针对Y染色体微缺失检测两种不同方案的比较

目的:比较两种Y染色体微缺失检测方案的结果。方法:采用荧光定量PCR方法对方案一(六位点法:sY84,sY86,sY127,sY134,sY254,sY255)和方案二(八位点法:sY84,sY86,sY127,sY134,sY254,sY255,sY145,sY152)的检测结果进行比较。结果:六位点法AZF区的缺失检出率为9.34%(575/6177),八位点法AZF区的缺失检出率为8.85%(542/6122),两种方法AZF区的缺失检出率没有显著差异。结论:虽然八位点法增加对AZFd区域位点的检测,但缺失检出率与六位点法无差异。因此,从实验操作、经济成本及对临床策略指导等方面考虑,Y染色体微缺失检测六位点法优于八位点法。

染色体核型分析与Y染色体微缺失联合检测无精子或少精子症的临床应用研究

目的对男性无精子或少精子症患者进行染色体遗传学病因诊断与分析,探讨染色体核型分析与Y染色体微缺失联合检测对无精子或少精子症的临床应用价值。方法收集四川泸州地区240例男性无精子或少精子症患者的临床资料及外周血样本。外周血淋巴细胞按常规染色体培养G显带行核型分析,Y染色体微缺失检测采用多重PCR技术。结果240例男性无精子或少精子症患者中无精子症患者179例、严重少精子症患者61例。单一染色体核型分析异常检出率为22.92%(55/240),包括单纯染色体数目异常30例、单纯染色体结构异常21例和合并异常4例。单一Y染色体微缺失异常检出率为10.42%(25/240),其中AZFc缺失异常率最高为7.08%。采用核型分析与Y染色体微缺失联合检测的异常检出率为30.83%(74/240),其中6例患者两项结果均异常,两种方法联合应用时较单一方法的检出率高(χ^(2)=30.24,P<0.001)。结论系统地报道了泸州地区男性无精子或少精子症患者的染色体核型及Y染色体微缺失的发生率及类型,同时提出两种方法联合应用可提高异常检出率,对男性不育症患者的病因诊断、遗传咨询及生殖治疗提供了重要指导作用。

614例新疆地区少精子症和无精子症患者遗传学病因及性激素水平分析

目的分析无精子症和少精子症患者遗传因素以及与性激素水平的关系。方法回顾性分析2017年7月至2022年9月间佳音医院收治的307例无精子症患者、307例少精症子患者和301例精液正常男性的临床检验资料,包括外周血染色体核型、Y染色体拷贝数变异(Y-CNV)和性激素水平,分析相关的检测异常发生率以及与血清激素水平的关系。结果(1)所有入组患者中共检出130例染色体核型异常(包括染色体多态),异常检出率14.20%(130/915)。其中,无精子症组异常检出率20.19%(62/307),少精子症组异常检出率12.05%(37/307),对照组异常检出率10.29%(31/301)。130例核型异常中,常染色异常21例(2.29%)、常染色体正常多态性47例(5.13%);性染色体异常37例(4.04%),性染色体正常多态性22例(2.40%);另有2例表现为常染色体+性染色体正常多态性变化,1例表现为常染色体和X染色体相互易位。染色体核型异常患者中47,XXY(克氏综合征)检出最多(23例),46,XX(性反转)次之(6例)。(2)无精子症组检出56例Y-CNV异常(18.24%),少精子症组检出62例(20.19%),对照组检出3例(0.99%);少、无精子症患者Y-CNV异常检出率显著高于对照组(P<0.05)。(3)各组患者间血清FSH和LH水平比较均有统计学差异(P<0.05),其中无精子症组FSH和LH水平最高,少精子症组次之,对照组最低;少、无精子症患者中,染色体核型异常组血清FSH和LH水平显著高于染色体核型正常组(P<0.05);少、无精子症组中,Y-CNV异常组与正常组性激素水平比较无统计学差异(P>0.05)。结论无精子症患者和少精子症患者易出现Y染色体拷贝数变异异常以及染色体核型、性激素水平异常,对少精子症和无精子症患者进行染色体核型、Y染色体拷贝数变异以及性激素联合检测,有助于为后续的生殖治疗提供合理的临床方案。

