刘寄奴抗炎组分筛选及其机制研究

目的考察刘寄奴活性组分及其对干扰素-γ(IFN-γ)和脂多糖(LPS)协同诱导RAW264.7细胞的抗炎机制。方法应用溶剂萃取和D101大孔树脂分别制备刘寄奴各提取物和总黄酮,紫外分光光度法测定总黄酮的含量;IFN-γ和LPS协同诱导细胞炎症模型;Greissreaction法测定各提取物及总黄酮对细胞上清液中亚硝酸盐含量的影响;RT-PCR法考察总黄酮对细胞内诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、诱导型环氧合酶(COX-2)mRNA的影响;Westernblot法考察总黄酮对细胞iNOS、COX-2、磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)蛋白表达的影响。结果刘寄奴乙酸乙酯部位与其他提取物相比,在相同剂量时对亚硝酸盐含量的抑制率最高,由此富集获得的总黄酮含量达53%。刘寄奴总黄酮呈剂量依赖性抑制细胞上清液中亚硝酸盐的含量,并对刺激后的细胞活力有保护作用;刘寄奴总黄酮呈抑制iNOS、COX-2mRNA表达,抑制iNOS、COX-2、p-ERK的蛋白表达。结论活性导向的分离提示乙酸乙酯部位是刘寄奴抗炎活性组分之一,由此富集的总黄酮呈剂量依赖性抑制细胞上清液中亚硝酸盐含量,部分通过丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)中的细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路抑制iNOS和COX-2基因和蛋白的表达而达到抗炎效果。

不同型号大孔树脂纯化的刘寄奴总黄酮对诱导型一氧化氮合酶的抑制作用

目的考察不同型号大孔树脂纯化的刘寄奴总黄酮对IFN-γ和LPS协同诱导RAW264.7细胞中NO表达的影响。方法应用溶剂萃取和AB-8、D101、ADS-17大孔树脂分别制备刘寄奴总黄酮,分光光度法测定总黄酮的含量;IFN-γ和LPS协同诱导RAW264.7造成炎症模型;Griessreaction测定总黄酮对细胞上清液中亚硝酸盐含量的影响;RT-PCR考察总黄酮对细胞内诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA的影响;Westernblot考察总黄酮对细胞iNOS蛋白表达的影响。结果3种刘寄奴总黄酮含量均达到50%以上,且以ADS-17型大孔树脂富集所得的总黄酮含量最高,达到67.78%。3种刘寄奴总黄酮均呈剂量和时间依赖性抑制细胞上清液中亚硝酸盐的含量,同等流程中以ADS-17型大孔树脂富集的总黄酮达到半抑制率的剂量为最小。ADS-17型刘寄奴总黄酮呈剂量依赖性抑制iNOSmRNA和蛋白的表达。结论ADS-17型大孔树脂有效富集刘寄奴黄酮类化合物,适用于刘寄奴总黄酮的提取。ADS-17型刘寄奴总黄酮呈时间和剂量依赖性抑制细胞上清液中亚硝酸盐含量,部分通过抑制iNOSmRNA和蛋白的表达达到下调NO产量的结果。刘寄奴总黄酮可能是刘寄奴抗炎药效的物质基础,有望进一步开发成为iNOS抑制剂。

六月霜中提取物清除O_2·^-和OH·自由基

应用氮蓝四唑 (NBT)光还原法 ,对六月霜中提取物清除超氧离子自由基O2 ·- 的效果进行了测定 .结果显示 ,六月霜提取物对超氧离子自由基有较强的清除效果 ,清除效果与提取物中黄酮质量浓度有关 ,当黄酮质量浓度达到一定值时 ,对O2 ·- 的清除效果可高达 88.4 1% .提取物与抗坏血酸 (Vc)进行了对照实验 ,结果显示其对O2 ·- 的清除能力比Vc高 .六月霜提取物在Vc—Cu2 +—H2 O2 体系中 ,对OH·自由基的清除效果的研究显示 ,最高清除率为 84 .0 2 % .

大孔吸附树脂在提取粉防己中汉防己甲素和汉防己乙素中的应用

目的:改进粉防己中汉防己甲素、乙素的提取工艺,使其操作简便,降低提取的成本和毒性。方法:利用D10 1大孔吸附树脂和硅胶柱层析进行分离、提取汉防己甲素和乙素。结果:得到纯度较高的汉防己甲素和乙素,得率分别为0 .0 6 % ,0 .0 16 % ,纯度均大于98%。结论:利用D10 1大孔吸附树脂和硅胶柱层析可以有效分得汉防己甲素和乙素,且得率较高,纯度已达到标准品的要求,可用作标准品的制备。该方法与传统的分离、提取方法比较,操作简便,并且降低了成本和毒性。

六月霜花果总黄酮水提取工艺研究

在不同条件下提取六月霜花果中总黄酮,结果表明:提取温度、提取时间和溶剂体积对总黄酮提取量都有不同程度的影响。通过正交试验得出六月霜花果总黄酮提取最佳条件是(以1g六月霜花果为基准):溶剂体积为40ml,提取时间为60min,提取温度为100℃。

