赖氨匹林对人宫颈癌HeLa细胞的抑制作用及其机制研究

目的探讨ERK1/2信号通路在赖氨匹林(aspisol)对人宫颈癌HeLa细胞抑制中的作用。方法分别采用MTT比色法、标准细胞集落形成分析法和Annexin V/PI双染法分析不同浓度aspisol(1、5、10mmol·L-1)对HeLa细胞增殖、细胞集落形成及细胞凋亡的影响;Western blot方法检测细胞外信号调节蛋白激酶(ERK1/2)/磷酸化(P-ERK1/2)和COX-2的表达。结果 aspisol(1、5、10mmol·L-1)可呈浓度依赖性抑制HeLa细胞的生长、降低克隆形成数量、诱导HeLa细胞的早期凋亡率、下调P-ERK1/2及COX-2的表达水平(P<0.01),但不影响总ERK表达(P>0.05)。结论 aspisol对宫颈癌HeLa细胞有抑制增殖、诱导凋亡的作用,其作用机制可能与抑制ERK1/2的活化进而下调COX-2的表达有关。

赖氨匹林对B16黑色素瘤的增殖抑制及促凋亡作用

目的探讨赖氨匹林(aspisol)在体外和体内对小鼠B16黑色素瘤细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法利用MTT法和流式细胞术检测赖氨匹林对B16细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用。用细胞悬液法将B16黑色素瘤细胞接种于小鼠前肢腋窝皮下,制备可移植肿瘤模型。次日给予不同浓度的赖氨匹林腹腔注射,每天1次,共28天,用达卡巴嗪(dacarbazine,DTIC)和生理盐水分别作阳性对照和阴性对照。计算aspisol的抑瘤率;原位凋亡检测法(TUNEL)检测赖氨匹林对肿瘤细胞凋亡的影响;免疫组化法检测aspisol对小鼠肿瘤组织的Survivin、C-erbB-2表达的影响。结果Aspisol可抑制B16细胞增殖,最大抑制率为(68.78±1.27)%,诱导B16细胞凋亡,最大凋亡率为15.8%。200、400、800mg·kg-1aspisol对小鼠黑色素瘤的抑瘤率分别为15.0%、32.3%、49.4%,40mg·kg-1DTIC的抑瘤率为51.4%。各给药组肿瘤细胞均呈现明显凋亡形态改变,不同浓度aspisol均明显下调小鼠肿瘤组织的Survivin、C-erbB-2表达。结论Aspisol在体外和体内能够抑制小鼠B16黑色素瘤增殖和诱导凋亡,其机制可能与抑制Survivin、C-erbB-2表达有关。

ERK1/2 MAPK在赖氨匹林对MCF-7细胞增殖抑制中的作用

背景与目的:探讨赖氨匹林(Aspisol)在抑制人乳腺癌MCF_7细胞增殖过程中,对ERK1/2MAPK信号转导通路的影响。材料与方法:采用免疫细胞化学方法测定MCF_7细胞中环氧合酶_2(COX_2)的表达。采用噻唑蓝(MTT)比色法检测Aspisol对MCF_7增殖的抑制作用;采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况;应用Westernblot分别检测ERK1/2、p_ERK1/2蛋白和凋亡相关蛋白Bcl_2、Bax的表达。结果:在MCF_7细胞中未检测到COX_2的表达。Aspisol对MCF_7细胞增殖有明显的抑制作用,且具有剂量和时间依赖性(P<0.01)。Aspisol可诱导MCF_7细胞凋亡,并随着剂量的增大细胞的凋亡率升高(P<0.05)。Aspisol抑制MCF_7细胞p_ERK蛋白的表达(P<0.05),但不影响总ERK1/2蛋白的表达(P>0.05);Aspisol可促进Bax蛋白表达(P<0.05),但抑制Bcl_2的表达(P<0.05)。结论:Aspisol影响ERK1/2MAPK信号转导通路,调节凋亡相关蛋白表达是其抑制MCF_7细胞增殖的作用之一。

