拟南芥多效性基因CPR5转化水稻中花11的研究

利用根癌农杆菌介导法将拟南芥多效性基因CPR5转化水稻中花11,同时优化了其再生体系和遗传转化体系。结果表明:相比27℃、暗培养,32℃、持续光照培养可使诱导率提高到100%,且缩短了诱导周期;预分化培养后,在附加5 mg/L 6-BA和1 mg/L NAA的分化培养基上分化率和再生率可分别达到100%和90.50%。同时探索了较高转化频率的条件为A600≈0.05～0.1的农杆菌菌液浸染5 min,共培养时间为3 d,同时添加1张用AAI培养液浸湿的无菌滤纸。对部分转化植株进行PCR、Southern blot和半定量RT-PCR检测,结果表明AtCPR5基因已经整合到水稻基因组中,在所试验的转化植株中均为单拷贝,但表达程度存在差异。