不同基原枳实水煎液黄酮类成分及抗氧化活性差异研究

目的 比较不同基原枳实水煎液黄酮类成分和抗氧化活性差异,为枳实的质量评价和临床用药提供参考。方法 建立HPLC法同时测定枳实水煎液中8种黄酮类成分(芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、柚皮素、橙皮素、川陈皮素、桔皮素)的含量,结合多元统计分析化学成分差异;采用DPPH法和ABTS法测定不同基原枳实水煎液的抗氧化活性,以灰色关联度分析和双变量相关性分析评价枳实水煎液中8种成分含量与抗氧化活性的相关性。结果 含量测定及统计分析结果表明不同基原枳实水煎液主要差异成分为柚皮苷和新橙皮苷,其中甜橙枳实水煎液中几乎不含柚皮苷和新橙皮苷,而酸橙枳实水煎液中这两种成分含量较高;抗氧化活性结果表明酸橙枳实水煎液抗氧化活性显著优于甜橙枳实水煎液(P <0.05);灰色关联度分析和双变量相关性分析显示,酸橙枳实水煎液中抗氧化作用的核心药效组分是橙皮苷、新橙皮苷、川陈皮素;甜橙枳实水煎液抗氧化作用的核心药效组分是芸香柚皮苷、橙皮素、川陈皮素。结论 本研究建立了HPLC法同时测定枳实水煎液中8种黄酮类成分的含量;不同基原枳实水煎液黄酮类成分含量与抗氧化能力均存在差异。

舒胃汤对功能性消化不良大鼠血清干细胞因子、一氧化氮的影响

目的观察舒胃汤对功能性消化不良(FD)大鼠血清干细胞因子(SCF)、一氧化氮(NO)的影响,探讨舒胃汤治疗FD的作用机制。方法将60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、木香顺气丸组、莫沙必利组、舒胃汤低剂量组、舒胃汤高剂量组共6组,每组10只。除空白组外其余5组通过夹尾刺激方法制造功能性消化不良模型。模型组和空白组不给予药物处理,其余各组大鼠分别给予相应药物灌胃治疗14 d。采用ELASA法检测大鼠血清SCF、硝酸还原酶法检测大鼠血清NO含量变化。结果与空白组比较,模型组大鼠血清NO升高,SCF降低(均为P<0.05),差异有统计学意义;舒胃汤治疗后血清SCF升高(P<0.05),NO降低差异有统计学意义(P<0.05)。结论舒胃汤能够调节功能性消化不良大鼠血浆NO、SCF水平的变化,恢复胃肠道运动功能,从而起到对功能性消化不良的治疗作用。

经典名方温胆汤中枳实模拟古法的炮制工艺与质量控制研究

目的结合古代及现代文献,建立模拟古法的枳实炮制工艺及质量控制方法,为温胆汤经典名方研发提供参考依据。方法运用高效液相色谱法(HPLC)等现代分析技术测定柚皮苷、新橙皮苷含量,分析探讨不同炮制参数对枳实质量的影响。结果建立枳实中柚皮苷、新橙皮苷HPLC含量测定方法及供试品溶液的制备方法,系统适应性试验及方法学考察结果良好。确立枳实炮制工艺参数为以药材量1.4倍水,拌润55 min,120℃炒制7 min。水炙后,枳实中柚皮苷、新橙皮苷含量升高。结论柚皮苷、新橙皮苷可用于枳实药材定量分析和质量控制;《备急千金要方》中温胆汤组方药材枳实模拟古法的炮制方法初步推断为水炙。本研究可为经典名方温胆汤新药研发提供参考依据。

厚朴、枳实、生大黄治疗2型糖尿病胃肠实热证经验--仝小林三味小方撷萃

厚朴、枳实、生大黄组成的厚朴三物汤是仝小林教授临证辨治2型糖尿病的靶方之一。中满内热,土壅木郁是该方运用的核心病机。临床运用时,厚朴作为小肠动力药,常用9~30 g以下气除满;枳实作为胃动力药,用9~15 g以破气消积;大黄作为大肠动力药,视患者肠腑燥实之轻重而用1.5~15 g以泻热通下。三者用于以脘腹胀满、大便秘结、舌红苔黄等为临床表现的2型糖尿病胃肠实热证患者,药证相应,效如桴鼓。

