黑熊源蛔虫的分子鉴定及其线粒体pcox1、pnad5基因的系统发育分析

为鉴定黑熊源蛔虫的种类及分析其系统的发育特征,本实验对长沙生态动物园黑熊肠道内分离的6株蛔虫采用PCR扩增其线粒体部分cox1基因(pcox1)和部分nad5基因(pnad5)并测序,采用DNAStar 5.0软件分析这两种基因与GenBank中不同蛔虫相应基因序列的同源性;利用Dna SP 5.0软件分析pcox1和pnad5基因的单倍型数量、核苷酸多样性以及序列之间的核苷酸差异;并采用MEGA7软件构建二者的进化树分析黑熊源蛔虫的遗传进化关系。PCR结果显示,6株黑熊源蛔虫pcox1、pnad5基因分别为408 bp和528 bp,两种基因序列之间的同源性分别为99.30%~100%和99.20~100%,与Gen Bank中转移贝蛔虫相应基因序列的同源性分别为96.80%~99.80%和95.10%~95.30%。DnaSP 5.0软件分析结果显示,黑熊源蛔虫pcox1基因共检测到5个单倍型,单倍型多样性和核苷酸多样性分别为0.933±0.015和0.00675,核苷酸差异平均值为2.733;pnad5基因共检测到6个单倍型,单倍型多样性和核苷酸多样性分别为1.000±0.00926和0.00756,平均核苷酸差异为4.000。基于pcox1和pnad5基因构建的系统进化树显示,6株黑熊源蛔虫均与转移贝蛔虫聚为同一分支;与贝氏西蛔虫聚为一大支,与其他蛔虫遗传距离较远。上述结果表明6株黑熊源蛔虫均为转移贝蛔虫,且他们的遗传变异程度均较低,pcox1基因和pnad5基因均可作为转移贝蛔虫分类鉴定的分子标记。本研究首次对黑熊源蛔虫进行分子鉴定并分析其的遗传进化关系,为转移贝蛔虫的分类鉴定以及野生黑熊蛔虫病的防治提供参考。

4种漂浮法分离土壤中人蛔虫卵的效果比较

目的比较4种不同漂浮法从土壤中分离人蛔虫卵的效果,从而摸索出一种行之有效的、适用于现场的从土壤中分离人蛔虫卵的方法。方法在不含人蛔虫卵的土壤中按一定比例加入人蛔虫卵(包括受精蛔虫卵和未受精蛔虫卵),分别用4种漂浮法检查,比较检出效果。结果硫酸锌溶液漂浮法、饱和硝酸钠溶液漂浮法、饱和柠檬酸三钠溶液漂浮法及饱和盐水漂浮法的受精蛔虫卵检出率依次为6.89%、26.85%、8.46%和0.21%(F=221.45,P<0.01);总蛔虫卵检出率依次为6.29%、25.49%、7.77%和0.19%(F=223.41,P<0.01)。结论4种漂浮法均能分离出土壤中的人蛔虫卵,以饱和硝酸钠溶液漂浮法的效果最佳,且操作简便,适合大批量土壤样本的人蛔虫卵分离检查。

福建省人体重要寄生虫感染家庭聚集性分析

目的调查福建省人体重要寄生虫感染家庭聚集性的现状。方法按《全国人体重要寄生虫病现状调查实施细则》规定的方法,对福建省13个县(市、区)39个抽样点的调查结果,采用二项分布拟合原理对重要感染虫种进行家庭聚集性分析。结果共调查6219户,20195人,蛔虫、鞭虫、钩虫感染率分别为9.55%、11.48%、19.73%,其分布均存在显著的家庭聚集性(P均<0.001)。结论福建省人体肠道蛔虫、鞭虫和钩虫的感染均有家庭聚集性,建议以家庭为主体加强健康教育力度和驱虫,以提高和巩固防治效果.。

