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小鼠和大鼠NS5ATP4同源基因序列的生物信息学分析 被引量:4
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作者 成军 杨倩 +2 位作者 刘妍 王建军 纪冬 《世界华人消化杂志》 CAS 2004年第7期1582-1587,共6页
目的:克隆、鉴定、分析小鼠和大鼠NS5ATP4基因序列, 确定编码产物序列,并对于其与人的NSSATP4基因及其编码产物的序列的同源性进行分析. 方法:利用基因芯片技术获得了人NS5ATP4的cDNA序列,利用生物信息学技术确定小鼠、大鼠的NS5ATP4的... 目的:克隆、鉴定、分析小鼠和大鼠NS5ATP4基因序列, 确定编码产物序列,并对于其与人的NSSATP4基因及其编码产物的序列的同源性进行分析. 方法:利用基因芯片技术获得了人NS5ATP4的cDNA序列,利用生物信息学技术确定小鼠、大鼠的NS5ATP4的基因及其编码产物的序列,并对于其同源性进行生物信息学分析. 结果:利用生物信息学技术确定了小鼠和大鼠的NS5ATP4 的基因及其编码产物的序列,小鼠和大鼠的NS5ATP4编码基因区分别由762和756个核苷酸(nt)组成.编码产物分别由263和261个氨基酸残基(aa)组成.与人NS5ATP4基因和蛋白质一级结构序列的同源性分别为90.29%,84.25%和95.65%,86.96%. 结论:应用生物信息学技术确定了小鼠和大鼠的NS5ATP4 的基因及编码产物的序列. 展开更多
关键词 小鼠 大鼠 NS5atp4同源基因序列 生物信息学分析 基因芯片技术
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新基因NS5ATP4表达产物下调细胞周期素B2基因表达的研究 被引量:2
2
作者 郭江 成军 +7 位作者 赵龙凤 杨倩 纪冬 曲建慧 高学松 刘妍 张黎颖 戴久增 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2005年第4期352-354,共3页
目的探讨新基因NS5ATP4表达产物对细胞周期素B2(cyclinB2)基因启动子转录的调节作用。方法根据文献确定细胞周期素B2的启动子区域,聚合酶链反应(PCR)扩增细胞周期素基因因启动子(B2p),克隆至真核报告基因表达载体pCAT3Basic中,构建pCAT3... 目的探讨新基因NS5ATP4表达产物对细胞周期素B2(cyclinB2)基因启动子转录的调节作用。方法根据文献确定细胞周期素B2的启动子区域,聚合酶链反应(PCR)扩增细胞周期素基因因启动子(B2p),克隆至真核报告基因表达载体pCAT3Basic中,构建pCAT3cyclinB2p报告载体;以该质粒转染肝癌细胞系HepG2细胞系,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测报告基因氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性并与pcDNA3.1()NS5ATP4共转染HepG2细胞系,用ELISA法检测CAT的表达活性。结果成功获得细胞周期素B2启动子的正确克隆。pCAT3cyclinB2p和pcDNA3.1()NS5ATP4共转染的HepG2细胞的CAT表达活性是pCAT3Basic空载体的10倍,pCAT3cyclinB2p的0.14倍。结论本文克隆的细胞周期素B2启动子有顺式调节下游基因表达的活性,NS5ATP4对细胞周期素B2基因的转录具有下调作用。 展开更多
关键词 NS5atp4 细胞周期素B2 基因启动子 下调
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转基因重组质粒ATP4B-SV40T-IRES-GFP的构建及鉴定
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作者 张隆 赵成根 +3 位作者 李大力 王金玉 李琦 范忠泽 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2012年第4期314-318,共5页
目的:构建ATP4B-SV40T-IRES-GFP重组质粒并进行鉴定.方法:根据小鼠ATP4B启动子序列设计引物,获得的小鼠ATP4B基因启动子序列,并加入限制性内切酶酶切位点.将其装入载体IRES-GFP,获得重组载体ATP4B-IRES-GFP并进行酶切鉴定.之后将SV40T... 目的:构建ATP4B-SV40T-IRES-GFP重组质粒并进行鉴定.方法:根据小鼠ATP4B启动子序列设计引物,获得的小鼠ATP4B基因启动子序列,并加入限制性内切酶酶切位点.将其装入载体IRES-GFP,获得重组载体ATP4B-IRES-GFP并进行酶切鉴定.之后将SV40T基因克隆入ATP4B-IRES-GFP载体,并用限制性内切酶PstI和AseⅠ进行验证.结果:将小鼠ATP4B启动子序列插入IRES-GFP载体,经过酶切验证获得正确的ATP4B-IRES-GFP质粒;将SV40T片段插入ATP4B-IRES-GFP,质粒测序及酶切结果验证获得正确的ATP4B-SV40T-IRES-GFP重组质粒.显微注射入小鼠受精卵可获得阳性小鼠.结论:成功构建ATP4B-SV40T-IRES-GFP重组质粒,可用于下一步构建原发性胃癌转基因小鼠. 展开更多
