气相色谱-质谱分析北细辛根和根茎中的挥发性成分

采用色谱 质谱联用技术对北细辛根和根茎的挥发性成分进行分离分析 ,鉴定出了 36种化学成分 ,主要成分为十五烷、甲基丁香酚、黄樟醚、3 ,5 二甲氧基甲苯等。对照北细辛根和根茎的分析结果可以发现 ,两者的挥发性成分基本相同 ,但含量有较大差异 ,这为北细辛的临床合理用药及质量控制标准的确定提供了实验依据。

细辛挥发油抗植物病原真菌活性初步研究

Effect of essential oil from Asarum heterotropoides Fr.Schmidt var.mandshuricum(Maxim.)Kitag on hypha growth of sixteen plant pathogenic fungi was tested at concentration of 500 μg/mL.The inhibition rates to fourteen plant pathogenic fungi were above 50%,which showed the essential oil had broad-spectrum antifungal activity.According to the toxicity curve of essential oil to Alternaria humicola,the EC50 to mycelium growth and spores germination were 326.86 μg/mL and 406.24 μg/mL respectively.Furthermore,the effect of essential oil on cell membrane potential of A.humicola was tested by the conductivity method.The results showed the action of essential oil was changing osmosis of cell membrane of fungi.

不同产地和采收期辽细辛挥发油的含量测定

目的对不同产地和采收期的辽细辛进行挥发油的含量测定,探讨其主要成分甲基丁香酚的含量。方法按《中华人民共和国药典》2000版一部附录XD挥发油测定法对11个产地和某产地五到十月采收的辽细辛进行了挥发油含量测定,用气相色谱法对甲基丁香酚进行了分析。结果黑龙江(Y8)和桓仁2号(Y10)的辽细辛中挥发油及甲基丁香酚的含量较高,质量较好。九月采收的辽细辛中挥发油和甲基丁香酚的含量均为最高,辽细辛的最佳采收期应为九月。结论应将挥发油含量高,主要有效成分甲基丁香酚含量高作为评价辽细辛药材质量和确定其最佳采收期的合理依据。

北细辛挥发油对5种镰刀菌的抑菌活性及其成分分析

以水蒸气蒸馏法提取北细辛挥发油,通过菌丝生长速率法和孢子萌发法,研究其对5种马铃薯干腐病致病菌镰刀菌的抑菌效果,优化提取方法,并采用气质联用法分析挥发油的化学成分。结果表明北细辛挥发油对5种供试镰刀菌抑制作用显著,且抑菌活性与挥发油浓度呈剂量依赖性。不同方法提取的4组挥发油共鉴定出51种成分,其中18种组分相同,均以甲基丁香酚和黄樟醚为主,两者总含量达50%以上。地下部分挥发油含量明显高于地上部分,且超声辅助浸提法提取率更高。因此,北细辛挥发油可进一步开发为植物源农药,具有很好的开发前景。

辽细辛根及根茎化学成分的分离与鉴定

目的研究辽细辛干燥根及根茎的化学成分。方法运用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、制备HPLC等分离手段进行化学成分的分离纯化,并通过波谱分析技术鉴定其化学结构。结果从辽细辛根及根茎中分离得到16个化合物,分别鉴定为1-O-对香豆酰基-β-D-木糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(1-O-p-coumaroyl-β-D-xylopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyraboside,1)、1-O-阿魏酰基-β-D-木糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(1-O-feruloyl-β-D-xylopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyraboside,2)、4,2',4',6'-四羟基查耳酮-2',4'-二-O-β-D-吡喃葡萄糖(4,2',4',6'-tetrahydroxy-chalcone-2',4'-di-O-β-D-glucopyraboside,3)、柚皮素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(naringenin-7-O-β-D-glucopyranoside,4)、8-去甲氧基-马兜铃内酰胺N-β-D-吡喃葡萄糖苷(8-desmethoxy-aristolactam-N-β-Dglucopyranoside,5)、(R)-(+)-5-(2,3-二羟丙基)-1,3-亚甲二氧基苯((R)-(+)-5-(2,3-dihydroxypropyl)-1,3-benzodioxole,6)、3-甲基-6-羟基-8-甲氧基-3,4-二氢异香豆素(3-methyl-6-hydroxy-8-methoxy-3,4-dihydroisocoumarin,7)、(+)-7'-甲氧基落叶松树脂醇((+)-7'-methoxylariciresinol,8)、肉豆蔻醚(myristicin,9)、黄樟醚(safrole,10)、(-)细辛脂素((-)-asarinin,11)、5,7-二-O-β-D-吡喃葡萄糖基柚皮素(5,7-di-O-β-D-glucopy-ranosyl-2(S)-naringenin,12)、甲基丁香酚(methyleugenol,13)、卡枯醇(kakuol,14)、2-甲氧基-4,5-亚甲二氧基苯丙酮(2-methoxyl-4,5-methylene-dioxypropiophenone,15)和β-谷甾醇(β-sitosterol,16)。结论化合物6、7和8为首次从细辛属植物中分离得到,化合物3和5为首次从辽细辛植物中分离得到。