温胆汤历史沿革研究进展

温胆汤主要组方药材包括半夏、竹茹、枳实、陈皮、甘草和生姜,主治用于胆寒症。由于历史变迁,朝代更迭,历代温胆汤在药材组成、用药剂量与加水量及炮炙方法等方面有所不同。

枳实煮散的粉碎粒度和煎煮工艺的研究

目的:优选枳实煮散的粉碎粒度和煎煮工艺,为枳实煮散的研究和应用提供参考。方法:制备4种规格的枳实煮散,采用HPLC方法检测水煎液中辛弗林、柚皮苷、橙皮苷及新橙皮苷的含量;以总化合物的百分含量和干膏率为指标考察粉碎粒度、加水量及煎煮次数对枳实煮散煎出物的影响,并与饮片传统煎煮进行对比研究。结果:粒度、加水量和煎煮次数对枳实煮散水煎液的化合物含量和干膏率均有显著影响(P<0.05),综合多方面因素,最终确定枳实煮散的制备工艺为:颗粒全部通过10目筛,且过80目筛的细粉量不得大于20%;煎煮工艺为煮散加10倍水,浸泡20 min,煎煮1次,煎煮时间20 min。按此工艺制备的煮散水煎液中化合物含量和干膏得率均是饮片传统煎煮(10倍水,煎煮2次,煎煮时间共50 min)的2.5倍以上。结论:筛选的枳实煮散的粉碎粒度,适合工业生产,便于患者煎煮;从药学角度来说,枳实煮散能够起到节省药材和节省能源的作用。

基于网络药理学探讨小承气汤治疗消化性溃疡的分子机制

目的:基于网络药理学和分子对接的研究方法,探讨小承气汤治疗消化性溃疡潜在的物质基础和分子机制。方法:在TCMSP数据库中查找并筛选出小承气汤中3味中药(枳实、厚朴、大黄)的活性成分,运用Swiss Target Prediction数据库预测靶点,通过文献挖掘及在多种基因疾病数据库中,以“消化性溃疡”、“胃溃疡”、“十二指肠溃疡”等为关键词查询得到疾病相关靶点,将两者进行分析比对得到关键靶点。应用Cytoscape软件表示出“药材-成分-靶点-通路”之间的关系图,对靶点基因进行生物过程分析,用京都基因组数据库进行通路注释分析,再用分子对接方法得到药材活性成分与关键靶点的结合情况。结果:通过网络预测出小承气汤中21种活性成分作用于与疾病相关的16个关键靶点上,涉及了31个生物学过程、27条KEGG通路(P<0.05)。结论:本研究利用网络药理学探讨小承气汤治疗消化性溃疡潜在的物质基础和作用机制,对经典名方在临床的广泛应用提供了参考,也为后期的深入研究提供了方向。

枳实标准汤剂质量研究

为更好地评价不同产地的枳实标准汤剂,建立了枳实标准汤剂中辛弗林含量及特征图谱的测定方法。采用高效液相色谱仪与InertSustain AQ-C18(4.6 mm×250 mm,5.0μm)色谱柱,以甲醇-磷酸二氢钾溶液为流动相,柱温为28℃,流速为1.0 mL/min,检测波长为225 nm,对枳实标准汤剂中辛弗林含量、特征图谱进行了测定。结果显示,15批枳实标准汤剂出膏率均值为15.14%,范围为10.50%~19.91%,RSD为19.31%;辛弗林含量(质量分数)均值为9.07 mg/g,范围为5.92~15.21 mg/g,RSD为33.05%;辛弗林含量转移率均值为22.65%,范围为10.24%~47.70%,RSD为45.92%;15批枳实标准汤剂共确定7个共有峰,各峰相对保留时间均在±5%内,相对峰面积RSD均大于100%,相似度为0.655~0.936。这表明,不同产地的枳实出膏率、辛弗林含量及含量转移率较稳定;不同产地的枳实标准汤剂各成分间差异较大。经方法学考察认为,枳实标准汤剂中辛弗林含量及特征图谱的测定方法稳定,具有较高的重复性、稳定性及可信度,可用于枳实标准汤剂的质量评价,可为进一步深入研究枳实配方颗粒提供参考。