关键词 SV40T atp4B启动子 质粒 转基因小鼠
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ATP4B在不同程度胃黏膜病变中的表达及其与幽门螺杆菌感染的关系 被引量:5
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作者 李凤斐 杜维桓 杨桂彬 《北京医学》 CAS 2014年第1期12-14,共3页
目的研究ATP4B在胃黏膜病变演化过程中的表达变化,并探讨其与幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染的关系。方法根据组织形态学检查将221例胃镜活检标本分为慢性浅表性胃炎(CSG)、慢性萎缩性胃炎(CAG)、肠上皮化生(IM)和异型增生(Dy... 目的研究ATP4B在胃黏膜病变演化过程中的表达变化,并探讨其与幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染的关系。方法根据组织形态学检查将221例胃镜活检标本分为慢性浅表性胃炎(CSG)、慢性萎缩性胃炎(CAG)、肠上皮化生(IM)和异型增生(Dys)4组;采用免疫组织化学方法检测ATP4B的表达情况;根据胃镜检查时快速尿素酶试验结果确定Hp感染状态。结果 ATP4B表达水平随胃黏膜病变演化而降低,在4组的表达率分别为51.4%、15.4%、15.9%及5.0%,CSG组ATP4B表达水平显著高于其他各组(P<0.05)。CSG组中Hp阳性标本ATP4B的表达率为33.3%,显著低于其在Hp阴性标本中的表达率(59.7%,P<0.05);在另外3组中,Hp阳性标本与阴性标本ATP4B的表达率差异无统计学意义(P>0.05)。结论在胃黏膜病变演化过程中,ATP4B的表达随胃黏膜病变的进展而降低;Hp在胃黏膜病变演化的早期阶段抑制了ATP4B的表达。 展开更多
关键词 atp4B 胃黏膜病变 幽门螺杆菌
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粟酒裂殖酵母蛋白Atp4定位和功能的研究 被引量:1
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作者 李琴 张琳琳 黄鹰 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期59-63,共5页
研究粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)中Atp4的定位和参与线粒体功能的机制。借助于基因敲除、荧光显微镜观察、线粒体提取、生化试剂处理和Western blotting等技术开展研究。在甘油培养基上,Δatp4突变菌株表现出生长缺陷,是... 研究粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)中Atp4的定位和参与线粒体功能的机制。借助于基因敲除、荧光显微镜观察、线粒体提取、生化试剂处理和Western blotting等技术开展研究。在甘油培养基上,Δatp4突变菌株表现出生长缺陷,是线粒体呼吸缺陷菌;Fluorescence microscope观察到用GFP标记的Atp4和线粒体是共定位的;采用生化试剂TritonX-100和蛋白酶K处理以及碳酸钠处理Atp4-Flag和yHL6381线粒体,结果表明Atp4定位在线粒体内膜;Western blotting实验结果表明Atp4缺失导致Cob1、Cox1、Cox2和Atp6表达量剧烈下降,Cox3和Cox4蛋白表达量也有略微下降。综上所述,Atp4在线粒体内膜发挥功能,对于维持线粒体编码蛋白的正常表达至关重要,是线粒体呼吸链功能的发挥所必需的。 展开更多
关键词 线粒体 atp4 粟酒裂殖酵母 呼吸链
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日产柴ATP4——未来大型货车的希望
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作者 张维福 《汽车与配件》 1996年第13期24-25,共2页
在世界各地的汽车展上,许多概念小客车纷纷亮相,但是很少有概念货车登场,一个原因是在汽车展上展示未来货车的形象,对使用者(货运公司)来说是没有多少趣味的。他们更多地重视盈利和亏损的计算。由于新的排放法规的颁布,目前正迫使日本... 在世界各地的汽车展上,许多概念小客车纷纷亮相,但是很少有概念货车登场,一个原因是在汽车展上展示未来货车的形象,对使用者(货运公司)来说是没有多少趣味的。他们更多地重视盈利和亏损的计算。由于新的排放法规的颁布,目前正迫使日本的货车制造公司投入更多的资金用于开发新的货车。去年秋季的东京汽车展上。 展开更多
关键词 汽车 货车 atp4系列 日产柴
