Application of Online Solid-phase Extraction Technology in the Field of Environmental Analysis

For purpose of purification and enrichment, environmental samples usually need to be pretreated before analysis because of low concentration of residual organic matters. Solid-phase extraction （SPE） is one of the frequently used methods of pretreatment. This article introduces the methodological principle and flow channel of SPE as well as the categories of frequently used small extraction column, analyzes the application of online SPE technology in environmental analysis, generalizes the advantages of online SPE and sets forth its developmental trend.

在线固相萃取/超高效液相色谱-串联质谱测定地表水中90种药品及个人护理用品

该研究建立了在线固相萃取(OSPE)/超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)测定地表水中90种药品及个人护理用品(PPCPs)的分析方法。水样经过滤后直接进样注入OSPE柱中进行净化和富集,通过阀切换将目标物转移到分析柱中进一步分离分析。采用Waters HSS T3 C_(18)(100 mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱进行分离,以0.1%甲酸水溶液和乙腈为流动相进行洗脱。质谱采用正、负离子同时采集,多反应监测(MRM)模式检测,内标法定量。在优化的色谱-质谱条件下,90种PPCPs呈良好的线性关系,相关系数(r^(2))均大于0.99,检出限为0.06~10.00 ng/L,定量下限为0.24~40.00 ng/L;在10、20、100 ng/L加标水平下,90种化合物的回收率为81.2%~120%,大多数化合物的相对标准偏差(n=7)小于10%。该方法的分析效率、灵敏度高,运行稳定,可作为地表水中PPCPs的监测方法。

在线固相萃取-高效液相色谱串联质谱法快速测定水中痕量氯霉素类抗生素

建立一种新型在线固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱分析方法,自动进行样品富集、净化、分离及检测,实现环境水中氯霉素、甲砜霉素、氟甲砜霉素的定量分析。系统由专属的大体积进样器进样2 mL环境水样到亲水亲油的HLB柱上进行富集和浓缩后进行分析,且整个分析时间仅需17 min;使用同位素标记的内标法定量目标物质,用于校正在线固相萃取过程中不可避免的损失和基质效应,以确保方法准确性,测定结果同传统方法吻合度高。各组分在质量浓度0.50~50.0 ng/L范围内与对应的色谱峰面积线性相关性好,相关系数均大于0.9995,检出限为0.030~0.12 ng/L。3种浓度的样品溶液分别平行测定6次,测试结果的相对标准偏差为1.60%~9.04%,样品加标回收率为85.0%~123.0%。该方法准确可靠、操作简捷、灵敏度高、分析速度快,为研究抗生素在生态环境中的时空分布和迁移转化提供技术支撑。

在线固相萃取大体积进样-高效液相色谱-串联质谱法检测地表水中35种抗生素

抗生素在水环境中常有检出,是国际公约管控的新污染物之一。为了控制水质和保证饮用水来源的安全使用,需要建立快速和高效的抗生素分析方法。目前能够快速测试地表水中多种类抗生素的综合分析方法有待补充。本文建立了在线固相萃取(SPE)大体积进样-高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)分析地表水中9种磺胺类、16种喹诺酮类、4种大环内酯类、4种四环素类和2种其他类共35种抗生素的分析方法。根据化合物在SPE柱的保留和pH条件实验,确定莫西沙星、达氟沙星2种抗生素为碱性上样(0.1%氨水溶液),其余33种抗生素为酸性上样(0.1%甲酸-水溶液)。采用多反应监测(MRM)扫描模式、内标法定量,35种抗生素在线性范围内的相关系数均大于0.995;方法检出限在0.1~5.2ng/L之间;在5ng/L、50ng/L和200ng/L三种加标浓度下,方法精密度分别为1.65%~12.3%、0.20%~10.4%和0.05%~9.92%;加标回收率分别为62.1%~93.1%、65.4%~127%和65.9%~124%。本方法所需样品体积小(10mL)、前处理简单,当酸性和碱性进样体积分别为3mL时,30min内能完成样品在线富集和分离分析过程。本方法应用于21件地表水样中35种抗生素的检测,林可霉素的检出率达到90.5%,氧氟沙星的检出含量最高达到98.2ng/L。本文建立的在线方法测定结果与离线方法一致,且操作简捷、灵敏度高、分析速度快,适合地表水中痕量抗生素的残留分析。

