气相色谱-质谱分析北细辛根和根茎中的挥发性成分

采用色谱 质谱联用技术对北细辛根和根茎的挥发性成分进行分离分析 ,鉴定出了 36种化学成分 ,主要成分为十五烷、甲基丁香酚、黄樟醚、3 ,5 二甲氧基甲苯等。对照北细辛根和根茎的分析结果可以发现 ,两者的挥发性成分基本相同 ,但含量有较大差异 ,这为北细辛的临床合理用药及质量控制标准的确定提供了实验依据。

细辛挥发油抗植物病原真菌活性初步研究

Effect of essential oil from Asarum heterotropoides Fr.Schmidt var.mandshuricum(Maxim.)Kitag on hypha growth of sixteen plant pathogenic fungi was tested at concentration of 500 μg/mL.The inhibition rates to fourteen plant pathogenic fungi were above 50%,which showed the essential oil had broad-spectrum antifungal activity.According to the toxicity curve of essential oil to Alternaria humicola,the EC50 to mycelium growth and spores germination were 326.86 μg/mL and 406.24 μg/mL respectively.Furthermore,the effect of essential oil on cell membrane potential of A.humicola was tested by the conductivity method.The results showed the action of essential oil was changing osmosis of cell membrane of fungi.

北细辛种子贮藏过程中生活力及种胚形态后熟研究

通过对北细辛（Asarum heterotropoides Fr.Var.mandshuricum（Maxim）kitag.）种子种胚萌发能力的验证、贮藏过程中种子活力测定以及种胚形态石蜡切片观察。结果表明,离体胚在25℃恒温、3 500-4 000 lx光照条件或暗条件下培养均枯死,北细辛种子采收后种胚不具有萌发能力。种子在3 500-4 000 lx光照条件下培养,5周后开始萌发,而在暗培养条件下,5周后则不萌发。室温条件下沙藏,北细辛种子活力保持不变,活力指数为88.3%-88.7%。种胚形态解剖结构观察发现,北细辛种胚发育过程为经过球形胚、心形胚、鱼雷型胚、具有完整子叶胚等阶段,其胚轴伸长、胚根伸长直至发芽。

北细辛种子萌发特性研究

北细辛（Asarum heterotrpoides Fr.var.mandshuricum （Maxim.）kitag.）是东北道地中药材,为多年生阴生植物,以种子繁殖.种子为胚形态后熟和生理后熟型种子,生产上,从播种到发芽约需10个月时间.本文通过对北细辛种子萌发特性进行研究,揭示光照、温度、种子干燥方式及激素对种子萌发能力的影响,对其生态适应性进行了讨论.结果表明：（1）北细辛种子对光照敏感,是需光种子.（2）恒温15℃下培养的种子,5周可达到最大萌发率,而其他温度条件下则需要8 ～12周,15℃是最适萌发温度.（3）在低于10℃或高于28℃下,种子不能萌发.（4）变温10℃/20℃,15 ℃/25℃,20℃/30℃条件下,种子萌发率分别为79.92％、94.52％和18.21％,差异显著（p＜0.05）,导致种子萌发率低的主要因素是高温.种子在6月末脱离母体是躲避高温、适应生态环境以延续生命的一种方式.（5）经赤霉素处理,可促进种子提前1周萌发,并提高种子的萌发速率,但不能提高种子萌发率.（6）赤霉素可以解除种子上胚轴休眠.经赤霉素处理的已萌发的种子,4周后可以发芽.依据本试验结果,可实现北细辛种子在2个月内生根发芽.

北细辛挥发油对5种镰刀菌的抑菌活性及其成分分析

以水蒸气蒸馏法提取北细辛挥发油,通过菌丝生长速率法和孢子萌发法,研究其对5种马铃薯干腐病致病菌镰刀菌的抑菌效果,优化提取方法,并采用气质联用法分析挥发油的化学成分。结果表明北细辛挥发油对5种供试镰刀菌抑制作用显著,且抑菌活性与挥发油浓度呈剂量依赖性。不同方法提取的4组挥发油共鉴定出51种成分,其中18种组分相同,均以甲基丁香酚和黄樟醚为主,两者总含量达50%以上。地下部分挥发油含量明显高于地上部分,且超声辅助浸提法提取率更高。因此,北细辛挥发油可进一步开发为植物源农药,具有很好的开发前景。

