细辛愈伤组织诱导条件的研究

[目的]筛选北细辛、汉城细辛愈伤组织诱导的适宜条件。[方法]选用北细辛、汉城细辛不同的外植体,在不同的培养基上加入不同浓度配比的外源激素进行诱导。[结果]北细辛、汉城细辛的根茎为最佳外植体。北细辛最适培养基为MS+0.60 mg/L6-BA+0.15 mg/LNAA,汉城细辛最适培养基为MS+0.60 mg/L6-BA+0.10 mg/LNAA。[结论]该研究为再生植株诱导、规模化生产、新品种的培育和推广提供理论依据。

细辛煎剂对动物心血管的作用

本实验对细辛煎剂治疗冠心病、心纹痛和高血压病进行了多方面的研究。发现细辛煎剂有缓和的降血压作用,其作用可维持1～1.5小时。细辛煎剂还有使血管扩张与引起β受体兴奋以及降低中心静脉压、右室压、肺楔压的作用。同时还对冠心病心绞痛伴高血压的病人进行了单一糖浆制剂的治疗观察,其好转率较高,心电图改善明显。

细辛毒性的研究述评

细辛的毒性,是历代医药学家争论不已的问题。从细辛述要、毒性研究、毒性定级及运用4个方面进行述评,认识细辛的毒性,来安全有效地使用细辛。

华细辛(异)丁香酚-O-甲基转移酶(IEMT)基因的分离与功能分析

甲基丁香酚(methyleugenol,ME)是中药细辛Asari Radix et Rhizoma挥发油中主要活性成分之一,具有镇痛、麻醉、抗炎等功效,其在植物体内的生物合成是初始前体物苯丙氨酸在众多酶的催化下经过一系列中间产物而完成的过程。丁香酚-O-甲基转移酶(eugenol O-methyltransferase,EOMT)是其中的关键酶之一,可使丁香酚苯环4位上的羟基甲基化,从而将丁香酚转化为甲基丁香酚。该研究首次从华细辛Asarum sieboldii中克隆1条(异)丁香酚-O-甲基转移酶[(iso)eugenol O-methyltransferase,IEMT]基因,其开放阅读框包含1 113 bp,编码1个由370个氨基酸残基组成的蛋白质;该蛋白具有甲基转移酶特征性结构域,以及二聚化结构域;构建原核表达重组质粒pET28a(+)-AsIEMT,诱导目标蛋白表达并分离纯化蛋白,以及对目标蛋白进行体外酶学分析,结果表明,AsIEMT具有双重催化活性,既能催化丁香酚生成甲基丁香酚,也能催化异丁香酚生成甲基异丁香酚,但后者效率更高;以异丁香酚为底物时,酶反应动力学常数K_(m)为(0.90±0.06)mmol·L^(-1),V_(max)为(1.32±0.04) nmol·s^(-1)·mg^(-1)。该研究拓展了对苯丙素类次生代谢关键酶基因的了解,为中药细辛品质形成机制的阐明提供了重要的研究基础。

华细辛转录组SSR标记的开发及其在华细辛遗传多样性分析中的应用

为探索华细辛的遗传多样性,该研究基于转录组测序结果进行SSR标记的开发,并以来自不同地区的华细辛5个种群为分析样本,利用GenALEx 6.5、NTSYS 2.1和Structure 2.3.4等软件进行遗传多样性评估。结果显示,从华细辛转录组中筛选得到的16个多态性丰富且重复性好的SSR标记,以其两侧序列为模板设计引物,能够对华细辛5个种群的150个个体样本进行稳定扩增,共得到56个多态片段,平均每对引物扩增3.5个多态片段,变化范围为2~8个,检测到平均期望杂合度(H_(e))、Shannon′s多样性指数(I)、Nei′s基因多样性指数(H)、多态性信息含量指数(PIC)的均值分别为0.172、0.281、0.429、0.382。种群间遗传分化系数(F_(ST))均值为0.588,与分子方差分析(AMOVA)结果[华细辛种群间变异程度(69%)大于种群内变异程度(31%)]相一致,各种群的多态位点百分率(PPL)范围从大到小依次为SNJ>LN>SY>SZ>TB。主成分分析(PCoA)和UPGMA聚类分析进一步显示,华细辛个体样本均按地理分布进行遗传聚类,与Structure聚类分析结果一致。综上所述,从转录组中开发的SSR标记能够有效评估华细辛自然分布种群间的遗传分化程度和种群遗传结构,揭示华细辛遗传多样性较为贫乏,遗传变异主要体现在种群水平,以及种群间遗传分化程度与地理距离存在相关性。