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ATP4A联合ATP4B可作为胃癌早期诊断及判断预后的生物标志物
7
作者 黎滨茹 李琳琳 马锐 《解剖科学进展》 CAS 2024年第2期153-156,160,共5页
目的利用生物信息学筛选出潜在的具有早期诊断及判断胃癌预后的生物标志物。方法应用GEO2R从GEO数据集筛选出差异表达基因,应用GO/KEGG进行功能富集分析,使用STRING工具生成蛋白互作网络,再利用Cytoscape的MCODE插件鉴定出Hub基因。使用... 目的利用生物信息学筛选出潜在的具有早期诊断及判断胃癌预后的生物标志物。方法应用GEO2R从GEO数据集筛选出差异表达基因,应用GO/KEGG进行功能富集分析,使用STRING工具生成蛋白互作网络,再利用Cytoscape的MCODE插件鉴定出Hub基因。使用HPA分析Hub基因在胃癌组织中的表达情况,基于Kaplan-Meier分析预后生存曲线。结果从GSE13911、GSE19826、GSE29272三个数据集得到105个有交集的DEGs,它们主要参与代谢途径。筛选出蛋白互作节点共75个,最后得到10个Hub基因,其中发现ATP4A和ATP4B有明显相关性(r=0.699,P<0.001),且发现ATP4A和ATP4B在胃癌组织细胞浆中表达升高,与预后差呈正相关。结论ATP4A和ATP4B可能作为胃癌潜在的早期诊断及判断预后的生物标志物。 展开更多
关键词 胃癌 Hub基因 atp4A atp4B GEO数据库
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丹参质膜H+-ATP4酶基因(SmPHA4)在酿酒酵母中表达及其抗逆功能分析
8
作者 刘娜娜 杨晓冰 +1 位作者 李晔 李秀红 《生物技术》 CAS 2022年第3期269-275,324,共8页
[目的]将丹参质膜H^(+)-ATP4酶基因(SmPHA4)克隆并导入到真核生物模型INVSc1酿酒酵母中,测试SmPHA4基因的酵母转化子在非生物胁迫下的耐受性,以分析该基因(SmPHA4)的功能。[方法]将SmPHA4基因全长通过无缝克隆的方式连入pYES2载体中获... [目的]将丹参质膜H^(+)-ATP4酶基因(SmPHA4)克隆并导入到真核生物模型INVSc1酿酒酵母中,测试SmPHA4基因的酵母转化子在非生物胁迫下的耐受性,以分析该基因(SmPHA4)的功能。[方法]将SmPHA4基因全长通过无缝克隆的方式连入pYES2载体中获得重组质粒pYES2-SmPHA4,并把该重组质粒导入到真核生物INVSc1酿酒酵母中,对SmPHA4基因的酵母转化子在不同温度、盐碱度、氧化剂等条件胁迫下的菌株存活率进行了分析统计。[结果]SmPHA4基因的酵母转化子对极端温度的耐受性有所增强(47℃和-20℃)(P<0.05或P<0.01)。但是在其余几种非生物胁迫下如3 mol/L NaCl、3 mol/L KCl、100 mmol/L H_(2)O_(2)和20%PEG 6000等胁迫条件下均显示出降低的耐受性(P<0.05或P<0.01)。[结论]SmPHA4基因可以增强酵母转化子对特定极端温度的耐受性,但降低了其在试验条件中盐胁迫、氧化胁迫、干旱胁迫因子的耐受性,显示SmPHA4基因与丹参的抗非生物胁迫功能有关。 展开更多
关键词 丹参 质膜H+-atp4 酿酒酵母 基因表达 功能分析
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PMCA1-4及其A端和C端剪接变异体在成年大鼠前庭组织中的表达
9
作者 罗蜜 褚汉启 +5 位作者 陶雁玲 周良强 陈金 刘云 杜智会 陈请国 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期202-206,共5页
目的研究质膜钙ATP酶异构体1-4(plasma membrane Ca^(2+)-ATPase 1-4,PMCA1-4)在成年大鼠前庭组织的分布部位,及其A端和C端剪接变异体的表达类型。方法选择8周龄健康SD大鼠,解剖出内耳器官行前庭切片,同时取前庭椭圆囊斑和球囊斑提取总... 目的研究质膜钙ATP酶异构体1-4(plasma membrane Ca^(2+)-ATPase 1-4,PMCA1-4)在成年大鼠前庭组织的分布部位,及其A端和C端剪接变异体的表达类型。方法选择8周龄健康SD大鼠,解剖出内耳器官行前庭切片,同时取前庭椭圆囊斑和球囊斑提取总RNA。通过免疫荧光方法检测PMCA1-4在成年大鼠内耳前庭组织的表达部位,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测PMCA1-4的A端和C端剪接变异体在成年大鼠前庭组织的表达类型。结果球囊和椭圆囊荧光染色切片中,于毛细胞和支持细胞的胞体外侧膜可见PMCA1表达,毛细胞纤毛中可见PMCA2强表达,毛细胞和支持细胞的胞体外侧膜可见PMCA3弱表达,PMCA4几乎不表达。4种PMCA亚型在球囊表达的剪接体分别为PMCA1x/b、PMCA2w/b、PMCA3z/(a,b)和PMCA4x/b,它们在椭圆囊的表达类型与球囊相同。结论PMCA1-4在成年大鼠前庭器官的表达部位存在差异,这4种PMCA亚型的剪接体类型也各不相同。这种差异性可能是为了满足前庭组织和亚细胞结构域对Ca2+调节的特殊需求。 展开更多