在线固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法同时测定药厂周边地表水中6种利尿剂的残留量

提出了在线固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS)同时测定药厂周边地表水中布美他尼、呋塞米、氯噻嗪、氢氯噻嗪、安体舒通、氨苯喋啶等6种利尿剂残留量的方法。分取20 mL处理后的药厂周边地表水样品,置于在线固相萃取仪的自动进样盘中,以WATERS Oasis HLB固相萃取柱进行提取、净化和富集;所得溶液自动转入色谱系统中,以Shim-pack CLC-ODS C_(18)色谱柱为固定相,以不同体积比的0.1%(体积分数)甲酸溶液-甲醇的混合溶液为流动相进行梯度洗脱;分离后的6种目标物经电喷雾离子源正离子模式扫描,多反应监测模式检测,外标法定量。结果表明:6种目标物标准曲线的线性范围均为0.005~10.0 mg·L^(-1);检出限(3S/N)为0.0351~0.147μg·L^(-1);按照标准加入法对实际样品进行3个浓度水平的加标回收试验,回收率为83.3%~104%,测定值的相对标准偏差(n=6)均不大于5.0%。

微柱固相萃取-电感耦合等离子体质谱联用技术用于测定高盐样品中痕量的铅

建立了微柱固相萃取 -电感耦合等离子体质谱联用系统 .对萃取体系的 p H、洗脱液酸度及流速进行了优化选择 .在最佳的分离条件下 Pb的检测限 (3σ,n=6)为 0 .0 3ng/ m L,测定海水的铅的RSD为 2 .6% .该系统成功地应用于实际样品和标准参考物的在线分离富集和测定 .

固相萃取技术及其研究进展

对固相萃取技术的原理和特点,萃取参数(吸附剂用量、背景体积及洗脱溶剂等)与萃取效率的规律,吸附剂的研究进展与发展趋势,以及目前的固相萃取在线联用技术等方面进行了阐述。该技术比传统液—液萃取用时短、二次污染小、选择性好,是一种很有前途的样品预处理技术。已广泛应用于环境样品中多环芳烃、农药、卤代烃、有机氯化合物、酚类等优先控制污染物的测定。

在线固相萃取法结合电雾式检测器测定黄芪及其复方中黄芪甲苷的含量

采用在线固相萃取高效液相色谱法,结合电雾式检测器,建立了快速测定黄芪及其复方中黄芪甲苷的方法。采用Acclaim Polar AdvantageⅡC18（50 mm＆#215;4.6 mm,3μm）为在线净化柱,以双三元液相色谱的右泵作为上样净化泵,甲醇-水为流动相,梯度洗脱,进行富集和净化；采用Acclaim C18（150 mm＆#215;4.6 mm,5μm）为分析柱,以双三元液相色谱的左泵作为分析泵,乙腈-水作为流动相,等度洗脱,流速为1.0 mL/min,采用中心切割的方式将目标物从在线净化柱转移至分析柱中。电雾式检测器（ CAD）的雾化器温度为30℃；氮气压力为241.3 kPa。黄芪甲苷在药材及复方基质中获得较好分离,黄芪甲苷在4.0～80 mg/L范围内,相关系数r=0.9998,平均回收率为97.6％。实验表明,本方法快速、简便,专属性、重现性较好,测定结果可靠,可应用于黄芪及其复方中黄芪甲苷含量的检测。

整体柱固相萃取-高效液相色谱法在线分析水果中的氯吡脲

建立了整体柱固相萃取-高效液相色谱/紫外检测在线联用方法并用于水果中氯吡脲的分析测定。考察了萃取溶剂的 pH 值及其流速、溶剂解吸时间及其流速等因素对氯吡脲萃取率的影响。在优化的条件下，该方法对氯吡脲的富集倍数为214倍，方法的线性范围为0.01-50.00μg / L，检出限为25 ng / L，相对标准偏差（ RSD）为3.9％。黑葡萄、猕猴桃和西瓜等水果中氯吡脲的加标回收率为87.0％-120.7％，RSD 为0.6％-9.2％。结果表明该方法快速、灵敏，能满足水果中痕量氯吡脲残留分析的要求。

