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ASODN逆转耐药肝癌细胞多药耐药基因mdr1的体内实验研究 被引量:7
1
作者 罗华友 严律南 +2 位作者 杨家印 刘自明 林琦远 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2004年第2期142-144,共3页
目的 在体外实验研究的基础上进一步观察反义硫代磷酸酯寡核苷酸 (ASODN)在裸鼠体内逆转耐药肝癌细胞SMMC 772 1/ADM多药耐药基因mdr1的作用。方法 取体外培养的耐药肝癌细胞 (1× 10 7个 /0 .2ml)注射于裸小鼠腋部皮下 ,建立耐... 目的 在体外实验研究的基础上进一步观察反义硫代磷酸酯寡核苷酸 (ASODN)在裸鼠体内逆转耐药肝癌细胞SMMC 772 1/ADM多药耐药基因mdr1的作用。方法 取体外培养的耐药肝癌细胞 (1× 10 7个 /0 .2ml)注射于裸小鼠腋部皮下 ,建立耐药肝癌模型 ,而后将成模裸鼠分成 4组 ,每组各 5只。ASODN组在裸鼠肿瘤局部注射浓度为 3μmol/L的ASODN 5 0 μl和脂质体Lipofectamine 5 0 μl,并在腹腔内注射阿霉素 (ADM ,每天 10mg/m2 ) ;正义链组 (SODN组 )与ASODN组的方法、剂量相同 ;对照 1组、对照 2组分别在裸鼠局部注射Lipofectamine 5 0 μl和生理盐水 2 0 0 μl,同时腹腔注射ADM (每天 10mg/m2 )。寡核苷酸于观察的两周内每周前 3d注射 ;ADM于每周的第 2~ 4天使用。Lipofectamine和生理盐水使用时间与寡核苷酸相同。结果 随着时间的推移 ,4组裸鼠的肿瘤体积逐渐增大 ,且于第 5天开始变化明显 ,此后各时相之肿瘤体积与前一时相比较 ,差异均有显著性意义 (P<0 .0 5 ) ;ASODN组的肿瘤体积在第 5天后明显小于其他 3组 (P<0 .0 5 ) ;而对照 1组、对照 2组及SODN组各时相的肿瘤体积差异无显著性意义 (P>0 .0 5 )。该实验结果提示 ,SODN及脂质体对裸鼠肿瘤的生长无明显影响 。 展开更多
关键词 asodn逆转 耐药性 肝癌细胞 多药耐药 MDRL基因 体内实验 反义硫代磷酸酯寡核苷酸 asodn
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^(99)Tc^m-EC-ASODN反义探针的合成和标记 被引量:7
2
作者 谢娟 刘方欣 +1 位作者 王颖 李少林 《核技术》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第6期449-453,共5页
报道反义探针99Tcm-EC-ASODN的合成和标记。将次乙酰双半胱氨酸(L,L-ethylenedicysteine,EC)与反义寡脱氧核苷酸(Antisenseoligodeoxynucleotides,ASODN)进行偶联,形成复合物EC-ASODN,通过核磁共振图谱(1H-NMR)、红外图谱(IR)、紫外(A2... 报道反义探针99Tcm-EC-ASODN的合成和标记。将次乙酰双半胱氨酸(L,L-ethylenedicysteine,EC)与反义寡脱氧核苷酸(Antisenseoligodeoxynucleotides,ASODN)进行偶联,形成复合物EC-ASODN,通过核磁共振图谱(1H-NMR)、红外图谱(IR)、紫外(A260)吸收和电泳,鉴定EC-ASODN复合物的结构。用锝(99Tcm)标记EC-ASODN,通过薄层层析评价99Tcm-EC-ASODN的标记率、放化纯和稳定性。结果显示,1H-NMR、IR谱图、紫外吸收和电泳都证实EC与ASODN联结形成EC-ASODN,99Tcm-EC-ASODN的标记率为77.28%,放化纯为97.52%,Rf=0.95—1,4h内具有很好的稳定性。结论:EC与ASODN能形成稳定的复合物EC-ASODN,用99Tcm标记,方法简便,能得到标记率高和稳定性好的反义探针。 展开更多
关键词 ^99TC^m-EC-asodn 反义探针 核磁共振光谱 红外光谱
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以jetPEI-RGD为载体的^(125)I-(α_v)ASODN投递对人肝癌细胞侵袭力的影响 被引量:1
3
作者 蔡海东 谯娱 +5 位作者 袁雪宇 余飞 杨越华 袁世栋 孙明 吕中伟 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2010年第9期1496-1499,共4页
