实验性自体移植静脉内膜增生模型的建立

目的 建立自体静脉移植模型 ,并观察其平滑肌细胞 ( SMC)增殖和内膜增厚的时空变化 .方法 用“Cuff”技术将兔自体颈外静脉移植入同侧颈动脉系统 ,观察 PCNA和 α-actin表达 ,并对自体移植静脉管腔、内膜、中膜面积定量分析 .结果 自体静脉移植后扩张 ,2 wk内最明显 ,同时 SMC增殖和迁移 ,1～ 2 wk达高峰 ,PCNA和 α- actin表达也明显增高 .结论 该模型设计科学 ,成功率高 .SMC增殖从术后 3 d即已开始 ,1～ 2 wk达高峰 ,是抑制细胞增殖的最佳时期 ,增生内膜主要是由中膜

大鼠自体移植静脉内膜增生模型的改进

目的改进大鼠自体移植静脉内膜增生模型。方法将36只SD大鼠随机分成实验组和对照组。实验组采用套管法将大鼠自体颈外静脉移植入同侧颈动脉系统。对照组采用吻合法行自体颈外静脉移植,术后均皮下注射肝素800 U/kg,2次/d,共5 d。观察术后不同时间点两组大鼠移植静脉通畅性、吻合口狭窄及内膜增生情况。结果实验组移植静脉自体移植静通畅性优于对照组,吻合口狭窄程度轻于对照组。结论实验组模型设计科学,操作简便,成功率高。

改良“cuff”法建立大鼠自体静脉移植动脉化模型

目的建立冠状动脉旁路术后移植静脉桥狭窄的动物模型。方法采用改良"cuff"技术,建立大鼠颈外静脉移植到同侧颈总动脉模型50例。结果手术无死亡,14 d静脉桥通畅率96%,大体观静脉桥管腔不同程度的狭窄,病理示内膜不同程度增生。结论本模型能真实反映冠状动脉旁路术后静脉桥狭窄的情况,是进一步研究防治静脉桥狭窄的理想模型。

可降解外套管抑制自体移植静脉内膜增生的研究

目的:研究可降解的外套管束缚自体移植静脉对减轻桥静脉内膜、中层增厚的作用,探讨其防止或延缓桥静脉再狭亮窄的机制.方法:建立犬自体股静脉至股动脉的端-端静脉移植模型,其中一侧桥静脉外加聚乳酸-聚乙醇酸(PLGA)做成的圆柱形外套管(外套管组),对侧单纯静脉移植作为对照组.超声多普勒观察在体移植血管的通畅性.术后2、4、6、8、24周再次手术取桥静脉.光镜观察移植静脉中段内膜、中层厚度,胶原、弹力纤维变化;透射电镜观察静脉壁基底膜、细胞排列、细胞增殖、凋亡,细胞骨架结构,细胞外基质(ECM)变化等;免疫组化观察静脉壁细胞增殖、凋亡及分布.结果:术后40条静脉均通畅,吻合口无狭窄.对照组术后2周见内膜、中层增厚;随时间延长,增厚更加明显.外套管组术后2周内膜、中层稍增厚;4～24周持续增厚,但各时间点均明显小于对照组(P＜0.05,P＜0.01);对照组术后2周见中层平滑肌、外膜弹力纤维断裂严重,而外套管组无明显断裂.新生静脉内膜由平滑肌细胞(SMCs)和大量ECM构成,中层主要为SMCs和ECM;术后2周,静脉壁细胞增殖和凋亡率都较高,主要分布在内膜和中层,外套管组明显低于对照组(P＜0.01),4周以后两者显著下降,凋亡率高于增殖率(P＜0.05).结论:可降解外套管在术后早期可保持静脉结构的完整性,减轻管壁结构破坏,抑制内膜、中层增生,外套管降解后对静脉壁的保护作用继续存在.

