土炒对白术中白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ含量的影响

目的:探讨土炒对白术有效成分白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ含量的影响,并通过与清炒白术的比较,研究辅料土对白术成分变化是否具有实质作用。方法:采用高效液相色谱法测定各样品中白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的含量。采用ODS C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈-水梯度洗脱,流速:1.0 mL/min,柱温:30℃,检测波长:白术内酯Ⅰ、Ⅲ为220 nm;白术内酯Ⅱ为276 nm。结果:白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ测定方法学考察符合液相色谱法的要求;生白术中白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ含量分别为0.4365、0.2878、0.4140 mg/g,10批土炒白术中白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ平均含量分别为0.5503、0.3013、0.8403 mg/g,10批清炒白术中白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ平均含量分别为0.5386、0.2958、0.7399 mg/g。结论:白术经炮制后白术内酯Ⅱ含量不变,白术内酯Ⅰ、Ⅲ显著升高,清炒和土炒对白术内酯类成分含量影响无显著差异。

白术内酯Ⅰ在胃癌细胞中抑制输出蛋白T的作用和机制

目的探究白术内酯Ⅰ在胃癌细胞中抑制输出蛋白T(XPOT)的作用和机制。方法探究XPOT在胃癌组织中的表达情况。自安徽中医药大学第二附属医院脾胃科病例随访系统中随机调出具有完整临床病理及随访资料的胃癌病例105例,并获取对应的肿瘤组织和癌旁组织。应用免疫组化、qPCR和Western blot技术检测上述标本中XPOT表达情况。使用GSEA分析TCGA、GEO数据库中胃癌患者基因表达数据。通过多种细胞实验检测癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力。并检测XPOT、SKP2、CyclinA、P27的mRNA的蛋白表达水平。结果生物信息学结果及临床样本均证实,XPOT在胃癌组织中表达高,提示不良预后;体外研究发现:AT-1可抑制胃癌细胞的增殖、侵袭能力;XPOT下调可抑制胃癌细胞的增殖、侵袭能力;AT-1可下调XPOT表达,继而对SKP2、P27、CyclinA进行调控,即通过调控XPOT途径,抑制胃癌细胞的增殖和侵袭。结论胃癌组织中XPOT过表达可提示患者预后不良。白术内酯Ⅰ可下调XPOT调控泛素化-蛋白酶体途径抑制胃癌细胞的增殖及侵袭。

毛细管电泳紫外检测法同时测定白术中白术内酯Ⅱ和白术内酯Ⅲ含量

目的建立同时测定白术中白术内酯Ⅱ、Ⅲ的毛细管电泳紫外检测方法,并测定白术样品中白术内酯Ⅱ、Ⅲ的含量。方法采用毛细管区带电泳法,紫外检测波长254 nm,缓冲液硼酸-硼砂体积比为5∶1,分离电压15 kV,柱温20℃,电动进样10 s。结果在最优条件下,白术内酯Ⅱ、Ⅲ完全分离;在线性范围内与峰面积线性关系良好,白术内酯Ⅱ线性方程为Y=2724.5X-54.078(r=0.9958),白术内酯Ⅲ的线性方程为Y=244.65X+201.8(r=0.9995),检测限(S/N=3)为0.2和1.0μg/ml。结论毛细管电泳紫外检测法可用于白术中白术内酯Ⅱ、Ⅲ的含量测定。

不同产地白术药材中白术内酯Ⅱ和Ⅲ的含量测定

目的建立一种同时测定白术内酯Ⅱ和Ⅲ的高效液相色谱检测方法,并分析不同产地白术药材中白术内酯Ⅱ和Ⅲ的含量。方法样品采用液-液萃取,以乙腈-水（50∶50）为流动相,流速1.0mL.min-1,采用SHIMADZU ODS柱分离（150mm×4.6mm;i.d.,5μm）;检测波长220nm。结果标准曲线线性范围为0.5~50.0μg.mL-1,线性关系良好（r〉0.99）,定量限为0.5μg.mL-1,回收率98%以上,方法的稳定性、重复性和精密度均较好（RSD〈3%）。结果显示杭州产白术药材中两种有效成分含量较高,河南产白术药材含量较低。结论该法操作简便、快速、灵敏、准确,已经成功地用于产地白术药材中白术内酯Ⅱ和Ⅲ的含量测定。

