Analysis of the influence of processing of bran stir-baking on the main components of Paeoniae Radix Alba-Atractylodis Macrocephalae Rhizoma herbal pair by high-performance liquid chromatography

The crude and processed Paeoniae Radix Alba-Atractylodis Macrocephalae Rhizoma herbal pairs, originated from Bai-zhu-shao-yao-san, are used to treat different diseases clinically. In order to evaluate the crude and processed Paeoniae Radix-Atractylodis Macrocephalae Rhizoma herbal pairs, a simple, easy, and sensitive high-performance liquid chromatography coupled with diode array detectors was developed for simultaneous determination of nine bioactive components in the herbal pairs. The calibration curve exhibited good linearity（r2≥0.9992）. The LODs and LOQs were ≤7.30 and 11.53 μg/m L, respectively. The intra-, inter-day and repeatability RSD values of the nine compounds were less than 3.86%, 2.71%, and 4.29%, respectively. The RSD stability values were less than 3.64%. The recovery of the method was in the range of 96.70%–102.10%, with RSD values less than 3.52%. The developed method can be applied to the intrinsic quality control of crude and processed Paeoniae Radix-Atractylodis Macrocephalae Rhizoma herbal pairs.

扶元和中膏单味药改善功能性消化不良的研究进展及网络药理学分析

【目的】联合网络药理学和分子对接技术,挖掘扶元和中膏君药党参、麸炒白术等各单味药物及复方改善功能性消化不良(Functionaldyspepsia,FD)的潜在靶点和分子机制。【方法】对扶元和中膏中各单味药物改善功能性消化不良的研究进展进行综述;构建“FD-靶点-有效成分-扶元和中膏”网络,筛选出的交集基因进行GO分析和KEGG相关通路富集,分子对接分析。【结果】扶元和中膏14味药中有10味药具有改善FD的作用,其机制是通过调节胃肠激素水平发挥作用;网络药理学共获得扶元和中膏有效成分149个,与FD相关靶点2641个,扶元和中膏与FD的交集靶点281个,PPI网络筛选获得前5个核心靶点,从构建的“FD-作用靶点-有效成分-扶元和中膏”网络筛选获得扶元和中膏前25个有效成分,对281个交集靶点的GO分析和KEGG分析表明,扶元和中膏可能通过癌症通路、PI3K-Akt、MAPK等途径发挥治疗作用;分子对接结果表明2个主要成分(槲皮素和山奈酚)和3个关键靶点(AKT1、TNF、IL-6)均具有较好的亲和力。【结论】扶元和中膏的主要活性成分槲皮素和山奈酚可能通过癌症通路、PI3K-Akt、MAPK等信号通路,作用于AKT1、TNF、IL-6等关键靶点改善功能性消化不良。

黄枫治疗腰痛用药规律的数据挖掘

【目的】利用数据挖掘方法分析黄枫教授治疗腰痛的用药规律。【方法】收集并筛选黄枫教授门诊治疗腰痛的有效病例的病案资料。采用Microsoft Excel 2019对纳入的处方药物进行用药频次及性味归经分布的分析,采用IBM SPSS Modeler 18.0进行关联规则分析,采用IBM Statistics 26.0进行聚类分析。【结果】共纳入239首处方,涉及75味中药。使用频次≥20次的高频中药有23味,居前10位的中药为甘草、醋延胡索、狗脊、白术、两面针、盐牛膝、生地黄、续断、薏苡仁、丹参。药性分布以温性药物占比最高,药味分布以甘、苦、辛为主,归经以归肝、胃、脾经为主。关联规则分析得到的支持度居前20位的药物组合中,醋延胡索、狗脊、白术、两面针为核心药物。聚类分析得到6个聚类组合。【结论】黄枫教授治疗腰痛以三因制宜、治病求本为原则,多采用活血行气止痛、滋补肝肾药物,兼顾益气健脾,其辨治腰痛的思路可为临床腰痛的治疗提供参考。