兔自体静脉移植物粥样硬化模型的建立

为研究自体静脉移植物粥样硬化的发病机制以进行干预研究 ,建立家兔动物模型。将 30只雄性新西兰大白兔随机分为正常对照组 (n =6 )、单纯移植组 (n =12 )和高脂移植组 (n =12 ) ,分别给予普通饲料喂养、单纯自体颈外静脉移植加普通饲料喂养和自体颈外静脉移植加高脂饲料喂养。实验 12周末处死动物 ,检测血脂水平 ,同时观察静脉移植段的形态特征。结果发现 ,高脂移植组出现明显的高脂血症 ,其颈静脉移植段出现较典型的粥样硬化病变 ,包括内皮细胞脱落、内膜增生、平滑肌细胞移行增殖、脂质沉积和泡沫细胞形成等 ;单纯移植组的颈静脉移植段仅有明显的内膜增生和平滑肌细胞表型转换及增殖 ,未见明显脂质沉积 ;而正常对照组及各移植组对侧颈外静脉未见明显异常。结果提示 ,自体颈外静脉移植结合高脂饲料喂养可成功建立兔自体静脉移植物粥样硬化模型 ,此模型可用于人自体静脉移植物粥样硬化发生机理及防治措施等的研究。

大鼠自体移植静脉内膜增生模型的改进

目的改进大鼠自体移植静脉内膜增生模型,比较采用不同方法建立模型的效果。方法将36只SD大鼠随机分成2组:实验组和对照组。实验组采用“套管法”将大鼠自体颈外静脉移植入同侧颈动脉系统。对照组采用“吻合法”行自体颈外静脉移植,术后均给予肝素皮下注射5天。观察术后不同时间点两组大鼠移植静脉通畅性、吻合口狭窄及内膜增生情况。结果实验组移limit自体移植静脉通畅性优于对照组,吻合口狭窄程度轻于对照组。结论实验组模型设计科学,手术操作简便,成功率高。

大鼠自体移植静脉PDGF及受体基因表达的实验研究(英文)

内膜增生是移植静脉失败的主要原因．发病机理尚不清楚。本研究取Wistar大鼠80只建立自体颈静脉移植于肾下腹主动脉动物模型．通过电镜和组织切片原位杂交分期于术后2h、24h及术后1周观察移植静脉超微结构和血小板源生长因子（PDGF）及受体基因表达动态变化。结果显示：（1）术后2h．内膜破裂翻卷，SMC线粒体轻度肿胀；PDGF－A及PDGFR－βmRNA表达增加．但PDGF－BmRNA表达量较大；（2）术后24h．大部分内皮细胞脱落，内膜被覆以丝状血栓；PDGF－A与PDGFR－β较术后2h表达明显增加；（3）术后1周，内皮开始重新再生；PDGF－AmRNA表达开始减少．PDGFR－β持续表达。结果表明PDGF在自体静脉移植中与SMC增殖及内膜增生有关。

丹参对自体静脉移植替代动脉后早、中期通畅率及增殖病变的影响

目的 探讨丹参对自体静脉移植替代动脉后早、中期通畅率及增殖病变的影响。方法 将大鼠自体颈静脉移植于腹主动脉 ,分丹参组和对照组 ,丹参组于术前 1d开始管饲丹参注射液 [2 4g/ (kg·d ) ]直至取材 ;对照组管饲相同体积的生理盐水。于术后 1d、3d、1w、2w、4w及 8w取材 ,观测移植静脉通畅率、内 中膜厚度及细胞核增殖抗原(PCNA)的表达。结果 移植静脉通畅率两组间差异无显著性意义 (P>0 .0 5 ) ,术后 2w、4w及 8w移植静脉壁厚度丹参组较对照组减少 1/ 3 ,差异有非常显著性意义 (P<0 .0 1) ,丹参组PCNA阳性细胞数较对照组明显减少 (P<0 .0 1)。结论 丹参可抑制移植静脉增殖病变 ,对移植静脉早。

自体大隐静脉移植内瘘的应用护理

目的探讨自体大隐静脉上肢移植内瘘的临床应用及护理。方法选择2012年8月-2013年4月在某院血液净化中心维持性血液透析的患者10例。这些患者的吻合动脉为上肢肱动脉或桡动脉，静脉采用肘正中静脉、头静脉或贵要静脉；J形或U形搭桥术式端侧吻合。术后给予专科护理，专人开瘘，实行首次穿刺负责制。定期评估移植内瘘的通畅情况，通过血生化计算透析充分性。结果10例患者移植后即刻通畅率为100％，术后未见感染、血肿等并发症。3例患者因各种原因终止使用；其余7例均正常使用至今，最长的已使用32个月，血透时血泵流速达到200-250mL／mia。每季度抽查血生化显示Kt／V均达标。结论大隐静脉移植上肢内瘘长期通畅率高，并发症少，易于穿刺，血流充足，透析充分性好，可作为血液透析患者有效的血管通路之一。

