三种化合物对石棉致HEL细胞增殖周期及c-fos癌基因转录活性改变的影响

目的寻求一种适宜的石棉表面改性剂。方法利用流式细胞技术测定细胞周期以及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交技术测定ｃｆｏｓ癌基因转录活性，观察几种化合物对温石棉促人胚肺（ＨＥＬ）细胞增殖作用的影响。结果将ＨＥＬ细胞与温石棉共同孵育后，其Ｓ期细胞所占比例增加，ｃｆｏｓ癌基因的转录活性也明显增强。用３种化合物预处理的石棉组，其Ｓ期细胞所占比例以及ｃｆｏｓ癌基因的转录活性均低于未处理石棉组。结论用上述３种化合物预处理石棉，均可不同程度地抑制石棉的促细胞增殖作用。

几种化合物对石棉诱导人胚肺细胞产生超氧阴离子的抑制作用

用不同浓度的柠檬酸铝、混合稀土或硒酸钠溶液浸泡温石棉１ 小时后，再将其与人胚肺（ＨＥＬ） 细胞共同孵育，测定培养液中超氧阴离子（Ｏ－２ ） 含量。结果显示，温石棉可诱导ＨＥＬ细胞产生Ｏ－２ 。但与未处理温石棉组相比，经３ 种化合物预处理的温石棉所致ＨＥＬ细胞产生的Ｏ－２ 量明显降低，其抑制率随化合物浓度的增加而增高，呈一定的剂量依赖性。表明用上述３ 种化合物预处理温石棉，均可抑制其诱导ＨＥＬ细胞产生Ｏ－２ 。

温石棉的遗传毒性及三种化合物的阻断作用

为了寻求一种理想的石棉表面改性剂，本研究观察了柠檬酸铝、混合稀土或亚硒酸钠对温石棉诱导人胚肺（ＨＥＬ）细胞染色体改变的影响。结果显示，温石棉可致ＨＥＬ细胞染色体畸变率和姊妹染色单体交换率升高。经三种化合物预处理的温石棉，其所诱导的ＨＥＬ细胞的染色体畸变率和姊妹染色单体交换率均低于未处理温石棉组。提示，用三种化合物预处理温石棉，均可降低温石棉对细胞染色体的损伤作用。

三种化合物对温石棉促人胚肺细胞增殖作用的影响

为了探讨几种化合物对温石棉促人胚肺（ＨＥＬ）细胞增殖作用的影响，用不同浓度的柠檬酸铝、混合稀土或亚硒酸钠溶液浸泡温石棉１小时后，再将其与人胚肺细胞共同孵育，通过测定［３Ｈ］ＴｄＲ掺入量，来了解人胚肺细胞的增殖状况。结果显示，２．５～１０μｇ／ｍｌ的温石棉、时间作用在２４小时之内，或２０～８０μｇ／ｍｌ温石棉、时间作用在６小时之内均可促使人胚肺细胞增殖。与未处理温石棉组相比，经三种化合物处理的温石棉其促细胞增殖作用明显下降。提示，采用三种化合物溶液浸泡温石棉。

几种化合物对温石棉诱导人胚肺细胞蛋白激酶C活性的影响

为了探讨几种化合物对温石棉诱导人胚肺(HEL)细胞蛋白激酶C(PKC)活性的影响,该研究用不同浓度的柠檬酸铝、混合稀土或亚硒酸钠溶液浸泡温石棉1小时后,再将其与HEL细胞共同孵育24小时,测定了HEL细胞胞浆和胞膜中PKC的活性。其结果显示:随着石棉剂量的增加,HEL细胞胞浆和胞膜中的PKC活性逐渐升高,均呈明显的剂量依赖性;经3种化合物预处理的石棉,其所诱导的HEL细胞胞浆和胞膜中的PKC活性均明显低于未处理温石棉组。笔者提示:温石棉可能通过改变细胞内PKC的活性进一步促进肿瘤的发生;用3种化合物预处理温石棉,均可抑制温石棉对HEL细胞PKC活性的诱导作用。

三种化合物对石棉诱导人胚肺细胞产生过氧化氢抑制作用的比较研究

用不同浓度的柠檬酸铝、混合稀土及亚硒酸钠溶液浸泡温石棉１小时后，再将其与人胚肺（ＨＥＬ）细胞共同孵育，测定培养液中的过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）含量。结果显示，未经处理的温石棉可诱导ＨＥＬ细胞产生Ｈ２Ｏ２，并呈明显的剂量反应关系。与未处理温石棉组相比，经３种化合物预处理的温石棉所致ＨＥＬ细胞产生的Ｈ２Ｏ２量明显降低，其抑制率随化合物浓度的增加而增高，呈一定的剂量依赖性。结果表明，用３种化合物预处理温石棉，均可抑制其诱导ＨＥＬ细胞产生Ｈ２Ｏ２。