基于UPLC-Q-TOF-MS和多元统计分析樟帮米泔水漂白术漂制过程中化学成分的动态变化研究

目的研究樟帮米泔水漂白术漂制过程中化学成分的动态变化,为白术漂制工艺的合理制定及炮制机制的阐释提供参考。方法以白术生品及其5个不同漂制阶段的漂制品(第1、2阶段漂制品分别为生品用9倍量米泔水各漂12、24 h;第3-5阶段漂制品分别为生品先用9倍量米泔水漂24 h,再用9倍量清水各漂12、24、48 h,漂洗温度均为26℃)为研究对象,采用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)检测其化学成分,以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱(0-5 min,5%-30%B;5-14 min,30%-60%B;14-23 min,60%-70%B;23-31 min,70%-95%B;31-32 min,95%-5%B;32-35 min,5%B),柱温40℃,进样量2μL,流速0.3 mL·min^(-1);运用电喷雾离子源(ESI),在正离子模式下进行扫描并采集质谱数据,扫描范围m/z 50-1250;利用PeakView 1.2进行数据分析,结合对照品、chemicalbook数据库及相关文献对白术生品及其5个不同漂制阶段漂制品的化学成分进行鉴定;质谱数据通过MarkerView1.2软件归一化处理后应用多元统计分析方法找出差异化合物,分析差异化合物的相对含量随漂制时间不同的变化规律。结果从白术生品及其5个不同漂制阶段漂制品中共鉴别出55个化学成分,包含白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ等在内的40个共有成分。其中,从白术生品、第1-5阶段漂制品中分别鉴别出了53、47、49、49、44、46个成分。与白术生品比较,漂制过程中新增了vitexin和dihydrosyrindine 2个成分,未检测到聚-L-组氨酸、尿苷等9个成分,而9-hydroxy-7-oxo-7H-furo[3,2-g]chromen-4-ylβ-D-glucopyranoside、4-octylbenzoic acid等4个成分在漂制过程中呈消失-出现的变化趋势。多元统计分析筛选出18个差异化合物,其中白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ这3个差异化合物的相对含量随着漂制时间的延长均呈现先上升后下降的变化趋势,且都是生品中为最低,第3阶段漂制品中为最高。结论漂制辅料(清水和米泔水)和漂制时间是白术漂制过程中化学成分产生动态变化的主要原因。漂白术饮片若以白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ为指标性成分和药效成分,则白术合理的漂制工艺为:白术生品先用9倍量米泔水漂24 h,再用9倍量清水漂12 h。该实验可为樟帮特色米泔水漂白术炮制科学内涵的阐释提供科学依据。

基于指纹图谱-多成分化学计量学的建昌帮蜜糠炒白术质量评价研究

目的:建立蜜糠炒白术的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱及多成分含量测定方法。方法:采用Agilent Eclipse XDB-C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相,流速为0.8 mL·min^(-1)进行梯度洗脱,柱温为30℃,检测波长为240 nm,建立15批蜜糠炒白术的HPLC指纹图谱,并同时建立白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ及苍术酮的含量测定方法。结果:15批蜜糠炒白术的指纹图谱呈现24个共有峰,相似度均>0.891;对其中4个共有峰进行指认,分别是白术内酯Ⅲ(11号峰)、白术内酯Ⅱ(16号峰)、白术内酯Ⅰ(20号峰)、苍术酮(24号峰)。主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘分析(OPLS-DA)结果均显示,不同产地、同产地不同批次药材制备的蜜糠炒白术质量有着明显的区分;变量重要投影系数(VIP)值>1的共有峰有7个,从大到小分别为1号、14号、4号、24号(苍术酮)、15号、16号(白术内酯Ⅱ)及2号峰。15批蜜糠炒白术的白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ及苍术酮的含量依次为144.84~642.59μg·g^(-1)、57.67~1086.15μg·g^(-1)、142.45~707.19μg·g^(-1)、968.73~2887.70μg·g^(-1)。结论:建立的蜜糠炒白术指纹图谱及多成分定量分析方法操作简单、稳定可靠,结合化学计量学方法可实现对蜜糠炒白术的质量分析,为蜜糠炒白术质量评价标准的建立提供参考。

