氯胺酮快速抗抑郁机制及不良反应的研究进展

目的对氯胺酮治疗抑郁症的可能作用机制及临床不良反应进行系统阐述,以期为氯胺酮的临床研究及新一代抗抑郁药的研制提供思路及参考。方法从中国知网(CNKI)、万方中文数据库、Web of Science数据库及PubMed数据库检索2012年5月至2022年5月收录的相关文献;以“氯胺酮、艾司氯胺酮、抑郁症、难治性抑郁症、重度抑郁症、N-甲基-D-天冬氨酸受体、α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑-丙酸受体、脑源性神经营养因子、雷帕霉素靶蛋白、肠道菌群、真核延伸因子2激酶、不良反应”为中文检索词,以“ketamine,esketamine,depression,treatment resistant depression,major depressive disorder,NMDAR,AMPAR,BDNF,TOR,gut microbiota,eEF2K,side effect”为英文检索词,最终纳入83篇文献进行研究分析。结果与结论氯胺酮是一种N-甲基-D-天冬氨酸受体(N-methyl-d-aspartate receptors,NMDAR)拮抗剂,由(S)-氯胺酮和(R)-氯胺酮两种对映异构体按照1∶1的比例构成。已有证据表明其对抑郁症的治疗有着显著疗效。研究显示,氯胺酮的作用机制可能与NMDAR、α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑-丙酸受体(α-amino-3-hydroxy-5-methylisoxazole-4-propionic acid receptor,AMPAR)、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)、雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)、肠道菌群、真核延伸因子2激酶(eukaryotic elongation factor 2 kinase,eEF2K)等有关。同时,多项研究显示氯胺酮可能导致神经毒性反应、拟精神病、心血管系统疾病,以及泌尿系统疾病等多种不良反应,导致其在临床应用及试验中存在一定局限性。因此,深入探讨氯胺酮的作用机制及临床不良反应应,探索氯胺酮可能的作用靶点极其重要。

D-AP5对PD小鼠黑质多巴胺能神经元簇状放电影响

目的探究侧脑室注射D(-)-2-氨基-5-磷戊酸(D-AP5)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)帕金森病(PD)模型小鼠黑质区多巴胺能神经元簇状放电的影响。方法将小鼠随机分为对照组、D-AP5组、MPTP组和D-AP5+MPTP组。采用电生理实验记录小鼠黑质区多巴胺能神经元的簇状放电百分比。结果析因设计方差分析显示,D-AP5和MPTP两者存在交互作用(FMPTP=4.601,P<0.05;FD-AP5=2.399,P>0.05;FMPTP×D-AP5=12.020,P<0.01)。单独效应分析显示,在未注射MPTP的两组小鼠中,D-AP5组小鼠黑质区多巴胺能神经元簇状放电百分比与对照组小鼠相比差异无显著性(F=1.916,P>0.05);在注射MPTP的两组小鼠中,D-AP5+MPTP组小鼠黑质区多巴胺能神经元簇状放电百分比较MPTP组明显降低(F=12.094,P<0.01)。结论侧脑室注射D-AP5可降低MPTP模型小鼠黑质区多巴胺能神经元簇状放电百分比。

AMPA与NMDA抗体重叠的自身免疫性脑炎合并眼阵挛-肌阵挛综合征1例报告

眼阵挛-肌阵挛综合征(OMS)是一种少见的神经系统综合征,与肿瘤相关,常见于儿童,成人少见,其特征是不自主、无节律、混乱、多向的眼球不自主运动,通常伴有四肢和躯干肌阵挛性抽搐、共济失调。抗α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异唑丙酸受体(AMPAR)与抗N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)抗体重叠的自身免疫性脑炎合并眼阵挛-肌阵挛综合征的病例报道更为少见,对其临床表现及治疗缺乏全面的认识。现报道1例AMPAR与NMDAR抗体重叠的自身免疫性脑炎合并眼阵挛-肌阵挛综合征患者,并基于此病例对国内外相关文献进行复习,以期提高临床医生的认识。

