膜荚黄芪(Astragalus membranaceus (Fisch) Bunge)组织培养再生体系的建立

本研究以膜荚黄芪的子叶、下胚轴、幼茎、幼叶为外植体,诱导愈伤组织及再生芽,建立膜荚黄芪组织培养再生体系。结果表明,子叶是最佳的外植体。在6-BA与2,4-D或NAA培养基组合中,以MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.5mg/L为最佳的愈伤组织及芽诱导培养基。黄芪再生植株较难生根,在IAA、IBA和NAA激素培养基组合中,以1/2MS+IBA 2.0mg/L或1/2MS+IBA 1.0mg/L+NAA 1.0mg/L为最佳的试管苗生根培养基,生根率50%左右。

黄芪的本草考证及其研究进展

目的:研究历代书籍对黄芪的文献记载,对黄芪进行本草考证,总结黄芪的现代研究进展。方法:通过查阅古代本草学书籍以及与黄芪相关的现代书籍与期刊,从黄芪的道地沿革、基源、名称、功效主治、炮制方法、分类品级以及黄芪在现代医学应用研究七个方面进行考证。结果:通过查阅,黄芪道地产区由之前的四川、陕西、宁夏地区逐渐过渡到山西、内蒙古地区,如今以山西、内蒙古地区的黄芪为优,较为全面地分析了黄芪的发展历程和应用价值。黄芪作为最常用的中药补药,且应用范围广泛,有很好的研究价值和发展前景。结论:黄芪最初以膜荚黄芪为正品,后来蒙古黄芪所替代,但膜荚黄芪仍作为正品被使用,为黄芪的进一步研究提供了理论基础,黄芪作为最常用的中药补药,应用范围广泛,有很好的研究价值和发展前景。

蒙古黄芪中黄酮类成分的研究

目的研究蒙古黄芪的化学成分,为该中药的开发利用和质量评价提供依据。方法利用多种色谱方法分离纯化,通过理化常数测定和波谱分析鉴定其化学结构。结果从蒙古黄芪中分离鉴定了9个黄酮类化合物,分别为芒柄花素(formononetin,Ⅰ)、(3R)-8,2′-二羟基-7,4′-二甲氧基异黄烷[(3R)-8,2′-dihydroxy-7,4′-dimethoxy-isoflavane,Ⅱ]、毛蕊异黄酮(calycosin,Ⅲ)、(6aR,11aR)9,10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-葡萄糖苷[(6aR,11aR)9,10-dimethoxypterocarpan-3-O-β-D-glucoside,Ⅳ]、7,2′-二羟基-3′,4′-二甲氧基异黄烷-7-O-β-D-葡萄糖苷(7,2′-di-hydroxy-3′,4′-dimethoxy-isoflavane-7-O-β-D-glucoside,)、芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷(formononetin-7-O-β-D-glucoside,Ⅴ)、毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷(calycosin-7-O-β-D-glucoside,Ⅵ)、红车轴草异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷(pratensein-7-O-β-D-glucoside,Ⅶ)和染料木苷(genistin,(Ⅸ))。结论化合物为首次从黄芪属植物中分得,化合物为首次从该种植物中获得,化合物～具有促进细胞增殖的活性。-

安国引种黄芪的质量初步评介

测定安国县１０个村引种黄芪药材中黄芪甲苷含量，平均值为０．１９９％，比传统道地黄芪高２倍，比《中国药典》标准（不得少于０．０４％）高近４倍，但外观质量难以相比，１０个村黄芪药材中砷、汞、铅、镉、镍、钴等 ６种元素的平均值分别为 ０． ２４４、０． ００９、１．７３１、０． ０３６、０． ２１４、０． ３０２ μｇ／ｇ，与土壤中６种元素的比值即富集系数≤０．５。

黄芪多糖微波辅助提取工艺优化

对黄芪多糖进行微波辅助提取,采用单因素试验及正交试验优化提取工艺,探讨料水质量比、微波功率、微波处理时间、pH对黄芪多糖提取率的影响。结果表明,微波辅助提取黄芪多糖的最佳工艺条件是料水质量比1∶15、微波功率450 W、微波处理时间90 s、pH 8.5。

蒙古黄芪与膜荚黄芪种子形态特征及其鉴别方法的研究

目的为黄芪种子鉴定提供方法,为按中药材GAP原则制定相关标准操作过程(SOP)提供基础研究资料。方法采用肉眼直接观察、光学显微镜观察和电子显微镜进行扫描观察,比较蒙古黄芪和膜荚黄芪两种药用黄芪的种子形态特征和微观结构;通过萌发试验,比较二者的差异。结果通过肉眼和光学显微镜观察,两种黄芪种子的形态差异不明显,在电子显微镜下观察,两种黄芪种子的萌发孔形状、种脐和种皮的微观结构有明显差异;蒙古黄芪较膜荚黄芪种子硬实率高,萌发不整齐,萌发高峰滞后。结论在电子显微镜下能够对两种黄芪种子准确地做出鉴定,种脐、萌发孔、种皮的微观结构可作为鉴别两种黄芪种子的指标;种子硬实率和萌发动态规律可用于两种黄芪种子的辅助鉴别。