奇蒿抗真菌成分研究

对奇篙进行系统分离提取，以各部分提取物进行抗真菌体外药敏实验。发现其中两种提取物对真菌有较好抗菌活性。

3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸的稳定性和抗氧化活性研究

目的考察影响化合物3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸稳定性的因素并对3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸的体外抗氧化活性进行初步研究。方法采用HPLC考察3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸在不同溶剂、pH、温度、光照条件下的稳定性;采用UV测定3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸的体外抗氧化活性(清除DPPH自由基)。结果溶剂的种类、pH值、温度、光照条件对3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸稳定性具有一定影响。3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸具有较强的体外清除DPPH自由基活性,其活性与Vc相当[3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸和Vc的IC_(50)值分别为(372.56±1.04)μg·mL^(-1)和(294.54±1.03)μg·mL^(-1)]。结论在该化合物的分离纯化及其分析检测时,不能采用纯有机溶剂为溶剂,应在中性或酸性条件下,低温、避光操作。3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸作为抗氧化剂在制药、食品、化妆品以及精细化工行业具有广阔的应用前景。

南刘寄奴黄酮类成分的研究

目的研究南刘寄奴中的黄酮类成分。方法运用各种柱色谱法分离,采用核磁共振波谱技术和理化性质鉴定化合物的结构。结果共分离得到了11个黄酮类化合物,分别鉴定为：异鼠李素（1）、山柰酚（2）、半齿泽兰素（3）、木犀草素（4）、芹菜素（5）、槲皮素（6）、大波斯菊苷（7）、山柰酚-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷（8）、木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（9）、槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷（10）、广寄生苷（11）。结论化合物1～11均为首次从该植物中分离得到,其中化合物8和11为首次从本属植物中分离得到。

刘寄奴化学成分研究

目的研究刘寄奴Artemisia anomala的化学成分。方法采用溶剂法和多种柱色谱法进行分离纯化,并经波谱分析鉴定化合物的结构。结果从刘寄奴95%乙醇提取物的醋酸乙酯部位分离得到7个化合物,分别鉴定为(4aS,7S,7aR)-7-羟基-7-甲基-1,4a,5,6,7,7a-六氢环戊二烯[c]吡喃-4-羧酸甲酯(1)、rehmaglutin D(2)、(E)-6-羟基-2,6-二甲基辛-2,7-二烯酸(3)、金圣草酚(4)、木犀草素(5)、芹菜素(6)、对羟基苯丙烯酸(7)。结论其中化合物1为新的环烯醚萜,命名为刘寄奴醚萜;化合物2为首次从该属植物中分离得到,化合物3、4和7为首次从该植物中分离得到。

竹叶、六月霜提取物抑菌作用比较研究

研究测定了淡竹竹叶、六月霜提取液对细菌的抑制作用,并对两者的抑菌效果进行了比较,结果表明:不同提取液有不同程度的抑制作用,比较而言,竹叶的总体抑菌能力强于六月霜。

南北刘寄奴活血化瘀药理作用的比较研究

本文对南、北刘寄奴在活血化瘀方面的药理作用进行了比较研究,实验结果表明:两者对正常实验动物的凝血时间、血浆复钙凝结时间、凝血酶凝结时间、体外血栓形成长度、聚集指数等指标,与生理盐水组相比较,均有显著差异;南刘寄奴与北刘寄奴相比较,则无明显差异。实验结果提示,两者均有活血化瘀的功效,其作用强度则无明显差异。

刘寄奴醇提物抗局灶性脑缺血有效部位筛选研究

目的筛选刘寄奴醇提物抗局灶性脑缺血的有效部位。方法将ICR小鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组（10 mg·kg-1）、刘寄奴醇提物石油醚萃取部位（部位Ⅰ）、刘寄奴醇提物乙酸乙酯萃取部位（部位Ⅱ）、刘寄奴醇提物正丁醇萃取部位（部位Ⅲ）和刘寄奴醇提物剩余水层（部位Ⅳ）,其中部位Ⅰ-Ⅳ各设3.25,6.50 g·kg-1 2个剂量组,于造模前连续给药7 d。采用改进的Zea Longa方法建立局灶性脑缺血动物模型。造模6 h后,测定小鼠神经功能评分、脑指数、脑含水量、脑梗死体积及脑组织病理形态学等指标;分别采用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法测定刘寄奴醇提物有效部位3.25,6.50 g·kg-1剂量组脑组织中超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量。结果与模型组相比,部位Ⅰ、部位Ⅱ和部位Ⅲ均能在不同程度上改善局灶性脑缺血引起的脑水肿,其中部位Ⅲ能显著降低小鼠神经功能评分、脑指数、脑含水量、脑梗死体积（P〈0.01或P〈0.05）。病理组织切片显示,与模型组相比,部位Ⅲ能明显改善脑组织神经元核溶解程度、核体不规则程度（P〈0.01）。与模型组相比,部位Ⅲ3.25,6.50 g·kg-1剂量组均能显著升高小鼠脑组织中超氧化物歧化酶活性（P〈0.01,P〈0.05）,降低丙二醛含量（P〈0.05）。结论初步筛选出刘寄奴醇提物正丁醇萃取部位（部位Ⅲ）为刘寄奴抗局灶性脑缺血的有效部位,其作用机制可能与其抗氧化损伤有关。