关键词 质膜钙ATP酶异构体1-4 球囊 椭圆囊 前庭毛细胞 剪接变异体
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Atp4b promoter directs the expression of Cre recombinase in gastric parietal cells of transgenic mice 被引量:4
10
作者 Zengming Zhao Ning Hou +2 位作者 Yanxun Sun Yan Teng Xiao Yang 《Journal of Genetics and Genomics》 SCIE CAS CSCD 2010年第9期647-652,共6页
Parietal cells are one of the largest epithelium cells of the mucous membrane of the stomach that secrete hydrochloric acid. To study the function of gastric parietal cells during gastric epithelium homeostasis, we ge... Parietal cells are one of the largest epithelium cells of the mucous membrane of the stomach that secrete hydrochloric acid. To study the function of gastric parietal cells during gastric epithelium homeostasis, we generated a transgenic mouse line, namely, Atp4b-Cre, in which the expression of Cre recombinase was controlled by a 1.0 kb promoter of mouse β-subunit of H^+-, K^+-ATPase gene (Atp4b). In order to test the tissue distribution and excision activity of Cre recombinase in vivo, the Atp4b-Cre transgenic mice were bred with the reporter strain ROSA26 and a mouse strain that carries Smad4 conditional alleles (Smad4Ca/Co). Multiple-tissue PCR of Atp4b-Cre;Smad4Co/+ mice revealed that the recombination only happened in the stomach. As indicated by LacZ staining, ROSA26;Atp4b-Cre double transgenic mice showed efficient expression of Cre recombinase within the gastric parietal cells. These results showed that this Atp4b-Cre mouse line could be used as a powerful tool to achieve conditional gene knockout in gastric parietal cells. 展开更多
关键词 parietal cells Cre recombinase transgenic mouse atp4b
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Intramolecular stacking interaction in mixed-ligand complexes containing ATP4-and aromatic N-heterocyclic ligands
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作者 乐学义 毋福海 +2 位作者 贺小凤 宋粉云 计亮年 《Chinese Journal of Chemistry》 SCIE CAS CSCD 1998年第4期356-362,共7页