膜荚黄芪内生真菌的分离与鉴定

根据膜荚黄芪(Astragalus membranaceus(Fisch.)Bunge)根叶组织在4种培养基上的生长状况,制成水载片,用光学显微镜定期观察产孢的内生真菌菌丝结构、菌落形态特征等指标鉴定到属。结果表明:从膜荚黄芪根、叶各培养基上共分离65株内生真菌。经显微形态观察鉴定为半知菌门镰孢属、曲霉属、青霉属,其中镰孢属为优势菌群,且大都无孢子产生。

用RP-HPLC法测定黄芪毛状根中黄芪甲苷的含量

ＲＰ－ＨＰＬＣ法对黄芪毛状根中黄芪甲苷进行定量分析，在实验条件下，黄芪甲苷标准品在 １０．６４～５３．２０μｇ范围内与峰面积呈良好的线性关系；平均加样回收率为９２．６６％；精密度试验相 对标准偏差为４．２０％和２．４０％；测得黄芪毛状根中黄芪甲苷的含量为０．１４％（干重）。

HPLC法测定黄芪中的黄芪甲苷含量

用ＨＰＬＣ法测定了黄芪甲苷含量．样品从东北黄芪中提取，用色谱纯甲醇溶解并稀释，采用ＹＷＧＣ１８ 柱，流动相为甲醇，在２０５ ｎｍ 下检测，灵敏度为０－１ ＡＵＦＳ，测定了黄芪甲苷的含量．平均回收率为９６－１ ％ ，ＲＳＤ 为２－１５ ％ ，结果表明，样品浓度在０－０１ ～０－２ ｍｇ／ｍＬ 之间与峰面积成良好的线性关系．

施N量和AM真菌对黄芪生长和生理学特性的影响

以非灭菌土为生长基质,采用盆栽试验,研究了不同施N水平下接种AM真菌对黄芪生长和生理学特性的影响。结果表明:不同施N水平对AM真菌接种效果有显著影响,接种AM真菌能够提高黄芪根系菌根侵染率,但高N量抑制了AM真菌对黄芪根系的侵染。不同施N水平下接种AM真菌能有效提高黄芪生长量、植株叶片可溶性蛋白含量及SOD和CAT活性,但可溶性糖含量和POD活性却有所下降。施N量为50～100 mg N/ kg土时AM真菌接种效果最好。

黄芪改善红细胞变形能力的活性成分研究

膜荚黄芪(Astragalus Membrannaceus(Fisch)Bunge)为豆科紫云英属植物,其根作为传统中药黄芪之正品。本课题通过以改善红细胞变形能力为活性导向筛选,用核孔膜滤筛法,以IF值为指标,对膜荚黄芪的成分进行了系统分离和鉴定。结果表明:黄芪中的黄芪皂甙Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ(Astragaloside Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ)等皂甙类及芒柄花素(Formononetin),毛蕊异黄酮(Calycosin)等异黄酮类化合物,对孵化红细胞的变形能力有明显的改善作用,这可能是黄芪改善血液流变学指标的重要机理。

卡通片质量标准研究

目的 :对卡通片进行定性定量分析 ,制定其质量标准。方法 :对卡通片中黄芪、人参、葛根进行了薄层色谱鉴别 ,并采用高效液相色谱法对该制剂中黄芪的主要有效成分黄芪甲甙进行定量测定。结果 :加样回收率为 97.6 4% ,RSD为 2 .18% (n=5 )。结论 :方法灵敏 ,结果准确 。

川产家种与野生膜荚黄芪的生药学对比研究

本文通过对四川家种与野生膜荚黄芪(Astragalus membranaceus(Fisch)Bunge)根的性状、组织构造、化学成分预试薄层层析定性、游离氨基酸种类和含量的对比分析,结果表明:家种膜荚黄芪与野生膜荚黄芪质量基本一致,为发展四川黄芪资源提供了科学依据。

黄芪毛状根淀粉粒结合淀粉合成酶(GBSS)基因表达载体的构建及在大肠杆菌中的表达

以膜荚黄芪毛状根中克隆得到的GBSS基因序列设计一对特殊引物 ,得到了包含GBSS基因全部表达序列的1.9kb的cDNA片段。该片段正向连接于切除了GUS基因的pBI12 1上 ,构建成表达载体pBI-gbss。SDS -PAGE实验证实了GBSS基因在含有该表达载体的DH5α的大肠杆菌中得到表达。酶活性测定表明转化菌株比未转化菌株高出 2 0 %。

