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Immune Responses to the Attenuated Mycoplasma hyopneumoniae 168 Strain Vaccine by Intrapulmonic Immunization in Piglets 被引量:22
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作者 FENG Zhi-xin, SHAO Guo-qing, LIU Mao-jun, WU Xu-su, ZHOU Yong-qi and GAN Yuan Key Laboratory of Animal Diseases Diagnostic and Immunology, Institute of Veterinary Medicine, Jiangsu Academy of Agricultural Sciences/National Center for Engineering Research of Veterinary Bio-Products, Ministry of Agriculture, Nanjing 210014, P.R.China 《Agricultural Sciences in China》 CSCD 2010年第3期423-431,共9页
To investigate the immune responses to the attenuated Mycoplasma hyopneumoniae 168 strain vaccine, 8-15 d old piglets were immunized with M. hyopneurnoniae 168 strain vaccine by intrapulmonic route. And the specific I... To investigate the immune responses to the attenuated Mycoplasma hyopneumoniae 168 strain vaccine, 8-15 d old piglets were immunized with M. hyopneurnoniae 168 strain vaccine by intrapulmonic route. And the specific IgG antibody in serum, lymphoproliferation, IFNT, and specific secretory IgA (SIgA) antibody in bronchoalveolar lavage fluid were detected on 30 and 60 d post-immunization (DPI), respectively. On 60 DPI, all the pigs except for those in health control group were challenged with a field M. hyopneumoniae strain JS. Necropsy was performed on 30 d post-challenge (DPC). The results showed that IFN7 and specific SIgA were stimulated on surface of respiratory tract after immunization. And peripheral blood mononuclear cells could also be proliferated about 1.81 and 2.12 fold on 30 and 60 DPI when stimulated by M. hyopneumoniae protein in vitro. However, no serum IgG antibody against M. hyopneumoniae was detected during the whole immune phage. After challenge, vaccinated pigs were observed with only very slight histological lesion in individual lobes. None of vaccinated pigs showed any clinical signs. While the unvaccinated pigs from challenge control group showed varying degrees of clinical sign and severe macroscopical lesion of mycoplasmal pneumonia of swine (MPS). The result suggested that the attenuated M. hyopneumoniae 168 strain vaccine inoculated by intrapulmonic route could activate the systemic cellular immunity, the local mucosal immunity and IFNγ secretion in respiratory tract to against M. hyopneumoniae infection in piglets. 展开更多