赖氨匹林抑制乳腺癌细胞增殖的机制初探

背景与目的：有研究证实非类固醇类抗炎药（nonsteroidal anti-inflammatotry drugs，NSAIDs）通过抑制环氧合酶（cyclooxygenase，COX）-2干扰致癌作用，但并不是唯一机制。本实验探讨非选择性环氧合酶-2抑制剂赖氨匹林（aspisol）对体外培养的雌激素受体（ER）阴性（MDA-MB-231）和阳性（MCF-7）人乳腺癌细胞增殖的影响及其ERK（extracellular sigal-regulated kinase，细胞外信号调节蛋白激酶）信号通路的影响。方法：应用MTT比色法分析细胞生长抑制作用，流式细胞技术测定凋亡率，Western blot方法检测赖氨匹林对两种乳腺癌细胞外信号调节蛋白激酶（ERK）／磷酸化（P-ERK）的表达的影响。结果：1～10mmol／L赖氨匹林可抑制MDA-MB-231、MCF-7细胞的生长，且其作用具有剂量和时间依赖性，药物浓度越大，时间越长，抑制作用越明显，差异有显著性（P〈0．01）。赖氨匹林（1，5，10mmol／L）作用24h后诱导MDA-MB-231细胞的早期凋亡率分别为（5．76±1．02）％、（10．28±1．95）％、（15．41±2．14）％，与对照组（0．27±0．17）％比较，差异有显著性（P〈0．01），并呈浓度依赖性。赖氨匹林（1，5，10mmol／L）作用24h后诱导MCF-7细胞的早期凋亡率分别为（4．62±1．05）％、（6．86±2．51）％、（11．40±3．56）％，与对照组（0．21±0．11）％相比，差异有显著性（P〈0．01），并呈浓度依赖性。赖氨匹林可不同程度下调两种乳腺癌细胞P-ERK的表达水平（P〈0．01），但不影响总ERK表达（P〉0．05）。结论：赖氨匹林对ER阳性和ER阴性乳腺癌细胞均有抑制增生，诱导凋亡的作用，其作用机制与抑制乳腺癌ERK信号通路有关。

静脉滴注赖氨匹林治疗发热患者的疗效观察

目的比较静脉滴注赖氨匹林与复方氨林巴比妥注射液、对乙酰氨基酚片对发热患者的退热疗效。方法选择发热患者120例,随机分成三组,每组40例。A组给予赖氨匹林注射剂0.9g加入0.9%生理盐水100ml静脉滴注;B组给予复方氨林巴比妥注射液(安痛定)2ml肌肉注射;C组给予对乙酰氨基酚片0.5g口服。三组病例用药30min,60min,120min各测体温1次,观察退热疗效。结果赖氨匹林组退热效果最快,用药30min,体温降至(38.5±0.2)℃,总有效率82.5%;用药60min体温降至(37.7±0.3)℃,总有效率90%;用药120min体温降至(36.6±0.4)℃,总有效率95%。在相同条件下,赖氨匹林的退热疗效高于复方氨林巴比妥和对乙酰氨基酚。结论静脉滴注赖氨匹林退热效果快,不良反应小,是理想、安全的退热药物,值得临床推广。

赖氨匹林增强Cx32/Cx26组成的Hela细胞缝隙连接功能

目的体外观察赖氨匹林对转染并稳定表达连接蛋白32/26(Cx32/Cx26)的Hela细胞缝隙连接通讯(GJIC)功能和Cx32/Cx26蛋白表达水平的影响。方法不同浓度(0、1、5、10mmol·L-1)赖氨匹林作用于人宫颈癌Hela细胞24h后,以划痕标记/染料示踪技术(SL/DT)检测赖氨匹林作用Hela细胞48h后荧光黄在细胞之间传递的距离来评价其对缝隙连接(GJ)功能的影响;Western blot方法检测赖氨匹林对Cx32/Cx26蛋白表达的影响。结果 SL/DT检测显示赖氨匹林具有上调GJ功能的作用;Western blot显示赖氨匹林增加Cx32/Cx26蛋白表达水平。结论赖氨匹林抑制转染并稳定表达Cx32/Cx26的Hela细胞的增殖、上调GJ功能且这种作用可能与其增加Cx32/Cx26蛋白表达水平有关。