PCRR-FLP方法在蛔虫种间鉴别上的应用

研究应用PCR RFLP方法初步鉴别了 4种不同蛔虫。从猪蛔虫、人蛔虫、犬弓首蛔虫及鸡蛔虫中分别提取基因组DNA ,通过PCR扩增得到长度分别约为 450bp、450bp、530bp、550bp的PCR产物。经与国外报道相比较 ,确认完整扩增出 4种蛔虫的第二内部转录间隔区 (ITS 2 )片段。PCR产物经限制性内切酶HaeⅢ和HinfⅠ酶切鉴定 ,通过产生的特异性片段首先可以区分犬弓首蛔虫与鸡蛔虫。通过对 4种蛔虫的基因组DNA进行扩增 ,得到长度分别约为 980bp、980bp、1 0 50bp、1 0 70bp的PCR产物。经与国外报道相比较 ,确认完整扩增出 4种蛔虫的ITS 1、ITS 2及 5 8S核糖体DNA。PCR产物经限制性内切酶HaeⅢ酶切鉴定 ,通过产生的特异性片段可以区分出猪蛔虫与人蛔虫。通过PCR RFLP分析 ,初步推测猪蛔虫与人蛔虫仍为两个独立虫种 。

湖北省农村居民蛔虫感染危险因素的病例对照研究

为了解湖北省农村居民蛔虫感染主要危险因素,采用1∶1配对病例对照研究方法,从2003年湖北省人体重要寄生虫病现状调查所得蛔虫感染者中,随机抽取200例作为病例组,按性别和年龄匹配200例健康对照,应用SAS统计软件进行条件Logistic回归分析。单因素分析发现6个因素与蛔虫感染有关;多因素分析表明,蛔虫感染与使用未经无害化处理人粪尿施肥、落地食物不洗捡食和喝不洁生水之间存在显著的相关关系,其OR值分别为2.785、2.669和0.051。加强粪便无害化处理,改进不良劳动生产方式,改善不良饮食卫生习惯,有助于减少蛔虫感染。

棕熊蛔虫ITS rDNA的PCR扩增与序列分析

目的以核糖体DNA（rDNA）的第一与第二内转录间隔区序列（ITS-1及ITS-2）鉴定从广州动物园棕熊分离的蛔虫种类。方法应用PCR方法以保守引物NC5和NC2扩增蛔虫样本的ITS及5．8SrDNA序列，将PCR扩增出的片段纯化后克隆至pGEM-TEsay载体，用菌落PCR及酶切鉴定阳性菌落，对阳性菌落进行测序，并与Gen．Bank“公布的人蛔虫（Ascaris lumbricoides）、猪蛔虫（Ascariis suum）、浣熊贝利斯蛔虫（Baylisascaris procyonh）及狮弓蛔虫（Toxascaris leonina）ITS序列比较。结果从棕熊分离的2个蛔虫样本的ITS及5．8SrDNA总长为859—861bp，种内相似性为99．7％，与GenBank^TM公布的人蛔虫、猪蛔虫、浣熊贝利斯蛔虫及狮弓蛔虫的相似性分别为84．6％、84．5％、89．3％及72．3％，序列差异明显。结论棕熊蛔虫不同于上述种类蛔虫，可能为Baylisacaris transfuga.

黔、川、浙选点调查农村土壤蛔虫卵及其他寄生虫的污染情况(英文)

目的 :进一步了解中国长江以南农户蛔虫卵污染情况。方法 :选择 3个试点县 ,贵州省都匀、四川省南川和浙江省余姚农户各 2 0户 ,每户查家庭内外共 7处 ,及中、小学各 1所和菜场、肉场各 2处。虫卵用 5 % Na OH分离 ,用饱和硫酸镁离心漂浮后镜检。结果 :以贵州省都匀农户的土壤标本蛔虫卵数最多 (1 6 2 2 .5 /1 0 g) ,四川南川次之 (1 0 99.2 /1 0 g) ,浙江余姚最少 (2 49.0 /1 0 g)。农户的 7处中以厕所土壤污染最严重 ,占蛔虫卵总数的 6 4.3% ,依次为牲畜棚 (9.3% )、庭院 (7.3% )、厨房 (7.2 % )、门槛 (6 .5 % )、客堂 (3.1 % )和卧室 (2 .2 % )。此外尚见鞭虫卵、肝毛细线虫卵、犬弓蛔虫卵、类圆线虫卵、微小膜壳绦虫卵、蛲虫卵、贾第虫包囊和艾美尔球虫卵囊等。结论 :结果表明所查地区农村土壤受蛔虫卵等污染严重。

