艾草水提取物对大肠杆菌的抑制机理初步研究

以革兰氏阴性菌大肠杆菌((Escherichia coli)作为试验菌,通过测定艾草(Artemisia argyi Lévl.et Van.)水提物与大肠杆菌作用前后细菌培养液的电导率、总糖和总蛋白的变化,阐明艾草水提物对大肠杆菌的抑菌机理。结果表明,艾草水提物(3g/mL)对大肠杆菌有较强的抑菌作用,其最低抑制浓度(MIC)为浓缩液的32倍稀释物。经艾草水提物处理后,大肠杆菌培养液电导率、总糖浓度、蛋白质浓度均增大,表明艾草水提物可破坏大肠杆菌细胞膜,导致细胞内容物流出,对培养液中相关生理生化指标造成影响。

运用UPLC-BCD方法快速筛选中草药中凝血酶抑制剂

目的:建立超高相液相色谱-生物化学检测(UPLC-BCD)分析方法快速筛选丹参、远志、蕲艾药材中凝血酶抑制剂,为中草药中生物活性成分的辨识提供一种便捷的技术手段。方法:运用UPLC分析技术,采用Xtimate UHPLC C;色谱柱(2.1 mm×100 mm, 1.8μm),柱温30℃,流动相为甲醇(B)-0.1%甲酸水溶液(A),梯度洗脱,检测波长256 nm,体积流量0.2 mL·min^(-1)。以比伐卢定作为阳性对照,考察酶反应条件,建立UPLC-BCD分析方法检测3种药材提取物与凝血酶反应前后色谱特征图谱及酶反应产物的差异,评价3种药材凝血酶抑制作用、快速筛选所含酶抑制剂,采用超高效液相色谱-离子阱-静电场轨道阱质谱(UHPLC-LTQ/Orbitrap MS)方法鉴定酶抑成分。结果:丹参、远志和蕲艾均具有较好的凝血酶抑制作用,检出丹参和远志中7种酶抑制剂,初步鉴定为丹酚酸A、迷迭香酸、丹酚酸B、西伯利亚远志呫吨酮B、远志山酮Ⅲ、3,6’-二芥子酰基蔗糖、细叶远志苷A。蕲艾色谱峰在反应前后无明显变化,其酶抑制活性可能来源于色谱图未显示的其他成分。结论:建立的UPLC-BCD方法能够快速辨别复杂基质的酶抑制作用及酶抑制剂,为中草药中生物活性成分的快速筛选提供了快速、便捷的分析手段。