在线固相萃取-液相色谱法直接测定水中超痕量多环芳烃

建立了在线固相萃取-液相色谱直接测定水体中16种超痕量多环芳烃(PAHs)的方法。水样经高速离心后,加入适量甲醇,配制成40%(体积分数)甲醇水溶液,直接进样2 mL至在线固相萃取流路,进行萃取富集,再通过阀切换将洗脱的PAHs转移至分析流路进行分离检测。16种PAHs在各自范围内线性关系良好,相关系数均大于0.996;方法的检出限为0.14～12.50 ng/L,其中苯并[a]芘(B(a)P)的检出限为0.38 ng/L。实际水样在10、40和200 ng/L加标水平下的加标回收率为76.1%～134.9%, RSD为0.3%～16.6%。B(a)P在1 ng/L加标水平下的回收率为71.8%～92.7%, RSD为3.9%。结果表明,该方法操作简单,灵敏度高,溶剂消耗量少,可满足水样中PAHs,尤其是B(a)P的超痕量分析要求。

在线固相萃取-高效液相色谱法同时测定豆芽中11种植物生长剂和杀菌剂

建立了同时测定豆芽中多菌灵、诺氟沙星、环丙沙星、4-氯苯氧乙酸、3-吲哚乙酸、6-苄基嘌呤、2,4-滴、3-吲哚丁酸、1-萘乙酸、福美双和百菌清11种植物生长剂和杀菌剂的在线固相萃取-高效液相色谱分析方法。样品经10%乙腈溶液提取后直接进样分析。首先通过上样泵将样品带入到ACQUITY UPLC BEH C18在线固相萃取柱(5×2.1mm,1.7μm)上实现净化与富集,然后通过阀切换将在线固相萃取柱切换至分析流路中,利用分析泵将保留在固相萃取柱上的目标物反向冲洗至AcclaimTMPolar AdvantageⅡC18分析柱(100×2.1mm,3μm)上进行分离,采用二极管阵列检测器检测。结果表明,11种药物残留在相应的线性范围内线性良好,相关系数r≥0.999,方法的检出限为0.0029~0.094μg/g,低中高3个水平加标的回收率为82.4%~115.0%,相对标准偏差为0.22%~6.8%。方法可用于豆芽中植物生长剂和杀菌剂的同时检测。

在线固相萃取-高效液相色谱-质谱法快速测定绵羊尿液中3种轭合态β-受体激动剂

采用双三元高效液相色谱和液相质谱联用（ HPLC-MS/MS）建立了测定绵羊原始尿液及酶解后尿液中β-受体激动剂（沙丁胺醇、克伦特罗、莱克多巴胺）在线SPE（ Turboflow）检测的方法。分别对Turboflow柱和分析柱条件进行优化,最终确定样品上样速率4 mL/min,进样体积100μL,样品净化时间0.5 min。本方法的回收率在91.3％～112.2％之间,线性范围为0.1～100μg/L,精密度RSD〈1％,日间峰面积RSD〈12％,说明方法的重现性和稳定性良好。在对酶解后的尿液检测中发现,对于苯酚类β-受体激动剂（沙丁胺醇、莱克多巴胺）,酶解后的尿液中检出化合物含量明显高于未酶解样品,对苯胺类β-受体激动剂（克伦特罗）的影响不大。本方法只需对原始尿液或酶解后的尿液进行过膜处理,样品的在线净化、富集、柱平衡和最终分析可在15 min内完成,大大缩短了日常分析所需时间。本方法操作简单,可用于养殖动物β-受体激动剂大规模筛查。