与精子发生障碍相关的染色体畸变

目的 :探讨与精子发生障碍相关的细胞遗传学原因。 方法 :对 174例少精子症、无精子症的病人进行染色体核型分析。 结果 :72例无精子症病人中检出异常染色体核型病人 13例 (18.1% ) ,主要涉及性染色体数目、结构畸变。 10 2例少精子症病人中 ,检出异常染色体核型病人 5例 (4 .9% ) ,主要涉及常染色体某些片段的倒位、易位。 结论 :性染色体畸变导致精子发生障碍最为严重 。

无精症及严重少精症Y染色体微缺失和生殖激素水平研究

目的探讨少精症及严重无精症患者与Y染色体AZF基因微缺失的关系。方法采用多重PCR方法对染色体核型正常的346例严重少精症和无精症患者进行Y染色体AZF基因微缺失检测，同时用化学发光法测定生殖激素水平。结果346例患者中发现Y染色体微缺失患者17例，缺失率为4．9％，其中262例重度少精症中Y染色体微缺失14例（5．3％），84例无精症患者中Y染色体微缺失3例（3．6％）。微缺失类型包括单纯AZFa微缺失2例；单纯AZFb微缺失3例；单纯AZFc微缺失11例；AZFb＋AZFc微缺失1例。30例精液正常者Y染色体均未发现AZF基因微缺失。生殖激素检测结果显示，Y染色体微缺失患者血清FSH，LH和T水平分别为18．76±9．62IU／L，6．05±4．48IU／L和378．54±158．98mmol／L。与无微缺失患者相比，Y染色体微缺失患者血清FSH水平显著性升高（t=3．930，P=0．006）、T水平显著性降低（t=-2．602，P=0．011）。结论Y染色体微缺失及血清生殖激素水平异常与少精症、无精症密切相关，其中AZFc缺失为常见的类型。

原发生精障碍者Y染色体AZF区域微缺失基因诊断

目的对男性不育患者Y染色体AZF区域微缺失进行基因诊断。方法采用多重PCR-凝胶电泳技术对23例原发性无精症患者、28例原发性少精症患者和7例正常生育男性对照进行Y染色体微缺失检测。结果23例原发性无精子症患者中,5例发生了Y染色体微缺失,缺失率为21.7%,在28例少精症患者中,有6例发生缺失,其缺失率为21.4%。其中无精症(AZFa)区sY86缺失1例(2.0%);AZFb区sY127缺失1例(2.0%),sY134缺失1例(2.0%),sY127和sY134同时缺失1例(2.0%);AZFc区sY254缺失1例(2.0%),sY254和sY255同时缺失4例(8.0%)。7例正常生育男性均未检测到Y染色体微缺失。结论男性不育患者Y染色体AZF区域6个STS位点微缺失与男性原发性无精症和少精症密切相关,采用多重PCR技术进行微缺失分析简便、快速、准确,值得推广应用。

501例无精、少精子症细胞遗传学研究

本文对501例无精、少精子症患者进行染色体分析,发现异常核型145例,其中X染色体数目异常81例,易位、倒位11例,Y染色体结构异常49例,XX男性2例,额外小染色体1例,总的染色体异常率为28.94%。本文还分析了核型与表型的关系,并从细胞遗传学的角度对无精。

染色体变异、畸变与男性生殖激素水平和精子生成的关系

目的探讨染色体变异、畸变与男性生殖激素水平和精子生成的关系。方法对147例男性不育和复发性流产患者进行染色体核型、生殖激素和精液分析,并对其结果进行对比分析。结果染色体畸变组血清FSH、LH水平和无精子症发生率分别高于染色体变异组和正常组(P<0.05,P<0.01),血清T水平显著低于染色体变异组和正常组(P<0.05)。Y染色体变异组血清FSH水平和少精子症发生率显著高于常染色体变异组(P<0.05),两组无精子症发生率差异无统计学意义(P>0.05)。性染色体畸变组血清FSH、LH水平和无精子症发生率显著高于常染色体畸变组(P<0.05),血清T水平显著低于常染色体畸变组(P<0.05)。结论染色体变异、畸变与生殖激素紊乱和生精功能障碍密切相关,性染色体变异和畸变导致男性血清FSH、LH水平显著升高、T水平显著降低可能是导致少精子症和无精子症的发病机制之一。