关键词 mycoplasma hyopneumoniae attenuated vaccine cellular immunity mucosal immunity
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猪支原体肺炎活疫苗(168株)气溶胶免疫后呼吸道sIgA分泌及抗原存留规律 被引量:6
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作者 华利忠 白昀 +6 位作者 武昱孜 王佳 杨浩 吴猛 袁厅 邵国青 冯志新 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2019年第4期69-74,共6页
猪支原体肺炎是由猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae ,Mhp)引起的猪的一种慢性呼吸道疾病,严重影响养猪业发展,活疫苗气溶胶免疫是防治该病的新措施。为研究猪肺炎支原体活疫苗(168株)经气溶胶免疫后,疫苗株在免疫猪肺内的占位存... 猪支原体肺炎是由猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae ,Mhp)引起的猪的一种慢性呼吸道疾病,严重影响养猪业发展,活疫苗气溶胶免疫是防治该病的新措施。为研究猪肺炎支原体活疫苗(168株)经气溶胶免疫后,疫苗株在免疫猪肺内的占位存留规律,选用3周龄不吃初乳猪27头,随机分为3组,G1气溶胶免疫组12头,G2肺内免疫组12头,同时设立阴性对照3头。分别于免疫后第2 h、7 d、14 d及28 d进行鼻拭子Mhp sIgA检测以及血清抗体检测。另外在上述时间点分别宰杀G1和G2组各3头,对照组在实验组免疫后第28 d宰杀,采集肺泡灌洗液,分别进行Mhp sIgA检测及Mhp疫苗株含量检测。结果显示:(1)所有试验猪至实验结束,Mhp血清抗体未出现转阳现象;(2)鼻拭子sIgA水平G1组在免疫后第14 d与对照组相比上升,差异具有显著统计学意义(p <0.05);G2组在免疫后第7 d和14 d与相应的对照组相比上升,差异具有显著统计学意义(p <0.05),各时间点G1组与G2组sIgA水平差异不具备统计学意义(p >0.05);(3)G1组肺泡灌洗液中的 sIgA在免疫后14 d部分转阳(阳性率33.33%),28 d全部转阳(阳性率100%);G2组在免疫14 d时已全部转阳(阳性率100%),各时间点G1组与G2组sIgA水平差异不具备统计学意义(p >0.05);(4)气溶胶免疫组肺泡灌洗液内Mhp疫苗株浓度在免疫后第2 h、7 d、14 d和28 d分别是相应肺内免疫组的0.37倍、1.01倍、0.88倍以及0.52倍。猪支原体肺炎活疫苗(168株)经气溶胶免疫后,和肺内免疫一样可以诱导免疫猪的局部黏膜免疫以及具有同等的占位效应,且经气溶胶免疫的疫苗株在免疫仔猪体内的增殖水平可能与其诱导的黏膜免疫水平相关。 展开更多
关键词 猪肺炎支原体活疫苗(168株) 气溶胶免疫 肺内免疫 占位效应 黏膜免疫
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猪支原体肺炎活疫苗(168株)滴鼻免疫保护效果的研究 被引量:2
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作者 杨若松 邢宪平 +4 位作者 冯志新 华利忠 熊祺琰 Hassan Zackaria Ali Ishag 邵国青 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期93-97,共5页
本研究通过滴鼻免疫新途径免疫猪支原体肺炎活疫苗168株,与肺内免疫组及对照组进行比较,来确定滴鼻免疫猪支原体肺炎活疫苗(168株)的免疫保护力。将20只猪随机分为肺内免疫组、滴鼻免疫组、健康对照组和攻毒对照组。定期观察和检测各组... 本研究通过滴鼻免疫新途径免疫猪支原体肺炎活疫苗168株,与肺内免疫组及对照组进行比较,来确定滴鼻免疫猪支原体肺炎活疫苗(168株)的免疫保护力。将20只猪随机分为肺内免疫组、滴鼻免疫组、健康对照组和攻毒对照组。定期观察和检测各组猪免疫后的临床症状。结果表明:滴鼻免疫组免疫后,猪群体温正常,无免疫引起的局部或全身不良反应,免疫途径安全可行;滴鼻免疫组和肺内免疫组与健康对照组相比,SIgA水平显著升高,差异极显著(P<0.01),但滴鼻免疫组与肺内免疫组相比,差异不显著。流式细胞仪检测显示CD4+数值未发生显著性变化。肺脏剖检评分显示滴鼻免疫组的肺脏的病变水平与攻毒对照组相比呈极显著降低(P<0.01),保护率达到60%,相对低于肺内免疫组100%的保护率。猪支原体肺炎活疫苗(168株)通过滴鼻免疫方式,可以产生较好的免疫保护力。 展开更多