目的:探讨以jetPEI-RGD为转染载体的125I-(αV)ASODN投递在体外对HepG2细胞侵袭力的影响。方法:125I标记整合素αV亚基的ASODN,以聚乙烯亚胺衍生物jetPEI-RGD为载体,通过受体介导的转染方式进入HepG2细胞,利用Boyden小室侵袭模型评估复... 目的:探讨以jetPEI-RGD为转染载体的125I-(αV)ASODN投递在体外对HepG2细胞侵袭力的影响。方法:125I标记整合素αV亚基的ASODN,以聚乙烯亚胺衍生物jetPEI-RGD为载体,通过受体介导的转染方式进入HepG2细胞,利用Boyden小室侵袭模型评估复合物对HepG2细胞侵袭力的影响,并计算实验组和各对照组的抑制率。结果:jetPEI-RGD/125I-(αV)ASODN组、jetPEI-RGD/(αV)ASODN组、jetPEI-RGD组、125I-(αV)ASODN组、(αV)ASODN组和Na125I组的抑制率分别为(52.60±4.11)%、(39.73±3.40)%、(30.05±5.19)%、(14.14±2.94)%、(12.79±2.68)%和(0.91±2.91)%,相对于其他各实验对照组,jetPEI-RGD/125I-(αV)ASODN组减低了HepG2细胞的侵袭能力(P<0.01)。结论:以jetPEI-RGD为载体投递125I-(αv)ASODN能有效抑制HepG2细胞的侵袭力。 展开更多
关键词 肝肿瘤 jetPEI-RGD 整合素αV亚基 asodn 细胞侵袭
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PDGFR-αASODN玻璃体内注射对视网膜的毒性作用 被引量:1
4
作者 彭燕一 李光辉 +1 位作者 秦程 蒋姣姣 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第14期2264-2267,共4页
目的:探讨PDGFR-αASODN对视网膜的毒性作用。方法:选择健康成年有色家兔24只,随机分为4组,每组6只;4组兔子3组右眼玻璃体分别注射0.1 m L不同浓度的PDGFR-αASODN/lipofectamine TM 2000溶液,另外1组注射0.1 m L平衡盐溶液作为对照组;... 目的:探讨PDGFR-αASODN对视网膜的毒性作用。方法:选择健康成年有色家兔24只,随机分为4组,每组6只;4组兔子3组右眼玻璃体分别注射0.1 m L不同浓度的PDGFR-αASODN/lipofectamine TM 2000溶液,另外1组注射0.1 m L平衡盐溶液作为对照组;4组兔子的左眼不注药。于注药后第1、7、14及28天,对4组兔子的右眼行裂隙灯、间接检眼镜、视网膜电图(ERG)检查;第28天,取4组兔子的眼球,对视网膜组织进行光镜HE、免疫组化及透射电镜的观察。结果:裂隙灯、间接检眼镜检查,各组在各个检查时间点均未发现异常。ERG b波振幅,实验组与对照组比较差异无显著性。注药后第28天,光镜下HE和免疫组化检查,各组视网膜组织均未发现任何病理变化。注药后第28天电镜检查,D组视网膜感光细胞:部分膜盘间隙扩张,部分膜盘融合,少数细胞核周围间隙略增大,其细胞核形态略不规则。结论:玻璃体内注射0.1 m L PDGFR-αASODN/lip2000时,PDGFR-αASODN的浓度≤1.5μmol/L是较为安全的。 展开更多
关键词 PDGFR-αasodn 毒性作用 视网膜 视网膜电图
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PEI-RGD/^(125)I-(α_V) ASODN的制备及其对肝癌HepG2细胞侵袭力的抑制
5
作者 蔡海东 谯娱 +4 位作者 袁雪宇 杨越华 袁世栋 孙明 吕中伟 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期609-613,共5页
目的:探讨以PEI-RGD(polyethyleneimine-Arg-Gly-Asp)为转染载体的125I-(αV)ASODN投递在体外对HepG2肝癌细胞侵袭力的影响。方法:125I标记整合素αV亚基的ASODN,以聚乙烯亚胺衍生物PEI-RGD为载体制备PEI-RGD/125I-(αV)ASODN复合物,通... 目的:探讨以PEI-RGD(polyethyleneimine-Arg-Gly-Asp)为转染载体的125I-(αV)ASODN投递在体外对HepG2肝癌细胞侵袭力的影响。方法:125I标记整合素αV亚基的ASODN,以聚乙烯亚胺衍生物PEI-RGD为载体制备PEI-RGD/125I-(αV)ASODN复合物,通过受体介导方式转染进入HepG2细胞,利用Boyden小室侵袭模型检测复合物对HepG2细胞侵袭力的影响。结果:(1)125I-(αV)ASODN的标记率为(73.78±4.09)%,放化纯度为(96.68±1.38)%,37℃放置48 h后的放化纯度仍>90%,表明其稳定性良好;(2)HepG2细胞对PEI-RGD/125I-(αV)ASODN的摄取于4μl/2μg时达到峰值[(12.77±0.85)%],之后明显降低,故选择2μl/1μg作为PEI-RGD/125I-(αV)ASODN对HepG2细胞的作用剂量;(3)相对于其他实验组和对照组,PEI-RGD/125I-(αV)ASODN组显著降低了HepG2细胞的侵袭能力(P<0.01)。结论:以PEI-RGD为载体投递125I-(α)ASODN能有效抑制HepG2细胞的侵袭力。 展开更多