The stability constants of the binary ML2+ and ternary M(ATP)L2? complexes, where L=Iq (isoquinoline) or BIm (benzimidazole) and M=Zn2+ or Cd2+, have been determined by potentiometric pH titration in aqueous solution ... The stability constants of the binary ML2+ and ternary M(ATP)L2? complexes, where L=Iq (isoquinoline) or BIm (benzimidazole) and M=Zn2+ or Cd2+, have been determined by potentiometric pH titration in aqueous solution at I=0.1 mol/L (NaClO4), T=25°C. The stability of the ternary complexes characterized by ΔlogKM=logKM(ATP)LM(ATP)L- logKMML corresponding to the equilibrium M(ATP)2? + ML2+ = M(ATP)L2? + M2+ in higher than what would be expected on statistical grounds. The increase may be related to the stacking interaction between the aromatic ring of the ligands L and the purine moiety of ATP4–. 1H NMR studies of Zn2+/ATP4?/L confirm the presence of stacking in the ternary complexes. It is concluded that the strength of the intramolecular stacking interaction ia dependent on the structure of the aromatic ring of the ligand L and the formation of a metal ion bridge. Possible implications an discussed briefly. 展开更多
关键词 Stacking interaction mixed-ligand complexes aromatic N-heterocyclic ligands atp4- stability constants
全文增补中
真菌中的脂质不对称调节和P4型ATP酶
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作者 陈柯志 刘锦燕 +1 位作者 王鲁灵 项明洁 《中国真菌学杂志》 CSCD 2023年第4期364-369,共6页
脂质组分在双分子膜中不对称分布是广泛存在于真核细胞中的现象,有助于膜系统的出芽和融合,从而促进胞吞胞吐、蛋白分选运输等生理过程。多种蛋白参与维持脂质不对称,其中P4型ATP酶是重要的脂质转运体。P4型ATP酶又称脂质翻转酶,主要介... 脂质组分在双分子膜中不对称分布是广泛存在于真核细胞中的现象,有助于膜系统的出芽和融合,从而促进胞吞胞吐、蛋白分选运输等生理过程。多种蛋白参与维持脂质不对称,其中P4型ATP酶是重要的脂质转运体。P4型ATP酶又称脂质翻转酶,主要介导氨基磷脂的转位。在酿酒酵母、新生隐球菌、白念珠菌和构巢曲霉中,多种P4型ATP酶亚基的缺失导致蛋白运输失常,对唑类药物的敏感性升高,细胞壁完整性受损,毒力减低,在巨噬细胞中生存能力减弱等表型,提示脂质翻转酶的重要性及其作为抗真菌靶点的潜力。 展开更多
关键词 脂质不对称 P4型ATP酶 脂质翻转酶 Cdc50 真菌 酿酒酵母 新生隐球菌
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外周血CD4^(+)PD-1^(+)Tcells及CD4^(+)T淋巴细胞ATP含量与复发性卵巢癌疗效的相关性分析
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作者 李慧芬 《实用妇科内分泌电子杂志》 2023年第27期24-26,共3页
目的 探讨外周血CD4^(+)程序性细胞死亡受体-1(PD-1)^(+)T cells及CD4^(+)T淋巴细胞三磷酸腺苷(ATP)含量与复发性卵巢癌疗效的相关性。方法 选取30例复发性卵巢癌患者为复发组,30例未复发卵巢癌患者为非复发组;另选取30名同期体检健康... 目的 探讨外周血CD4^(+)程序性细胞死亡受体-1(PD-1)^(+)T cells及CD4^(+)T淋巴细胞三磷酸腺苷(ATP)含量与复发性卵巢癌疗效的相关性。方法 选取30例复发性卵巢癌患者为复发组,30例未复发卵巢癌患者为非复发组;另选取30名同期体检健康者作为对照组。评估外周血CD4^(+)PD-1^(+)T cells及CD4^(+)T淋巴细胞ATP含量与复发性卵巢癌疗效的相关性。结果 复发组和非复发组的CD4^(+)PD-1^(+)T cells较对照组明显升高(P<0.05)。复发组和非复发组的CD4^(+)T淋巴细胞ATP含量较对照组明显降低(P<0.05)。复发组治疗后CD4^(+)PD-1^(+)Tcells显著低于治疗前(P<0.05),治疗后CD4^(+)T淋巴细胞ATP含量显著高于治疗前(P<0.05)。CD4^(+)PD-1^(+)T cells与复发性卵巢癌疗效成负相关(r=-0.393,P=0.039),CD4^(+)T淋巴细胞ATP含量与复发性卵巢癌疗效成正相关(r=0.449,P=0.031)。结论 复发性卵巢癌患者外周血CD4^(+)PD-1^(+)T cells及CD4^(+)T淋巴细胞ATP含量与疗效密切相关。 展开更多