转录组测序分析天冬氨酸和谷氨酸对广叶绣球菌生长的影响

【目的】通过转录组测序分析添加不同氮源培养后广叶绣球菌基因差异表达情况,旨在探究氨基酸调节基质降解的分子机理,为其高效生产提供理论依据。【方法】以硫酸铵、鱼粉蛋白胨、天冬氨酸和谷氨酸为氮源,测定菌丝生长速度并利用转录组测序技术对不同氮源诱导下广叶绣球菌进行基因差异表达分析。【结果】天冬氨酸和谷氨酸相对于硫酸铵、鱼粉蛋白胨可显著促进菌丝生长(P<0.01);GO功能富集分析显示差异基因主要富集在氧化还原酶活性、铁离子跨膜转运蛋白活性和铁离子的还原和转运同化等;KEGG通路富集分析显示,富集度较高的通路主要有色氨酸代谢、花生四烯酸代谢和氮代谢等。差异基因中溶血素蛋白ostreolysin A6、GroES类似蛋白和6-甲基水杨酸脱羧酶等基因在天冬氨酸或谷氨酸诱导下表达量变化倍数较大(P<0.01)。【结论】天冬氨酸和谷氨酸可能通过促进绣球菌氧化还原酶活性及铁离子代谢过程,提高其基质利用能力。研究结果为进一步研究广叶绣球菌木质纤维素降解机制及栽培生理提供理论依据。

外源氨基酸对烟叶氨基酸含量的影响

通过水培试验在营养液中添加氨基酸对烤烟生长的影响。研究表明,3种氨基酸处理均比对照明显促进了烤烟生长,提高了叶片叶绿素a、叶绿素b与类胡萝卜素的含量,增强了硝酸还原酶活性和蔗糖转化酶活性,提高了根系活力。外源谷氨酸、天门冬氨酸、苯丙氨酸都可以增加烟叶氨基酸含量,以谷氨酸处理效果最明显,其次是天门冬氨酸处理,再次是苯丙氨酸处理。同时3种氨基酸处理都显著提高了单株烤烟烟叶氨基酸累积量,其增加量为天门冬氨酸处理>谷氨酸处理>苯丙氨酸处理。

水稻灌浆期高温对天冬氨酸代谢酶活性及其家族氨基酸含量的影响

选用粳稻越光和籼稻IR72为材料,研究了灌浆期高温对水稻籽粒中天冬氨酸转氨酶(AAT)、天冬氨酸激酶(AK)活性以及稻米蛋白质组分与天冬氨酸族氨基酸组分含量的影响。结果表明,水稻灌浆期高温下籽粒中AAT和AK活性、天冬氨酸、赖氨酸、苏氨酸、蛋氨酸和异亮氨酸相对含量均显著提高,籽粒中AAT和AK活性与天冬氨酸家族总氨基酸含量分别呈显著和极显著正相关,说明水稻籽粒中AAT和AK对于高温下稻米天冬氨酸家族氨基酸含量的提高具有重要作用。高温有利于稻米中蛋白质组分与天冬氨酸族氨基酸组分相对含量的提高,有利于单粒稻米中谷蛋白与天冬氨酸家族氨基酸组分的积累以及粗蛋白中部分氨基酸比例的改善,但高温降低了每穗稻米中蛋白质组分与部分氨基酸组分的含量。

植物天冬氨酸代谢途径关键酶基因研究进展

谷类作物和豆类作物的营养价值主要体现在以天冬氨酸为前体的必需氨基酸的含量上。植物中这些氨基酸的含量受天冬氨酸代谢途径中关键酶基因的影响。本文综述了这些酶基因的克隆、在大肠杆菌和不同植物中表达的研究进展。

酶法合成L-4-甲砜基苯丙氨酸

以4-甲砜基苯丙酮酸和L-天冬氨酸为底物,利用重组大肠杆菌DM204(pGEX-KG-aspC/BL21)表达的天冬氨酸转氨酶酶法转化得到了L-4-甲砜基苯丙氨酸,优化得到的酶法最佳转化条件为:转化温度37℃,反应体系pH=8,底物4-甲砜基苯丙酮酸质量分数8%,质量分数0.6%的吐温80和10-4mol/L Mg2+对酶活有促进作用.在最佳工艺条件下经过12 h酶促反应,4-甲砜基苯丙酮酸摩尔转化率达95%.本研究利用化学生物法制备了L-4-甲砜基苯丙氨酸,为制备其它天然氨基酸衍生物提供了新思路.