南昌市2005年14岁以下儿童蛔虫感染监测

[目的]了解和掌握南昌市14岁以下儿童蛔虫感染的动态变化规律,为科学防治蛔虫感染提供重要依据。[方法]采用粪检生理盐水直接涂片法,检测蛔虫卵;以市区为单位,采用分层随机抽样的方法,对相应辖区内14岁以下儿童以年龄组分层,在每个年龄组内随机抽取不少于400人进行了蛔虫感染监测。[结果]南昌市2005年14岁以下儿童蛔虫平均感染率为1.08%;不同年龄组蛔虫感染率差异有统计学意义(χ2=16.36,P﹤0.05);9岁组蛔虫感染率最高,为1.44%。[结论]南昌市2005年14岁以下儿童蛔虫平均感染率较低。

基于nad5基因分析白狮蛔虫种系发育关系

为分析白狮蛔虫湖南动物园分离株线粒体nad5的遗传差异,并利用nad5序列分析白狮蛔虫与其他蛔虫的种系遗传关系,应用PCR技术对白狮蛔虫线粒体nad5的部分序列进行克隆和序列测定,利用Clustal X2.0程序对测序所得序列进行比对,再运用Mega4.1程序进行NJ法绘制种系发育树。结果表明:所获得nad5序列长度基本一致,约530 bp,15个样品分离株之间的同源性为97.4%~99.8%,通过构建系统种系发育,结果显示15个白狮蛔虫分离株与狮弓蛔虫位于同一大分支,与其他蛔虫所属分支具有较远的距离,得到较为明显的鉴别。狮弓蛔虫nad5序列种内较为保守,但种间差异明显,nad5基因可以作为理想的分子标记应用于狮弓蛔虫的分子鉴定和种间遗传变异研究,从而为狮弓蛔虫的群体遗传研究奠定基础。

使君子提取物对感染猪蛔虫小鼠的驱虫试验

选择50只昆明种(km)小白鼠,分成5组,其中3组因使君子提取物浓度不同而分,其余一个为对照组,一个为空白组,为了探究使君子提取物的驱虫效果,进行了为期1个月的试验。结果表明,使君子提取物具有较好的驱除猪蛔虫的效果。

大熊猫等8种野生哺乳动物蛔虫的线粒体COXⅠ和COXⅡ基因的亲缘关系分析

为了探讨寄生于大熊猫、小熊猫、北极熊、棕熊东北亚种、棕熊西藏亚种、黑熊四川亚种、黑猩猩和白眉长臂猿体内蛔虫的分类地位,采用PCR技术扩增了这些野生动物体内寄生蛔虫的线粒体COXⅠ、COXⅡ基因序列,并与GenBank中注册的同源性序列进行了分析。序列分析结果显示:扩增的8种野生哺乳动物蛔虫的COXⅠ、COXⅡ基因长度均分别为393和582bp,其中大熊猫与小熊猫及4种熊科动物蛔虫COXⅠ和COXⅡ基因的相似性分别为94.8%～95.0%和94.9%～95.5%;黑猩猩和白眉长臂猿蛔虫的COXⅠ、COXⅡ基因的相似性分别为99.8%和99.5%。分子系统树(NJ/MP/ML)表明,寄生在大熊猫、小熊猫和4种熊科动物体内的蛔虫均为贝蛔属(Baylisascaris)蛔虫;而黑猩猩和白眉长臂猿体内寄生的蛔虫应为蛔属(Ascaris)蛔虫。同时,分析结果也揭示了蛔虫与宿主之间存在协同进化关系。

