基于转录组的疏花软紫草低拷贝核基因引物开发

基于高通量的转录组测序,为大量并快速的开发分子标记提供契机。本研究对紫草科植物疏花软紫草进行转录组测序,共得到92 042 086条reads,从疏花软紫草158 446个Unigene中搜索到332个低拷贝核基因。为进行多态性验证,从中随机挑选30个设计引物,并对3个疏花软紫草种群共9个个体进行PCR扩增,结果发现其中16对引物能够扩增出单一稳定的目的条带,从中随机挑选7个片段进行群体测序并计算DNA多态性。结果表明,7对引物的多态性位点平均值为6.57,单倍型平均值为5.14,单倍型多态性（HD）在0.389~0.944之间,核苷酸多态性（Pi）为0.001 48~0.017 23。通过转录组测序技术开发的低拷贝核基因有较高的多态性,且可以有效地运用于群体遗传学和谱系地理学研究中。另外,这些低拷贝核基因能够被运用于软紫草属植物系统发育重建以及物种形成等研究工作中。

金川矿区本土植物光合生理生态日变化特征

采用便携式LI-6400光合测定仪,选择晴朗天气对金川矿区自然生长的软紫草(Arnebia szechenyi)、蒺藜(Tribulus terrester)、木本猪毛菜(Salsola arbuscula)叶片的气体交换参数及环境因子进行了测定,通过对比分析三种植物光合特性及其与环境因子间的关系,以揭示三种植物对矿区环境的适应特征。结果显示:软紫草和木本猪毛菜的净光合速率日变化有明显的"光合午休"现象,软紫草产生"午休"的主要原因为非气孔限制因素,而木本猪毛菜的主导因素为气孔限制因素。其中软紫草和木本猪毛菜的净光合速率日变化最大峰值均出现在11:00和17:00左右。蒺藜"光合午休"现象不明显,主要原因为气孔限制因素,最大峰值出现在9:00左右。总之,三种植物的水分利用效率存在时空差异,在强光、高温、低湿荒漠环境中都具有一定的生存优势,对矿区生境的适应能力大小依次为蒺藜、木本猪毛菜、软紫草。

金川荒漠植物光响应曲线最优模型分析

为探究荒漠植物的光合生理状况,采用Li-6400XT便携式光合仪在金川矿区测量了疏花软紫草( Arnebia szechenyi )、盐生草( Halogeton glomeratus )、木本猪毛菜( Salsola arbuscula )3种植物光合-光响应,并对其进行拟合分析,以期提高光合光响应曲线拟合的准确性并对3种植物的光合生理特征进行探索。研究发现:不同的模型对同一种植物的光响应曲线拟合结果存在较大差异,同一种模型对不同植物的拟合结果亦存在明显差异;直角双曲线修正模型为疏花软紫草和木本猪毛菜的拟合效果最优模型,而非直角双曲线模型对盐生草的拟合结果最佳;3种植物光合能力大小依次为疏花软紫草、木本猪毛菜和盐生草。

不同产地蒙紫草中左旋紫草素和β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁含量测定及质量标准研究

目的建立测定蒙药蒙紫草中左旋紫草素和β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁含量的方法,并制订其质量标准。方法采用显微鉴别法,对药材样品的横切面和粉末进行鉴别;采用薄层色谱法对药材样品中左旋紫草素和β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁进行定性分析;测定药材样品中水分、灰分、浸出物的含量;采用紫外分光光度法测定药材样品中左旋紫草素的含量,检测波长为516 nm;采用高效液相色谱法测定药材样品中β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量,色谱柱为Thermo Hypersil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.5%甲酸水溶液(70∶30,V/V),流速为1.0 m L/min,检测波长为275 nm,柱温为25℃,进样量为10μL。结果药材样品横切面和粉末显微特征明显;薄层色谱图中可见左旋紫草素和β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁的特征斑点,且斑点分离清晰。左旋紫草素质量浓度在5~50μg/m L(R^(2)=0.9999)范围内与吸光度线性关系良好,β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁的质量浓度在10~200μg/m L(R^(2)=0.9996)范围内与峰面积线性关系良好;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于2.00%;左旋紫草素和β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁的平均加样回收率分别为101.23%和100.16%,RSD分别为2.01%和2.88%(n=9)。根据1-7号批次药材拟订蒙紫草的质量标准,羟基蒽醌总色素(以左旋紫草素计)含量不得低于1.00%,β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁含量不得低于0.15%;蒙紫草中水分含量不得超过12.00%,总灰分含量不得超过8.00%,酸不溶性灰分含量不得超过2.00%,水溶性浸出物含量不得低于30.00%,醇溶性浸出物含量不得低于10.00%。结论该方法操作简便,结果准确,重复性高,稳定性好,可用于蒙药蒙紫草中左旋紫草素和β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量测定和质量控制。