关键词 聚乙烯亚胺-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(PEI-RGD) 整合素αV亚基 asodn 肝肿瘤 侵袭
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jetPEI-RGD介导的^(125)I-(α_V)ASODN对人HCC细胞生长抑制作用的研究
6
作者 蔡海东 谯娱 +3 位作者 余飞 袁雪宇 孙明 吕中伟 《同济大学学报(医学版)》 CAS 2009年第5期40-43,共4页
目的探讨jetPEI-RGD介导的125I-(αV)ASODN体外对人HCC细胞生长抑制的影响。方法用125I标记整合素αV亚基的ASODN,以聚乙烯亚胺衍生物jetPEI-RGD为转运载体转染进入Hep G2细胞,MTT法检测复合物对Hep G2细胞生长的抑制率。结果jetPEI-RGD... 目的探讨jetPEI-RGD介导的125I-(αV)ASODN体外对人HCC细胞生长抑制的影响。方法用125I标记整合素αV亚基的ASODN,以聚乙烯亚胺衍生物jetPEI-RGD为转运载体转染进入Hep G2细胞,MTT法检测复合物对Hep G2细胞生长的抑制率。结果jetPEI-RGD/125I-(αV)ASODN组的细胞抑制率与jetPEI-RGD/(αV)ASODN组比较,差异无统计学意义(P>0.05),与其余各实验对照组比较,细胞抑制率增高,差异具有统计学意义(P<0.001),且在一定的范围内抑制率与投药剂量呈正相关(r=0.879)。结论jetPEI-RGD介导的125I-(αV)ASODN能有效抑制Hep G2细胞的生长增殖。 展开更多
关键词 jetPEI-RGD 整合素αV亚基 asodn 肝细胞肝肿瘤
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c-mycASODN对半乳糖诱导的晶体上皮细胞中两种抗氧化酶活性的影响
7
作者 范芳 葛正龙 +2 位作者 曾小平 李海祥 李长福 《遵义医学院学报》 2003年第5期419-421,共3页
目的 探讨ASODN对半乳糖性白内障晶体上皮细胞 (LEC)中抗氧化系统活力的影响。方法 采用组织培养方法 ,以半乳糖诱发兔晶状体形成白内障 ,以不同浓度c mycASODN导入LEC后检测LEC中GSH Px、SOD活性。结果 在半乳糖性白内障形成过程中 ... 目的 探讨ASODN对半乳糖性白内障晶体上皮细胞 (LEC)中抗氧化系统活力的影响。方法 采用组织培养方法 ,以半乳糖诱发兔晶状体形成白内障 ,以不同浓度c mycASODN导入LEC后检测LEC中GSH Px、SOD活性。结果 在半乳糖性白内障形成过程中 ,LEC中GSH Px、SOD活性明显降低 ,导入不同浓度c mycASODN后 ,LEC中GSH Px、SOD活性明显增加。结论 在半乳糖性白内障形成过程中 ,导入c mycASODN后能改善LEC的抗氧化能力。 展开更多
关键词 反义C-MYC寡核苷酸 半乳糖 白内障 抗氧化系统 上皮细胞 抗氧化酶 c-mycasodn
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STAT6 ASODN对哮喘小鼠脾淋巴细胞影响的实验研究 被引量:3
8
作者 赵鹰 弓清梅 +3 位作者 田新瑞 任文霞 李建强 刘卓拉 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2006年第2期195-200,共6页