北细辛种子萌发过程中内源激素含量的变化

目的:通过对北细辛种子萌发过程中的内源激素含量和变化规律进行测定和分析,阐明4种内源激素在促进种胚发育和种子萌发过程中的作用机制,为北细辛种子保存、加速种子萌发进程等提供理论基础。方法:采用酶联免疫法(ELISA)对北细辛种子萌发过程中的赤霉素(GA3)、吲哚乙酸(IAA)、玉米素核苷(ZR)和脱落酸(ABA)进行测定。结果:从新鲜种子到沙藏14 d,种子中的ABA含量呈逐渐增加趋势,从第21天开始,ABA含量呈逐渐下降。从新鲜种子到沙藏35 d,GA3、ZR含量逐渐增加而后逐渐降低,呈"抛物线"变化趋势。IAA含量变化曲线呈"波浪型",新鲜种子中的IAA含量最高,沙藏70 d后,含量降到最小值。结论:种胚发育过程伴随着赤霉素(GA3)、吲哚乙酸(IAA)、玉米素核苷(ZR)和脱落酸(ABA)含量的消长,激素含量的变化影响着种胚形态发育和种子萌发。

不同产地和采收期辽细辛挥发油的含量测定

目的对不同产地和采收期的辽细辛进行挥发油的含量测定,探讨其主要成分甲基丁香酚的含量。方法按《中华人民共和国药典》2000版一部附录XD挥发油测定法对11个产地和某产地五到十月采收的辽细辛进行了挥发油含量测定,用气相色谱法对甲基丁香酚进行了分析。结果黑龙江(Y8)和桓仁2号(Y10)的辽细辛中挥发油及甲基丁香酚的含量较高,质量较好。九月采收的辽细辛中挥发油和甲基丁香酚的含量均为最高,辽细辛的最佳采收期应为九月。结论应将挥发油含量高,主要有效成分甲基丁香酚含量高作为评价辽细辛药材质量和确定其最佳采收期的合理依据。

辽细辛根及根茎化学成分的分离与鉴定

目的研究辽细辛干燥根及根茎的化学成分。方法运用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、制备HPLC等分离手段进行化学成分的分离纯化,并通过波谱分析技术鉴定其化学结构。结果从辽细辛根及根茎中分离得到16个化合物,分别鉴定为1-O-对香豆酰基-β-D-木糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(1-O-p-coumaroyl-β-D-xylopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyraboside,1)、1-O-阿魏酰基-β-D-木糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(1-O-feruloyl-β-D-xylopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyraboside,2)、4,2',4',6'-四羟基查耳酮-2',4'-二-O-β-D-吡喃葡萄糖(4,2',4',6'-tetrahydroxy-chalcone-2',4'-di-O-β-D-glucopyraboside,3)、柚皮素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(naringenin-7-O-β-D-glucopyranoside,4)、8-去甲氧基-马兜铃内酰胺N-β-D-吡喃葡萄糖苷(8-desmethoxy-aristolactam-N-β-Dglucopyranoside,5)、(R)-(+)-5-(2,3-二羟丙基)-1,3-亚甲二氧基苯((R)-(+)-5-(2,3-dihydroxypropyl)-1,3-benzodioxole,6)、3-甲基-6-羟基-8-甲氧基-3,4-二氢异香豆素(3-methyl-6-hydroxy-8-methoxy-3,4-dihydroisocoumarin,7)、(+)-7'-甲氧基落叶松树脂醇((+)-7'-methoxylariciresinol,8)、肉豆蔻醚(myristicin,9)、黄樟醚(safrole,10)、(-)细辛脂素((-)-asarinin,11)、5,7-二-O-β-D-吡喃葡萄糖基柚皮素(5,7-di-O-β-D-glucopy-ranosyl-2(S)-naringenin,12)、甲基丁香酚(methyleugenol,13)、卡枯醇(kakuol,14)、2-甲氧基-4,5-亚甲二氧基苯丙酮(2-methoxyl-4,5-methylene-dioxypropiophenone,15)和β-谷甾醇(β-sitosterol,16)。结论化合物6、7和8为首次从细辛属植物中分离得到,化合物3和5为首次从辽细辛植物中分离得到。

辽细辛地下部分的化学成分(Ⅱ)

目的对辽细辛地下部分进行化学成分研究。方法采用反复硅胶柱色谱法分离纯化,通过理化性质和谱学分析鉴定化合物结构。结果分离得到6个化合物,分别鉴定为马兜铃酰胺Ⅰ(aristololactamⅠ,1)、7-甲氧基马兜铃酰胺(7-methoxy-aristololactam,2)、马兜铃酸Ⅳa(aristolochicacidⅣa,3)、对羟基苯甲酸(p-hydroxybenzoic acid,4)、5,7-二-O-β-D-吡喃葡萄糖基柚皮素(5,7-di-O-β-D-glucpyranosyl-narigenin,5)、2,6-二甲氧基-4-甲基苯基-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(2,6-dime-thoxy-4-methylphenyl-1-O-β-D-glucopyranoside,6)。结论化合物4、6为细辛属内首次分离得到,化合物2、5为从该植物中首次分离得到。