赖氨匹林治疗小儿高热疗效的Meta分析

目的系统评价赖氨匹林治疗小儿高热的疗效。方法检索维普(VIP)、中国知网(CNKI)、万方等数据库,检索时间建库至2016年,纳入赖氨匹林治疗(试验组)与复方氨林巴比妥(安痛定)(对照组)治疗小儿高热的随机对照试验(RCTs),独立评价纳入研究的质量并提取资料,采用Rev Man 5.3软件进行统计分析。结果共纳入9篇RCTs,包含患者3 659例,Meta分析结果显示:试验组用赖氨匹林治疗小儿高热,用药1 h后体温明显低于对照组(肌肉注射安痛定),差异有统计学意义[MD=-0.73,95%CI(-1.03,-0.44),P<0.01];用赖氨匹林治疗小儿高热,用药1 h有效率明显高于对照组,差异有统计学意义[RR=1.16,95%CI(1.07,1.27),P<0.01];用药1 h后显效率显著高于对照组,差异有统计学意义[RR=1.55,95%CI(1.35,1.79),P<0.01]。结论肌肉注射赖氨匹林治疗小儿高热疗效比肌肉注射安痛定效果显著。

甲氧氯普胺联合赖氨匹林治疗偏头痛的对照分析

目的分析甲氧氯普胺联合赖氨匹林治疗偏头痛的疗效。方法 84例偏头痛患者随机分为2组。常规组采用赖氨匹林治疗,甲氧氯普胺组在常规组基础上给予甲氧氯普胺治疗。比较2组偏头痛治疗总有效率、药物不良反应发生率、干预前后偏头痛发作次数及每次发作持续时间、头痛VAS评分。对比治疗前后红细胞聚集指数、血小板黏附率、血浆黏度、纤维蛋白原。结果甲氧氯普胺组总有效率高于常规组(P<0.05);2组药物不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后甲氧氯普胺组偏头痛发作次数、偏头痛每次发作持续时间、头痛VAS评分优于常规组(P<0.05);红细胞聚集指数、血小板黏附率、血浆黏度、纤维蛋白原优于常规组(P<0.05)。结论甲氧氯普胺联合赖氨匹林治疗偏头痛的疗效优于单纯应用赖氨匹林。

赖氨匹林对乳腺癌ERK信号通路活性及Bcl-2、Bax表达的影响

目的:探讨非选择性环氧合酶-2抑制剂赖氨匹林对体外培养的MDA-MB-231人乳腺癌细胞ERK信号转导通路活性以及Bcl-2、Bax家族蛋白表达的影响。方法:应用MTT比色法分析细胞生长抑制作用,流式细胞技术测定细胞凋亡率,免疫印迹技术检测赖氨匹林对乳腺癌细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)/磷酸化(p-ERK)、Bcl-2、Bax表达的影响。结果:与对照组相比,(1-10)mmol/L赖氨匹林作用24h、48h、72h明显抑制MDA-MB-231细胞生长,具有剂量、时间依赖性。(1、5和10)mmol/L赖氨匹林作用24h,细胞早期凋亡率分别为5.81%、10.52%、15.63%,对照组为0.27%。赖氨匹林可下调MDA-MB-231细胞p-ERK的表达水平,但不影响总ERK表达,同时上调Bcl-2的表达,下调Bax的表达。结论:赖氨匹林对MDA-MB-231细胞有抑制增殖、诱导凋亡的作用,其作用机制与抑制乳腺癌ERK信号通路、影响Bcl-2、Bax蛋白表达有关。