目的研究STAT6反义寡核苷酸对哮喘小鼠脾淋巴细胞的影响作用。方法实验细胞分组:正常鼠空白组(A组)、正常鼠OVA组(B组)、哮喘空白组(C组)、哮喘OVA组(D组)、哮喘治疗组(E组)。正常设计并人工合成一段互补于小鼠STAT6 mRNA翻译起始区271-... 目的研究STAT6反义寡核苷酸对哮喘小鼠脾淋巴细胞的影响作用。方法实验细胞分组:正常鼠空白组(A组)、正常鼠OVA组(B组)、哮喘空白组(C组)、哮喘OVA组(D组)、哮喘治疗组(E组)。正常设计并人工合成一段互补于小鼠STAT6 mRNA翻译起始区271-290的反义寡核苷酸片段,全链硫代修饰。用卵白蛋白和氢氧化铝复制哮喘模型,用淋巴细胞分离液分离脾淋巴细胞,进行体外培养并导入由阳离子脂质体转染剂Geneshuttle携带的反义寡核苷酸,观察反义寡核苷酸的转染对脾淋巴细胞STAT6蛋白表达水平及细胞培养上清中IL-4分泌水平的影响。免疫细胞化学观察脾淋巴细胞中STAT6蛋白的表达水平,同时采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定脾细胞培养上清液中IL-4的浓度。结果D组细胞STAT6蛋白表达明显高于其余各组,均具有显著性差异(P均<0.01),STAT6 ASODN转染后,E组细胞该蛋白的表达量明显下降(P<0.01);D组脾淋巴细胞培养上清中IL-4分泌水平明显高于其余各组,均具有显著性差异(P均<0.01);STAT6 ASODN转染后,E组培养上清中IL-4分泌水平显著低于D组(P<0.01)。结论STAT6 ASODN可特异性抑制哮喘鼠脾淋巴细胞中STAT6蛋白的表达,并可特异性抑制脾淋巴细胞中IL-4的分泌,为反义基因技术治疗哮喘提供了依据。 展开更多
关键词 反义寡核苷酸 支气管哮喘 白介素-4 信号转导和转录激活因子6
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VEGF-ASODN对唾液腺腺样囊性癌的影响
9
作者 李晓光 王旭霞 +3 位作者 李腾宇 王延秀 高静 倪春晓 《上海口腔医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期611-616,共6页
目的:研究血管内皮细胞生长因子反义寡核苷酸(VEGF-ASODN)对裸鼠荷人唾液腺腺样囊性癌的生长抑制作用。方法:20只BALB/c裸鼠随机分为4组,每组5只,实验1~3组建立人唾液腺腺样囊性癌荷瘤裸鼠移植瘤模型,并注射相应试剂。第4组为无荷瘤对... 目的:研究血管内皮细胞生长因子反义寡核苷酸(VEGF-ASODN)对裸鼠荷人唾液腺腺样囊性癌的生长抑制作用。方法:20只BALB/c裸鼠随机分为4组,每组5只,实验1~3组建立人唾液腺腺样囊性癌荷瘤裸鼠移植瘤模型,并注射相应试剂。第4组为无荷瘤对照组。VEGF-ASODN组于瘤体及瘤周注射VEGF-ASODN 66μg。错义寡核苷酸组注射错义寡核苷酸66μg。生理盐水组注射生理盐水。每3 d 1次,共注射7次。实验结束后2 d,处死动物,取血清,测VEGF蛋白,测量肿瘤大小及重量,取肿瘤组织切片,免疫组化分析VEGF、PCNA、CD34表达,计算微血管密度(microvessel density,MVD)和增殖细胞核抗原标记指数(PCNA Label index,PLI),分子原位杂交检测VEGF mRNA表达。采用SPSS13.0软件包对数据进行统计学分析。结果:VEGF-ASODN组荷瘤裸鼠血清VEGF蛋白水平、肿瘤体积和重量、VEGF mRNA及其蛋白和PCNA、CD34表达均较对照组显著降低。结论:VEGF-ASODN通过抑制VEGF表达,从而抑制唾液腺腺样囊性癌细胞的生长。 展开更多
关键词 血管内皮细胞生长因子 反义寡核苷酸 裸鼠 基因技术 唾液腺腺样囊性癌
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转染VEGF-ASODN对胃癌细胞Survivin表达的影响
10
作者 郑斌 尹文涛 左铁 《昆明医学院学报》 2009年第6期31-34,共4页
目的了解转染VEGF-ASODN(血管内皮生长因子反义寡核苷酸)对胃癌细胞Survivin(生存素)表达、细胞生长的作用.方法人工合成硫代磷酸化VEGF-ASODN,转染胃癌细胞SGC-7901,用Western-blot法检测细胞Survivin蛋白表达量、用流式细胞仪检测转... 目的了解转染VEGF-ASODN(血管内皮生长因子反义寡核苷酸)对胃癌细胞Survivin(生存素)表达、细胞生长的作用.方法人工合成硫代磷酸化VEGF-ASODN,转染胃癌细胞SGC-7901,用Western-blot法检测细胞Survivin蛋白表达量、用流式细胞仪检测转染后细胞凋亡情况、用MTT检测转染后细胞生存力、细胞生长曲线检测转染后细胞生长情况.结果转染VEGF-ASODN能降低细胞Survivin蛋白,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),转染后细胞凋亡与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),能降低细胞的生存力及抑制细胞生长.结论VEGF-ASODN能抑制Survivin蛋白表达、抑制胃癌细胞生长、增加胃癌细胞的凋亡. 展开更多
关键词 血管内皮生长因子反义寡核苷酸 生存素 胃癌细胞
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VEGF-ASODN抑制裸鼠胃癌移植瘤微血管生长