马桑内酯激活的星形胶质细胞条件培养液对大鼠脑内钙调蛋白激酶Ⅱ表达的影响

目的揭示马桑内酯(coriaria lactone,CL)激活的星形胶质细胞条件培养液(astrocyte contined medium,ACM)对大鼠脑内钙调蛋白激酶Ⅱ(calcium/calmodulin-dependent protein kinaseⅡ,CaMKⅡ)表达的影响。方法按照McCarthy和DeVellis的方法作海马星形胶质细胞的纯化培养,然后收集对照组ACM和CL激活的ACM。取成年健康雄性SD大鼠40只,随机分为对照组(8只)和CL组(32只),对照组侧脑室注射未加任何刺激物的ACM 10μl,CL组侧脑室注射CL激活的ACM 10μl(按注射后的时间分为2h、4h、8h和12h,每个时间点8只)。观察两组大鼠的行为表现,用免疫组化检测脑内CaMKⅡ表达的变化,Western blot检测脑内CaMKⅡ含量的变化。结果CL组大鼠有痫样发作,而对照组无痫样发作;免疫组化检测结果显示,CaMKⅡ在CL组的皮质和海马表达与对照组比较无显著性差异(P>0.05);Western blot检测皮质和海马CaMKⅡ亚基含量的结果显示,α和β亚基在CL各时间组与对照组的比较,表达均无显著性差异(P>0.05)。结论CL激活的ACM对致痫大鼠脑内CaMKⅡ亚基α和β的表达水平无明显影响。

高效液相色谱法测定白术中白术内酯Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ的含量

目的建立白术中白术内酯Ⅰ、Ⅱ及Ⅲ的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法，资生堂CAPCELLPAKMGC18（100mm×3．0mm，3μm）色谱柱，流动相为甲醇-0．1％甲酸溶液（65：35），流速0．6mL·min^-1，柱温25℃，白术内酯Ⅰ及Ⅲ检测波长为220nm，白术内酯Ⅱ检测波长为280nm，进样量10μL。结果白术内酯Ⅰ的线性范围为1．128～56．42μg·mL^-1（r=0．9999）；白术内酯Ⅱ的线性范围为1．790～89．50μg·mL^-1（r=0．9999）；白术内酯Ⅲ的线性范围为1．268～63．42μg·mL^-1（r=0．9999）；平均加样回收率分别为98．5％（RSD=3．8％）、102．4％（RSD=2．8％）、98．6％（RSD=3．2％）。结论本方法简便、快速，测定结果准确可靠，可用于白术药材的质量控制。

白术中白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的靶标预测及蛋白互作网络研究

目的:探究白术中白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的潜在靶标及药理机制,为白术内酯类药物的研究开发提供网络药理学理论线索。方法:利用药效团匹配靶标服务器PharmMapper虚拟筛选白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的潜在靶标,借助STRING平台构建靶蛋白互作网络并筛选关键靶标,利用治疗靶标数据库探究靶标的功能以及与通路、疾病的关系,采用系统分子对接服务器SystemsDock将白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ与关键靶标进行分子对接,验证白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ与关键靶标的亲和活性。结果:白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ主要作用于丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)8、半胱氨酸蛋白酶(CASP)3、过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARG)、一氧化氮合酶(NOS)3、热休克蛋白(HSP)90AA1、雌激素受体(ESR)1、雄激素受体(AR)、糖原合成酶激酶(GSK)3B、骨形态发生蛋白(BMP)2、凝血酶原前体片段F2等10个关键靶标,具有治疗肿瘤、心血管疾病、中枢神经系统疾病的潜在药理活性;除白术内酯Ⅰ与MAPK8的亲和力小于4.25外,白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ与对应靶标对接分数基本都在4.25以上,均属于有效结合。结论:白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ具有"多靶点、多通路、多疾病"的药理作用机制。

HPLC法同时测定白术中白术内酯Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ的含量

本研究建立了同时测定中药白术中白术内酯Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ含量的高效液相色谱法,结果表明白术内酯Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ进样量分别在76~760 ng,87~870 ng,75~750 ng范围内线性关系良好,白术甲醇超声提取液中白术内酯Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ平均加样回收率分别为100.20%(RSD=1.8%),100.10%(RSD=1.2%),99.68%(RSD=0.84%),白术甲醇回流提取液中白术内酯Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ平均加样回收率分别为100.67%(RSD=0.88%),100.06%(RSD=0.67%),100.67%(RSD=1.7%).该含量测定方法简单、快速、准确、灵敏度高、重复性好,可用于白术药材的质量控制.超声提取法对白术内酯Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ的提取效率均高于加热回流提取法.