苍术多糖与正丁醇部位对脾虚大鼠线粒体自噬的影响

多糖与正丁醇部位是苍术的健脾活性部位,本文从线粒体自噬的角度探讨苍术活性部位对脾虚大鼠的调节作用,进而阐释其健脾机制。采用透射电镜观察大鼠胃窦组织线粒体超微结构;采用qRT-PCR和Western blot法检测大鼠胃窦组织线粒体PINK1、Parkin、LC3和P62 mRNA及蛋白表达水平;采用比色法检测大鼠胃窦组织三磷酸腺苷(adenosine-triphosphate,ATP)、H_(2)O_(2)水平,JC-1荧光探针法检测线粒体膜电位(MMP)水平。结果表明,与模型组相比,麸炒苍术多糖(FD)、麸炒苍术正丁醇部位(FZ)、生苍术多糖(SD)与生苍术正丁醇部位(SZ)均不同程度改善了脾虚大鼠胃窦组织线粒体结构损伤,且自噬溶酶体数量增多;FD、FZ、SD与SZ均能显著下调PINK1、Parkin、p62 mRNA与蛋白表达,上调LC3II蛋白表达、LC3II/I值;FD与FZ组ATP、MMP水平显著上升,H_(2)O_(2)水平显著下降,SZ组ATP、MMP水平显著上升,SD组H_(2)O_(2)水平显著下降。综上所述,苍术多糖与正丁醇部位可能是通过改善自噬障碍,恢复线粒体功能,从而调节脾虚,且麸炒后多糖与正丁醇部位效果明显优于生品。

蜜糠炒苍术炮制工艺优选及其抗胃溃疡作用研究

目的优选蜜糠炒苍术的炮制工艺,并对其炮制前后的抗胃溃疡作用进行比较。方法采用L_(9)(3^(4))正交实验设计,结合熵权逼近理想解排序(TOPSIS)模型,以苍术酮、β-桉叶醇、白术内酯Ⅲ、苍术素含量的综合评分为评价指标,以辅料与药材比例、炒制温度、炒制时间为考察因素,优选蜜糠炒苍术的炮制工艺并验证。以无水乙醇灌胃建立胃溃疡小鼠模型,以复方氢氧化铝片为阳性对照,以血清炎症因子[白细胞介素2(IL-2)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]含量、溃疡指数和胃溃疡抑制率为评价指标,比较生苍术和蜜糠炒苍术的抗胃溃疡作用。结果蜜糠炒苍术的最优炮制工艺为辅料与药材比例3∶10(g/g)、炮制温度140℃、炒制时间4 min。3次验证实验结果显示,最优工艺炮制所得蜜糠炒苍术中苍术酮等4种成分的含量较为稳定(RSD为3.47%~5.80%,n=3),综合评分为95.53%~95.89%(RSD=0.21%,n=3)。生苍术和蜜糠炒苍术均可不同程度地升高胃溃疡模型小鼠血清IL-2含量,降低其血清IL-6、TNF-α含量,蜜糠炒苍术可显著降低其溃疡指数(P<0.05或P<0.01);蜜糠炒苍术对上述指标的改善作用普遍优于同剂量生苍术(P<0.05或P<0.01);低、中、高剂量生苍术和蜜糠炒苍术对小鼠胃溃疡的抑制率分别为9.18%、19.30%、30.70%和50.32%、61.39%、53.16%。结论优选出的蜜糠炒苍术炮制工艺稳定、可行,且苍术经蜜糠炒制后抗胃溃疡的作用有所增强。