11
作者 郑斌 尹文涛 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2009年第4期409-413,共5页
目的研究血管内皮细胞生长因子反义寡核苷酸(VEGF-ASODN)对裸鼠荷人胃癌移植瘤微血管的生长抑制作用。方法人工合成硫代磷酸化VEGF-ASODN,转染胃癌细胞SGC-7901,实时荧光定量RT-PCR检测细胞RNA起始拷贝数,ELESA法检测VEGF蛋白含量,MTT... 目的研究血管内皮细胞生长因子反义寡核苷酸(VEGF-ASODN)对裸鼠荷人胃癌移植瘤微血管的生长抑制作用。方法人工合成硫代磷酸化VEGF-ASODN,转染胃癌细胞SGC-7901,实时荧光定量RT-PCR检测细胞RNA起始拷贝数,ELESA法检测VEGF蛋白含量,MTT检测细胞生存力,细胞生长曲线检测细胞生长。建立裸鼠荷胃癌移植瘤模型。实验分为4组:(1)VEGF-ASODN组,(2)错义寡核苷酸组,(3)生理盐水组,(4)无荷瘤对照组。结果VEGF-ASODN能降低胃癌细胞VEGFmRNA的水平,显著降低胃癌细胞及培养液VEGF蛋白含量,降低细胞生存力、抑制细胞生长。VEGF-ASODN还能显著降低荷瘤裸鼠血清VEGF蛋白水平、减小移植瘤的体积和重量、降低移植瘤微血管密度。结论VEGF-ASODN抑制移植瘤微血管的生长。 展开更多
关键词 血管内皮细胞生长因子反义寡核苷酸 胃癌细胞 微血管
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基质金属蛋白酶2和金属蛋白酶组织抑制因子2在乙酰肝素酶ASODN转染的裸鼠A375细胞移植瘤中的表达
12
作者 陈建立 张江安 +3 位作者 于建斌 孟静 李琳 陈燕辉 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期136-137,共2页
目的 探讨基质金属蛋白酶2(MMP2)和金属蛋白酶组织抑制因子2(TIMP2)在乙酰肝素酶反义寡核苷酸(ASODN)转染的裸鼠恶性黑素瘤移植瘤中的表达.方法 分空白组、无关序列(N-ODN)组、10 μmol/L ASODN组、20 μmol/L ASODN组和30μmol... 目的 探讨基质金属蛋白酶2(MMP2)和金属蛋白酶组织抑制因子2(TIMP2)在乙酰肝素酶反义寡核苷酸(ASODN)转染的裸鼠恶性黑素瘤移植瘤中的表达.方法 分空白组、无关序列(N-ODN)组、10 μmol/L ASODN组、20 μmol/L ASODN组和30μmol/L ASODN组5组,以脂质体包埋分别转染人恶性黑素瘤细胞株A375,后接种于裸鼠皮下,待成瘤后采用免疫组化SP法检测移植瘤中MMP2和TIMP2蛋白表达的变化.结果 各ASODN组裸鼠移植瘤中MMP2和TIMP2蛋白表达水平均较对照组、N-ODN组显著下调(P<0.05);ASODN3个浓度组(10、20、30 μmol/L)相比,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 乙酰肝素酶ASODN对裸鼠体内恶性黑素瘤移植瘤中的MMP2和TIMP2蛋白的表达有显著抑制效应. 展开更多
关键词 金属蛋白酶组织抑制因子2 基质金属蛋白酶2 asodn 细胞移植瘤 乙酰肝素酶 A375 裸鼠皮 转染
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VEGF-ASODN转染对胃癌细胞VEGF和survivin表达的影响 被引量:2
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作者 郑斌 杨策尧 段体德 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 2008年第10期983-987,共5页
目的观察血管内皮细胞生长因子反义寡核苷酸(VEGF-ASODN)转染胃癌细胞SGC-7901对血管内皮生长因子(VEGF)和生存素(survivin)表达的影响。方法人工合成硫代磷酸化VEGF-ASODN。实验分为5组:对照组,错义组,实验1组(转染浓度为100ng/mL),实... 目的观察血管内皮细胞生长因子反义寡核苷酸(VEGF-ASODN)转染胃癌细胞SGC-7901对血管内皮生长因子(VEGF)和生存素(survivin)表达的影响。方法人工合成硫代磷酸化VEGF-ASODN。实验分为5组:对照组,错义组,实验1组(转染浓度为100ng/mL),实验2组(转染浓度为400ng/mL)及实验3组(转染浓度为700ng/mL)。转染后实时荧光定量RT-PCR检测细胞RNA起始拷贝数;ELESA法检测细胞及培养上清液VEGF蛋白含量;Western-blot法检测细胞生存素蛋白表达量;流式细胞仪检测细胞凋亡;细胞生长曲线检测转染对细胞生长的影响。结果3个实验组VEGF mRNA水平和VEGF蛋白表达量及培养上清液VEGF蛋白含量均明显降低,survivin蛋白的表达水平随转染浓度的升高而降低,转染VEGF-ASODN能使胃癌细胞凋亡增加、细胞生长减缓。结论VEGF-ASODN转染胃癌细胞SGC-7901能显著抑制细胞VEGF的表达,促进细胞凋亡,抑制细胞增殖。 展开更多