在线固相萃取-高效液相色谱法检测食用油中15+1种欧盟优控多环芳烃

建立了植物油中15＋1种欧盟优控多环芳烃的在线固相萃取-高效液相色谱-紫外/荧光（online-SPEHPLC-UV/FLD）检测分析方法。食用油样品经异丙醇稀释定容并过滤,固相萃取柱Chrom Spher Pi（80 mm×3 mm）在线净化,反相C18PAH专用柱（250 mm×4.6 mm i.d,5μm）分离,异丙醇、乙腈和水为流动相,梯度洗脱,紫外（220 nm）和荧光检测器检测。结果表明,15＋1种多环芳烃在相应的线性范围内峰面积与质量浓度之间线性良好（R2〉0.99）;检出限为0.03~12.23μg/kg;3个水平加标回收率为65.3%~110.5%;相对标准偏差为0.1%~9.8%。

固相萃取-高效液相色谱法测定黄芪中黄芪甲苷的含量

目的采用固相萃取-高效液相色谱方法分析黄芪中黄芪甲苷的含量。方法采用C18固相萃取小柱纯化黄芪提取物中的黄芪甲苷，反相高效液相色谱-紫外检测方法测定黄芪中黄芪甲苷含量。色谱柱为Zorbax SB-C18柱（φ4．6mm×150mm，5μm），以乙腈-水（32：68）为流动相．流速1．0ml／min，柱温30℃，检测波长200nm。结果黄芪甲苷进样量在1.408～7．04μg范围内与峰面积呈良好线性关系，r=0．9999。平均回收率为101．5％。结论该方法操作简便。重现性好，可作为黄芪药材或其它含黄芪制剂中黄芪甲苷含量的分析方法。

HPLC-MS法测定大鼠尿中黄芪甲甙的含量及其尿药动力学研究

目的 建立测定大鼠尿中黄芪甲甙含量的新方法。方法 采用固相萃取高效液相色谱 质谱联用法对大鼠尿中黄芪甲甙的含量进行测定。色谱条件为 :DiamonsilTM C18(4.6mm× 2 5 0mm)柱 ,流动相 :乙腈 水 (40∶6 0 ,v/v) ,流速 0 .8ml/min ,电喷雾型质谱检测器。结果 黄芪甲甙在 0 .1～ 10 μg/ml线性良好 (r=0 .9991,n =5 ) ,最低检测限为 10ng/ml。高、中、低浓度的日内和日间变异系数均小于 10 % ,平均回收率 >90 %。用此法测定了大鼠静注黄芪甲甙后的尿药浓度并计算了药代动力学参数 ,消除速率常数k =0 .2 7h-1,肾排泄速率常数ke=2 .5× 10 -2 h-1。结论 该方法符合生物样品分析要求 ,为黄芪甲甙的体内含量测定提供了新的方法。

在线固相萃取-液相色谱-串联质谱法检测蘑菇中毒患者尿液中痕量α-鹅膏毒肽

建立了在线固相萃取-液相色谱-串联质谱(online SPE-LC-MS/MS)测定蘑菇中毒患者尿液中痕量α-鹅膏毒肽的分析方法。样品经甲酸酸化的乙腈-甲醇(5∶1,v/v)沉淀蛋白质,反相液液微萃取去除样品提取液中的有机溶剂,毒素经ODS微柱(5 mm×2.1 mm,5μm)在线SPE净化,XBridgeTM BEH C18色谱柱(150 mm×3.0 mm,2.5μm)分离,MS/MS测定。采用基于定量环的快速阀切换技术作为在线SPE和LC-MS/MS模块的接口,使得两个分离模块互相独立,无论是流动相还是压力,都不会互相干扰,保证了系统的稳定性;在线系统的精准净化,有效消除了后续质谱检测的基质效应,确保了尿液中痕量水平α-鹅膏毒肽的定性定量检测。尿液中α-鹅膏毒肽在0.1~50μg/L范围内线性关系良好,相关系数(r2)为0.9983;检出限(LOD)为0.03μg/L;α-鹅膏毒肽的加标(0.1、2.0和20μg/L)平均回收率为84.3%~91.7%,相对标准偏差(RSD)为3.8%~7.2%。体内鹅膏毒肽代谢迅速,生物基质中痕量水平毒素的检测是其中毒实验室鉴定的主要难题,通过实际样品检测,证明该法操作简单,准确、灵敏;溶剂沉淀蛋白质和反相液液微萃取去除有机相和脂溶性基质的简单操作,可以作为水溶性毒素在线SPE-LC-MS/MS检测时快速且有效的配套前处理方法;基于在线SPE精准净化技术,可以实现尿液中α-鹅膏毒肽的高灵敏度测定(LOD为0.03μg/L),解决了中毒时患者体内痕量水平α-鹅膏毒肽定性确证的难题,部分患者α-鹅膏毒肽中毒实验室鉴定的时间可以扩展到90 h以上;同时,痕量水平的定量检测技术,可以为中毒后迅速代谢的α-鹅膏毒肽在体内的剂量反应关系研究提供可靠的技术支撑。