赖氨匹林对C_3H小鼠移植性乳腺癌的抑制作用

背景与目的:在肿瘤的发生、发展中,环氧合酶(cyclooxygenase,COX)起了很重要的作用,而多种COX抑制剂可以抑制肿瘤细胞增殖,诱导肿瘤细胞凋亡。本实验观察不同浓度赖氨匹林(Aspisol)对小鼠移植性乳腺癌的抑制作用以及对肿瘤细胞凋亡和对肿瘤组织环氧合酶-2(COX-2)、Caspase-3蛋白的表达的影响,并探讨其抑制乳腺癌生长的作用机制。方法:用细胞悬液法将肿瘤细胞接种于C3H小鼠前肢腋窝皮下,制备可移植肿瘤模型。次日给予不同浓度的Aspisol腹腔注射,每天一次,共28天,用氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)和生理盐水分别作为阳性对照和阴性对照。计算Aspisol的抑瘤率;原位凋亡检测法(TUNEL)检测Aspisol对肿瘤细胞凋亡的影响;免疫组化法检测Aspisol对小鼠肿瘤组织的COX-2、Caspase-3表达的影响。结果:175、350、700mg/kgAspisol对小鼠乳腺癌的抑瘤率分别为38.9%、48.2%、47.0%,10mg/kg5-FU的抑瘤率为60.4%。各给药组肿瘤细胞均呈现明显凋亡形态改变,不同浓度Aspisol均明显下调小鼠肿瘤组织COX-2的表达,增强Caspase-3表达。结论:Aspisol对C3H小鼠移植性乳腺癌的生长具有抑制作用;能诱导肿瘤细胞的凋亡,其机制可能与抑制COX-2表达、增强Caspase-3表达有关。

赖氨匹林对小鼠移植乳腺癌的生长抑制和诱导凋亡作用

目的:观察不同浓度的赖氨匹林对C3H小鼠移植性乳腺癌的抑制作用、肿瘤细胞凋亡和造血系统及肝肾功能的影响,为赖氨匹林抗肿瘤作用的临床应用研究提供实验佐证。方法:用细胞悬液法将肿瘤细胞接种于C3H小鼠前肢腋窝皮下,接种后将小鼠随机分成aspisol大、中、小剂量组和生理盐水(NS)组及氟尿嘧啶(5-Fu)组,于接种后第2天分别腹腔注射相应药物,1次/天,连续给药28天。第30天取血,处死小鼠,称瘤体重量,计算抑瘤率;观察小鼠对造血系统、肝肾功能的变化;观察肿瘤组织病理变化;TUNEL法检测赖氨匹林对肿瘤细胞凋亡的影响。结果:赖氨匹林对小鼠乳腺癌的生长具有显著的抑制作用(P<0.01),苏木精-伊红(HE)染色组织病理学检查显示:赖氨匹林各剂量组肿瘤组织有不同程度的坏死。各治疗组肿瘤细胞均呈现明显凋亡形态改变,在一定的用药时间和用药范围内赖氨匹林对小鼠的造血系统及肝、肾功能无明显影响。结论:赖氨匹林对C3H小鼠移植乳腺癌的生长具有抑制作用,能诱导其凋亡,但对其造血系统及肝、肾功能无明显影响。

赖氨匹林在急诊儿科发热性疾病中的应用观察

目的:观察赖氨匹林对小儿高热的退热效果。方法:选择200例高热患儿,将其随机分为赖氨匹林组和安痛定组,分别用赖氨匹林和安痛定肌注退热,观察体温变化,进行疗效比较。结果:两组患儿用药30min及1h后观察体温变化,赖氨匹林组显效率分别为84.7%和98.0%,安痛定组显效率分别为40.0%和86.0%,赖氨匹林组退热效果优于安痛定组,且观察期间无不良反应发生。结论:赖氨匹林起效快,效果好,疗效肯定,无不良反应,是治疗小儿高热的有效药物。