关键词 胃肿瘤/病理学 血管内皮细胞生长因子 反义寡核苷酸 血管内皮生长因子 生存素 转染
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环氧合酶-2反义寡核苷酸对宫颈癌Hela细胞周期的影响
14
作者 张宏晶 刘斌 《中文科技期刊数据库(文摘版)医药卫生》 2023年第2期149-151,共3页
分析环氧合酶-2反义寡核苷酸对宫颈癌Hela细胞周期的影响。方法 选择本院2019年1月至2022年10月间自愿参与研究的40例宫颈癌患者,将每位患者宫颈癌Hela细胞周期进行观察。观察研究方法为对比分析。将每位患者的宫颈癌Hela细胞作为对照... 分析环氧合酶-2反义寡核苷酸对宫颈癌Hela细胞周期的影响。方法 选择本院2019年1月至2022年10月间自愿参与研究的40例宫颈癌患者,将每位患者宫颈癌Hela细胞周期进行观察。观察研究方法为对比分析。将每位患者的宫颈癌Hela细胞作为对照组,同时使用MEM培养基培养进行培养。培养过程中,观察宫颈癌Hela细胞周期的方法为像差倒置显微镜。培养的时候,分为四组:正常对照组、正义寡核苷酸转染组(SODNS组)、反义寡核苷酸转染组(ASODNS组)、脂质处理组。每份培养基经过48 h的处理,观察细胞周期的变化。结果 细胞形态和数目情况:宫颈癌Hela细胞贴壁生长;形态为不规格的三角形或者为梭形,细胞内部的细胞核形态为圆形或椭圆形,具有核仁;细胞透明性强;经过反义寡核苷酸的转染影响后,宫颈癌Hela细胞的生长状态较差;反义寡核苷酸能够对宫颈癌Hela细胞破坏;反义寡核苷酸浓度逐渐增加后,细胞碎片增多,24 h后细胞数目明显减少,折光性降低;48 h后,细胞形态发生明显变化,细胞质中出现颗粒物质,细胞核固缩,发生破裂和溶解,细胞间隙增大;反义寡核苷酸影响的宫颈癌Hela细胞都出现大量死亡漂浮情况;与对照组、脂质处理组、SODNS组的细胞周期对比分析,能够发现ASODNS组细胞的DNA在S期合成的时候,细胞占比量明显减少,在G2/M期的占比量增多,与其他三组均有明显的数据差异。与此同时,在G0/G1期的时候,细胞分布数据无明显的差异。结论 环氧合酶-2反义寡核苷酸对宫颈癌Hela细胞周期的G2/M、S期均均有影响,可抑制细胞S期,因此对该细胞有抑制繁殖作用。同时均有引发细胞再分布作用。临床治疗宫颈癌患者的时候,可选择COX-2抑制剂辅助治疗。 展开更多
关键词 asodnS COX-2 宫颈癌 妇科疾病 Hela细胞周期
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c-myc反义寡核苷酸对肾癌细胞的生长抑制作用及对细胞周期的影响 被引量:9
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作者 王子明 种铁 张鹏 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期611-612,623,共3页
目的 观察修饰的c myc反义寡核苷酸 (ASODN)对肾癌细胞的生长和细胞周期的影响。 方法 用人工合成的c mycASODN转染于培养的人肾癌细胞 ,观察其对瘤细胞的作用。结果 ①MTT法测定发现 ,与正义和错配链相比较 ,c mycASODN有明显抑制... 目的 观察修饰的c myc反义寡核苷酸 (ASODN)对肾癌细胞的生长和细胞周期的影响。 方法 用人工合成的c mycASODN转染于培养的人肾癌细胞 ,观察其对瘤细胞的作用。结果 ①MTT法测定发现 ,与正义和错配链相比较 ,c mycASODN有明显抑制肾癌细胞生长的作用 ,12 μmol·L-1c mycASODN组作用 4 8h ,对瘤细胞的生长抑制率为 4 7% ;该生长抑制作用随反义药物剂量的增加而增强 ,同时随作用时间的变化而变化。②流式细胞仪检测证明 ,c mycASODN对肾癌细胞周期的抑制作用在G1期到S期。结论 c 展开更多
关键词 C-MYC 反义寡核苷酸 肾癌 生长抑制 细胞周期 asodn 细胞培养
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Survivin mRNA反义寡核苷酸诱导胰腺癌细胞凋亡 被引量:11
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作者 王亚利 宋天保 +3 位作者 王西京 王中卫 宋潍 郝小静 《世界华人消化杂志》 CAS 2004年第8期1872-1874,共3页