Egr-1在自体移植静脉中的表达及意义

目的研究自体静脉移植后早期生长反应基因-1(Egr-1)表达的动态变化,探讨其在内膜增生中的作用。方法Wistar大鼠90只,将大鼠右颈总静脉端-端吻合于肾下腹主动脉建立自体静脉移植模型。术后随机分别于1、2、6和24h,3、7、14、28及42d相应时间处死动物取移植静脉,同时取正常静脉作对照。应用原位杂交和RT-PCR方法检测Egr-1mRNA的表达,联合应用Western蛋白印迹和免疫组织化学方法检测Egr-1蛋白表达情况,同时进行组织形态学观察。结果自体静脉移植后,Egr-1mRNA和Egr-1蛋白的表达呈双相变化,即移植后1h,Egr-1mRNA表达迅速升高,阳性率为(35±7)%,6h、24h及3d时下降到较低水平,阳性率分别为(8±2)%、(8±6)%和(8±4)%,7d时又再升高,28d时达高峰,阳性率为(45±6)%,此与其余各时点比较差异均有统计学意义(P<0.01),42d时,Egr-1mRNA的表达再次下降;移植早期(2h)即有Egr-1蛋白的表达,阳性率为(30±5)%,并持续至6h,24h^3d表达下降到较低水平,阳性率分别为(7±3)%和(7±8)%,7d时又再升高,至移植后28d,Egr-1蛋白的表达阳性率达到高峰,为(40±9)%,此与其余各时点比较差异有统计学意义(P<0.01)。移植后7d,免疫组化结果显示,Egr-1蛋白表达主要位于中膜血管平滑肌细胞(VSMCs)和单核细胞/巨噬细胞,移植后期28d,Egr-1蛋白表达主要位于新生内膜和中膜的VSMCs,同时部分内皮细胞也有Egr-1蛋白的表达。结论移植静脉内膜增生与Egr-1的激活及表达关系密切,Egr-1可能成为防治移植静脉内膜增生、狭窄及闭塞的一个新的干预靶点。

自体心包外支架预防静脉移植物再狭窄的动物模型的建立

目的:建立自体心包外支架包裹静脉移植物减轻内膜增生的动物模型,探讨自体心包外支架预防静脉移植物再狭窄的可行性。方法:以“no-touch”方法取犬一侧颈外静脉,对半剪成两段后分别吻合在双侧股动脉上,其中一侧静脉移植物外包裹自体心包(实验组),另一侧为单纯的静脉移植(对照组)。术后2周、4周分别切取移植静脉,行HE和WEIGERT染色,图像分析系统测量和计算内膜厚度、内膜面积。免疫组化法检测静脉移植物平滑肌细胞增殖细胞核抗原(PCNA)的表达水平。结果:除1条犬死亡外,余12条成活,所有动静脉吻合口无狭窄。实验组静脉移植物术后2周、4周内膜厚度、内膜截面积和PCNA指数均明显低于对照组(P<0.01)。结论:该动物模型设计合理,自体心包可作为静脉外支架的材料,能明显减轻内膜的增生,减少平滑肌细胞的增生。

用自体心包行静脉周支持对静脉移植物内膜增生的影响

目的探讨自体心包外周支持对静脉移植物内膜增生的影响。方法取犬一侧颈外静脉,对半剪成两段后分别吻合在双侧股动脉上,其中一侧静脉移植物外包裹自体心包(实验组),另一侧为单纯的静脉移植(对照组)。术后2、4周分别切除移植静脉,计算机图像分析系统测量和计算内膜厚度、内膜面积,进行扫描电镜检查,用免疫组织化学方法检测静脉移植物平滑肌增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。结果实验组静脉移植术后2、4周内膜厚度和内膜截面积明显低于对照组(P<0.01)。实验组静脉移植物术后2、4周的PCNA指数也明显低于对照组(P<0.01;P<0.05)。扫描电镜检查显示实验组静脉移植物内皮层破坏程度轻于对照组。结论自体心包外周支持能抑制静脉移植物内膜的增生。