基于化学计量学及熵权TOPSIS分析联合多组分定量的麸炒苍术综合质量评价

目的:采用多组分定量联合化学计量学及熵权优劣解距离法(EW-TOPSIS)对不同产地所得麸炒苍术质量进行评价,为麸炒苍术药材的品质评价和质量控制提供参考。方法:以不同产地所得18麸炒批苍术为检测样品,采用HPLC法同时测定麸炒苍术中白术内酯Ⅲ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅰ、苍术素醇、(4E,6E,12E)-十四癸三烯-8,10-二炔-1,3-二乙酸酯、苍术苷A、β-桉叶醇、苍术素和苍术酮的含量,运用化学计量学和熵权TOPSIS分析法对不同产地麸炒苍术进行比较分析和综合评价。结果:含量测定方法学考察结果符合《中华人民共和国药典》规定要求。18批麸炒苍术样品中白术内酯Ⅲ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅰ、苍术素醇、(4E,6E,12E)-十四癸三烯-8,10-二炔-1,3-二乙酸酯、苍术苷A、β-桉叶醇、苍术素、苍术酮9种成分的含量分别为0.076~0.130、0.030~0.059、0.107~0.233、0.314~0.637、0.514~0.996、0.186~0.318、7.234~13.894、1.778~4.766、0.694~2.493 mg/g。化学计量学方法显示18批麸炒苍术可聚为3类,呈现一定的区域差异。β-桉叶醇、苍术素、苍术酮和白术内酯Ⅰ是影响麸炒苍术产品质量的主要潜在标志物。EW-TOPSIS法分析结果显示,江苏和浙江产区所得麸炒苍术质量较优,其次为河南、湖北、四川和云南产区。结论:所建方法快速灵敏、准确可靠,可用于麸炒苍术内在质量的综合质量评价。

苍术麸炒前后多糖与正丁醇部位对脾虚大鼠的调节作用

目的 对苍术麸炒前后多糖与正丁醇部位健脾功效进行比较,探寻苍术治疗脾虚的有效物质。方法 大鼠建立脾虚模型,分别灌胃给药:苍术麸炒多糖、麸炒正丁醇部位、生多糖、生正丁醇部位。检测各组大鼠脾与胸腺指数、胃动素(MTL)、淀粉酶(AMS)、血管活性肠肽(VIP)、免疫球蛋白(IgG)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)含量。结果 与模型组相比,麸炒多糖组、麸炒正丁醇组的脾与胸腺指数均不同程度上升(P <0.05);各给药组均能使脾虚大鼠MTL、VIP、IL-6与TNF-α含量下降,AMS与IgG含量上升,其中除生多糖组VIP与IL-6、生正丁醇组VIP外,其余指标差异均具有显著性(P <0.05);与生多糖组相比,麸炒多糖组脾指数明显上升(P <0.05),VIP、IL-6、TNF-α含量明显下降(P <0.05);与生正丁醇组相比,麸炒正丁醇组胸腺指数、AMS含量明显上升(P <0.05),MTL、VIP、TNF-α含量明显下降(P <0.05)。结论 麸炒后苍术多糖与正丁醇部位健脾功效优于生品。

白术饮片HPLC指纹图谱研究

目的:为白术饮片的质量控制建立HPLC指纹图谱。方法:采用HPLC法测定了14批来自不同产地和不同批次的白术饮片样品,确立标准指纹图谱。色谱条件:Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL/min;检测波长242 nm;柱温25℃。结果:白术饮片有16个共有峰,多数峰可以达到较好分离,所建立白术饮片指纹图谱的分析方法有较好的重现性。结论:该分析方法具有良好的精密度、重现性和稳定性,各批次间共有峰的相对保留时间的RSD均小于1.1%,共有峰面积符合指纹图谱相关要求。建立的指纹图谱检测标准可以作为白术饮片的质量评价和品种鉴别的主要依据之一。

