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题名转拟南芥AtKup1基因高含钾量烟草获得
被引量:22
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作者
郭兆奎
杨谦
姚泉洪
万秀清
颜培强
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机构
哈尔滨工业大学生命科学与工程系
上海市农业科学院生物技术中心
黑龙江省烟草科学研究所
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出处
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第12期24-28,共5页
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基金
国家烟草专卖局资助项目(1102001011007)
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文摘
提取拟南芥幼根总RNA,进行RTPCR逆转录,产物测序,将其构建到含Km(带内含子)筛选标记的植物双元表达载体上,根癌农杆菌介导法将AtKup1基因导入烟草,对转化子进行PCR扩增、GUS染色、Southern杂交和AtKup1基因mRNA荧光定量PCR分析,并进行烟叶内在成分化验分析。PCR获得2100bp左右扩增产物,测序结果证实扩增产物序列与拟南芥AtKup1基因(GenbankNo:AF029876)一致;得到GUS染色阳性的AtKup1基因转化烟草材料29株。经PCR扩增、分子杂交检测证实AtKup1基因已整合到转基因烟草的基因组,荧光定量PCR分析可以在幼根中检测到AtKup1基因的mRNA转录。烟叶含钾量化验结果表明导入的AtKup1基因在转化材料中成功表达,使烟叶含钾量提高约45%。
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关键词
atkup1基因
转基因烟草
K^+含量
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Keywords
atkup1 Transgenic tobacco K^+ content
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分类号
Q943
[生物学—植物学]
S572
[农业科学—烟草工业]
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