EDTA冠醚衍生物(Ⅶ)——EDTA大环醚双内酯与铜(Ⅱ)、钴(Ⅱ)配合物的合成和性质研究

合成了N,N‘—二羧甲基大环醚双内酯与铜(Ⅱ)、钴(Ⅱ)的4个固态配合物。经元素分析、红外光谱、紫外光谱和热重分析确证,得到了两种组成的配合物:一种为ML·HNO_3·3H_2O,配体中羧氧、叔胺氮直接配位金属离子.另一种为MHL·NO_3·2H_2O,酸式盐。4个配合物中的醚氧或酯氧通过与配位水中的氢原子形成氢键来束缚金属离子。

HPLC-MS法同时测定香砂六君丸中原儿茶酸、党参炔苷及白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的含量

目的:采用高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)法同时测定香砂六君丸中原儿茶酸、党参炔苷及白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的含量。方法:色谱条件中色谱柱:Agilent Zorbax SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:0.1%甲酸-水溶液为流动相A,乙腈-0.1%甲酸为流动相B,梯度洗脱;流速:0.5 ml·min-1。质谱检测模式为负离子模式;单离子检测扫描(SIM),雾化器压力为241.32 k Pa,干燥气温度为360℃,毛细管电压为3 000 V,四极杆温度为100℃,干燥气流速为9.0 L·min-1。结果:原儿茶酸、党参炔苷、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ分别在0.30~15.00,0.60~30.00,8.80~442.00,8.70~435.00,2.04~102.00μg·ml^-1范围内线性关系良好(r>0.999 0),平均加样回收率分别为99.16%,98.47%,99.91%,99.74%,99.18%,RSD分别为2.21%,2.80%,1.05%,1.09%,1.57%(n=6)。结论:HPLC-MS法可同时测定香砂六君丸中原儿茶酸、党参炔苷及白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ含量,该方法具有较好的稳定性及重复性,并可为香砂六君丸质量评价提供参考。

白术内酯Ⅱ对照品制备方法研究

研究白术对照品的制备方法,为白术药材及其相关产品的质量控制奠定物质基础。以白术药材的主成分分析为指标,选择白术药材对照品;采用溶剂和色谱方法从白术药材中分离、制备对照品;采用紫外、红外光谱、质谱、氢谱和碳谱对其进行结构鉴定。从白术药材中分离得到白术内酯Ⅱ作为对照品。本文建立的分离、纯化方法简便,对照品纯度较高。

白术的化学成分及药理作用研究进展

白术为菊科苍术属植物,以干燥的根茎入药,在我国有悠久的药用历史。白术含有多种化学成分,包括倍半萜及内酯类、黄酮类、苯丙素类、炔烃及其苷类、多糖等。现代药理学研究表明,白术具有抗炎、抗肿瘤、改善胃肠道功能、调节泌尿系统、改善神经功能、改善免疫、兴奋子宫平滑肌、降血脂血糖等药理作用,临床上主要用于胃肠道疾病、肝脏疾病等的治疗,具有良好的开发潜力。本文就白术中单体成分及其药理作用的国内外研究进展进行综述,以期为其进一步开发利用提供参考。

健脾化滞丸制备工艺优化及白术内酯Ⅰ含量测定

目的:优化健脾化滞丸的制备工艺。方法:采用薄层色谱(TLC)法对健脾化滞丸中的白术内酯Ⅰ进行定性鉴别;采用L_(9)(3^(3))正交试验设计,以药粉细度、干燥时间、干燥温度为考察因素;以健脾化滞丸中白术内酯Ⅰ的含量、含水量和溶散时限三者的综合得分作为评价指标,优选出健脾化滞丸的最佳制备工艺。结果:以100目的药粉细度、60℃的干燥温度、12 h的干燥时间为最佳制备工艺。结论:所建立的薄层色谱法合理可行,优选的制备工艺稳定,操作简便,有效提高了健脾化滞丸的质量。

白术内酯对癌性恶病质小鼠血清细胞因子的影响

目的探讨白术内酯对癌性恶病质小鼠血清细胞因子白细胞介素2(IL-2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响。方法 C57BL6小鼠接种小鼠肺腺癌(Lewis)细胞建立癌性恶病质动物模型,随机分为模型对照组、白术水煎剂组(DA)、白术内酯组(AT)、康莱特组(KLT),每组15只。治疗7d后观察白术内酯对癌性恶病质小鼠生理状况(体质量、摄食量等)及血清细胞因子TNF-α、IL-2的影响。结果各治疗组小鼠生理状况改善,体质量及摄食量增加,TNF-α水平均较模型组显著降低,IL-2水平较模型组显著提高(P<0.05)。但AT组与DA组、KLT组比较差异无统计学意义(P均>0.05)。结论白术内酯可能通过调节细胞因子改善癌性恶病质小鼠的一般状况。