目的:用反义寡核苷酸(ASODN)封闭胰腺癌细胞中Survivin 基因的表达,研究其诱导细胞凋亡的作用及其机制. 方法:用脂质体介导SurvivinASODN转染人胰腺癌细胞株SW1990细胞,用Annexin Ⅴ-FITC/PI复染、流式细胞术检测及电镜术观察凋亡,激酶... 目的:用反义寡核苷酸(ASODN)封闭胰腺癌细胞中Survivin 基因的表达,研究其诱导细胞凋亡的作用及其机制. 方法:用脂质体介导SurvivinASODN转染人胰腺癌细胞株SW1990细胞,用Annexin Ⅴ-FITC/PI复染、流式细胞术检测及电镜术观察凋亡,激酶活性检测法测定细胞内caspase-3活性变化,免疫沉淀法测定细胞内丝裂原活化蛋白激酶p38(p38MAPK)活性的变化早期细胞变化情况. 结果:脂质体介导SurvivinASODN转染胰腺癌细胞后细胞内p38MAPK及caspase-3活性较对照组明显升高(55.3% vs 2.9%,3.2%,4.5%,4.8%respectively,P<0.05).细胞出现典型的凋亡形态学特征,细胞凋亡率较对照组明显增加(8.81±1.33 vs 47.87±2.91,and 14.73±1.36 vs 23.47±3.61.P<0.05). 结论:脂质体介导转染Survivin ASODN可以诱导细胞激活,诱导活化进而诱导细胞发生凋亡. 展开更多
关键词 凋亡 asodn 胰腺癌细胞 诱导 脂质体介导 反义寡核苷酸 转染 RNA 形态学特征 免疫沉淀法
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原癌基因c-erbB_2、c-myb对小鼠卵母细胞体外成熟的影响 被引量:4
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作者 郑莉萍 吴磊 +1 位作者 汪小浪 郑月慧 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期712-715,共4页
目的:探讨原癌基因c-erbB2、c-myb对小鼠卵母细胞体外成熟的影响。方法:建立小鼠卵 母细胞体外培养模型,用不同浓度反义c-erbB2寡脱氧核苷酸(c-erbB2ASODN)和反义c-myb寡脱氧 核苷酸(c-myb ASODN)分别与未成熟卵母细胞共孵育,观察c-erbB... 目的:探讨原癌基因c-erbB2、c-myb对小鼠卵母细胞体外成熟的影响。方法:建立小鼠卵 母细胞体外培养模型,用不同浓度反义c-erbB2寡脱氧核苷酸(c-erbB2ASODN)和反义c-myb寡脱氧 核苷酸(c-myb ASODN)分别与未成熟卵母细胞共孵育,观察c-erbB2ASODN和c-myb ASODN对 卵母细胞体外成熟的影响。结果:c-erbB2ASODN和c-myb ASODN均能呈剂量依赖方式抑制24h 卵母细胞的GVBD率和PB1排出率,并显著延迟其成熟的时间,而无义tat寡脱氧核苷酸则无此 作用。结论:原癌基因c-erbB2和c-myb均在卵母细胞成熟过程中起着重要的作用。 展开更多
关键词 C-ERBB2 C-MYB 卵母细胞 反义寡脱氧核苜酸(asodn) 体外成熟
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Survivin反义寡核苷酸对人卵巢癌细胞株中survivin和SMAC/DIABLO基因表达的影响 被引量:4
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作者 孙艳 李勇 +3 位作者 范立侨 吴小华 程建新 赵群 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1571-1574,共4页
目的观察survivin反义寡核苷酸(ASODN)对人卵巢癌细胞株SKOV3中survivin、Smac/DIABLO表达的影响,探讨survivin、Smac/DIABLO在ASODN诱导卵巢癌细胞凋亡和细胞周期改变中的作用和分子机制。方法用脂质体(LipofectamineTM2000)介导surviv... 目的观察survivin反义寡核苷酸(ASODN)对人卵巢癌细胞株SKOV3中survivin、Smac/DIABLO表达的影响,探讨survivin、Smac/DIABLO在ASODN诱导卵巢癌细胞凋亡和细胞周期改变中的作用和分子机制。方法用脂质体(LipofectamineTM2000)介导survivin ASODN转染人卵巢癌细胞株SKOV3,用MTT比色法检测细胞生长活性,流式细胞学技术检测细胞凋亡指数、细胞周期分布及survivin、Smac蛋白表达改变,逆转录酶链反应检测survivin、Smac/DIABLO基因表达改变。