黄芪枳实汤联合化疗在乳腺癌患者中的临床效果观察及对毒副反应的影响研究

目的:探讨黄芪枳实汤联合化疗在乳腺癌患者中的临床效果及对毒副反应的影响。方法:取2015年7月—2016年10月我院收治的乳腺癌患者80例,按治疗方法不同分为对照组(n=40)和观察组(n=40)。对照组采用吡柔比星和紫杉醇进行化疗,观察组在对照组基础上给予黄芪枳实汤进行治疗,比较两组临床治疗效果及毒副反应。结果:观察组患者治疗后CD8+水平显著低于对照组患者,CD4+/CD8+水平显著高于对照组患者(P<0.05);观察组患者出现白细胞下降、血小板减少、胃肠道反应、脱发、谷丙转氨酶升高等毒副反应例数均显著少于对照组患者(P<0.05)。结论:黄芪枳实汤联合化疗在乳腺癌患者中的临床效果理想,可显著改善患者的免疫功能,降低化疗的毒副反应,值得推广应用。

基于指纹图谱和网络药理学预测经典名方温胆汤中枳实的质量标志物

目的基于指纹图谱和网络药理学预测经典名方温胆汤(Wendandecoction,WDD)中药材枳实的质量标志物(Q-Marker)。方法建立枳实药材和WDD基准样品的指纹图谱,使用中药色谱指纹图谱相似度评价软件(2012年A版)进行相似度分析和共有成分指认;采用网络药理学筛选共有成分的相关靶点和关键通路,并建立成分-靶点-通路网络,预测枳实发挥祛痰止呕,清胆和胃功效潜在的Q-Marker,并测定其含量。结果建立了15批枳实药材和15批WDD基准样品的指纹图谱,15批枳实药材和WDD基准样品指纹图谱相似度>0.9,指认出5个化学成分,分别为柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、川陈皮素、桔皮素;网络药理学筛选分析得到5个化合物的TP53、MAPK8、EGFR、JUN、MMP9等32个核心靶点和癌症通路、内分泌抵抗通路等10条关键通路,构建了“成分-靶点-通路”网络图,预测柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、川陈皮素、桔皮素为WDD中枳实的Q-Marker。WDD中柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、川陈皮素、桔皮素的含量≥0.0117%,0.0253%,0.0257%,0.0104%,0.0107%。结论WDD中枳实的Q-Marker预测分析为建立完整的WDD质量评价体系提供参考,也为阐明其药效物质基础的作用机制奠定了基础。