钴-60射线辐照对白术药材中4种有效成分的影响研究

目的:研究不同剂量钴-60(60Co)射线辐照对白术药材4种有效成分含量的影响。方法:采用HPLC-DAD梯度洗脱-波长切换法;以Agilent C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,流动相为乙腈-水,梯度洗脱,流速为1.0 ml·min-1,柱温35℃,检测波长为220 nm(白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ及苍术酮)和275 nm(白术内酯Ⅰ),进样量为10μl。分别选择剂量为5,8,10 k Gy对白术药材进行辐照,比较辐照前后4种有效成分含量的变化。结果:白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ、苍术酮分别在0.011~0.217μg,0.011~0.212μg,0.012~0.243μg,0.094~1.885μg范围内有良好线性,平均加样回收率分别为101.3%,100.6%,100.7%和100.5%。经过5,8,10 k Gy辐照后,白术药材所含的白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ及苍术酮均有变化。超过5 k Gy后,苍术酮辐照前后含量变化差异有统计学意义(P<0.05)。结论:所建立的白术有效成分测定方法回收率高,重复性好,简单实用,可用于白术的质量控制。在60Co辐照剂量不超过5k Gy时,各成分变化不显著,可为白术药材辐照灭菌手段提供参考。

不同采收时期白术的质量测定

目的:探讨不同采收时期白术的质量,并进行统计及比较。方法:选取浙江产白术,将其根据采收时期的不同进行分组,并根据其采收时期及生长年限,应用高效液相色谱法对白术进行白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅲ及苍术酮含量的测定,并将测定结果进行统计及比较。结果:经研究比较发现,随着年份的增加,白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅲ及苍术酮的含量均呈现上升趋势,而且11月上旬采摘的白术的白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅲ及苍术酮的含量高于其他月份,经比较,P均<0.05,差异均有统计学意义。结论:不同采收时期白术的质量明显不同,购买时以3年生11月上旬采摘者质量最佳。

马来酰肼的残留测定及其对白术品质影响的研究

目的:测定马来酰肼(MH)残留量,并探讨其对白术质量的影响。方法:白术现蕾期,施用不同浓度MH水剂,采收期测定白术MH残留及糖类、内酯类成分的含量,并采用独立样本t检验和主成分分析法评价MH对白术内在质量的影响。结果:白术根茎MH残留量为0.3~2.2 mg/kg;独立样本t检验显示内酯类成分的含量随MH施用浓度升高呈低-高-低趋势;主成分分析显示,施用MH对白术内在质量具有显著影响,75和100倍液时白术质量综合评价指数最高。结论:保证低残留的同时,施用适当浓度的MH可以提高白术产量及内在质量。

不同炮制方法对白术药材指标成分含量及浸出物影响研究

目的:研究不同炮制方法对白术药材指标成分含量及浸出物含量的影响。方法:采用HPLC色谱法测定白术药材指标成分,并采用醇溶性浸出物测定法(热浸法)测定其浸出物。结果:比较不同炮制方法对白术指标成分含量及浸出物的影响,发现米泔水漂白术的白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ含量明显增高,焦炒白术和麸炒白术中白术内酯Ⅲ含量显著增高;几种不同白术炮制品中苍术酮含量变化不明显。浸出物含量变化趋势:焦白术>白术药材>麸炒白术>土炒白术>米泔水漂白术。结论:不同炮制方法对白术药材中白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ、苍术酮及浸出物含量均有一定的影响,该研究为炮制工艺改进及临床用药提供依据。

HPLC法测定苓桂术甘汤中五种成分的含量

目的：建立HPLC法同时测定苓桂术甘汤中肉桂酸、桂皮醛、甘草酸、白术内酯Ⅲ、茯苓酸的量。方法：采用XBridge TM（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液梯度洗脱,体积流量为0.8 m L/min,检测波长为210 nm,柱温为30℃。结果：肉桂酸、桂皮醛、甘草酸、白术内酯Ⅲ、茯苓酸5种成分在100 min内被完全分离;峰面积与其浓度成良好的线性关系;加样回收率（n=6）为99.39%~100.06%（RSD=0.22%~2.19%）。结论：采用高效液相色谱法同时测定复方中的5种成分,此方法简单可靠,精密度好,可较好地用于苓桂术甘汤的质量控制。

HPLC法同时测定白术中4种倍半萜

目的建立HPLC法同时测定白术中白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ、苍术酮的含有量。方法白术甲醇提取液的分析采用Eclipse Plus C18色谱柱(4. 6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-水,梯度洗脱;柱温25℃;体积流量1. 0 m L/min;检测波长220 nm、276 nm。结果白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ、苍术酮分别在0. 005 2~0. 052 mg/m L (R^2=0. 999 6)、0. 010~0. 10 mg/m L (R^2=0. 999 9)、0. 090~2. 9μg/m L (R^2=0. 999 7)、0. 30~1. 8 mg/m L (R^2=0. 999 9)范围内线性关系良好,平均加样回收率99. 13%~100. 34%,RSD 0. 72%~4. 76%。结论该方法准确稳定,重复性好,可用于白术的质量控制。