结果同对照组比较,不同浓度ASODN作用后细胞生长明显减慢,转染后48hIC50在600nmol/l左右。用600nmol/L ASODN转染48h后,细胞凋亡指数(AI)明显增加,(t=6.3671,P<0.05);更多的细胞停留在G0/G1期(t=10.3832,P<0.01)。Survivin mRNA和蛋白表达明显下调(t=3.5031,P<0.05,t=7.8146,P<0.01),SmacmRNA和蛋白表达上调(t=2.8011,P<0.05,t=11.3917,P<0.01)。结论ASODN诱导细胞凋亡,使更多的细胞停留在G0/G1期,减少进入有丝分裂细胞数的作用,是通过下调survivin基因,上调Smac基因表达来共同完成的,survivin、Smac/DIABLO基因在调节SKOV3细胞周期、凋亡的功能上密切相关,二者的相互作用是卵巢癌发生、发展的重要分子机制之一。 展开更多
关键词 卵巢癌 SURVIVIN基因 Smac/DIABLO基因 asodn
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hTERT基因反义核酸对K562细胞端粒酶活性的影响 被引量:16
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作者 何冬梅 张洹 jnu.edu.cn 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第7期653-655,共3页
目的:探讨人类端粒酶逆转录酶(humantelomerasereversetranscriptase,hTERT)基因的反义寡核苷酸(antisenseoligodeoxynucleotide,ASODN)对K562细胞端粒酶活性的影响。方法:采用多聚酶链反应-酶联免疫测定(PCR-ELISA)方法检测... 目的:探讨人类端粒酶逆转录酶(humantelomerasereversetranscriptase,hTERT)基因的反义寡核苷酸(antisenseoligodeoxynucleotide,ASODN)对K562细胞端粒酶活性的影响。方法:采用多聚酶链反应-酶联免疫测定(PCR-ELISA)方法检测人工合成的反义脱氧寡核苷酸处理K562细胞前后端粒酶活性的改变,以逆转录PCR(RT-PCR)分析hTERT基因mRNA表达水平。结果:hTERT基因的ASODN作用于K562细胞后,hTERTmRNA表达水平显著下调,其端粒酶活性明显受到抑制。结论:hTERT基因的ASODN可以在翻译水平显著抑制K562细胞的端粒酶活性,hTERT基因与端粒酶的活性密切相关。 展开更多
关键词 HTERT基因 K562细胞 端粒酶 asodn 肿瘤
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半乳糖基修饰的反义硫代寡核苷酸对肝癌多药耐药细胞株MDR_1基因过度表达的抑制作用 被引量:2
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作者 郭军 王宝成 +2 位作者 董冰 师秋丽 狄剑时 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 1998年第7期480-483,共4页
设计合成三种互补MDR1mRNA的反义硫代寡核苷酸(ASODN),分别互补MDR1mRNA序列起始区、含AUG起始密码子区及针对Loop形成位点区的序列,作用于阿霉素(DOX)诱导的肝癌多药耐药细胞株BEL-7402... 设计合成三种互补MDR1mRNA的反义硫代寡核苷酸(ASODN),分别互补MDR1mRNA序列起始区、含AUG起始密码子区及针对Loop形成位点区的序列,作用于阿霉素(DOX)诱导的肝癌多药耐药细胞株BEL-7402/DOX。经流式细胞分析及RT-PCR的方法检测,发现三种ASODN均能不同程度地降低BEL-7402/DOX细胞膜表面P-GP含量;同时MDR1mRNA的表达也有轻度降低,其中尤以互补MDR1mR-NALoop形成位点的ASODN抑制作用最强。以导向配体Gal10-PLL修饰此ASODN后,作用于BEL-7402/DOX细胞,发现与相同剂量未修饰ASODN比较,P-GP含量由76.8%降至19.8%;对ADM的IC50由1.28μg/ml降至0.42μg/ml。实验说明,半乳糖基修饰的互补MDR1mRNALoop形成位点的ASODN能够明显降低肝癌多药耐药细胞膜表面P-GP的含量,并较大程度地逆转多药耐药细胞BEL-7402/DOX对化疗药物的耐受性。 展开更多
关键词 肝肿瘤 药物疗法 半乳糖 asodn 多药耐药
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