大黄、枳实、厚朴不同炮制品对小承气汤中药效组分的影响

目的研究大黄、枳实、厚朴饮片变化对小承气汤药效组分的影响,以期为临床的合理应用和饮片的质量标准提供参考。方法采用HPLC法分别测定各类成分。大黄游离蒽醌类(芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚):Syncronis C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇–0.1%磷酸;梯度洗脱;体积流量0.8 m L/min;柱温30℃;进样量10μL;检测波长254 nm。大黄结合蒽醌类(番泻苷B、番泻苷A):Syncronis C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈–0.05%磷酸;梯度洗脱;柱温30℃;进样量10μL;检测波长340 nm。枳实黄酮苷类(芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷):Syncronis C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈–水;梯度洗脱;体积流量0.7 m L/min;柱温40℃;进样量10μL;检测波长283 nm。厚朴木脂素类成分(和厚朴酚、厚朴酚):Syncronis C_(18)色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈–0.05%磷酸;梯度洗脱;体积流量0.7 m L/min;柱温30℃;进样量10μL;检测波长294 nm。结果小承气汤配伍剂量(大黄12 g–炒枳实9 g–姜厚朴6 g)不变,大黄、枳实、厚朴饮片改变时,小承气汤药效组分总量变化规律为:大黄–枳实–姜厚朴>酒大黄–炒枳实–姜厚朴>熟大黄–炒枳实–姜厚朴>大黄炭–炒枳实–姜厚朴≈小承气汤>大黄–炒枳实–厚朴,变化率分别为酒大黄组(6.561%)、熟大黄组(4.222%)、大黄炭组(0.118%)、枳实组(30.186%)、厚朴组(-11.218%)。除大黄炭组外,其余组的药效组分总量皆明显变化,其中枳实组变化最明显。结论同一味药材的不同炮制品在小承气汤处方中药效组分不同,对其他药味的影响亦不同,在小承气汤处方配伍中不可随意替代。

经典名方枳实薤白桂枝汤物质基准的量值传递研究

目的 建立经典名方枳实薤白桂枝汤(Zhishi Xiebai Guizhi Decoction,ZXGD)基准样品的HPLC特征图谱并对其进行多成分含量测定,研究ZXGD物质基准量值传递规律,为复方制剂研究奠定基础。方法 制备20批ZXGD基准样品,建立其特征图谱,明确其特征峰并对其进行特征峰的归属;对ZXGD基准样品进行多成分含量测定,分析主要成分从饮片-物质基准的传递规律。结果 20批ZXGD基准样品的特征图谱相似度均大于0.93,共匹配得到11个特征峰,分别来自于方中枳实(峰1、3~5、9)、厚朴(峰2、10、11)、桂枝(峰6~8);各指标性成分的含量范围及饮片-基准样品的平均转移率分别为辛弗林0.46%~0.85%和103.80%,橙皮苷0.58%~1.07%和42.36%,肉桂酸0.025%~0.047%和105.53%,桂皮醛0.09%~0.17%和5.40%,厚朴酚与和厚朴酚0.005 6%~0.010 3%和0.23%。结论 采用HPLC特征图谱和多成分含量测定对ZXGD物质基准的量值传递规律进行研究,该方法科学合理,且明确了饮片-物质基准的传递规律,实现了对经典名方ZXGD开发研究的全过程质量控制。

枳实饮片标准汤剂的质量控制

目的:建立枳实饮片标准汤剂的质量控制方法,为枳实配方颗粒及其他枳实相关产品的质量评价提供参考。方法:从市场上收集了不同品质的16批枳实饮片,其中包括13批酸橙枳实和3批甜橙枳实,按标准化煎煮工艺制备枳实饮片标准汤剂,以辛弗林转移率、标准汤剂的出膏率和pH等为综合评价指标,建立枳实饮片标准汤剂的质量控制体系。结果:13批酸橙枳实饮片标准汤剂中辛弗林转移率处于35. 7%～92. 7%,平均转移率61. 9%; 3批甜橙枳实饮片标准汤剂中辛弗林转移率处于53. 1.%～84. 4%,平均转移率73. 2%。13批酸橙枳实饮片标准汤剂的出膏率处于20. 7%～43. 8%,平均出膏率28. 4%; 3批甜橙枳实饮片标准汤剂的出膏率范围为13. 8%～17. 6%,平均出膏率15. 4%。说明酸橙枳实饮片标准汤剂的出膏率高于甜橙枳实饮片标准汤剂的出膏率。13批酸橙枳实饮片标准汤剂的pH 4. 48～5. 32,平均pH 4. 99; 3批甜橙枳实饮片标准汤剂的pH 4. 77～5. 38,平均pH 5. 06。与相应的对照指纹图谱相比,13批酸橙枳实饮片标准汤剂的HPLC指纹图谱相似度均> 0. 9,找到6个共有峰,其中3个指认为柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷; 3批甜橙枳实饮片标准汤剂的HPLC指纹图谱相似度均> 0. 9,找到2个共有峰,其中1个指认为橙皮苷。酸橙枳实饮片标准汤剂图谱中的色谱峰数量明显多于甜橙枳实饮片标准汤剂。结论:建立的质量评价方法精密度、重复性、稳定性良好,适用于枳实相关产品的质量评价。酸橙和甜橙的枳实饮片标准汤剂应该作为2个品种,不同基原枳实饮片标准汤剂应该分别进行研究。以枳实为例,建议多基原的中药配方颗粒以"种名+中药饮片+配方颗粒"的形式命名。