线粒体型天门冬氨酸氨基转移酶同工酶测定及其应用价值

目的建立免疫抑制法测定各类心脏和肝脏疾病的m-AST,观察其应用价值.方法提取纯化心肌细胞质型天门冬氨酸氨基转移酶同工酶(s-AST)酶蛋白,免疫羊制备抗人s-AST抗体,应用免疫抑制原理抑制标本中的s-AST活性,测定m-AST活性.结果血清m-AST参考值4～15u/L,急性心肌梗死60～310、陈旧心肌梗死10～20、无梗死冠心病7～15、无心衰7～18、心衰8～25、心包炎10～16、心肌炎18～30 u/L;急性肝炎56～410、慢迁肝炎12～17、慢活肝炎18～90、有腹水肝硬化18～50、无腹水肝硬化12～30、原发性肝癌11～64、继发性肝癌16～95、肝脓肿15～21 u/L.有坏死的心、肝病m-AST明显升高.非心肝性恶性肿瘤和其他疾病基本在参考值范围内.结论测定m-AST可协助判定心、肝疾病的严重性和有无坏死.

兴奋性氨基酸受体激动剂对大鼠脊髓损伤后诱发电位和血流量的影响

文中报道了观察大鼠脊髓中度损伤（５０ｇ／ｃｍ）后脊髓蛛网膜下腔注射兴奋性氨甚酸（ＥＡＡ）受体激动剂Ｎ－甲基－Ｄ－天冬氨酸（ＮＭＤＡ）对脊髓损伤后脊髓灰质血流量（ＳＣＢＦ）、脊髓诱发电位（ＳＰＥＰ）和运动诱发电位（ＣＭＥＰ）的影响。结果发现ＮＭＤＡ明显加剧脊髓损伤（ＳＣＩ）后脊髓缺血和脊髓上、下行传导功能障碍。表明在脊髓损伤基础上增加ＥＡＡ可加剧脊髓组织的损害，进一步证实了ＥＡＡ通过激活ＮＭＤＡ受体所引起的一系列病理生理效应参与脊髓继发性损伤。

高效液相色谱法测定羊水中兴奋性氨基酸、抑制性氨基酸的含量

建立了反相高效液相色谱法测定羊水中兴奋性氨基酸天门冬氨酸、谷氨酸,抑制性氨基酸甘氨酸含量的方法,色谱柱为LUNAC18柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈水(V/V),按低压梯度洗脱,梯度系统0～4min,乙腈40%;4～20min,乙腈40%～52%;20～30min,乙腈52%～60%;30～40min,乙腈60%～40%。流速0.8mL/min,柱温40℃,紫外检测波长260nm;进样量10μL。结果显示,天门冬氨酸、谷氨酸和甘氨酸三者的线性范围均为2.5～85mg/L;标准加入的回收率为99.6%～102.6%。本方法灵敏度高、测定结果可靠。用本方法对201例不同孕期的羊水作兴奋性和抑制性氨基酸检测,发现羊水中3种氨基酸随妊娠进展而增加的趋势,胎儿畸形或宫内缺氧时羊水中这3种氨基酸水平明显升高。