辽细辛地下部分化学成分的分离与鉴定

目的对辽细辛地下部分进行化学成分研究。方法采用反复硅胶色谱法分离纯化,通过理化性质和NMR谱学数据鉴定其化学结构。结果从辽细辛地下部分分离得到7个化合物,分别鉴定为卡枯醇(kakuol,1)、2-甲氧基-4,5-亚甲二氧基苯丙酮(2-methoxy-4,5-methylene-dioxypropi-ophenone,2)、(-)-芝麻脂素((-)-sesamin,3)、(-)-细辛脂素((-)-asarinin,4)、pluviatilol(5)、5-羟甲基糠醛(5-hydroxymethylfurfural,6)、正丁基-吡喃果糖苷(n-butylfructopyranoside,7)。结论化合物6、7为首次从细辛属中分离得到,化合物2、5为首次从该植物中分离得到。

辽细辛地上部分化学成分的分离与鉴定

目的对辽细辛（Asarum heterotropides Fr Schmidt. var. mandshuricum（Maxim.）Kitag.）地上部分的化学成分进行研究。方法采用硅胶柱色谱等方法进行分离纯化，根据理化性质和NMR波谱数据进行结构鉴定。结果分离得到6个化合物，分别鉴定为（10bS） 8,9-dihydroxy-1,5,6,10b-tetrahydro-2H-pyrrolo[2,1-a]isoquinolin-3-one（1）、尼古丁酸（nicotinic acid，2）、5-羟甲基糠酸（5-hydroxymethyl-furoic acid ，3）、琥珀酸（succinic acid，4）、山奈酚（kaempferol，5）、山奈酚3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（kaempferol-3-O-β-D-glucopyranoside，6）。结论化合物1～3为首次从细辛属植物中分离得到，化合物5为首次从辽细辛中分离得到。

辽细辛果实中马兜铃酸A的含量测定

目的比较辽细辛果实中不同部位和不同产地辽细辛果实与种子中马兜铃酸A的含量。方法采用HPLC法对辽细辛果实中不同部位和不同产地辽细辛种子进行马兜铃酸A的含量测定。结果辽细辛果实各部位以及各产地的辽细辛种子中均含有马兜铃酸A,辽细辛果实以种子中的马兜铃酸A含量最高,测定的各产地辽细辛种子以吉林省富江乡和清原县北三家乡产辽细辛种子中马兜铃酸A含量最低。结论辽细辛果实各部位中均含有马兜铃酸A,其中以种子中的含量为最高,不同产地的辽细辛种子中马兜铃酸A的含量不同。

细辛挥发油对植物病原真菌的抑制作用研究

目的测定细辛挥发油抗药用植物病原真菌的活性，探讨其抗菌作用机制。方法以“甲霜灵”和“农抗120”为对照农药，采用菌丝生长速率法测定细辛挥发油对5种植物病原真菌的毒力作用，求得毒力方程和EC50，比较细辛挥发油与两种常用农药的作用；以枸杞炭疽病菌为作用对象，采用电导率法测定细辛挥发油对菌丝细胞膜的损伤作用。结果在5种供试菌中，细辛挥发油对西洋参疫病菌的抑制作用最强，EC50值为59．70μg／mL，与“甲霜灵”相近；对枸杞炭疽病菌抑制作用最弱，EC50值为410.20μg／mL，介于“甲霜灵”和“农抗120”之间；对砂仁叶枯病菌、烟草赤星病菌、土生链格孢菌的EC50在296.48～334.13μg／mL，高于“甲霜灵”，与“农抗120”相近。供试菌在细辛挥发油作用5．0、10.0h后，菌丝细胞外渗液电导率值随着作用时间延长而增加，分别为7．9001、9．4760μS／cm，明显高于空白对照组1．8677、1.7956μS／cm（P〈0．05），与对照农药“农抗120”作用相近，略高于“甲霜灵”组。结论细辛挥发油对5种植物病原真菌的抑制作用居于“甲霜灵”和“农抗120”之间，细辛挥发油可以造成枸杞炭疽病菌菌丝细胞膜损伤，引起内容物外渗，细胞膜是细辛挥发油对植物病原真菌的作用靶点之一。