关键词 复发性卵巢癌 CD4^(+)PD-1^(+)T cells CD4^(+)T淋巴细胞ATP含量
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ABCC4基因表达对前列腺癌免疫微环境的影响
14
作者 张清元 刘敏 +5 位作者 陆江婷 袁宗泽 苑佳兴 庞福智 廖金玲 陈阳 《广西医科大学学报》 CAS 2023年第2期245-253,共9页
目的:探究ATP结合盒亚家族C成员4(ABCC4)基因在前列腺癌(PCa)中的表达,分析ABCC4对PCa肿瘤免疫微环境(TME)的影响。方法:使用GEO数据库中的GEO2R计算PCa与癌旁组织的差异表达基因。通过GEPIA2数据库探究ABCC4基因在PCa中的表达。将从UCS... 目的:探究ATP结合盒亚家族C成员4(ABCC4)基因在前列腺癌(PCa)中的表达,分析ABCC4对PCa肿瘤免疫微环境(TME)的影响。方法:使用GEO数据库中的GEO2R计算PCa与癌旁组织的差异表达基因。通过GEPIA2数据库探究ABCC4基因在PCa中的表达。将从UCSC Xena数据库下载的TCGA中的PCa数据分为ABCC4基因高、低表达组。使用clusterprofafiler R包进行GO分析和基因集富集分析(GSEA)。利用TISIDB数据库、ESTIMATE和CIBERSORT分析ABCC4基因表达与免疫指标的相关性。结果:PCa组织中ABCC4基因表达高于癌旁组织(P<0.05)。ABCC4高表达组PCa患者生存能力较差。在GSEA中,ABCC4低表达组中Th1和Th2细胞分化通路被激活,ABCC4基因可能在PCa的TME中起作用。TISIDB分析证实ABCC4基因表达与NK和T细胞丰度呈负相关关系(P<0.05)。ABCC4基因高表达与免疫检查点基因低表达有关。ESTIMATE和CIBERSORT分析表明,ABCC4基因表达可抑制PCa的免疫细胞浸润,尤其CD8 T、NK和Tregs细胞。免疫荧光实验显示,ABCC4蛋白表达低可诱导更多的CD8 T细胞浸润(P<0.05)。结论:ABCC4基因调控PCa的TME的免疫细胞浸润,尤其对T细胞和NK细胞浸润有重要作用,从而影响PCa的发生及其免疫治疗。 展开更多
关键词 前列腺癌 ATP结合盒亚家族C成员4 免疫浸润 肿瘤免疫微环境 生物信息学
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膀胱癌患者癌组织ABCC4、miR506-3-p表达水平及临床意义
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作者 廖高源 何超 刘攀 《国际检验医学杂志》 CAS 2023年第20期2526-2531,共6页
目的检测膀胱癌患者ATP结合盒转运蛋白C4(ABCC4)和微小RNA-506-3p(miR-506-3p)的表达水平,并探讨其与患者预后的关系。方法选取2015年5月至2017年5月该院收治的78例膀胱癌患者作为研究对象,术中收集所有患者膀胱癌组织及癌旁组织(距离... 目的检测膀胱癌患者ATP结合盒转运蛋白C4(ABCC4)和微小RNA-506-3p(miR-506-3p)的表达水平,并探讨其与患者预后的关系。方法选取2015年5月至2017年5月该院收治的78例膀胱癌患者作为研究对象,术中收集所有患者膀胱癌组织及癌旁组织(距离癌组织边缘≥3 cm)。采用免疫印迹法或实时荧光定量PCR技术检测各组织ABCC4蛋白、mRNA及miR-506-3p的表达水平,分析ABCC4蛋白和miR-506-3p表达的相关性、靶向调控关系,以及二者与膀胱癌患者临床病理特征、术后4年总生存率的关系;COX回归分析影响膀胱癌患者预后的危险因素。结果膀胱癌组织ABCC4蛋白和mRNA的表达水平均明显高于癌旁组织(P<0.05),而膀胱癌组织miR-506-3p的表达水平明显低于癌旁组织(P<0.05)。膀胱癌组织中ABCC4蛋白与miR-506-3p表达呈负相关(P<0.05),且miR-506-3p可靶向调控ABCC4;膀胱癌组织ABCC4蛋白的表达水平与肿瘤分期、肿瘤最大径和是否发生淋巴结转移有关(P<0.05),miR-506-3p表达水平与肿瘤分期有关(P<0.05)。ABCC4蛋白高表达组患者总生存率明显低于低表达组(P<0.05),miR-506-5p高表达组总生存率明显高于低表达组(P<0.05);肿瘤分期及膀胱癌组织ABCC4蛋白、miR-506-3p表达是影响膀胱癌患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论ABCC4在膀胱癌组织中表达上调,而miR-506-3p在膀胱癌组织中表达下调,且二者呈负相关。ABCC4、miR-506-3p均具有作为膀胱癌预后标志物和治疗靶点的潜力。 展开更多