关键词 猪支原体肺炎活疫苗(168株) 滴鼻免疫 SIGA 肺脏病变
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猪肺炎支原体168菌株蛋白SDS-PAGE谱带和染色体DNAPFGE图谱比较 被引量:1
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作者 邵国青 钱建飞 +3 位作者 凌雯 杨奎 赵军 蔡宝祥 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 1999年第4期247-249,共3页
猪肺炎支原体(MycoplasmahyopneumoniaeMph)是猪气喘病的主要病原,现遍布于世界各养猪国家。国内外科技工作者对该病的防治作了大量的研究报道[1]。尽管如此,有关Mhp的致病性及毒力因子仍知之不详[2]。中国在Mhp的弱毒研究方面取得了突... 猪肺炎支原体(MycoplasmahyopneumoniaeMph)是猪气喘病的主要病原,现遍布于世界各养猪国家。国内外科技工作者对该病的防治作了大量的研究报道[1]。尽管如此,有关Mhp的致病性及毒力因子仍知之不详[2]。中国在Mhp的弱毒研究方面取得了突破性进展[3,4],经多年应用表明该弱毒... 展开更多
关键词 猪肺炎支原体 弱毒株 PAGE PFGE 猪气喘病病原
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猪支原体肺炎活疫苗(168株)肺内免疫机制研究 被引量:8
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作者 冯志新 刘茂军 +6 位作者 熊祺琰 华利忠 王海燕 甘源 韦艳娜 苏国东 邵国青 《中国兽药杂志》 2012年第8期4-7,19,共5页
为研究猪支原体肺炎活疫苗(168株)的免疫机制,通过肺内接种免疫5~10日龄仔猪,并于免疫后不同时间点检测血清中IgG抗体效价、全血中淋巴细胞转化效率、呼吸道局部的IFN-γ浓度和特异性SIgA滴度,于免疫后28 d剖杀采集呼吸道上皮组织,通... 为研究猪支原体肺炎活疫苗(168株)的免疫机制,通过肺内接种免疫5~10日龄仔猪,并于免疫后不同时间点检测血清中IgG抗体效价、全血中淋巴细胞转化效率、呼吸道局部的IFN-γ浓度和特异性SIgA滴度,于免疫后28 d剖杀采集呼吸道上皮组织,通过扫描电镜法与原位杂交检测法观察疫苗株在呼吸道的存留以及对纤毛的影响情况。结果发现,免疫后猪血液中淋巴细胞转化增强1.52~2.01倍,支气管表面IFN-γ浓度和特异性SIgA滴度持续增加,但血清抗体一直未检测到。扫描电镜与原位杂交检测结果发现疫苗株能有效地黏附在支气管纤毛上皮细胞上,但对纤毛的影响较小。由此表明,猪支原体肺炎活疫苗(168株)通过肺内免疫可有效激活全身细胞免疫及呼吸道局部的黏膜免疫与细胞免疫反应,而且还可以通过黏附支气管纤毛上皮细胞产生占位效应而对上皮组织不产生损伤。 展开更多
关键词 猪支原体肺炎活疫苗 肺内免疫 免疫机制
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不同猪支原体肺炎活疫苗菌株P46和P97基因序列差异性分析 被引量:8
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作者 武昱孜 邢宪平 +3 位作者 韦艳娜 熊祺琰 冯志新 邵国青 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期2365-2373,共9页
对我国用于生产的3种猪支原体肺炎活疫苗菌株(168株、RM48株、Z株)进行P46和P97R1R2基因序列分析,考察其保守性和差异。提取来源于四家猪支原体肺炎活疫苗生产企业的疫苗株基因组DNA,以其为模板进行PCR扩增、测序;利用DNAStar序列分析... 对我国用于生产的3种猪支原体肺炎活疫苗菌株(168株、RM48株、Z株)进行P46和P97R1R2基因序列分析,考察其保守性和差异。提取来源于四家猪支原体肺炎活疫苗生产企业的疫苗株基因组DNA,以其为模板进行PCR扩增、测序;利用DNAStar序列分析软件对测序结果和国际标准株J株、232株、7448株、7422株一起进行比对,分析3种疫苗菌株和4个标准株之间核苷酸及氨基酸差异。结果发现,疫苗株Z株、RM48株、168株的P46基因序列相似性为100%,与J株、232株相似性为99.1%,与7422株、7448株相似性为98.9%。疫苗株RM48株和Z株的P97R1R2基因序列相似性为100%;而与疫苗株168株相似性为97.5%;三个疫苗株与J株、232株、7448株、7422株的P97R1R2基因相似性仅为90.1%~93.6%,差异主要发生在R1区重复序列的次数上。本研究为临床猪支原体肺炎活疫苗菌株的检测及不同菌株之间的差异鉴定研究奠定了基础。 展开更多