不同产地辽细辛中马兜铃酸的痕量检测

目的:比较不同产地不同部位辽细辛中马兜铃酸的痕量。方法:采用高效液相色谱法对不同产地不同部位的辽细辛进行了痕量检查。结果:地上部分不含或较少含马兜铃酸,而地下部分大多含有马兜铃酸。结论:不同产地、不同药用部位的辽细辛中马兜铃酸的含量不同。

辽细辛挥发油化学成分的研究

本文报道了对辽细辛挥发油化学成分进行提取、分离和鉴定的结果。测得辽细辛挥发油的含量为2.5％;用GC/MS法鉴定了25种化合物;并用峰面积归一化法通过HP59970C化学工作站数据处理系统测得各化学成分在挥发油中的百分含量。

HPLC法测定种子经处理后种植的辽细辛中马兜铃酸A的含量

目的比较不同种子处理方法对辽细辛中马兜铃酸A的含量的影响。方法采用不同方法对同一批辽细辛种子进行处理并种植,采收2年生不同月份的辽细辛植株进行马兜铃酸A的含量测定;采用Diamonsil(钻石)C18色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm),以0.05 mol.L-1磷酸二氢钠水溶液-乙腈(体积比为60∶40)为流动相,流速为1.0 mL.min-1,柱温为30℃,检测波长为390 nm,进样量为10μL,外标法计算含量。结果种植2年后的辽细辛药材各部位中均含有马兜铃酸A且地上部分含量明显高于地下部分,其含量逐渐减少,到8、9月份已趋于稳定。结论采用水超声处理辽细辛种子的方法可以除去细辛中的部分马兜铃酸,但不能完全除去,为细辛中的马兜铃酸的去除提供了参考依据。

不同产地北细辛的种质特征

目的比较不同产地北细辛的种质特征。方法根据《中华人民共和国国家标准-农作物种子检验规程》和自建的马兜铃酸A检测方法,对8个产地的北细辛种子进行了水分、生活力、千粒质量、发芽率和马兜铃酸A含量的测定,并用SPSS13.0软件对检测结果进行聚类分析。结果各产地的种子总体上粒大饱满,活力较好,但水分都比较高,且都含有马兜铃酸A。结论清原县北三家乡和本溪谢家所产的北细辛种子从总体上来看,水分和马兜铃酸A的含量较低,生活力等其他指标较高,质量相对比较好。

应用TTC法快速测定北细辛种子生活力

研究北细辛种子生活力的快速测定方法,为北细辛种子利用及安全保存提供技术支撑。采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法,设置不同的浸种时间、TTC浓度、染色温度、染色时间的正交试验,对北细辛种子生活力进行测定。影响北细辛种子生活力测定值大小的因素依次为TTC浓度>染色温度>染色时间>浸种时间;最佳条件:温水浸种6h、0.1%TTC溶液、30℃避光染色18h;最佳反应条件下测得种子生活力与发芽率实测值很相近。TTC法可作为北细辛种子生活力测定的标准方法,对北细辛栽培及种质资源保存具有重要意义。

不同产地辽细辛质量比较

目的:比较不同产地中药材辽细辛的质量。方法:用水蒸气蒸馏法提取并测定挥发油的含量,GC-MS法测定挥发油中甲基丁香酚、黄樟醚和榄香脂素的相对含量,HPLC测定马兜铃酸A的含量,原子分光仪等测定药材中无机元素的含量,并用SPSS统计分析系统进行聚类分析。结果:化学试验测定与聚类分析的结果基本一致,5个产地的辽细辛药材聚为3类。结论:应把挥发性成分(挥发油总量、甲基丁香酚、榄香脂素)、有益的无机元素含量高,毒副作用成分黄樟醚、马兜铃酸A和重金属元素含量低作为评价中药材辽细辛质量的依据。将化学试验与聚类分析相结合,使结果分析更为快速、准确。

