3种蒿属植物挥发油的化学成分及对米象和烟草甲的生物活性研究

为了寻找对米象和烟草甲具有良好杀虫和驱避活性的植物挥发油,采用超临界CO_(2)萃取法提取藏沙蒿、云南蒿和臭蒿的挥发油,气相质谱法分析挥发油的化学成分,用滤纸片法测定挥发油对米象和烟草甲的触杀与驱避活性。藏沙蒿挥发油中含量最高的化合物为己酸-3-己烯酯(28.91%),云南蒿挥发油为十六酸甲酯(17.37%),臭蒿挥发油为斯巴醇(14.75%)。藏沙蒿挥发油对米象触杀活性最好,LD50为181.62μg/cm2,臭蒿挥发油对烟草甲触杀活性最好,LD50为38.34μg/cm2。3种蒿属植物挥发油对米象和烟草甲均表现出良好的驱避活性,其中藏沙蒿的驱避效果最好。

三种蒿属植物叶面腺体观察及其挥发性物质的SPME-GC-MS分析

为了解艾蒿、臭蒿和黄花蒿三种蒿属植物挥发性物质的组成,探寻其与叶面腺毛体的关系,通过顶空固相微萃取和气相色谱-质谱联用法对其化学成分进行鉴定分析比较,并利用体式荧光显微镜观察三种蒿属植物叶面腺毛体数量.结果表明:1黄花蒿挥发性物质种类和含量最多,艾蒿挥发性物质种类和含量其次,臭蒿挥发性物质种类和含量最少,三者主要成分均为单萜类化合物与倍半萜类化合物;2三种植物均含有顺-3-己烯酸乙酯、蒈烯、桉树脑、大根香叶烯、β-石竹烯;3艾蒿挥发性物质还含有罗勒烯、2,6-二甲基-1,5,7-辛三烯-3-羟基、樟脑、β-榄香烯、丁香烯、桉叶稀、杜松烯、E-环氧法尼稀,臭蒿挥发性物质还含有羟基脲、β-蒎稀、β-榄香烯、丁香烯,黄花蒿挥发性物质还含有3-己烯-1-醇、2-辛烯-4-醇、5,5-二甲基-1-乙基-1,3-环戊二烯、邻异丙基甲苯、莰烯、D-柠檬稀、β-蒎稀、E-β-法尼烯;4三种植物中黄花蒿挥发性物质种类和含量最多,其腺毛体密度也最大;艾蒿挥发性物质种类和含量其次,其腺毛体密度也处于其次;臭蒿挥发性物质种类和含量最少,其腺毛体密度也最小.

HPLC法测定臭蒿中东莨菪内酯的含量

目的:建立臭蒿中东莨菪内酯成分的HPLC定性定量分析方法。方法:色谱柱为Agilent TC-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温30℃,流动相为甲醇(A)-0.3%磷酸溶液(B)梯度洗脱,流速1.0 m L·min-1,检测波长344 nm。结果:东莨菪内酯质量浓度与峰面积在测定范围内呈良好的线性关系(r=0.999 9),重现性好,RSD值为1.51%;平均加样回收率为101.42%。结论:本试验建立的HPLC方法稳定可靠、简便易行,为臭蒿药材的质量评价和质量控制提供了理论依据。

臭蒿药材薄层色谱鉴别的方法学研究

目的建立藏药臭蒿的质量控制方法。方法本文初步建立了臭蒿药材的薄层色谱鉴别方法,以东莨菪内酯为指标成分,以乙酸乙酯-甲醇-浓氨试液(17:2:1)为展开剂,展开,取出,晾干后,置紫外光灯(365nm)下检视。结果供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同的蓝色荧光主斑点。结论该方法操作简单,稳定性好。为臭蒿的质量标准建立提供一定的依据。

臭蒿水乳剂抗烟草黑胫病的作用

采用菌丝生长速率法,测定臭蒿水乳剂对烟草疫霉菌丝生长的毒力及其药效稳定性;采用菌丝块诱导孢子囊产生法测定臭蒿水乳剂对烟草疫霉孢子囊抑制的毒力;最后对盆栽防效结果进行探讨.结果表明,低浓度臭蒿水乳剂对烟草疫霉菌丝生长和孢子囊的产生均有明显抑制作用,对烟草疫霉菌丝生长抑制的EC50和EC90值分别为5.93g·L-1、52.56g·L-1,其对烟草疫霉菌丝生长的抑制作用具有良好的pH值稳定性、光稳定性、热稳定性以及贮藏稳定性;对烟草疫霉孢子囊产生抑制的EC50、EC90值分别为6.56g·L-1,65.22g·L-1.盆栽防效及对烟草幼苗生长影响实验表明,22d其对烟草黑胫病的防效为56.2%,且对烟草幼苗生长几乎没有影响.

臭蒿抗菌成分的分离和鉴定

采用硅胶柱层析法对臭蒿粗提物进行分离纯化,利用孢子萌发法对抗菌流分进行活性评价,采用高效液相色谱-质谱联用技术(HPLC-MS)分析抗菌流分的物质组成。结果显示:臭蒿粗提物分离纯化得到13种流分(Fr.1~Fr.13),其中流分Fr.5抗菌活性最好,对流分Fr.5进一步硅胶柱层析分离得到4种流分(Fr.5.1~Fr.5.4)。臭蒿粗提物对烟草链格孢菌孢子的EC50为5.04 g/L,流分Fr.5.2的EC50为0.57 g/L。LC-MS分析出流分Fr.5.2主要由去氧双羟基蒿甲醚(17.00%)、去氧双氢青蒿素(43.65%)、去氧青蒿素(16.15%)组成。以双氢青蒿素为标准品,测得流分Fr.5.2中双氢青蒿素的质量分数为40.95%,双氢青蒿素对烟草链格孢菌孢子的EC50为2.70 g/L,表明流分Fr.5.2中主要抗菌物质为青蒿素衍生物。

藏药臭蒿及其近缘种药材的ITS2 DNA条形码鉴别

臭蒿Artemisia hedinii有清热凉血,退黄,消炎的功能,在藏药中占有重要地位。蒿属植物种类繁多,在青藏高原分布广泛,且其外形较为相似,传统鉴定方法难以准确快速鉴定。文章以ITS2序列为DNA条形码,建立了一种快速准确鉴定臭蒿及其易混蒿属藏药植物的方法。从青藏高原采集蒿属藏药21个样品,分别提取样品DNA,对ITS2目标序列进行PCR扩增、测序,获得其ITS2序列信息;并从Gen Bank上下载同属序列11条;运用MEGA 6.0对所有32条ITS2序列进行对比,计算种间种内遗传距离,构建Neighbor Joining(NJ)系统进化树,并比较样本ITS2序列间的二级结构差异。结果显示:臭蒿、牛尾蒿、黄花蒿、艾蒿的遗传距离较近,但四者种间最小距离均远大于种内最大距离,NJ树显示4种蒿属植物种内之间各单独形成一个分支,ITS2序列二级结构也显示出差异。以ITS2序列作为DNA条形码,可达到对臭蒿及其近缘蒿属藏药植物进行准确、快速的识别和鉴定的目的,准确地弄清物种之间的系统进化关系的目的,为该属药用植物的质量控制、安全用药及合理开发利用提供理论依据。