赖氨匹林治疗急诊小儿高热中的临床效果分析

目的探究赖氨匹林治疗急诊小儿高热中的临床效果。方法随机抽取2014年6月—10月来该院急诊科就诊的高热儿童70例,随机分为两组,对照组和实验组,每组35例。对照组使用对乙酰氨基酚,实验组使用赖氨匹林。记录24 h的体温监测,并比较。结果对照组的总体有效率为91.43%,实验组的总体有效率为97.14%,实验组的治疗效果显著,且起效快,所需时间短,明显优于对照组。结论使用赖氨匹林治疗急诊小儿高热见效快,副作用较小,值得在临床上推广。

赖氨匹林静脉滴注、肌肉注射和安痛定注射在小儿高热中的退热效果探讨

目的：探讨赖氨匹林静脉滴注、肌肉注射和安痛定注射在小儿高热中的退热效果。方法选取2011年9月~2014年3月本院收治的150例高热患儿为研究对象，将其随机分为A组（赖氨匹林静脉滴注组）50例、B组（赖氨匹林肌肉注射组）50例和C组（安痛定肌肉注射组）50例，然后将三组患儿的退热时间构成及治疗前后的血清PCT、hs-CRP水平进行统计及比较。结果 A组及B组的退热时间构成优于C组，A组则优于B组，A组及B组治疗后不同时间的血清PCT及hs-CRP均低于C组，A组则低于B组，差异均有统计学意义（P均＜0.05）。结论赖氨匹林在小儿高热中的应用效果好于安痛定，且静脉滴注的应用方式效果相对更好。

注射用赖氨匹林致低血容量性休克一例

1例61岁女性患者因急性上呼吸道感染伴发观,静脉注射赖氨匹林0.75g及头孢呋辛1.5g。药物开始滴注约3小时,患者出现头晕、心慌、面色苍白、大汗、皮肤湿冷、面容淡漠,同时患者开始出现意识模糊,手工测量,血压降至90/60mmHg以下。立即停药,并给予吸氧,0.9%氯化钠溶液120ml,羟乙基淀粉200/0.5溶液250ml,15分钟后患者意识清醒,自诉症状好转。2小时后患者自诉症状基本消观,血压升至106/64mmHg,未诉其它不适,生命体征平稳要求遂离院。次日再次应用头孢呋辛,未出现不适。

赖氨匹林与卡氮芥协同抗肿瘤作用的研究应用

目的 探讨赖氨匹林与卡氮芥协同抗肿瘤的作用价值.方法 通过基础实验、动物实验与临床观察等三大部分对赖氨匹林与卡氮芥作用进行研究.结果 ①基础实验：赖氨匹林对C6细胞具有促凋亡和增殖抑制作用；②动物实验：赖氨匹林与卡氮芥联合使用对胶质瘤具有显著性治疗作用；③临床观察：脑胶质瘤术后36例患者随访18个月,赖氨匹林、卡氮芥联合组疗效明显优于无化疗组和卡氮芥组.结论 赖氨匹林＋卡氮芥对动物模型胶质瘤有显著治疗效果.收集脑胶质瘤术后患者,初步证实赖氨匹林的抗胶质瘤的作用和它在神经外科临床中的应用前景.

来比林在儿童发热性疾病中的作用

目的观察静脉滴注来比林在儿童发热性疾病中的作用。方法将240例急性上呼吸道感染患儿在体温>39℃时随机分为来比林组(80例),扑热息痛组(80例)和复方氨基比林组(80例)。结果来比林组退热效果明显优于扑热息痛和复方氨基比林组(P<0.01)。结论来比林对小儿高热是非常有效的药物,较扑热息痛、氨基比林退热起效快、持续时间长、副作用小、使用较安全,可作为首选使用。