土炒对白术中白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ含量的影响

目的:探讨土炒对白术有效成分白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ含量的影响,并通过与清炒白术的比较,研究辅料土对白术成分变化是否具有实质作用。方法:采用高效液相色谱法测定各样品中白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的含量。采用ODS C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈-水梯度洗脱,流速:1.0 mL/min,柱温:30℃,检测波长:白术内酯Ⅰ、Ⅲ为220 nm;白术内酯Ⅱ为276 nm。结果:白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ测定方法学考察符合液相色谱法的要求;生白术中白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ含量分别为0.4365、0.2878、0.4140 mg/g,10批土炒白术中白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ平均含量分别为0.5503、0.3013、0.8403 mg/g,10批清炒白术中白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ平均含量分别为0.5386、0.2958、0.7399 mg/g。结论:白术经炮制后白术内酯Ⅱ含量不变,白术内酯Ⅰ、Ⅲ显著升高,清炒和土炒对白术内酯类成分含量影响无显著差异。

麸炒前后苍术中3种成分的HPLC测定

目的采用HPLC法测定苍术麸炒前后苍术烯内酯丙、苍术素及(4E,6E,12E)-十四癸三烯-8,10-二炔-1,3-二乙酸酯。方法采用Tigerkin C18(5μm,4.6mm×250mm)色谱柱;流动相分别为乙腈-水(54∶46)、乙腈-水(72∶28);体积流量1.0 mL/min;检测波长分别为220nm、340nm;柱温25℃。结果测定了17个不同地区市售苍术片及自制的麸炒苍术片中倍半萜类成分苍术烯内酯丙、聚乙烯炔类成分苍术素和(4E,6E,12E)-十四癸三烯-8,10-二炔-1,3-二乙酸酯,发现除个别样品外,麸炒苍术中这些成分的量低于生苍术片。结论麸炒导致苍术中倍半萜类成分和聚乙烯炔类成分含有量下降。

麸炒白术中试炮制工艺优选

目的:确定麸炒白术的最佳中试炮制工艺。方法:采用正交试验法和多指标综合加权评分法,以白术饮片外观性状、白术内酯(Ⅰ+Ⅲ)含量和醇溶性浸出物为考察指标,对影响白术炮制的因素进行考察。结果:中试最佳工艺为:炒制温度240℃,加热时间21min,辅料用量10%,炒制转数25r/min。结论:该工艺运用现代饮片工业,为进一步制定白术饮片的质量标准提供了参考依据,为工业化大生产提供了数据支持。

茅苍术及其麸炒品水提物对H/R诱导H9c2心肌细胞损伤的保护作用

目的比较茅苍术生品和麸炒品水提物体外抗心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的作用。方法以连二亚硫酸钠诱导H9c2缺氧/复氧损伤模型,MTT法检测细胞活力,ELISA法检测SOD、LDH和MDA的水平;RT-PCR法检测Caspase-3、Bax、Bcl-2 mRNA的表达;Western Blot法检测Caspase-3、Bax、Bcl-2的蛋白表达量。结果与模型组比较,茅苍术生品和麸炒品水提物均能提高细胞的存活率;提高SOD的水平,降低LDH和MDA的水平;提高Bcl-2 mRNA的水平,降低Caspase-3、Bax mRNA的水平;提高Bcl-2的蛋白表达,降低Caspase-3、Bax的蛋白表达量,麸炒品的作用优于生品。结论茅苍术水提物能够体外抗心肌细胞H/R损伤,具有抗氧化和抑制细胞凋亡的作用,麸炒后该作用增强。

土炒对白术挥发油含量及组成的影响

目的研究土炒对白术中挥发油成分的含量及组成的影响。方法采用2010年版《中国药典(一部)》附录ⅩD挥发油测定甲法测定挥发油含量,采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)法比较白术、清炒白术和土炒白术中挥发油组成,并进一步采用薄层色谱(TLC)法和高效液相色谱(HPLC)法研究辅料土对挥发油成分的吸附作用。结果白术经土炒炮制后挥发油含量有所降低,但清炒后含量却增高;GC-MS分析结果表明,白术生品和清炒白术的挥发油组成成分和相对含量差异不大,而土炒品和生品、清炒品相比虽组成成分无差异,但各成分相对含量有较大差异;TLC和HPLC分析表明,辅料土对挥发油成分有吸附作用。结论辅料土对白术挥发油成分有吸附作用,会使白术土炒后挥发油含量降低,挥发油组成成分相对含量发生改变。