正常生育男性及少精子症患者精子中由回文序列介导的染色体突变

目的:探讨人类精子中由回文序列介导的一类新型染色体突变的发生规律。方法:对28例少精子症以及32例正常生育男性的精液样本,采用巢式及多重巢式PCR检测其中特定的易位DNA序列,并对结果进行统计学分析。结果:49例存在t(11;22)易位突变,其中少精子症组22例,正常生育组27例,两组之间差异无显著性(χ2=0.336,P>0.05)。此外,至少4例亦存在t(1;22)(p21.2;q11.2)、t(17;22)(q11;q11)或t(X;22)(q27;q11)易位突变。易位的发生与精子密度(r=-0.389,P<0.05)、活动率(r=-0.397,P<0.05)呈负相关,而与精液量或供精者年龄无显著相关;未发现易位突变率与回文序列的相似度之间存在关联。结论:由回文序列介导的染色体突变在人类精子中普遍存在,且与精子密度、活动率相关。对这类突变进行动态量化检测可望提供一种从分子水平评估精子质量的手段。

男性不育患者的遗传学病因研究

目的研究染色体异常、SRY基因突变及Y染色体AZF基因微缺失等遗传学病因与男性不育的关系。检测少精子症不育患者血液和精子基因组AZF微缺失情况。方法采用染色体G显带对87例男性不育患者进行核型分析,采用PCR技术对患者SRY基因突变及Y染色体AZF基因微缺失进行检测。结果 87例男性不育患者中发现染色体异常25例(28.74%);XX男性反转1例(1.15%);AZF微缺失4例(4.60%)。总的遗传学异常检出率为34.48%。结论染色体异常及Y染色体AZF微缺失等是引起男性不育的重要遗传学病因。

利用染色体相对长度分析小Y染色体与少弱精的关系

目的利用染色体相对长度分析小Y染色体与少弱精的关系。方法将2016年12月-2017年12月于我院行染色体核型分析且Y染色体微缺失阴性;年龄20～55岁的206例患者作为研究对象,分为精液异常组(n=142)和精液正常组(n=64),利用北昂染色体分析软件测量Y染色体和21号染色体的相对长度,Y染色体相对长度≤21号染色体长度时作为小Y染色体,比较两组中小Y染色体所占的比例是否存在显著差异。结果 142例少弱精患者中小Y染色体有20例(14.1%),64例精液正常的患者中小Y染色体有7例(10.9%);两组差异无统计学意义(P> 0.05)。结论小Y染色体与少弱精无关联。

精子质量异常患者染色体变异分析

目的探讨染色体变异与少精子症、畸形精子症和无精子症的关系。方法选取2015年6月至2017年6月于本院就诊的原发不育男性患者211例,根据精液常规检测结果分为少精子症组(107例)、畸形精子症组(60例)和无精子症组(44例),以同期140例精液常规正常男性作为对照组,抽取外周血进行染色体核型分析,并比较不同组间染色体异常分布。结果畸形精子症组和无精子症组染色体畸变率(5.0%和9.1%)高于正常对照组(1.4%),差异均有统计学意义(P均<0.05);少精子症组染色体畸变率(2.8%)与对照组(1.4%)比较差异无统计学意义(P>0.05);各组间染色体多态率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论染色体畸变是导致畸形精子症和无精子症的重要因素之一,对于此类患者进行外周血染色体检查,有助于查找病因、明确诊断。

