黄花蒿花粉变应原舌下滴剂治疗蒿属花粉过敏的有效性及安全性评价

目的评价黄花蒿花粉变应原舌下滴剂治疗蒿属花粉致敏季节性变应性鼻炎(SAR)的有效性及安全性,为SAR患者变应原特异性免疫治疗(AIT)提供临床依据。方法选取确诊为蒿属花粉AR患者148例,纳入随机、安慰剂、双盲平行对照研究。所有患者经皮肤点刺试验(SPT)证实均适合接受SLIT,其中舌下免疫治疗(SLIT)组(n=74)予以黄花蒿花粉变应原舌下滴剂含服治疗,按需辅以对症治疗(ST);安慰剂组(n=74)舌下含服安慰剂,按需辅以抗组胺药物及局部激素疗法。以鼻症状总积分(TNSS)、视觉模拟量表(VAS)评分、变应性鼻-结膜炎生活质量量表(RQLQ)评分及Th17/Treg免疫平衡状况作为有效性评价指标,以不良事件发生状况作为安全性评价指标。结果治疗9个月后,同安慰剂组比较,SLIT组在TNSS、VAS及RQLQ的评分改善方面效果更优,差异均有统计学意义(P值均<0.05);SLIT组Th17细胞百分比和血清IL-17的表达均较安慰剂组降低,Treg细胞百分比和转化生长因子β1(TGF-β1)的表达均较安慰剂组升高,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。2组在试验周期内共观察到39例次不良事件,绝大多数为轻度、一过性的不良反应,极少有中度不良反应,均未出现严重不良反应,无不良转归。结论黄花蒿花粉变应原舌下滴剂特异性免疫治疗蒿属花粉致敏AR患者,对控制疾病进展、改善生活质量有较好效果,且未增加不良反应。作用可能是通过调节Th17/Treg免疫平衡实现的。

枸杞叶多糖调节T细胞和巨噬细胞缓解过敏性哮喘小鼠气道炎症

目的 构建以黄花蒿花粉为变应原的过敏性哮喘模型,采用枸杞叶多糖(lycium barbarum leaves polysaccharide,LBP)灌胃的方式进行干预,观察LBP对由黄花蒿花粉引起的过敏性哮喘小鼠是否有缓解作用并探究肺部Th1、Th2及巨噬细胞的变化。方法 实验设置对照组、LBP组、模型组、模型+LBP组,每组10只小鼠。肺组织苏木素-伊红染色观察肺结构;马松染色、过碘酸-雪夫染色检测肺组织纤维化程度和杯状细胞化生程度及黏液分泌水平。流式细胞术检测肺组织嗜酸性粒细胞占比变化,肺组织Th1、Th2细胞水平及巨噬细胞M1、M2极化情况。结果 与模型组相比,LBP组的哮喘小鼠肺组织嗜酸性粒细胞浸润数量降低(P<0.01)。同时,肺部纤维化程度明显减轻,支气管化生的杯状细胞明显减少。模型组小鼠肺部Th2细胞较对照组上调,LBP组小鼠肺部Th1细胞较模型组上调(P均<0.01)。与对照组相比,模型组小鼠M1细胞数量减少,M2细胞数量增多(P均<0.01)。LBP组小鼠M1和M2型细胞的占比与模型组相比发生了逆转(P均<0.05)。结论 LBP可通过减少黄花蒿引起的气道炎性细胞浸润,调节小鼠体内的T细胞及巨噬细胞平衡缓解哮喘程度。

青蒿花粉活力及柱头可授性研究

以野生青蒿中形态差异较为明显的绿秆(品系Y03)和紫红秆(品系Y07)为材料,分别以碘-碘化钾染色法、TTC染色法、联苯胺-甲萘酚染色法和离体萌发法测定其花粉活力,并从中选取较适宜的检测方法研究其贮藏特性,采用联苯胺-过氧化氢法测定其柱头的可授性.结果表明,碘-碘化钾和TTC染色法不适宜青蒿的花粉活力检测,联苯胺-甲萘酚染色法可以用于快速测定青蒿花粉活力,但测定值偏高,离体萌发法能准确可靠地反应花粉活力;两个品系的新鲜花粉在室温条件下只能贮藏2d,4℃,-19℃条件下可以贮藏3d,干燥处理显著加快了花粉活力的丧失;联苯胺-过氧化氢法测得两个品系青蒿柱头可授期为8~10d,边缘雌花可授性比中央两性花的强,且其可授期比中央两性花长1~2d.

不同种源黄花蒿花粉形态及生活力比较

目的:研究不同种源黄花蒿花粉生活力的差异,同时比较两者花粉形态上的差异。方法:采用TTC染色法和花粉液体培养法。结果:TTC染色法不适宜作为黄花蒿花粉活力测定的有效方法,在选定的培养基上花粉液体培养测得两种黄花蒿花粉活力分别为(24.64±0.14)%,(57.58±0.34)%,RSD%分别为1.69%,1.78%。结论:两种黄花蒿的花粉活力有显著差异,而形态上无显著性差异。

黄花蒿花粉新过敏原烯醇化酶鉴定:重组纯化及IgE结合活性

目的分析并鉴定黄花蒿花粉中新过敏原烯醇化酶以及致敏性。方法通过对黄花蒿花粉转录组学研究,得到潜在过敏原烯醇化酶的基因序列,通过序列扩增、重组表达和纯化获得重组黄花蒿花粉烯醇化酶,结合过敏患者血清和酶联免疫吸附实验(ELISA)、免疫印迹实验(Western blot)和竞争抑制实验研究黄花蒿花粉烯醇化酶的IgE结合活性。结果38份蒿属过敏患者血清ELISA结果显示黄花蒿花粉烯醇化酶的IgE结合率为24%(9/38),其中5份在免疫印迹分析中显示阳性结合条带。竞争抑制结合分析显示重组黄花蒿花粉烯醇化酶能够抑制过敏患者血清中IgE与黄花蒿花粉总提取物的结合。结论从黄花蒿花粉中分析并鉴定出一种新的过敏原烯醇化酶,进一步丰富了蒿属物种的致敏组分信息,为蒿属花粉过敏疾病的组分解析诊断方法的建立奠定基础。

黄花蒿的开花特性与繁育系统研究

目的:研究黄花蒿的开花特性,明确其繁育系统,为开展优良品种选育提供参考。方法:田间观察黄花蒿的开花进程和传粉特性,离体培养法测定花粉萌发率,联苯胺-过氧化氢法测定柱头可授性,套袋法研究授粉习性。结果:黄花蒿的花期在每年10月份,持续约1个月,单株花期约2周。黄花蒿整个开花期的花粉萌发率变化不大,盛花期的花粉萌发率约为44.2%。黄花蒿雌花柱头的可授性在散粉前最大,且雌花柱头的可授性高于两性花。花粉-胚珠比率值和套袋法结果判定黄花蒿繁育系统为专性异交。结论:黄花蒿的繁育系统类型为专性异交,且为风媒传粉。