Chitosan Obtained from Cell Wall of Aspergillus Niger Mycelium

Chitin from cell walls of Aspergillus Niger mycelium was prepared. A new method for the preparation of high deacetylation degree chitosan was studied in a dilute sodium hydroxide solution at a high pressure. The experimental results indicate that the deacetylation degree of the chitosan can reach 80% under the condition of a 5.00 mol/L sodium hydroxide solution at 0.1 MPa of pressure for 1 h. This method shows the advantages of the applications in the industry production and environment protection.

黑曲霉电解法制备甲壳素的研究

本试验以实验室发酵的黑曲霉菌丝体为原料,采用电解法从中提取甲壳素,再将甲壳素碱法脱乙酰转化为壳聚糖。通过单因素试验和正交试验分析了电解时间、电压、碱浓度及料液比对壳聚糖的脱乙酰度、得率、粘均分子量等指标的影响,以此间接反映电解法各因素对甲壳素产品的影响。黑曲霉电解法制备甲壳素的最优条件为:电解时间1.25h,NaOH浓度3%,电压8V,液料比12:1。试验证明,利用电解法从黑曲霉中提取甲壳素实践上是可行的。

黑曲霉几丁质和壳聚糖的研究

通过正交试验确定黑曲霉的最佳培养条件。由培养的黑曲霉湿菌体制备几丁质，最经济的方法是电解法；制备壳聚糖则采用间歇提取法，所得干燥壳聚糖产品的壳聚糖含量为９２．２９％，游离氨基为９６．１１％，１％壳聚精的１％醋酸溶液运动粘度为５．３３ｘ１０￣（－６）ｍ￣２／ｓ，粘均分子是为８．０２４ｘ１０￣４，灰分为９．２４％，产品得率为９．７２％，探讨了从柠檬酸厂废弃酸渣中分离黑曲霉菌丝体的方法，得率为３０％左右。

从黑曲霉提取甲壳素和壳聚糖

采用电解法从培养的黑曲霉湿菌体制甲壳素 ;采用碱提取法从培养的黑曲霉湿菌体制壳聚糖。甲壳素提取的得率干菌重量的 2 0 6 %。所得干燥壳聚糖产品的游离胺基为 93 76 % ,0 5%壳聚糖的 0 5%醋酸的运动粘度为 5 4 4 8× 10 6 m2 /s ,粘均分子量为 8 2 75× 10 4 ,含水量为 9 16 % ,产品得率为 12 11%。

葡萄糖酸钠生产厂黑曲霉菌渣的利用研究

对葡萄糖酸钠生产中残留的黑曲霉菌体废渣的营养成分进行了测定,结果表明:该菌渣含粗蛋白10.30%、粗脂肪3.89%、粗纤维14.46%、粗灰分21.00%、总糖32.56%,此外还含有丰富的Ca、P、Mg、Fe、K、Na等矿物元素,与常用的饲料原料进行比较,证明该菌渣可用作饲料原料。为进一步实现该菌渣的高值化综合利用,对从该菌渣中提取粗蛋白、壳聚糖、麦角甾醇等有用成分的工艺进行了研究,提取率分别达到10.84%、3.44%、0.81%,壳聚糖的脱乙酰度为72.95%。

O-羧甲基壳聚糖的制备及对黑曲霉生长的影响

采用红外光谱法对合成的O-羧甲基壳聚糖(OCMC)进行表征,研究壳聚糖及OCMC对黑曲霉生长的影响。结果表明:当培养基中添加OCMC,作用第1天时,可以有效的抑制黑曲霉菌落的生长;当OCMC质量浓度为1.0mg/mL时,对黑曲霉生长的抑制能力最强;壳聚糖和OCMC能与ct-DNA发生相互作用,导致ct-DNA双螺旋结构被破坏。

利用微波技术从黑曲霉提取壳聚糖的研究

对利用微波技术并通过加入乙醇降低碱浓度的方法从黑曲霉菌丝体提取壳聚糖进行了研究。确定的最优提取条件为 :菌丝体比碱液体积为 1∶10 ,微波火力为 480W ,消解时间为 2 0min ,碱浓度为 2 0 % ,醇水比为 1∶1。用优化的工艺进行提取 ,壳聚糖的脱乙酰度为 88% ,特性粘数为 1.