少、弱精子及无精子症患者染色体核型分析

目的 探讨染色体异常对少弱精子及无精子症的影响。方法 对 199例男性少、弱精子及无精子症患者进行外周血淋巴细胞培养 ,G显带染色体核型分析。结果 染色体核型异常 2 0例 ,占 10 .1% ;染色体变异 19例 ,占 5 .3%。结论 染色体异常是导致少、弱精子及无精子症的重要因素之一。

无精和严重少精症患者的遗传缺陷分析——附2例世界首报染色体异常核型

对217例无精和严重少精症患者外周血淋巴细胞染色体核型进行分析,并采用聚合酶链反应对7例Y染色体结构异常患者的AZFc区进行检测。187例无精症患者中检出异常核型77例(41.18%)(其中46,XY,t(6;14)(p21;p13),46,XY,t(8;12)(p21;q24)为世界首报核型),主要涉及染色体异常(数目异常和结构异常);染色体异态(Y染色体异态和9号染色体臂间倒位)及46,XX性反转;30例严重少精症患者中检出异常核型4例(13.33%)(结构异常和46,XX性反转)。由此可见,性染色体数目和结构异常是精子发生障碍的主要原因,其次常染色体的某些断裂点也可能影响精子发生。AZFc区的缺失与否与精子发生也有直接关系。

东北地区男性不育患者的Y染色体微缺失分析

目的探讨男性不育患者Y染色体微缺失的种类及其与精子检测结果之间的关系。方法针对12个Y染色体特异序列标签位点设计引物,采用PCR方法检测3720例男性不育患者的Y染色体微缺失情况,并分析对应患者的精子检测结果。结果3720例男性不育患者中共检出Y染色体微缺失165例,检出率为4.43%;其中,包含AZFa和AZFb主要位点缺失的检出率分别为0.24%和0.99%,均为无精子患者;AZFc和AZFd缺失的检出率为2.66%和0.24%,分别63%和89%为有精子患者;Y染色体微缺失构成比为AZFabcd 5.45%,AZFa 5.45%,AZFb 6.67%,AZFbcd 16.98%,AZFc 60.00%,AZFd 5.45%。结论AZFc缺失是最常见的Y染色体微缺失,约2/3 AZFc缺失患者有精子存在,经过治疗后有可能找到更多精子。可适当增加微缺失基因检测的位点,但不能过度解读,某些非常规检测位点缺失将被强制传播给雄性后代,部分缺失有可能扩展为完全的缺失而影响生育。

精索静脉曲张严重少精子症患者Y染色体微缺失分析

目的:探讨精索静脉曲张和Y染色体微缺失对生精障碍的影响。方法:对随机挑选的100例左侧精索静脉曲张严重少精子症患者(精子浓度<5×106/ml,组1),100例左侧精索静脉曲张轻度少精子症患者[精子浓度(10～20)×106/ml,组2],100例特发性严重少精子症患者(组3),100例特发性轻度少精子症患者(组4)和30例正常生育男性对照组(组5)采用聚合酶链反应(PCR)技术进行Y染色体微缺失检测,选取无精子因子(AZF)a、b和c区9个序列标签位点(STS)。结果:组1中有19例患者存在AZF微缺失(19%);组3中有11例患者存在AZF微缺失(11%),其余各组均未发现AZF微缺失;组1比组3有较高的缺失率。结论:在治疗精索静脉曲张严重生精障碍患者前应先进行Y染色体微缺失检测,避免不必要的治疗。

无精症及少精症患者的病因学研究

目的:探讨染色体核型异常和DAZ基因缺失与生精障碍的关系。方法:应用多重PCR技术对60例无精、少精患者和60例正常生育力男性进行DAZ基因检测,并对60例无精、少精患者进行外周血染色体检查。结果:在60例无精、少精患者中共发现23例异常,约为38.3%(23/60),其中DAZ基因缺失4例,染色体异常19例,DAZ基因缺失率为6.7%(4/60),染色体异常率为31.7%(19/60),正常生育力男性未检测到DAZ基因缺失。结论:染色体异常和DAZ基因缺失与生精障碍密切相关,是无精、少精的重要原因。