改进HPLC法测定门冬氨酸鸟氨酸原料药中的有关物质

目的:改进测定门冬氨酸鸟氨酸原料药中有关物质的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Phenomenex Luna NH2(两根串联),流动相为0.02 mol/L磷酸二氢钾缓冲液(p H 5.6)-乙腈(40∶60,V/V),流速为1.0 m L/min,检测波长为205 nm,柱温为35℃,进样量为20μL。结果:马来酸、3-氨基-2-哌啶酮、琥珀酸、苹果酸、富马酸、β-门冬氨酰门冬氨酸检测质量浓度线性范围分别为5.398~26.992μg/m L(r=0.999 1)、5.204~26.021μg/m L(r=0.999 3)、5.149~25.749μg/m L(r=0.999 6)、5.174~25.874μg/m L(r=0.999 3)、5.164~25.823μg/m L(r=0.999 3)、5.194~25.973μg/m L(r=0.999 5);定量限分别为0.22、0.53、51.50、103.50、0.26、8.31 ng,检出限分别为0.13、0.26、10.30、20.70、0.13、2.08 ng;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均不超过2%;加样回收率分别为99.30%~102.31%(RSD=1.02%,n=9)、99.88%~100.89%(RSD=0.37%,n=9)、99.36%~101.53%(RSD=0.70%,n=9)、99.13%~102.65%(RSD=1.15%,n=9)、100.18%~101.45%(RSD=0.38%,n=9)、99.39%~100.81%(RSD=0.58%,n=9)。6批样品均未检出马来酸、琥珀酸和β-门冬氨酰门冬氨酸;3-氨基-2-哌啶酮含量为0.006%~0.056%,苹果酸含量为0.014%~0.071%,富马酸含量为0.000 5%~0.003 4%,最大未知杂质含量为0.013%~0.110%,未知杂质总含量为0.013%~0.120%。结论:该方法操作简便,精密度、稳定性、重复性均较好,可用于门冬氨酸鸟氨酸原料药中有关物质的测定。

两亲性氨基酸嵌段共聚物的合成、表征和载药性能

采用N-羧酸-α-氨基酸-环内酸酐开环聚合的方法合成两亲性氨基酸嵌段共聚物(苯丙氨酸-天冬氨酸共聚物,PPA-PAA),并以难溶性药物4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯(ATPR)为模型药考察该聚合物的载药性能。采用FT-IR与1H NMR对合成的PPA-PAA结构进行表征,计算聚合度,采用芘荧光探针法测定两亲性氨基酸嵌段共聚物临界胶束浓度(CMC),动态光闪射法测定胶束粒径。结果 PPA-PAA的CMC为95 mg/L,形成胶束的粒径为235 nm,载药量和包封率分别为27.1%和74.1%。PPA-PAA有望成为难溶性药物的给药载体。

灯盏细辛对NMDA所致大鼠视网膜神经元损伤的保护作用(英文)

目的:已有一些临床试验和基础研究显示灯盏细辛(GerigeronBreviscapus(vant)Hand-Maz2EBHM),对青光眼患者及动物模型有神经保护的作用,本研究探讨灯盏细辛是否对NMDA导致的大鼠RGCL神经元兴奋毒性有保护作用。方法:60只健康SD大鼠随机分为4组,其中6只为正常对照组(A组),其余54只随机分为3组,分别为B组(EBHM组),C组(生理盐水+NMDA组),D组(EBHM+NMDA组),每组各18只大鼠。C、D两组大鼠右眼玻璃体内注射NMDA10nmol/2μL制成视网膜损伤模型,左眼玻璃体内注射相同剂量PBS液作为自身对照。B组及D组均在NMDA注射前7d起按150mg/(kg·d)日剂量予60g/LEBHM腹腔内注射,C组予生理盐水0.5mL腹腔内注射。在NMDA处理后4,7,14d处死动物剥取视网膜作全层铺片行RGCL神经元计数分析。结果:正常对照组双眼RGCL神经元计数比较差异无显著性意义(P=0.200)。NMDA干预后4,7,14dEBHM组RGCL神经元计数,双眼与正常对照组比较差异无显著性意义(P>0.05)。生理盐水+NMDA及EBHM+NMDA组实验眼在以上各时段RGCL神经元计数与正常组比较差异均有非常显著性意义(P<0.001),左眼与正常对照组比较差异无显著性意义(P>0.05)。实验眼14d时RGCL神经元计数EBHM+NMDA组高于生理盐水+NMDA组,二者比较差异有显著性(P=0.044),但仍低于正常对照组(P<0.05)。结论:单独使用EBHM对正常大鼠RGCL神经元计数无影响,EBHM可对NMDA所致大鼠RGCL神经毒性提供部分保护作用。