辽细辛果实中马兜铃酸A的含量测定

目的比较辽细辛果实中不同部位和不同产地辽细辛果实与种子中马兜铃酸A的含量。方法采用HPLC法对辽细辛果实中不同部位和不同产地辽细辛种子进行马兜铃酸A的含量测定。结果辽细辛果实各部位以及各产地的辽细辛种子中均含有马兜铃酸A,辽细辛果实以种子中的马兜铃酸A含量最高,测定的各产地辽细辛种子以吉林省富江乡和清原县北三家乡产辽细辛种子中马兜铃酸A含量最低。结论辽细辛果实各部位中均含有马兜铃酸A,其中以种子中的含量为最高,不同产地的辽细辛种子中马兜铃酸A的含量不同。

细辛挥发油对植物病原真菌的抑制作用研究

目的测定细辛挥发油抗药用植物病原真菌的活性，探讨其抗菌作用机制。方法以“甲霜灵”和“农抗120”为对照农药，采用菌丝生长速率法测定细辛挥发油对5种植物病原真菌的毒力作用，求得毒力方程和EC50，比较细辛挥发油与两种常用农药的作用；以枸杞炭疽病菌为作用对象，采用电导率法测定细辛挥发油对菌丝细胞膜的损伤作用。结果在5种供试菌中，细辛挥发油对西洋参疫病菌的抑制作用最强，EC50值为59．70μg／mL，与“甲霜灵”相近；对枸杞炭疽病菌抑制作用最弱，EC50值为410.20μg／mL，介于“甲霜灵”和“农抗120”之间；对砂仁叶枯病菌、烟草赤星病菌、土生链格孢菌的EC50在296.48～334.13μg／mL，高于“甲霜灵”，与“农抗120”相近。供试菌在细辛挥发油作用5．0、10.0h后，菌丝细胞外渗液电导率值随着作用时间延长而增加，分别为7．9001、9．4760μS／cm，明显高于空白对照组1．8677、1.7956μS／cm（P〈0．05），与对照农药“农抗120”作用相近，略高于“甲霜灵”组。结论细辛挥发油对5种植物病原真菌的抑制作用居于“甲霜灵”和“农抗120”之间，细辛挥发油可以造成枸杞炭疽病菌菌丝细胞膜损伤，引起内容物外渗，细胞膜是细辛挥发油对植物病原真菌的作用靶点之一。

HPLC法测定北细辛中芝麻脂素和细辛脂素的含量

目的：建立北细辛中Ｌ－芝麻脂素和Ｌ－细辛脂素的含量测定方法，为该药材提供质量控制标准。方法：以醋酸乙酯为溶剂，加热回流１２０ｍｉｎ提取；用ＨＰＬＣ法测定：使用ＨｙｐｅｒｓｉｌＢＤＳＣ１８色谱柱（２５０ｍｍ×４６ｍｍ，５μｍ），流动相：乙腈－水（５０∶５０），流速１２ｍＬ·ｍｉｎ－１，检测波长：２８７ｎｍ，纸速：２ｍｍ·ｍｉｎ－１，进样量：１０μＬ，外标法定量。结果：两组分的平均回收率分别为芝麻脂素１００４％（ＲＳＤ＝１９％）和细辛脂素１００２％（ＲＳＤ＝１６％）。结论：方法快速简便，结果准确，可用于细辛药材质量控制。

细辛不同品系性状比较分析

[目的]比较不同品系北细辛生长发育性状,进行新品种选育。[方法]对"北细01"、"北细02"和"北细03"3个细辛品系的单株鲜重、单株根鲜重、发育芽数及挥发油含量等性状进行调查分析。[结果]各品系产量、挥发油均在第5年增长最快;"北细03"产量、发育能力均高于其他2个品系,挥发油含量高于"北细01",低于"北细02;"5年生各品系干燥根挥发油含量均达到《中华人民共和国药典》(2005年版)规定值,6年生各品系干燥根挥发油含量均高于《中华人民共和国药典》(2005年版)规定值。[结论]"北细03"是较优良的北细辛品系,有望成为新的优良品种。