少精子症患者Y染色体微缺失与否与单精子卵细胞胞浆内注射的相关性

目的:观察探讨Y染色体微缺失少精子症患者对单精子卵细胞胞浆内注射治疗结果的影响。方法:选取我院2013年1月至2016年4月接受卵细胞胞浆内单精子注射辅助治疗的23例确诊为Y染色体微缺失特发性少精症不育患者,及同期在我院接受单精子卵细胞胞浆内注射辅助治疗的无Y染色体微缺失的100例少精子不育患者,分为缺失组及无缺失组。比较接受辅助治疗的两组不育患者在男方精液参数、女方年龄、获卵数、受精率、卵裂率,早晚期流产率等指标数值上差异,分析少精子症不育患者Y染色体微缺失对单精子卵细胞胞浆内注射辅助治疗结果的相关性。结果:缺失组患者在女性年龄,不育年限、获卵数上与无缺失组无统计学差异(P>0.05)。缺失组患者在正常形态精子数量,精子浓度,子宫内膜厚度上与无缺失组具有统计学差异(P<0.05)。缺失组患者在卵裂率,可移植胚胎率上与无缺失组无统计学差异(P>0.05)。缺失组患者在受精率,优质胚胎率均低于无缺失组,且早期流产率,晚期流产率显著高于无缺失组(P<0.05)。结论:Y染色体微缺失的少精子症不育患者在单精子卵细胞胞浆内注射治疗结局中,受精率、胚胎质量明显降低,流产率略微提高,故Y染色体微缺失会影响单精子卵细胞胞浆内注射治疗结果。男性患者面临不育问题时选择胚胎植入治疗时是否选择遗传学诊断,应在遗传咨询后尊重患者意愿。

无精症和严重少精症遗传缺陷筛查研究

目的:探讨无精子症和严重少精子症患者的遗传缺陷与精子生成障碍的关系。方法:采用G显带技术分析外周血染色体核型,并采用聚合酶链式反应对其中染色体核型分析正常的患者进行Y染色体上基因微缺失检测,已正常生育的男子设为对照组。结果:205例无精子症和39例严重少精子症患者中发现染色体核型异常74例,异常核型发生率为30.33%,正常对照组只发现1例异常核型,占3.33%;其中染色体核型正常的无精子症和严重少精子症患者发现Y染色体上基因微缺失3例,缺失率为8.33%,正常对照组无1例Y染色体基因微缺失。结论:染色体核型异常和Y染色体微缺失均为引起无精子症和严重少精子症的重要原因。同时采用这两种遗传学筛查方法可以更全面地评价无精子症和严重少精子症患者的遗传缺陷状况,更好地为患者提供病因诊断、遗传咨询和治疗方案的选择。

1例携带环状4号染色体的Wolf-Hirschhorn综合征合并少精子症患者减数分裂Ⅰ期缺陷的分析

目的报道1例Wolf-Hirschhorn综合征携带1条环状4号染色体合并严重少精子症的病例,并探讨精子发生障碍的可能机制。方法为检测患者初级精母细胞染色体的联会、重组和转录失活情况,用荧光标记联会复合体蛋白3(synaptonemal complex protein 3,SCP3)、错配修复基因蛋白(mut L homolog 1,MLH1)和乳腺癌易感基因1(breast cancer susceptibility gene 1,BRCA1)蛋白对睾丸活检样本进行免疫荧光染色。结果 SCP3染色显示对照组偶线期精母细胞占5.2%,而患者偶线期的精母细胞显著增高占35.4%,表明患者的生精阻滞在初级精母细胞的偶线期。MLH1染色显示每个细胞的结合位点数对照组为47.8±4.5,患者为45.9±5.9,后者明显减少(U=2.62,P<0.05)。BRCA1染色显示患者所有粗线期细胞中都带有1条环状4号染色体,并有不同程度的不配对区域。结论环状4号染色体可能影响生殖细胞减数分裂Ⅰ期的进展,影响联会复合体的形成及未联会区域基因转录的活性,从而使精子的生成障碍,导致不育。