关键词 猪支原体肺炎 猪肺炎支原体 疫苗株 P46基因 P97基因
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猪支原体肺炎疫苗的免疫原理及应用效果概述 被引量:2
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作者 华利忠 冯志新 +4 位作者 刘茂军 熊祺琰 甘源 张小飞 邵国青 《中国兽药杂志》 2012年第8期58-61,共4页
猪支原体肺炎灭活疫苗和弱毒活疫苗的临床应用均有很好的效果。简述了猪支原体肺炎灭活疫苗以体液免疫为主、弱毒活疫苗以细胞免疫和粘膜免疫为主的不同免疫学特性,分析认为占位效应可能是猪支原体肺炎弱毒活疫苗独特的免疫原理之一,提... 猪支原体肺炎灭活疫苗和弱毒活疫苗的临床应用均有很好的效果。简述了猪支原体肺炎灭活疫苗以体液免疫为主、弱毒活疫苗以细胞免疫和粘膜免疫为主的不同免疫学特性,分析认为占位效应可能是猪支原体肺炎弱毒活疫苗独特的免疫原理之一,提出了灭活疫苗可能的改良方向及保证弱毒疫苗高效免疫的三项措施,以期为猪支原体肺炎防控提供参考。 展开更多
关键词 猪支原体肺炎 灭活疫苗 弱毒活疫苗 应用效果
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Mhp强弱毒株P97基因的克隆与序列测定 被引量:3
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作者 丁芳 宁宜宝 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期698-701,共4页
利用聚合酶链式反应(PCR)技术扩增出猪肺炎支原体弱毒株R659及强毒株F19的P97基因,PCR产物经纯化后,克隆至载体pGEM-Teasyvector,转化DH5α感受态细胞,筛选阳性克隆,提取质粒,对目的片段测序,结果表明:R659的P97全基因大小为3416bp,F19... 利用聚合酶链式反应(PCR)技术扩增出猪肺炎支原体弱毒株R659及强毒株F19的P97基因,PCR产物经纯化后,克隆至载体pGEM-Teasyvector,转化DH5α感受态细胞,筛选阳性克隆,提取质粒,对目的片段测序,结果表明:R659的P97全基因大小为3416bp,F19的P97全基因大小为3329bp,强弱毒株间核苷酸同源性为96.9%,弱毒株R659与标准株232A核苷酸同源性为95.6%,强毒株F19与232A株核苷酸同源性为95.1%。 展开更多
关键词 基因 核苷酸 弱毒株 克隆 序列测定 同源性 聚合酶链式反应 强毒株 猪肺炎支原体 DH
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贵州省地方猪肺炎支原体鉴定及其主要黏附因子基因序列分析 被引量:1
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作者 张静 赵春萍 +6 位作者 张雄 王婧 齐婧 周思旋 杜春林 罗意 史开志 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第5期73-81,共9页
为了了解贵州地方猪肺炎支原体菌株遗传变异情况,试验对3份贵州省贵阳市某地方猪养殖场疑似感染猪肺炎支原体的病料进行离体培养及PCR鉴定;同时对分离菌株及6株疫苗菌株的主要黏附因子P46基因、P97基因R1区和P146基因高变区进行PCR扩增... 为了了解贵州地方猪肺炎支原体菌株遗传变异情况,试验对3份贵州省贵阳市某地方猪养殖场疑似感染猪肺炎支原体的病料进行离体培养及PCR鉴定;同时对分离菌株及6株疫苗菌株的主要黏附因子P46基因、P97基因R1区和P146基因高变区进行PCR扩增及测序,并与参考菌株比对分析,挖掘分离菌株与疫苗菌株、参考菌株之间的差异性。结果表明:从疑似病料中培养并鉴定获得1株猪肺炎支原体,命名为GZ株。GZ株P46基因核苷酸序列与疫苗菌株、参考菌株的同源性最高,均在98.3%以上。P146蛋白高变区氨基酸差异主要发生在PQ和PS重复区,GZ株PQ重复区中只缺失2个氨基酸,而PS重复区中缺失7个氨基酸,与疫苗菌株168L株、RM48株和Z株缺失情况一致。GZ株P97基因R1区核苷酸序列与疫苗菌株、参考菌株之间的同源性低,为94.5%~97.4%;各菌株间P97蛋白R1区氨基酸序列中,AAKPV/E重复基元存在不同程度缺失,GZ株在该区域仅存在5个重复基元,且第1个重复序列中的谷氨酸(E)突变为谷氨酰胺(Q)。说明P97蛋白R1区和P146蛋白高变区氨基酸序列的改变导致抗原表位和黏附能力发生变化,对P97基因R1区和P146基因高变区遗传变异情况的调查将有助于筛选出最佳商品化疫苗和研制地方性适用疫苗,有效阻止肺炎支原体在猪群中的传播。 展开更多
关键词 猪肺炎支原体 GZ株 疫苗菌株 P46基因 P146基因 P97基因
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