辽细辛地下部分化学成分的分离与鉴定

目的对辽细辛地下部分进行化学成分研究。方法采用反复硅胶色谱法分离纯化,通过理化性质和NMR谱学数据鉴定其化学结构。结果从辽细辛地下部分分离得到7个化合物,分别鉴定为卡枯醇(kakuol,1)、2-甲氧基-4,5-亚甲二氧基苯丙酮(2-methoxy-4,5-methylene-dioxypropi-ophenone,2)、(-)-芝麻脂素((-)-sesamin,3)、(-)-细辛脂素((-)-asarinin,4)、pluviatilol(5)、5-羟甲基糠醛(5-hydroxymethylfurfural,6)、正丁基-吡喃果糖苷(n-butylfructopyranoside,7)。结论化合物6、7为首次从细辛属中分离得到,化合物2、5为首次从该植物中分离得到。

细辛愈伤组织诱导条件的研究

[目的]筛选北细辛、汉城细辛愈伤组织诱导的适宜条件。[方法]选用北细辛、汉城细辛不同的外植体,在不同的培养基上加入不同浓度配比的外源激素进行诱导。[结果]北细辛、汉城细辛的根茎为最佳外植体。北细辛最适培养基为MS+0.60 mg/L6-BA+0.15 mg/LNAA,汉城细辛最适培养基为MS+0.60 mg/L6-BA+0.10 mg/LNAA。[结论]该研究为再生植株诱导、规模化生产、新品种的培育和推广提供理论依据。

不同产地辽细辛中马兜铃酸的痕量检测

目的:比较不同产地不同部位辽细辛中马兜铃酸的痕量。方法:采用高效液相色谱法对不同产地不同部位的辽细辛进行了痕量检查。结果:地上部分不含或较少含马兜铃酸,而地下部分大多含有马兜铃酸。结论:不同产地、不同药用部位的辽细辛中马兜铃酸的含量不同。

辽细辛地上部分化学成分的分离与鉴定

目的对辽细辛（Asarum heterotropides Fr Schmidt. var. mandshuricum（Maxim.）Kitag.）地上部分的化学成分进行研究。方法采用硅胶柱色谱等方法进行分离纯化，根据理化性质和NMR波谱数据进行结构鉴定。结果分离得到6个化合物，分别鉴定为（10bS） 8,9-dihydroxy-1,5,6,10b-tetrahydro-2H-pyrrolo[2,1-a]isoquinolin-3-one（1）、尼古丁酸（nicotinic acid，2）、5-羟甲基糠酸（5-hydroxymethyl-furoic acid ，3）、琥珀酸（succinic acid，4）、山奈酚（kaempferol，5）、山奈酚3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（kaempferol-3-O-β-D-glucopyranoside，6）。结论化合物1～3为首次从细辛属植物中分离得到，化合物5为首次从辽细辛中分离得到。

HPLC法测定种子经处理后种植的辽细辛中马兜铃酸A的含量

目的比较不同种子处理方法对辽细辛中马兜铃酸A的含量的影响。方法采用不同方法对同一批辽细辛种子进行处理并种植,采收2年生不同月份的辽细辛植株进行马兜铃酸A的含量测定;采用Diamonsil(钻石)C18色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm),以0.05 mol.L-1磷酸二氢钠水溶液-乙腈(体积比为60∶40)为流动相,流速为1.0 mL.min-1,柱温为30℃,检测波长为390 nm,进样量为10μL,外标法计算含量。结果种植2年后的辽细辛药材各部位中均含有马兜铃酸A且地上部分含量明显高于地下部分,其含量逐渐减少,到8、9月份已趋于稳定。结论采用水超声处理辽细辛种子的方法可以除去细辛中的部分马兜铃酸,但不能完全除去,为细辛中的马兜铃酸的去除提供了参考依据。

辽细辛挥发油化学成分的研究

本文报道了对辽细辛挥发油化学成分进行提取、分离和鉴定的结果。测得辽细辛挥发油的含量为2.5％;用GC/MS法鉴定了25种化合物;并用峰面积归一化法通过HP59970C化学工作站数据处理系统测得各化学成分在挥发油中的百分含量。

应用TTC法快速测定北细辛种子生活力

研究北细辛种子生活力的快速测定方法,为北细辛种子利用及安全保存提供技术支撑。采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法,设置不同的浸种时间、TTC浓度、染色温度、染色时间的正交试验,对北细辛种子生活力进行测定。影响北细辛种子生活力测定值大小的因素依次为TTC浓度>染色温度>染色时间>浸种时间;最佳条件:温水浸种6h、0.1%TTC溶液、30℃避光染色18h;最佳反应条件下测得种子生活力与发芽率实测值很相近。TTC法可作为北细辛种子生活力测定的标准方法,对北细辛栽培及种质资源保存具有重要意义。