法,分别优化提取溶剂、药材粒径、提取温度、提取压力、提取时间、冲洗体积、循环数目、药材加入量等影响因素。结果优化后的条件为:甲醇提取,药材粉末粒径100～120目,提取温度120℃,提取压力10.3MPa,静态提取时间10min,冲洗体积40%,1个循环,药材加入量1.00g。结论本法可一次将马兜铃酸和从马兜铃等4种药材中完全提取,显示了良好的适用性。经比较,该法比传统的超声和索氏提取方法提取效率更高,节约溶剂,省时省力;静态加压溶剂法更适合于青木香中马兜铃酸的提取。

木防己多糖的组成及其清除活性氧自由基的作用

目的:提取并纯化木防己多糖(AFMP),确定其组成,研究其清除活性氧自由基的作用。方法:利用水提醇沉得到木防己粗多糖,再经DEAE:纤维素和聚酰胺纯制。利用Fenton反应研究AFMP清除·OH的作用;利用邻苯三酚自氧化法研究AFMP清除·O2-的作用。结果:纸色谱显示AFMP由葡萄糖和半乳糖组成。AFMP清除·OH的能力较弱;清除·O2-时的效果稍强,IC50为1407.4μg/ml。结论:木防己多糖为首次提取制得,有一定的清除羟自由基和超氧阴离子自由基的作用。