黑曲霉菌体制备壳聚糖的工艺研究

研究了黑曲霉不同发酵条件（发酵温度、发酵时间、发酵pH值、摇床转速）对壳聚糖产率的影响。并对培养基组成和培养条件进行了优化试验，结果表明，最佳培养液成分为70n也玉米浆，4g葡萄糖，1．2g硫酸镁，按A8．0×10^8个，mL孢子；培养条件发酵温度27℃-31℃，发酵时间72h，发酵pH值7．4～7．6，摇床转速130r／min。

壳聚糖金属配合物对黑曲霉的抑制活性研究

通过观察黑曲霉菌丝体的生长及孢子萌发情况,考察壳聚糖(CS)及壳聚糖锌(CS-Zn)、壳聚糖镍(CS-Ni)的抗真菌性能。结果表明:壳聚糖、壳聚糖锌和壳聚糖镍对黑曲霉孢子萌发和菌丝体生长均具有明显抑制作用,且壳聚糖金属配合物的抑菌效果比壳聚糖本身更强,其中壳聚糖镍最强。壳聚糖镍对黑曲霉的抑菌活性受壳聚糖分子质量、环境pH值、质量浓度因素的影响较大。分子质量为5kD的CS制备的CS-Ni抗真菌效果最好;CS-Ni抑菌效果在pH3～7.5时随pH值降低而增强;随CS-Ni质量浓度(0～0.75mg/mL)的增加而增强。

黑曲霉产壳聚糖发酵工艺的优化

通过单因素及正交实验对黑曲霉产壳聚糖的发酵工艺进行了优化。结果表明,最佳发酵条件为:70mL玉米浆,4%葡萄糖,1·2%硫酸镁,8·0×108孢子量,pH7·4～7·6,转速为130r/min,29℃发酵72h的壳聚糖的产率最高,达到18%。

从柠檬酸厂废菌丝体中提取壳聚糖的研究

本文确定了从柠檬酸厂废黑曲霉菌丝体中制备壳聚糖的工艺条件，得干燥壳聚糖产品的脱乙酰度为96.82％，1％壳聚糖的1％醋酸溶液的运动粘度为5.41×10－4m2／s，粘均分子量为7.89×104，灰分为3.75％，得率为3.35％。

黑曲霉发酵生产壳聚糖工艺研究

采用生物发酵法制备了壳聚糖。在常用培养基中添加酒糟进行了正交实验,确定培养基组成为:玉米浆4%、烘干磨碎酒糟4%、葡萄糖3%、硫酸镁1%。得到了摇瓶发酵和15 L发酵罐中的发酵工艺。对发酵罐发酵过程的特征参数进行了初步研究,分析了生物量、pH值、残糖含量、Mg2+含量的变化,并绘制出变化曲线。

黑曲霉发酵生产壳聚糖的研究

通过正交实验,研究了由黑曲霉发酵生产壳聚糖的工艺条件,确定最佳培养基为玉米浆3%、葡萄糖3%、硫酸镁1.0%、磷酸二氢铵0.01%、磷酸二氢钾0.005%;最佳发酵条件为接种量10%、发酵时间90 h、摇床转速180 r.min-1、pH值6、发酵温度30℃。最佳工艺下的菌体干重达51.52 mg.mL-1,利用酸碱法提取壳聚糖,其脱乙酰度达78.09%。

黑曲霉制备壳聚糖工艺研究

研究了由黑曲霉发酵生产壳聚糖的培养基配料比和培养条件，并设计了在培养基中加酒糟的正交试验，得出最佳方案：培养液成分为玉米浆4％、酒糟4％、葡萄糖3％、硫酸镁1％，接入7×10^8～9×10^8个孢子／mL菌悬液1．BmL，培养条件为发酵温度28℃、摇床转速180r／min、发酵时间80h、pH中性，并探讨了微波提取壳聚糖的技术。

几种培养基附加物对几丁质产量的影响

试验了不同浓度的果糖、L-谷氨酰胺及N-乙酰氨基葡萄糖对黑曲霉AS18合成几丁质的影响。发现在培养基中含有3%、0.03%和0.05%的果糖、N-乙酰氨基葡萄糖和谷氨酰胺时,对黑曲霉合成几丁质有促进作用,其中前体物质N-乙酰氨基葡萄糖促进作用最为明显。在培养基中添加0.03%的N-乙酰氨基葡萄糖,几丁质产量为2.62g/L,提高了42%。