关键词 膀胱癌 ATP结合盒转运蛋白C4 miR-506-3p 临床病理特征 预后
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遗传性远端肾小管性酸中毒合并耳聋相关基因Atp6v0a4在小鼠内耳发育过程中的表达 被引量:3
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作者 刘亚青 李琦 +1 位作者 辛凤 袁永一 《中华耳科学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第1期88-93,共6页
目的常染色体隐性遗传远端肾小管酸中毒是一种严重的酸碱平衡紊乱性疾病,常常合并有感音神经性聋,ATP6V0A4被证实是其致病的相关基因,目前仍不明确致病机制。我们拟通过研究Atp6v0a4在不同发育阶段小鼠的内耳表达来探究ATP6V0A4在听觉... 目的常染色体隐性遗传远端肾小管酸中毒是一种严重的酸碱平衡紊乱性疾病,常常合并有感音神经性聋,ATP6V0A4被证实是其致病的相关基因,目前仍不明确致病机制。我们拟通过研究Atp6v0a4在不同发育阶段小鼠的内耳表达来探究ATP6V0A4在听觉系统形成中的作用。方法选择不同发育时期健康的昆明小鼠(E18,P1,P7,P14,P21),应用免疫荧光标记技术结合激光共聚焦显微镜观察Atp6v0a4蛋白在内耳的定位与表达。West-ern-blot定性定量研究该蛋白在不同时期小鼠内耳蛋白表达变化。结果 Atp6v0a4蛋白主要表达部位为耳蜗内毛细胞、外毛细胞、血管纹、内淋巴囊以及螺旋神经节,且在不同发育阶段表达位置稳定。Western-blot结果提示Atp6v0a4在小鼠内耳广泛表达,在不同发育阶段,Atp6v0a4在Corti’s器及螺旋神经节及血管纹中表达相对稳定,而在前庭组织中表达下降。结论通过对不同发育阶段的小鼠耳蜗切片进行Atp6v0a4蛋白表达分析研究,明确了Atp6v0a4在小鼠内耳的表达,为深入研究Atp6v0a4在内耳发育过程中的作用和致聋机制奠定了基础。 展开更多
关键词 Atp6v0a4 表达定位 内耳
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氧化铈-钒酸铁/凹土对染料废水脱色处理 被引量:1
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作者 韩粉女 许琦 唐喆 《环境科学与技术》 CAS CSCD 北大核心 2016年第S2期134-136,共3页
把凹土作为载体来制备对废水进行脱色的催化剂,是现在废水脱色处理研究的热点。将CeO_2-FeVO_4/ATP和H_2O_2组成非均相类Fenton体系对红色基GP染料废水进行脱色研究。主要考察研究CeO_2-FeVO_4/ATP的加入量、脱色时间、脱色温度、pH值以... 把凹土作为载体来制备对废水进行脱色的催化剂,是现在废水脱色处理研究的热点。将CeO_2-FeVO_4/ATP和H_2O_2组成非均相类Fenton体系对红色基GP染料废水进行脱色研究。主要考察研究CeO_2-FeVO_4/ATP的加入量、脱色时间、脱色温度、pH值以及H_2O_2用量对染料废水脱色率的影响。实验结果表明:在CeO_2-FeVO_4/ATP的加入量为2 g/L,脱色时间为1 h,pH值为6,脱色温度为313 K,H_2O_2用量为9 mL/L时脱色率达到99%。 展开更多
关键词 凹凸棒土 脱色 CeO2-FeVO4/ATP
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猪ATP6V0A4基因启动子核心区的筛选与分析 被引量:1
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作者 汪亮 李忠秋 +3 位作者 唐晓东 张海峰 刘娣 张冬杰 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2021年第3期216-221,共6页
ATP6V0A4基因编码V-ATP酶的一个亚基,与H+转运相关,是遗传性远端肾小管性酸中毒的致病基因。在前期研究中发现,民猪在遭受冷应激后其背脂中ATP6V0A4基因的转录水平发生了显著上升(P<0.05)。为了分析ATP6V0A4基因在转录水平的调控机制... ATP6V0A4基因编码V-ATP酶的一个亚基,与H+转运相关,是遗传性远端肾小管性酸中毒的致病基因。在前期研究中发现,民猪在遭受冷应激后其背脂中ATP6V0A4基因的转录水平发生了显著上升(P<0.05)。为了分析ATP6V0A4基因在转录水平的调控机制,构建了一系列长度不同的含有该基因5′端启动子区域的双荧光素酶报告基因质粒,转染PK15细胞并检测双荧光素酶的相对活性。根据检测结果,利用重叠PCR技术定点靶序列,预判可能存在的转录调控因子。结果发现,该基因启动子区的-1504~-1 bp片段具有转录活性,通过2轮启动子截短试验后判定-265~-1 bp区域内存在正调控元件,-581~-265 bp区域内存在负调控元件。定向缺失-205~-190 bp,-120~-110 bp小片段后,确定-205~-190 bp区域内存在调控该基因转录的正调控元件结合位点,通过在线软件预测后发现E2F3、SP2、EGR1、E2F6、CTCFL、E2F1、SP1和ETF可能是该基因的正调控转录因子。首次克隆了猪的ATP6V0A4基因的启动子区域并进行了转录因子结合位点的筛选与鉴定,为后续研究其在冷应激状态下的转录调控奠定了基础。 展开更多