枳实煮散与传统饮片煎煮的对比研究

目的比较枳实煮散与传统饮片的煎出效果,为枳实煮散的研究和应用提供参考。方法采用HPLC方法检测枳实水煎液中橙皮苷、柚皮苷、新橙皮苷及辛弗林含量,以化合物含量和干膏率为指标,系统考察加水量、煎煮时间对枳实煮散与传统饮片煎煮的影响。结果枳实煮散煎煮工艺为加水量不少于14倍、煎煮时间不少于15min;同等煎煮条件下,煮散化合物含量和干膏率均达饮片2倍以上;煮散加10倍水,煎煮1次,煎煮时间10min,其总化合物含量和得膏率分别为饮片传统煎煮(10倍水,煎煮时间为50min)的3.4倍、2.7倍。结论从药学角度来说,枳实饮片制成煮散,在节省一半以上药材的同时,又能节省4/5的煎煮时间,值得深入研究和推广应用。

UFLC-MS/MS法同时测定栀子厚朴汤中10个成分的含量

目的:建立超快速液相色谱-串联质谱法同时测定栀子厚朴汤中10个成分(京尼平苷、京尼平龙胆双糖苷、和厚朴酚、厚朴酚、异柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、柚皮素和橙皮素)的含量。方法:采用Shim-Pack XR-ODS色谱柱(75 mm×3.0 mm,2.2μm),流动相为0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B),梯度洗脱(0~10 min,10%B→30%B;10~12 min,30%B→60%B;12~18 min,60%B→85%B),平衡时间为5min,流速为0.5 mL·min-1,柱温为30℃,进样量为5μL;质谱采用3200 QTRAP三重四极杆串联质谱仪,离子源为电喷雾电离源(ESI源),检测方式为负离子检测,扫描模式为多反应检测(MRM)。结果:京尼平苷、京尼平龙胆双糖苷、和厚朴酚、厚朴酚、异柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、柚皮素和橙皮素质量浓度分别在1~40μg·mL-1(r=0.999 6)、0.2~8μg·mL-1(r=0.999 7)、0.1~4μg·mL-1(r=0.999 3)、0.1~4μg·mL-1(r=0.999 7)、0.2~8μg·mL-1(r=0.999 5)、1~40μg·mL-1(r=0.999 7)、0.2~8μg·mL-1(r=0.998 5)、1~40μg·m L-1(r=0.999 7)、0.1~4μg·m L-1(r=0.999 2)和0.02~0.8μg·m L-1(r=0.999 4)范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均回收率(n=9)分别为98.0%、98.5%、96.9%、98.8%、98.4%、99.3%、99.4%、98.7%、98.9%和97.9%。6批样品中上述10个成分的含量范围分别为京尼平苷4.51%~4.83%,京尼平龙胆双糖苷0.805%~0.841%,和厚朴酚0.125%~0.134%,厚朴酚0.133%~0.144%,异柚皮苷0.403%~0.435%,柚皮苷5.54%~5.84%,橙皮苷0.210%~0.222%,新橙皮苷3.98%~4.30%,柚皮素0.059 2%~0.066 0%,橙皮素0.021 3%~0.022 3%。结论:本方法准确灵敏,稳定性和重复性好,可用于栀子厚朴汤的质量控制。