基于指纹图谱与化学计量学评价白术炮制品质量

目的基于指纹图谱与化学计量学评价白术Atractylodis macrocephalae Rhizoma炮制品(麸炒、土炒)质量。方法通过UPLC法建立5个产地(浙江磐安和於潜、安徽、湖南、河北安国)炮制品的指纹图谱,分析采用Acquity UPLC■BEH C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm);以甲醇-水为流动相,梯度洗脱;体积流量0.25 m L/min;柱温25℃;检测波长240 nm。再通过聚类分析与主成分分析评价其质量。结果 28批麸炒品、27批土炒品指纹图谱的相似度分别为0.802~0.986、0.623~0.995,均聚为3类。其中,浙江磐安、於潜产样品与其他产地区分较明显,并且前者各批次之间差异较小。结论该方法简便可靠,可用于白术的质量控制。

不同加工工艺对白术中白术内酯Ⅰ和白术内酯Ⅲ含量的影响

目的比较不同加工工艺对白术中白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅲ含量的影响。方法采用反相高效液相色谱法测定白术中白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅲ含量。色谱柱:Phenomenex C18(250mm×4.6mm);流动相:甲醇∶0.02%磷酸水(64∶36);检测波长:220nm;流速:1.0ml/min;柱温:30℃。结果不同加工工艺对白术中白术内酯Ⅰ和白术内酯Ⅲ含量有一定影响。鲜白术在不同加工工艺条件下白术内酯Ⅰ和白术内酯Ⅲ含量由高到低依次为:鲜白术烘至一定程度切片>产地趁鲜直接切片>传统工艺切片。低温烘干与烘房烘干对白术内在质量无明显影响。结论结合饮片外观,鲜白术产地烘至一定程度直接切片,其质量较好。

白术4种炮制品HPLC指纹图谱比较

目的建立并比较4种白术炮制品高效液相指纹图谱。方法采用外标法。Dikma Kromasil C18（250mm×4．6mm，5μm）色谱柱，以乙腈-水梯度洗脱（45％～100％乙腈），体积流量为1．0mL／min，柱温25℃，检测波长为242nm。通过中药指纹图谱计算机辅助相似度软件，计算相似度等相关参数。结果通过对白术4种炮制品指纹图谱的比较分析，各种炮制品共有指纹明显不同。结论本研究所建立的方法可靠，简便易行，为更好地控制不同白术炮制品质量提供科学依据。

正交试验法优选麸炒白术工艺研究

目的探讨麸炒白术的最佳炮制工艺。方法以水溶性浸出物含量、醇溶性浸出物含量、挥发油含量为指标,选择辅料用量、加热温度、加热时间3个因素,用L9(34)正交设计表,采用综合加权评分法,对上述三因素进行炮制工艺的优选。结果麸炒白术最佳炮制工艺为:辅料用量10%,加热温度150℃,加热时间5min。结论为进一步制定麸炒白术饮片的质量标准提供了参考依据。

白术与麸炒白术配方颗粒的红外光谱研究

目的建立白术与麸炒白术配方颗粒的红外光谱快速鉴别方法，为中药炮制品配方颗粒的真伪鉴别提供示范性研究。方法采用一维红外光谱及二阶导数光谱法分别对白术与麸炒白术配方颗粒进行红外光谱分析。结果白术和麸炒白术配方颗粒的一维红外光谱基本相似，后者在779cm一处出现特征吸收峰；白术和麸炒白术配方颗粒的二阶导数光谱在900～650cm^-1区域内的谱峰，其峰位置、强度、形状均存在一定的差异。结论通过比较不同级别的红外光谱，可以快速、准确地鉴别白术与麸炒白术配方颗粒。