响应面优化酸热法从废弃黑曲霉提取壳聚糖工艺

研究以酸热法破除黑曲霉细胞壁提取壳聚糖的工艺。在单因素实验基础上,运用Box-Behnken中心组合实验和响应面法考察了破壁温度、破壁时间和盐酸浓度3个因素对壳聚糖得率的影响,并优化了破壁工艺。结果表明,最佳破壁工艺为:破壁温度100℃,破壁时间1.6h,盐酸浓度2.1%,壳聚糖实际得率为10.87%,理论值11.06%,两者相对误差1.72%,说明响应面法优化酸热破除黑曲霉细胞壁工艺可行。

黑曲霉几丁质合成酶基因chs形态突变株的构建

以一株产柠檬酸的黑曲霉菌株为研究材料,为了优化菌株的深层发酵形态,提高柠檬酸产量,采用RNA干扰的方法,使与形态建成相关的几丁质合成酶chs基因沉默。首先将酶切得到的chs基因片段与质粒p JL43-RNAi连接,构建成干扰载体。为提高干扰载体的转化率,对原生质体制备、再生和转化条件进行了优化。然后通过聚乙二醇(PEG)介导,将构建的干扰载体导入黑曲霉的原生质体中,经过转化,筛选出形态突变株,并进行深层发酵。结果表明,在36.5℃培养16 h的幼嫩菌丝最利于原生质体释放;而5 mg/m L的溶菌酶,10 mg/m L的蜗牛酶和10 mg/m L的纤维素酶组成的混合酶系为最优的酶组合;在30℃下,以100 r/min酶解3 h可使原生质体的最大产量达到5.11×106/m L。最优的再生培养基为完全培养基,可以使再生率达到35.33%。获得的3株转化株的chs基因表达量降低,同时在深层发酵过程中,菌球的分支频率降低,分支缩短,离散菌丝减少,柠檬酸产量也分别提高12.33%,24.17%和19.61%。通过分子改造的形态突变株具有良好的产酸性能,对推动柠檬酸发酵工业的进步有重要意义。

葡萄糖酸钠发酵废弃菌丝体提取壳聚糖的研究

以产葡萄糖酸钠的废弃菌丝体为原料,探究了从废弃黑曲霉(Aspergillus niger)菌丝体提取壳聚糖的工艺条件。对废弃菌丝体进行了各组分分析后,在单因素的基础上对提取工艺进行优化,得出了碱法提取壳聚糖的最佳优化条件:料液比为1∶30(g∶mL),6%NaOH处理2 h,反应温度为95℃时,菌体蛋白去除率达到77.26%;碱(NaOH)浓度为30%,处理温度为120℃,脱蛋白处理后样品采用重复碱处理的方式脱乙酰,样品分两次重复用30%NaOH溶液在120℃下各处理1 h,得到壳聚糖的脱乙酰度为78.85%,壳聚糖得率为10.53%;后续用12%醋酸纯化处理,得到脱乙酰度为84.49%的壳聚糖,得率为9.56%。

黑曲霉菌丝体-壳聚糖的制备及对Cr(Ⅵ)的吸附性能研究

研究了黑曲霉菌丝体-壳聚糖对Cr(Ⅵ)的吸附特性。以废弃黑曲霉菌丝体、壳聚糖作为吸附剂制备原料,采用环氧氯丙烷进行交联,三聚磷酸钠进行固化,制备成黑曲霉菌丝体-壳聚糖复合型吸附剂。探究了pH值、黑曲霉菌丝体-壳聚糖的投加量对Cr(Ⅵ)的吸附影响。实验结果表明,黑曲霉菌丝体-壳聚糖的用量为0.5 g时对Cr(Ⅵ)吸附率最高达到92.30%,pH=6时对Cr(Ⅵ)吸附率最高达84.32%。动力学数据分析表明黑曲霉菌丝体-壳聚糖生物吸附剂对Cr(Ⅵ)的吸附过程符合准二级动力学模型(R2=1)。同时该吸附过程符合Freundlich等温线模型,最大吸附量为108.23mg/g;扫描电镜和红外光谱证实吸附反应发生吸附剂的颗粒表层,主要活性基团为-OH,-COOH。上述结果表明,黑曲霉菌丝体-壳聚糖对Cr(Ⅵ)吸附性能良好,绿色环保,应用前景广泛。

黑曲霉发酵生产壳聚糖的研究

研究了黑曲霉发酵生产壳聚糖的培养条件。通过单因素试验和正交试验分析,确定了最佳发酵条件为:培养酵温度30℃、pH值7.0、培养时间72h、摇床转速200r/min。最佳发酵条件下菌体干重达21.38mg/mL。通过电解法、酸碱交替处理提取壳聚糖,壳聚糖产率13.7%,脱乙酰度86.1%。