关键词 ATP6V0A4 启动子 核心区 双荧光素酶报告系统
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食蟹猴疟原虫 (Plasmodium cynomolgi)中一个真核翻译起始因子4A(eIF-4A)同源蛋白的cDNA克隆、表达和ATP酶活性测定(英文) 被引量:4
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作者 宋平 张竞男 +1 位作者 胡珈瑞 李奎 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期294-304,共11页
真核翻译起始因子 4A(eukaryoticinitiationfactor 4A ,eIF 4A)是DEAD盒蛋白家族的ATP依赖性的RNA解旋酶类中的一个原型成员 .它在真核细胞的蛋白质合成的起始过程中起着关键性作用 .通过PCR扩增和放射探针杂交相结合的方法筛选食蟹猴... 真核翻译起始因子 4A(eukaryoticinitiationfactor 4A ,eIF 4A)是DEAD盒蛋白家族的ATP依赖性的RNA解旋酶类中的一个原型成员 .它在真核细胞的蛋白质合成的起始过程中起着关键性作用 .通过PCR扩增和放射探针杂交相结合的方法筛选食蟹猴疟原虫 (Plasmodiumcynomolgi)的cDNA文库 ,克隆了一个eIF 4A同源蛋白的完整cDNA序列 ,命名为CH1F .CH1F全长 1 75 3bp ,包含一个1 1 97bp的完整阅读框 ,推测编码一个由 398个氨基酸组成的蛋白 .对CH1F的蛋白序列用BlastP进行搜索和分析 ,提示它应该是DEAD盒家族的一个eIF 4A同源蛋白 ;用DNAStar将其与许多典型的DEAD盒蛋白序列进行比对分析 ,结果显示 :比起其它的DEAD盒蛋白 ,它与eIF 4A或eIF 4A的同源蛋白具有更高的同源性和更多序列上的相似结构域 .将包含完整阅读框的片段亚克隆进表达载体pET 2 8a (+) ,在大肠杆菌DH5α中表达 ,产生的融合蛋白大小在 4 5kD左右 .对该融合蛋白进行纯化、重新折叠和初步鉴定 .ATP酶活性检测显示 ,该融合蛋白只有很低的ATP酶活性 ,而且它的ATP酶活性似乎不依赖于核酸底物 .对这一检测结果给出 3种可能的原因 .这一检测结果与根据序列分析得到的推论———CH1F蛋白可能是一个eIF 展开更多
关键词 真核翻译起始因子4A(eukaryotic initiation factor 4A eIF-4A) RNA解旋酶 ATP酶 食蟹猴 疟原虫(Plasmodium cynomolgi)
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质膜钙ATP酶异构体1~4的剪接体在新生大鼠前庭器官的表达 被引量:2
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作者 罗蜜 褚汉启 +5 位作者 陶雁玲 周良强 陈金 刘云 潘春晨 陈请国 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期473-477,共5页
目的研究质膜钙ATP酶异构体(plasma membrane Ca^(2+)-ATPase isoforms,PMCAs)1~4(PMCA1~4)的A端和C端剪接变异体在新生大鼠前庭器官的表达。方法取出生2天的健康SD大鼠10只,断头后分离出前庭器官(椭圆囊斑和球囊斑),提取总RNA,通过逆... 目的研究质膜钙ATP酶异构体(plasma membrane Ca^(2+)-ATPase isoforms,PMCAs)1~4(PMCA1~4)的A端和C端剪接变异体在新生大鼠前庭器官的表达。方法取出生2天的健康SD大鼠10只,断头后分离出前庭器官(椭圆囊斑和球囊斑),提取总RNA,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,检测PMCA1~4的A端和C端剪接变异体的表达。结果在新生大鼠的椭圆囊斑和球囊斑PMCA1~4表达的剪接体分别为PMCA1x/b,PMCA2w/(a、b),PMCA3z/(a、b、c)和PMCA4(x、z)/b。结论在新生大鼠前庭器官,PMCA1、PMCA2、PMCA3和PMCA4之间表达的A端和C端剪接变异体类型均不同,这可能是由于椭圆囊斑和球囊斑对这些PMCA亚型有着不同的Ca2+调节需求。 展开更多
关键词 质膜钙ATP酶异构体1~4 剪接体 椭圆囊斑 球囊斑
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