柱后紫外光解荧光衍生液相色谱法测定蔬菜中残留的15种苯脲除草剂

建立了蔬菜中15种苯脲除草剂残留的固相萃取-在线柱后紫外光分解和衍生化的高效液相色谱荧光检测分析方法。样品用乙腈提取,弗罗里硅土固相萃取柱净化,目标化合物由反相C18柱分离,经柱后紫外光分解和衍生化后进行荧光检测。对样品的前处理条件、液相色谱分离、柱后紫外光分解和衍生条件等进行了详细的研究。15种苯脲除草剂的高效液相色谱分离在乙腈-水梯度洗脱下完成,目标物的保留时间为9-31m in,线性范围内线性关系良好,相关系数为0.998 6-1.000 0;在洋葱、菠菜、黄瓜等样品中3个加标水平的平均回收率（n=3）为75.3%-121.6%,相对标准偏差为0.4%-11.6%;15种苯脲除草剂在蔬菜中的检出限为0.005-0.05m g/kg。该方法操作简便、灵敏度高、选择性好,符合多种农药残留分析的要求。

在线固相萃取-高效液相色谱-高分辨质谱法测定植物中11种水溶性有机酸

采用在线固相萃取-高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱建立植物中11种水溶性有机酸(乳酸、富马酸、琥珀酸、苹果酸、酒石酸、香豆酸、没食子酸、柠檬酸、香草酸、阿魏酸、新绿原酸)的分析方法。样品经匀浆、超声、过滤、稀释后,经在线Oasis MAX柱(20 mm×2.1 mm,30μm)富集净化,采用BEH C18AX色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm)分离,以含10 mmol/L甲酸铵的0.9%甲酸和0.9%甲酸-乙腈为流动相,梯度洗脱。在负离子扫描模式下,以Full MS/dd-MS2模式进行分析,内标法定量。结果表明,11种有机酸可在9 min内完成分离分析,各组分的精确质量数偏差小于5.00×10^(-6),在1~100μg/L质量浓度范围内线性关系良好,相关系数(R^(2))大于0.999,方法检出限为0.1~3.2μg/kg,定量限为0.3~9.6μg/kg。以芡实和小白菜为基质样品,在2个不同加标水平下,11种有机酸的平均添加回收率分别为92.2%~111%和94.2%~110%,日内相对标准偏差分别为1.4%~4.9%和0.8%~5.6%。所建方法简便、快速、准确、可靠,已应用于8种植物(白萝卜、胡萝卜、土豆、小白菜、香蕉、鸭梨、葡萄、芡实)中有机酸含量的分析,可以作为快速分析植物中水溶性有机酸的新方法。

固相萃取技术及其应用新进展

固相萃取(SPE)是近年来新开发出并得到广泛应用的一种新技术。本文拟通过固相萃取技术的原理、特点、分离模式和操作方法等以及在各个领域的应用和发展前景的介绍与阐述,以对这项新技术在我国的广泛应用起到推动作用。

贞灵固本片中黄芪甲苷的固相萃取-高效液相色谱-蒸发光散射测定

目的建立贞灵固本片中黄芪甲苷的含量测定方法。方法采用固相萃取-高效液相色谱-蒸发光散射检测法(SPE-HPLC-ELSD),Agilent-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-水(74∶26),柱温35℃,流速0.8ml.min-1。结果黄芪甲苷在0.272～5.432μg范围内具有良好的线性关系,r=0.999 9;平均加样回收率为98.82%,RSD为1.57%(n=9)。结论该方法简便、快速、灵敏、准确、重复性好,可作为贞灵固本片的质量控制方法。