儿童抽动障碍血浆兴奋性氨基酸水平与行为心理的相关性研究

目的 了解抽动障碍患儿血兴奋性氨基酸中谷氨酸 (GLU)、天门冬氨酸 (ASP)水平现状及其与行为心理的相关性。方法 采用高效液相色谱法检测了 4 8例抽动障碍患儿血浆GLU、ASP水平 ,其中暂时性抽动 13例 ,慢性运动性抽动 2 0例 ,抽动 秽语综合征 15例 ;并对其家庭状况和相关行为进行了问卷调查。结果 (1) 4 8例抽动患儿血浆GLU水平明显高于对照组 (P <0 0 1) ;(2 )慢性运动性抽动组和抽动 秽语综合征组患儿血浆GLU、ASP分别与对照组和暂时性抽动组比较 ,结果发现前两组血浆GLU水平明显高于后两组 (P <0 0 5、P <0 0 1) ;各组血浆ASP水平无显著差异 (P >0 0 5 )。 (3)抽动障碍患儿注意缺陷多动障碍、精神紧张、脾气暴躁等行为心理问题较对照组明显增高 (P <0 0 1,P <0 0 5 )。 (4)抽动组血浆兴奋性氨基酸 (EAAS)与多动注意缺陷障碍发生率呈正相关。结论 (1)儿童抽动障碍存在EAA水平变化 ,GLU可能参与抽动障碍的病理生理过程。(2 )

兴奋性氨基酸与青光眼

近年来随着对青光眼性视神经病变机制的深入研究,已证实兴奋性氨基酸与青光眼视网膜神经节细胞凋亡密切相关。21世纪青光眼的治疗模式正从传统的单纯降眼压向降眼压的同时从其他途径进一步加强神经保护转变,基础实验及部分临床研究证实干扰兴奋性氨基酸产生神经毒性的各环节均对神经元有保护作用,由此可以推测通过对兴奋性氨基酸的研究有望实现青光眼治疗史上的重大突破。

肝脏疾病患者血清中线粒体型天门冬氨酸氨基转移酶检测的临床意义

目的探讨线粒体型天门冬氨酸氨基转移酶(m-AST)以及m-AST与天门冬氨酸氨基转移酶(AST)比值在各类肝脏疾病中的变化规律及临床意义。方法用免疫抑制法测定各类肝脏疾病患者血清中m-AST和AST,计算出mAST/AST比值,观察其在入院时与治疗后的变化。结果患者入院时,mAST/AST比值从高到低依次为重型肝炎0.435±0.061、急性肝炎0.375±0.057、药物性肝炎0.321±0.035、慢性肝炎0.317±0.031、肝炎肝硬化0.276±0.031,均显著高于正常对照组(P<0.05);治疗后,急性肝炎组和药物性肝炎组mAST/AST比值明显下降,其他组无明显变化。结论动态监测血清mAST/AST比值的变化有利于急性肝炎、重型肝炎的预后判断和急性肝炎与慢性肝炎的鉴别诊断,对急性和药物性肝炎的评估和诊断治疗有指导价值。

