侵染花叶青木的病毒种类鉴定及其基因序列分析

【目的】探明采自云南和海南表现为黄化、皱缩等表型的花叶青木病毒种类。【方法】首先,利用转录组测序技术对来自云南省昆明市的花叶青木样品进行检测;然后,根据转录组测序结果,采用RT-PCR对采自云南省昆明市和海南省海口市的73份花叶青木样品开展转录组测序结果中发现的病毒种类检测验证,并扩增获得相关病毒基因片段,对这些病毒的基因序列进行比对分析。【结果】转录组测序结果发现,送测的花叶青木样品中含有蚕豆萎蔫病毒2号(broad bean wilt virus 2,BBWV2)、菜豆黄花叶病毒(bean yellow mosaic virus,BYMV)、黄瓜花叶病毒(cucumber mosaic virus,CMV)、豌豆耳突花叶病毒1号(pea enation mosaic virus 1,PEMV-1)和豌豆耳突花叶病毒2号(pea enation mosaic virus 2,PEMV-2)5种病毒的侵染。但随后对来自云南和海南的73份花叶青木样品的RT-PCR验证中,只检测到BBWV2、BYMV、CMV和PEMV-24种病毒。其中,云南和海南的样品中均能检测到BBWV2,总检出率为11.0%;而BYMV、CMV和PEMV-2仅在云南的样品中被检测到,检出率分别为5.5%、1.4%和1.4%。从两地采集的花叶青木样品中既未发现PEMV-1的侵染,也未发现BBWV2、BYMV、CMV和PEMV-2的复合侵染。为了进一步分析BBWV2、BYMV、CMV和PEMV-2花叶青木分离物与来自其他寄主植物相关病毒分离物的分子变异,选取检测到上述4种病毒的样品,分别对BBWV2、BYMV和CMV 3种病毒的cp及PEMV-2的RdRp序列进行扩增,并对扩增获得的BBWV2490 nt的small cp(GenBank登录号:OQ137565、OQ137566)、BYMV 499 nt的cp核心区域(GenBank登录号:OQ137568)、CMV 880 nt的cp(GenBank登录号:OQ137567)和PEMV-2800nt的RdRp核心区域序列(GenBank登录号:OQ137569)进行分析。序列比对分析结果表明,BBWV2云南与海南花叶青木分离物间存在85.9%的核苷酸序列一致性,二者与GenBank中其他BBWV2分离物分别存在79.8%—94.5%和80.2%—92.0%的核苷酸序列一致性;BYMV、CMV和PEMV-2云南花叶青木分离物与GenBank中相应病毒的核苷酸序列一致性分别为79.8%—99.0%、71.5%—99.4%和84.9%—98.0%。利用以上病毒相应基因核苷酸序列构建系统发育树,发现BBWV2云南和海南花叶青木分离物分别属于I组中的a亚组和b亚组;BYMV云南花叶青木分离物与伊朗(GenBank登录号:MN241051,MN241060)和伊拉克(GenBank登录号:JQ026005)蚕豆分离物具有较近的亲缘关系;CMV云南花叶青木分离物属于I组中的IB亚组,但与IB亚组的其他成员具有较远的亲缘关系;PEMV-2云南花叶青木分离物与云南豌豆分离物亲缘关系最近并聚为一组,但与其他分离物存在较远的亲缘关系。【结论】首次报道了花叶青木被病毒感染,同时也是BBWV2、BYMV、CMV和PEMV-2在花叶青木乃至桃叶珊瑚属植物上的首次报道,BBWV2、BYMV、CMV和PEMV-2花叶青木分离物与来自其他植物的相关病毒分离物存在较大的分子变异。

日本桃叶珊瑚的冷驯化及抗寒机制研究

冷驯化能大大提高植物的抗寒性.研究测定了引进日本桃叶珊瑚 AucubajaponicaThunb.cv.Variegata 苗木在不同越冬条件下的抗寒性指标及在低温锻炼前后的半致死温度,并通过双向电泳分离与抗寒性有关的特异蛋白.结果表明,日本桃叶珊瑚能安全地越冬 最低气温为-18℃ ,日本桃叶珊瑚叶片抗冻的细胞结构特征在于其叶肉细胞排列疏松,间隙大,有利于防止细胞内结冰;经过4℃冷驯化的植株低温半致死温度为-21℃,而未经冷驯化的植株低温半致死温度为-7.5℃;双向电泳分析发现至少有3个常温下存在而低温下消失的蛋白多肽,分子量分别为A15kD、B14kD、C56kD、D26kD.依据分子量和等电点初步分析,A与组蛋白H2A相似,B与组蛋白H2B相似;另B与Rubisco小亚基分子量相近,C与Rubisco大亚基分子量相近,前一种情况可能与有关抗寒基因的表达有关,后一种情况可能与低温下的光合作用减弱有关.

3种彩叶植物光合生理特性的差异

为了科学指导城市园林中彩叶植物的配置,采用LI-6400光合测定系统测定并研究了红叶石楠(Pho-tinia serrulata)、金边黄杨(Euonymus japonicuscv.Aureo-ma)与洒金桃叶珊瑚(Aucuba japonicavar. Variegata)3种彩叶植物的光合生理特性。结果表明:3种彩叶植物的最大净光合速率、光补偿点、光饱和点与表观量子效率一致表现为:红叶石楠>金边黄杨>洒金桃叶珊瑚,表明洒金桃叶珊瑚的耐阴性强于红叶石楠和金边黄杨。此外,洒金桃叶珊瑚净光合速率日变化呈"单峰"型,在11:30左右峰值出现之后,其光合速率一直呈下降趋势;而红叶石楠与金边黄杨净光合速率日变化呈"双峰"型,在中午均有明显光合"午休"现象。3种彩叶植物在午间净光合速率降低时,气孔导度下降,而叶片的蒸腾速率和胞间CO2体积分数上升,3种彩叶植物的净光合速率与胞间CO2体积分数日变化趋势相反。