膜荚黄芪活性成分研究

对膜荚黄芪（Astragatus membranaceus (Fisch.)Bunge）的成分进行了系统分离和鉴定,同时用E- 112顺磁共振仪测定了以芒柄花素为代表的异黄酮类化合物清除超氧自由基的活性,结果证明黄芪中的异黄酮类化合物具有清除超氧阴离子的活性。这可能是黄芪药物具有治疗心力衰竭和抗衰老的活性机理之一,在分离过程中,得到15种结晶,经化学降解和光谱分析分别鉴定为:晶Ⅰ:蔗糖（sucrose）,晶Ⅱ:黄芪皂甙Ⅳ（astragaloside Ⅳ）,晶Ⅲ:芒柄花素（formononetin）,晶Ⅳ:毛蕊异黄酮（calycosin）,晶V:黄芪皂甙Ⅵ（astragaloside Ⅵ）,晶Ⅵ:（3R）7,2’-二羟基-5’,6’二甲氧基异黄烷-7-O-β-D葡萄糖甙,晶Ⅶ:黄芪皂甙Ⅱ（astragaloside Ⅱ）,晶Ⅶ:黄芪皂甙Ⅱ（astragaloside Ⅱ）,晶Ⅷ:黄芪皂甙Ⅲ(astragaloside Ⅲ）,晶Ⅸ:β-谷甾醇（β-sitosterol),晶Ⅹ:棕榈酸（palmitic acid）,晶Ⅺ:胡萝卜甙（daucosterol),晶XⅡ～XV结构待定,本文主要报道晶Ⅲ的活性及晶Ⅵ的结构鉴定,晶Ⅵ为一新化合物。

玉仁丰乳丸质量标准研究

采用薄层色谱法对制剂中的黄芪、王不留行、川芎进行了鉴别，采用双波长薄层扫描法以人参皂苷Rg1为指标进行了含量测定。方法回收率为97．54％，RSD=3．43％，玉仁丰乳丸中人参皂苷Rg1测定含量为0．55％（n=3）。方法准确，专属性强，可有效地控制该制剂的质量。

商品黄芪的地区用药及其易混品的形态与显微鉴别

黄芪的地区用药及易混品共５种，即：梭果黄芪ＡｓｔｒａｇａｌｕｓｅｒｎｅｓｔｉｉＣｏｍｂ．，淡紫花膜荚黄芪Ａ．ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ（Ｆｉｓｃｈ．）Ｂｕｎｇｅｆ．ｐｕｒｐｕｒｉｎｕｓ（Ｙ．Ｃ．Ｈｏ）Ｙ．Ｃ．Ｈｏ，乌拉特黄芪Ａ．ｈｏａｎｔｃｈｙＦｒａｎｃｈ．，甘青黄芪Ａ．ｔａｎｇｕｔｉｃｕｓＢａｙａｌｉｎ和马衔山黄芪Ａ．ｍａｈｏｓｃｈａｎｉｃｕｓＨａｎｄ．－Ｍａｚｚ．等，对其中药形态和组织特证进行了比较研究，并编写了生药性状和组织特征检索灰。

超微粉碎技术对黄芪多糖、淫羊藿多糖溶出的影响

用蒽酮-硫酸法测定了黄芪、淫羊藿普通粉和超微粉对其多糖溶出量的影响。结果表明,在相同的条件下,超微粉中黄芪多糖、淫羊藿多糖提取量较普通粗粉分别提高了117.13%和315.15%。

黄芪幼苗丛枝菌根形成过程研究

盆栽灭菌条件下,研究了黄芪Astragalus membranaceus与摩西球囊霉Glomus mosseae形成丛枝菌根的过程及细胞结构变化情况。结果发现,黄芪接种34 d时,真菌菌丝开始侵染根表皮;44 d时菌丝在皮层细胞内逐渐增多,并且细胞间有极少量泡囊产生,形状为椭圆形;54 d时细胞内大量菌丝扩展;63 d时有大量真菌孢子萌发;84 d时细胞间有大量泡囊形成,呈圆形、近圆形或椭圆形,部分泡囊开始收缩衰老,同时皮层细胞内有少量丛枝并存。生长期间,菌根侵染率和孢子密度的变化与丛枝菌根的发育状况密切相关。

黄芪主要农艺性状与种子产量通径分析

为了提高黄芪种子的产量和质量,本文对三年生蒙古黄芪(Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bunge.var.mongholicus(bge.)Hsiao)的9个农艺性状和单株种子产量进行了通径分析。结果表明:9个性状与单株种子产量的直接通径系数大小依次为:单株果荚数(Py7=0.805)>每果荚种子数(Py8=0.556)>株高(Py1=0.146)>千粒重(Py9=0.059)>果层高(Py3=0.014)>每丛单株数(Py4=-0.090)>每株分枝数(Py5=-0.091)>每株果荚枝数(Py6=-0.110)>冠幅(Py2=-0.134)。因此,要提高黄芪种子产量,应通过加强田间管理措施,以增加单株果荚数、每果荚种子数和株高等。