安徽省土源性线虫病监测点居民生境中蛔虫卵污染情况监测报告

目的了解农村居民的菜园、厕所周边、厨房和庭院4类环境蛔虫卵污染情况。方法选择安徽蒙城县立仓镇路楼村、含山县清溪镇新兴村和霍山县下符桥镇圣人山村为观察地点,每个村抽取10户采集菜园、厕所周边、庭院、厨房四类地点的土样。采用饱和的硝酸钠漂浮镜检法检查4类环境土样蛔虫卵污染情况。结果4类生境蛔虫卵总检出率为35%,其中菜园、厕所周边、庭院、厨房蛔虫卵检出率分别为33.3%,11.1%,33.3%和50.0%。活蛔虫卵总检出率26.7%。结论居民生境中蛔虫卵污染较大,有潜在感染的危险。

湖北省中小学生蛔虫感染现状分析

目的掌握湖北省1992～2003年中小学生蛔虫感染现状，分析防治工作存在的问题和薄弱环节。方法1992年以来的中小学生常见病综合防治工作资料、调查资料、学校卫生统计年报表及国内外相关文献资料，进行分析评价。姑果1992年全省中小学学生肠道蛔虫感染率为25．97％，到2000年下降至10．57％，达到了以省为单位终期规划目标，但2003年农村中小学生肠道蛔虫感染出现反弹。小学生的肠道蛔虫感染阳性率明显高于中学生，农村中小学学生肠道蛔虫感染率高于城市。结论中小学生蛔虫感染呈逐年下降趋势，中小学生蛔虫病防治工作的重点应为农村及小学生。

大熊猫蛔虫ITS及5.8SrDNA序列的克隆与分析

基于核糖体DNA第一与第二转录间隔序列以及5.8S序列,以分离自广州动物园大熊猫体内的蛔虫为研究对象,用保守引物NC_5和NC_2对核糖体DNA(rDNA)的内转录间隔区ITS-1,ITS-2及5.8S序列进行PCR扩增,扩增后的片段纯化后克隆至pGEM-Teasy载体,重组质粒通过菌液PCR鉴定后,对阳性菌落进行序列测定及分析,鉴定大熊猫蛔虫的种类。结果显示,目的片段总长为910 bp,2个不同样品之间的ITS及5.8S序列没有差异,与GenBank^(TM)中的拜林蛔线虫(Baylisascaris transfuga)、猪蛔虫(Ascaris suum)和人蛔虫(Ascaris lumbricoides)的ITS序列相似性分别为96.6%、82.9%和82.7%。结果表明,此次分离的大熊猫蛔线虫可能为拜林蛔线虫。

双羟萘酸噻嘧啶咀嚼片抗猪蛔虫的药理效应

目的 :研究双羟萘酸噻嘧啶咀嚼片抗猪蛔虫的药理效应。方法 :将双羟萘酸噻嘧啶咀嚼片、普通片与阿苯哒唑等抗寄生虫药对小猪人工感染蛔虫病理模型进行治疗 ,采用改良加藤氏厚涂片法比较上述各药治疗前后的 EPG(克粪便虫卵数 )和虫卵阴转率。结果 :双羟萘酸噻嘧啶咀嚼片与片剂一样在肠虫营养液中 ,显著引起蛔虫虫体僵硬 ,导致猪蛔虫头颈段活动停止。双羟萘酸噻嘧啶咀嚼片 8m g· kg- 1 和 10 mg· kg- 1 组对小猪感染蛔虫均具有非常显著的驱治效果 ,治疗后虫卵阴转率达 97.2 6 %和 10 0 % (88h)、97.5 1%和 10 0 % (186 h) ,与阴性对照组比较有显著性差异 ;10 m g· kg- 1 组虫卵阴转率及 EPG显著高于阿苯哒唑 (肠虫清 )对照组 ,P<0 .0 5。急性毒性试验结果表明小鼠腹腔注射试验药混悬液 L D50 为 12 7.74～ 16 7.86 m g· kg- 1 ;小鼠累积灌胃给予该药的最小致死量大于 8g· kg- 1。结论