视网膜缺血性损伤中兴奋性氨基酸的变化

目的 观察视网膜缺血性损伤后视网膜和房水中谷氨酸 (glutamate,Glu)、天冬氨酸 (aspartate ,Asp)的含量变化。方法 采用血管结扎方法建立家兔视网膜缺血模型 ,正常兔作为对照组 ,观察缺血 30min、6 0min和 75min组视网膜和房水中Glu和Asp含量及形态学不同时间的动态变化。结果 缺血组视网膜Glu含量分别为 (5 .2 0± 1.6 0 )μmol·L-1、(4.2 1± 0 .96 ) μmol·L-1、(2 .11± 0 .6 7) μmol·L-1,正常对照组视网膜Glu含量为 (9.2 9± 2 .5 5 ) μmol·L-1;缺血组视网膜Asp含量分别为 (1.86± 0 .4 9) μmol·L-1、(1.0 7± 0 .2 1) μmol·L-1、(1.0 6± 0 .2 1) μmol·L-1,正常对照组视网膜Asp含量为 (2 .35± 0 .5 4 ) μmol·L-1;发生缺血性损伤时 ,缺血组Glu和Asp的含量与正常对照组有显著差异 (P <0 .0 1) ,缺血组组间比较有显著性差异 (P <0 .0 1)。随缺血时间延长 ,视网膜内Glu、Asp含量逐渐减少 ,房水中Glu、Asp含量逐渐增加。视网膜神经细胞持续丢失 ,以内颗粒层明显。结论 视网膜缺血时大量Glu、Asp释放入细胞外液 ,提示兴奋性氨基酸的神经毒性作用介导视网膜缺血性损伤。

脑出血后脑组织中兴奋性氨基酸与脑损伤的关系

目的通过收集临床手术治疗的高血压脑出血(HICH)患者的脑组织标本,研究脑出血后血肿周围脑组织细胞凋亡的病理变化及其与兴奋性氨基酸(EAAs)的关系。方法临床脑组织标本均于开颅手术中取材,术中获取不同时段血肿灶周围脑组织标本作为实验组,手术入路中远隔血肿部位脑组织标本作为对照组。根据发病至手术时间将实验组标本分为:超早期组(<8h);早期组(8～24h);延期组(>24h)。所有标本均行TUNEL染色观察凋亡细胞数量;应用高效液相色谱仪(HPLC)检测谷氨酸(Glu)和天门冬氨酸(Asp)含量。结果共收集临床脑组织标本19例:超早期组6例;早期组8例;延期组5例。对照组5例。对照组中各视野未见TUNEL阳性细胞,而病例组3个不同手术时段的凋亡阳性细胞数均高于对照组(P<0.01)。超早期组Asp、Glu含量明显高于对照组(P<0.01),随后均逐渐下降,Asp于早期组即接近对照组(P>0.05),而Glu下降较为缓慢,在早期组仍高于对照组间(P<0.01)。结论凋亡机制参与了脑出血后血肿周围早期神经细胞损伤的过程。Glu、Asp在脑出血后早期明显升高,增高的EAAs可能参与了诱导细胞凋亡发生。

接枝微粒材料P4VP-SiO_2对酸性氨基酸的吸附性能与吸附机理

将4-乙烯基吡啶(4VP)接枝聚合于微米级硅胶表面,制得了接枝有聚4-乙烯基吡啶(P4VP)的接枝微粒P4VP-Si O2,测定了P4VP-Si O2的红外光谱,表征了其化学结构,并测定了该复合型功能微粒材料的Zeta电位。采用静态法研究了P4VP-Si O2对酸性氨基酸天冬氨酸与谷氨酸的吸附性能,考察了介质pH、离子强度及温度对其吸附性能的影响,探索了吸附机理。研究结果表明:在较大的pH范围内,P4VP-Si O2的Zeta电位为较高的正值,即微粒表面携带有高密度的正电荷;酸性氨基酸天冬氨酸与谷氨酸等电点都较低,所以在一般的介质pH范围内,它们的分子带有负电荷;凭借静电相互作用,P4VP-Si O2对酸性氨基酸天冬氨酸与谷氨酸均表现出很强的吸附能力,而对中性与碱性氨基酸(在一般的介质pH范围内分子带有正电荷)的吸附能力则很弱;随介质pH的增大,P4VP-Si O2对天冬氨酸与谷氨酸的吸附能力呈现先增强后减弱的规律,在pH=4处,吸附容量具有最大值,分别为280 mg/g与230 mg/g;温度升高,吸附容量减小;盐度增大,吸附容量降低。