北细辛、华细辛、汉城细辛的急性毒性评价

目的:考察2010版中国药典中三种细辛散剂、水煎剂、挥发油的小鼠急性毒性,为临床安全合理用药提供急性毒理学依据。方法:采用Bliss法、最大给药量测定法。结果:北细辛:散剂LD50为4.8g/kg、水煎剂最大给药量为240g/kg、挥发油LD50为2.53mL/kg;华细辛:散剂LD50为7.5g/kg、水煎剂LD50为100.8g/kg、挥发油LD50为3.13mL/kg;汉城细辛:散剂最大给药量为31.2g/kg、水煎剂LD50为48.7g/kg、挥发油LD50为1.92mL/kg。结论:药典规定的三种细辛的不同制备方法和药用部位的小鼠急性毒性不同。

北细辛散剂、水煎剂、挥发油的急性毒性评价

目的:考察北细辛散剂、水煎剂、挥发油对小鼠的急性毒性,以期为临床安全、合理用药提供急性毒理学依据。方法:采用Bliss法及最大给药量测定法。结果:北细辛散剂LD50为4.8g/kg,水煎剂最大给药量为240g/kg,挥发油LD50为2.53mL/kg。结论:北细辛3种制剂的小鼠急性毒性强度依次为散剂、挥发油、水煎剂。

北细辛叶片显微结构观察

观察北细辛叶片、叶柄的显微结构,以揭示阴生植物北细辛的叶片特征。采用石蜡切片法对北细辛叶片横切面和叶柄横切面进行观察研究;采用扫描电镜对北细辛叶表面进行观察研究。结果发现,上、下表皮细胞厚度差异不明显,栅栏组织细胞含有叶绿体,叶绿体紧贴细胞壁,海绵组织也含有较多叶绿体;叶片下表皮的非腺毛分布多于上表皮;下表皮有蜡质层而上表皮没有;气孔轴式为环式,分布数目也是下表皮较上表皮多。叶柄解剖结构看出,叶柄横切面呈三角形,具有3个维管束鞘。北细辛叶片横切面解剖结构符合阴生植物叶片结构特点,叶表皮分布的非腺毛和蜡质层等特点是叶片对生态环境不断适应的体现,叶柄具有茎的结构特点。

HPLC-UV检测北细辛及数种中成药中的马兜铃酸A

目的:检查北细辛药材及数种中成药中的马兜铃酸A。方法:采用高效液相色谱法,紫外检测器,以Hypersil C18柱(250mm×4.6mm,5μm)测定马兜铃酸A的含量,流动相为甲醇-水-二甲基甲酰胺-冰醋酸(25∶13∶1∶1,v/v),流速1.0mL·min-1,检测波长315nm,柱温35℃。结果:在所选定的色谱条件下,细辛药材及含细辛药材的中成药未检出马兜铃酸A。结论:该检测方法测得马兜铃酸A最低检出量为1.8×10-4μg,为马兜铃酸A的检测提供了一种灵敏、经济、可行的科学方法。北细辛药材及含细辛药材的中成药中均未检出马兜铃酸A。

北细辛及其近缘植物叶片显微结构比较研究

采用常规石蜡切片法和无色指甲油印痕法对北细辛及其近缘植物叶片解剖结构进行比较研究。结果表明,北细辛及其近缘植物在叶片表皮细胞大小及排列方式、栅栏组织、叶肉细胞形态及排列方式和叶片表皮气孔密度等方面存在差异。北细辛叶片栅栏组织由1层柱状细胞组成;汉城细辛和华细辛叶片栅栏组织均由2层柱状细胞组成;尾花细辛和花叶尾花细辛叶片栅栏组织由1层柱状细胞组成,但其细胞较小且排列疏松;青城细辛、川滇细辛和长毛细辛栅栏组织分化不明显。北细辛、汉城细辛和华细辛叶肉细胞叶绿体小而密,青城细辛和长毛细辛叶肉细胞叶绿体较大,川滇细辛和尾花细辛叶肉细胞叶绿体较小,青城细辛、长毛细辛、川滇细辛和花叶尾花细辛叶肉细胞叶绿体数量较少且主要分布于叶肉组织上层细胞,叶肉细胞中叶绿体间的差异也可为细辛属植物分类鉴别提供参考。