混合稀土和柠檬酸铝对温石棉致人胚肺细胞谷胱甘肽含量改变的影响

目的寻求一种适宜的石棉表面改性剂。方法用不同浓度的混合稀土或柠檬酸铝溶液浸泡温石棉１小时后，再将其与人胚肺（ＨＥＬ）细胞共同孵育，测定ＨＥＬ细胞的谷胱甘肽（ＧＳＨ）含量。结果随着石棉剂量的增加或染毒时间的延长，ＨＥＬ细胞的ＧＳＨ含量明显降低。经混合稀土或柠檬酸铝预处理的石棉，其所诱导的ＨＥＬ细胞ＧＳＨ下降的程度明显减弱。结论用混合稀土或柠檬酸铝预处理温石棉，均可降低温石棉对ＨＥＬ细胞的毒性作用。

温石棉改性前后对人胚肺细胞癌基因改变的比较

目的寻求一种适宜的石棉表面改性剂。方法利用斑点杂交和流式细胞技术观察柠檬酸铝、混合稀土或亚硒酸钠等３种化合物对温石棉致人胚肺（ＨＥＬ）细胞转化过程中ｃＨａｒａｓ癌基因和Ｐａｎｒａｓ小鼠抗体（Ｐ２１ｒａｓ）蛋白的影响。结果在温石棉染毒组，ｃＨａｒａｓ癌基因的转录水平及Ｐ２１ｒａｓ蛋白含量明显高于对照组。在上述３种化合物预处理的温石棉组，ＨＥＬ细胞ｃＨａｒａｓ癌基因的转录水平及Ｐ２１ｒａｓ蛋白含量均明显低于未处理温石棉组。结论用上述３种化合物预处理温石棉，有可能减轻温石棉对人类的致癌危害性。

400mL·L^(-1)氧气对体外培养的人胚肺成纤维细胞增殖的促进作用

目的探讨400 mL·L-1O2对体外培养的人胚肺成纤维细胞(HELFs)增殖的促进作用。方法将生长良好的HELFs按13传代后,用无血清培养基培养24 h,分别置于空气及400 mL·L-1O2的细胞培养箱中培养5 d,每天收集细胞并计数、绘制细胞生长曲线;于培养后1 d、3 d及5 d,作Giemsa液染色,计算细胞分裂指数;培养后5 d收集细胞,流式细胞术检测细胞周期。结果细胞生长曲线显示400 mL·L-1O2较空气利于细胞生长;400 mL·L-1O2干预细胞3 d、5 d后细胞分裂指数分别为2.47%和2.03%,均明显高于空气组(1.90%和1.65%)(P<0.01,0.05);与空气组比较,400 mL·L-1O2干预细胞5 d后,HELFs处于G0/G1期细胞的比率明显减少(P<0.01),S期细胞比率显著增加(P<0.01),G2/M期细胞比率无明显差异(P>0.05)。结论 400 mL·L-1O2促进体外培养的HELFs的生长和增殖。

亚砷酸钠对人胚肺成纤维细胞增殖活性及细胞周期的影响

目的探讨亚砷酸钠对人胚肺成纤维细胞(HELF)增殖活性及细胞周期的影响。方法将体外培养的HELF细胞分别暴露于浓度为0(对照)、20、40、60μmol/L的亚砷酸钠培养基24、48和72 h。采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,采用流式细胞仪检测细胞周期分布。结果与对照组相比,各浓度亚砷酸钠染毒24、48、72 h后细胞抑制率均升高,差异有统计学意义(P<0.05);HELF细胞抑制率与亚砷酸钠浓度及作用时长均呈正相关(P<0.05)。HELF细胞G2+M期的比例仅在染毒24、48 h时均与亚砷酸钠染毒浓度呈正相关(P<0.05)。HELF细胞S期比例在染毒48 h时与亚砷酸钠染毒浓度呈负相关(P<0.05)。结论亚砷酸钠染毒可降低HELF细胞的增殖活性,并能够选择性地将细胞阻滞在合成末期及分裂期(G2+M期)。