洒金东瀛珊瑚光合生理特性的研究

洒金东瀛珊瑚的光合生理特性研究表明,洒金东瀛珊瑚的净光合速率日变化曲线在春季、夏季和秋季均呈双峰曲线型;其光补偿点约为29.71μmol.m-2.s-1,光饱和点在700μmol.m-2.s-1左右,补偿点低,饱和点较高,属于中性地被植物,具有较强的耐阴性,不耐阳光直射。多元线性回归分析结果表明,气孔导度对春、夏、秋3个季节的净光合速率均起着主要的影响作用。相关分析和通径分析结果表明,在洒金东瀛珊瑚的生长季内,适当降低温度和增加空气相对湿度,可提高其光能利用率。洒金东瀛珊瑚可作为优良的城市园林彩叶地被植物,栽植在乔木林下、建筑物北侧等非阳光直射的环境中。

杜仲几种不同炮制方法的比较

目的:对杜仲砂炒法、烘制法与传统炮制方法进行比较,考察3种炮制方法的优劣。方法:以损耗率和桃叶珊瑚苷粗品含量为指标,比较杜仲的3种炮制方法。结果:杜仲砂炒法和烘制法的损耗率较小,桃叶珊瑚苷粗品含量较高。结论:杜仲砂炒法和烘制法优于传统炮制方法。

抗生素对黄叶日本桃叶珊瑚试管苗细菌污染抑制效果初探

采用医用抗生素氨苄西林钠、硫酸链霉素、头孢拉定及其组合抑制黄叶日本桃叶珊瑚试管苗细菌污染试验结果表明:单独使用1种抗生素时,抗菌及试管苗生长、生根情况不如组合使用效果好,使用抗生素氨苄西林钠比另外2种抗生素效果好;组合使用抗生素时,培养基附加氨苄西林钠与硫酸链霉素各50 mg/L,对污染菌的抑菌率为100%,同时在增殖系数、苗高、生长势方面都表现最好,并对黄叶日本桃叶珊瑚试管苗的生根有明显的促进作用,氨苄西林钠与头孢拉定抗菌组合效果次之,效果好于硫酸链霉素与头孢拉定组合。

HPLC-ELSD法测定洒金桃叶珊瑚叶中桃叶珊瑚苷含量的研究

[目的]建立HPLC-ELSD测定洒金桃叶珊瑚叶中桃叶珊瑚苷含量的方法。[方法]采用蒸发光散射检测器(ELSD)对洒金桃叶珊瑚叶中桃叶珊瑚苷进行了HPLC分析。[结果]桃叶珊瑚苷在0.504～2.268μg范围内线性关系良好,回归方程为Y=1.656 4X+4.434 1(r=0.999 6,n=8),洒金桃叶珊瑚叶中桃叶珊瑚苷含量为2.64%,平均回收率为99.01%,RSD为1.53%。[结论]该方法简便、快速、准确性高、重复性好,适合于洒金桃叶珊瑚叶中桃叶珊瑚苷的定量分析。

3种常绿阔叶树在不同纬度试栽的反应

大叶冬青、乐东拟单性木兰、洒金桃叶珊瑚３种常绿阔叶树，在南京、盱眙、新浦纬度各相差约１°的地方试栽后，前两地可安全越冬，新浦栽种大叶冬青和洒金桃叶珊瑚可以成功，栽乐东拟单性木兰则要注意小环境的选择。

成都市洒金珊瑚炭疽病病原鉴定及潜在侵染源初探

为明确引起成都市洒金珊瑚炭疽病的病原菌种类和潜在侵染源,采集疑似为炭疽病的洒金珊瑚叶片,采用组织分离法进行分离,单孢纯化后得到22株代表菌株。结合形态学特征和多基因系统发育树的构建,将致病菌鉴定为暹罗炭疽菌Colletotrichum siamense、隐秘炭疽菌C.aenigma、喀斯特炭疽菌C.karstii和果生炭疽菌C.fructicola。将成都市园林植物上分离获得的炭疽菌接种洒金珊瑚,结果表明:供试菌株都可侵染洒金珊瑚,表现出强弱不同的致病性,来自其他寄主的炭疽病菌可能会成为洒金珊瑚炭疽病的潜在侵染源。

遮荫处理对红叶石楠和洒金桃叶珊瑚光合特性的影响

研究不同遮荫处理(透光率分别为20%、40%、60%、100%)对红叶石楠和洒金桃叶珊瑚两种观叶植物光合特性的影响.结果表明:遮荫处理6周后,与遮荫状态下原位测定相比,自然状态下两种植物异位测定的光合作用增强,随着遮荫程度的增强,叶片净光合速率呈增大趋势,红叶石楠和洒金桃叶珊瑚的最大值分别为9.7和8.3μmol.m-2.s-1;两种植物的蒸腾速率显著提高.遮荫处理不同程度地提高了两种植物叶片叶绿素a、b含量、叶绿素a+b总量及叶绿素/类胡萝卜素值,降低了叶绿素a/b值,但类胡萝卜素含量无显著变化.在自然状态下,红叶石楠净光合速率和蒸腾速率的表型可塑性指数(PPI)分别为2.08和3.21;洒金桃叶珊瑚的相应指标仅为0.55和1.60.两种植物的叶绿素和类胡萝卜素含量相对稳定,受外界环境因子影响相对较小.洒金桃叶珊瑚的耐荫性高于红叶石楠.