赖氨匹林对宫颈癌Hela细胞增殖及凋亡的影响

目的研究赖氨匹林(aspisol)对人宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡和周期的影响。方法取处于对数生长期的Hela细胞,实验分为4组:阴性对照组只加等体积的低糖DMEM培养液Hela细胞;实验组加入不同浓度的aspisol,使其终浓度分别为1 mmol/L、5 mmol/L、10 mmol/L。采用描计细胞生长曲线法检测细胞增殖状态;HE染色、AO/EB方法进行凋亡细胞形态学的观察。Annexin V-FITC/PI双染检测赖氨匹林对Hela细胞作用24 h后细胞凋亡情况;流式细胞术分析赖氨匹林对Hela细胞作用24 h后细胞周期的变化。结果与对照组比较,aspisol(1,5,10 mmol/L)可呈时间、浓度依赖性抑制Hela细胞的增殖;HE染色光镜下见Aspisol组细胞密度减小,细胞变圆,胞核染色变浅。赖氨匹林(1,5,10mmol/L)作用24 h后诱导Hela细胞的早期凋亡率分别为(5.73±0.87)%、(19.11±2.86)%、(33.72±5.06)%,与对照组(0.46±0.69)%比较,差异有统计学意义(P<0.01),并呈浓度依赖性。细胞周期检测显示赖氨匹林对Hela细胞有G0/G1期阻滞作用。结论 aspisol对宫颈癌Hela细胞有抑制增殖、诱导其凋亡和改变其细胞周期分布,阻滞Hela细胞于G0/G1期。

赖氨匹林对人恶性黑色素瘤A375细胞凋亡的诱导作用

目的 研究赖氨匹林（Aspisol）对人恶性黑色素瘤A375细胞凋亡的诱导作用。方法采用四甲荃偶氮唑蓝（MTr）比色法检测赖氨匹林对A375细胞增殖的抑制作用，倒置显微镜下观察A375细胞形态学变化，流式细胞仪（FCM）检测不同浓度的赖氨匹林诱导A375细胞的早期凋亡率。结果不同浓度的赖氨匹林对A375细胞均有明显的生长抑制作用，且其作用具有时间和浓度依赖性，差异具有非常显著性（P〈0．01）。不同浓度的赖氨匹林对A375细胞作用24h后，均可诱导其发生早期凋亡，并且呈浓度依赖性，差异具有显著性（P〈0．05）。结论赖氨匹林能抑制A375的增殖，诱导其发生凋亡。

赖氨匹林通过RAS/RAF/ERK信号通路调控子宫内膜癌细胞增殖、凋亡的研究机制

目的研究赖氨匹林(Aspisol)对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡的影响及其对RAS/RAF/ERK信号通路的调控作用。方法采用赖氨匹林(5μmol/L、10μmol/L、15μmol/L)作用于子宫内膜癌ZJB-ENC1细胞,MTT法检测赖氨匹林对子宫内膜癌ZJB-ENC1细胞增殖的影响;流式细胞术检测赖氨匹林对细胞凋亡的影响。采用RAS/RAF/ERK信号通路激活剂RASAL1处理子宫内膜癌细胞并加入赖氨匹林(10μmol/L)共同作用(RASAL1+Aspisol组),检测细胞增殖及凋亡能力变化。荧光定量PCR与蛋白免疫印迹(Western blot)分别检测赖氨匹林作用子宫内膜癌细胞后Cyclin D1、Bcl-2、Ras、Raf、p-Erk1/2 mRNA及蛋白的表达。结果MTT检测发现赖氨匹林对ZJB-ENC1细胞生长具有明显抑制作用,且与赖氨匹林使用浓度呈正相关;流式细胞术检测发现随着赖氨匹林浓度的增高细胞凋亡率明显升高;qRT-PCR与Western blot检测发现,与control组相比,赖氨匹林可明显抑制Cyclin D1、Bcl-2、Ras、Raf、p-Erk1/2表达,与Aspisol组相比,RASAL1+Aspisol组Cyclin D1、Bcl-2、Ras、Raf、p-Erk1/2表达均明显降低。结论赖氨匹林可通过抑制RAS/RAF/ERK信号通路相关蛋白表达而抑制其信号通路激活进程进而诱导子宫内膜癌细胞凋亡并抑制其增殖。