Ri质粒转化的青蒿发根培养及青蒿素的生物合成

用发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)转化药用植物青蒿(Artemisia annua L.)并建立了发根体外培养系统。Southern杂交、NPTⅡ酶的检测证明Ri质粒的T-DNA转移并整合到植物的核基因组上。在发根培养系统中,检测了青蒿的重要次生代谢物—青蒿素的含量,检测了不同理化因子对发根生长及青蒿素含量的影响。结果表明:光照(日光灯,12h光周期,2000lx)有利于次生产物青蒿素的积累。培养基的pH值为5.4。蔗糖浓度为3％不仅促进发根的生长,而且促进青蒿素的积累。低浓度亲乙酸(NAA)对发根生长具有促进作用,但抑制青蒿素的合成。赤霉素GA_3对发根的生长及次生产物的合成都具有促进作用,其最适浓度为4.8mg/L。