小熊猫蛔虫ITS及5.8S rDNA序列的克隆与分析

以广州动物园小熊猫体内分离出的蛔虫为研究对象,运用PCR方法,以保守引物NC5和NC2扩增其核糖体DNA(rDNA)的内转录间隔区(ITS)和5.8S序列,并对扩增后的片段进行纯化、克隆至pGEM-Teasy载体、转化、测序和序列分析,以鉴定小熊猫蛔虫的种类。结果显示2条蛔虫样品的ITS及5.8S rDNA序列基本一致,总长为913 bp,样品间序列相似性为99.7%。将序列与GenBank^(TM)公布的相关序列进行比较分析,结果显示2条蛔虫的ITS及5.8S序列与黑熊横走贝蛔虫(Baylisascaris transfuga注册号AB571304)相似性分别为98.1%、98.4%,与大熊猫西氏贝蛔虫(Baylisascaris schroederi注册号JN210912)相似性分别为96.9%、97.1%,与猪蛔虫(Ascaris suum注册号AB571302)相似性分别为89.9%、90.1%,与人蛔虫(Ascaris lumbricoides注册号AB571296)相似性分别为89.8%、90.1%,ITS-1序列与浣熊贝蛔虫(Baylisascaris procyonis注册号AB053230)相似性分别为92.0%、92.3%。研究结果表明小熊猫体内分离的蛔虫可能为贝蛔属蛔虫,从而为蛔虫的进一步分类、鉴定和遗传变异研究奠定了基础。

丙硫咪唑药糖在重疫区控制肠道线虫病的报告

本文应用丙硫咪唑药糖，在肠道线虫病重流行区，对４４１例患者进行了疗效观察，取得了较为满意的效果。４００ｍｇ一次顿服和４００ｍｇ连报二天对钩虫、蛔虫及鞭虫的虫卵阴转率前者分别为４５．８％、９７．７％和４６．４％，后者分别为８６．７％、９７．８％和４７．６％。４００ｍｇ连服二天对钩虫的疗效显著优于丙硫咪唑片剂及噻嘧啶片剂，对蛔、鞭虫疗效无显著性差异，该药糖副反应轻，口感好，味道甜，服用方便，群众乐意接受。适用于中小学校、幼儿园、农村村民的群体防治肠道线虫病。

双氧水灌肠及内服大承气汤治疗肠蛔虫堵塞12例临床观察

目的:探讨双氧水灌肠及内服大承气汤治疗肠蛔虫堵塞的疗效。方法:用双氧水灌肠及内服大承气汤和全身支持疗法治疗肠蛔虫堵塞12例。结果:12例痊愈,无任何并发症。结论:双氧水灌肠结合内服大承气汤治疗肠蛔虫堵塞具有疗程短、经济、疗效可靠的优点,适于基层医院推广。

2002年六盘水市某公立小学学生蛔虫感染情况调查

[目的]了解六盘水市小学生蛔虫感染情况。[方法]采用直接涂片法镜检蛔虫卵。[结果]共检查1 560人,阳性112人,检出率为7.2%。其中,男生775人,阳性人数为77人,检出率为9.9%;女生790人,阳性35人,检出率为4.4%。[结论]蛔虫感染仍然是小学生普遍存在的健康问题,男生感染率比女生高。加强学校健康教育工作,组织统一的驱蛔服药仍然是必要的。

东北虎源蛔虫线粒体cox1基因序列进化分析研究

为了解东北虎源蛔虫与其他蛔虫的种群遗传关系,本研究对湖南省长沙生态动物园东北虎粪便中采集的蛔虫成虫的线粒体DNA中细胞色素I(cox1)基因序列进行扩增,将测序结果与GenB ank中登录的其他蛔虫cox1序列进行对比及种系发育树分析。结果显示,来自长沙生态动物园7个东北虎蛔虫样品cox1序列长度基本一致,为413 bp^414 bp,与猫弓首蛔虫同源性最高,达98.4%以上,而且系统进化分析显示所有样品均与猫弓首蛔虫位于同一分支。该结果表明,pcox1序列种内相对保守,种间差异较大,因此可以作为猫科弓首蛔虫的种间遗传变异研究的分子遗传标记,从而为蛔虫的群体遗传研究奠定了基础。