自体移植静脉中早期生长反应基因1的表达及意义

目的:研究自体静脉移植后早期生长反应基因1(Egr-1)表达的动态变化,探讨其在内膜增生(IH)中的作用。方法:W istar大鼠80只,建立自体静脉移植模型。应用原位杂交和RT-PCR方法检测Egr-1 mRNA的表达,应用W estern蛋白印迹和免疫组化方法检测Egr-1蛋白表达情况,同时进行组织形态学研究。结果:自体静脉移植后,Egr-1mRNA和Egr-1蛋白的表达具有双相变化。移植1 h,Egr-1 mRNA阳性率为(35±7)%,6 h和24 h时下降,7 d时重新升高,4周达高峰(45±6)%。移植早期2 h即有Egr-1蛋白的表达,阳性率为(30±5)%,并持续至6h,24 h^3 d表达下降,移植4周Egr-1蛋白的阳性表达率达到高峰(40±9)%。结论:Egr-1的激活及表达与自体移植静脉内膜增生关系密切,Egr-1可能成为防治移植静脉内膜增生及狭窄、闭塞的一个新的干预靶点。

大鼠卵巢组织冷冻复苏及自体异位移植研究

目的探讨直接覆盖玻璃化冷冻(direct cover vitrification,DCV)在冷冻大鼠卵巢组织中的效果,并对自体异位移植后卵巢组织存活状况及内分泌情况进行分析。方法性成熟的Wistar大鼠50只随机分为A、B、C、D组,A和B组各20只,C和D组各5只。A组为新鲜卵巢组织移植;B组卵巢组织经DCV冷冻保存2周复苏后移植;C组为去势对照;D组为假手术对照。自体异位移植6周后检测大鼠血清中雌二醇(E2)水平,计算卵泡密度,观察移植卵巢组织形态学及增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达情况。结果大鼠卵巢组织移植存活的卵巢组织周围可见血管供应,移植失败的卵巢组织呈纤维化状态,与周围组织血供不明显。B组卵巢组织移植存活率低于A组(P<0.05)。B组卵巢组织中卵泡密度均低于A、D组,且A组低于D组(P<0.05)。A、B组血清E2水平高于C组,低于D组(P<0.05)。A、B组卵巢组织PCNA阳性率均低于D组,且B组低于A组(P<0.05)。结论大鼠卵巢组织经DCV法冻融自体异位移植后部分卵泡能存活并可恢复内分泌功能。

丹参对自体静脉移植物血小板源生长因子及其受体蛋白表达的影响

目的探讨丹参对自体静脉移植替代动脉后血小板源生长因子(PDGF)及其受体蛋白表达的影响。方法将大鼠自体颈静脉移植于腹主动脉,分丹参组和对照组,丹参组于术前1d开始管饲丹参注射液(24g·kg-1·d-1)直至术后4周取材,检测移植静脉PDGF及其受体蛋白的表达。结果正常静脉未见PDGF及其受体的表达,术后4周移植静脉可见PDGF A、B链及其受体α、β亚基的表达,丹参组PDGF B链及PDGF受体α、β表达较对照组明显减少(P<0.01),PDGF A链两组无明显差异(P>0.05)。结论丹参可减少移植静脉PDGF B链及PDGF受体α、β亚基的表达。

“套管法”建立大鼠自体静脉移植模型及其病理学观察

目的:探讨"套管法"建立大鼠颈静脉-颈动脉移植模型的可行性,并观察移植静脉早期的病理学变化。方法:采用套管法建立SD大鼠颈静脉-同侧颈动脉移植模型。分别在静脉移植后1、7和21 d取材,HE染色观察移植静脉血管壁组织血管结构变化特点,Digimizer图像处理分析软件测量内膜中膜增生厚度。结果:在18只模型中2只动物死亡,1只发现移植静脉内血栓形成,总成功率为83.3%。术后1 d移植静脉内膜中膜厚度为(48.47±11.28)μm,7 d内膜中膜开始增厚至(66.05±19.10)μm,术后21 d增生更加明显至(300.44±181.54)μm,三者相比具有统计学差异(χ2=125.2,P<0.01)。1、7及21 d两两之间相比均具有统计学差异。结论:采用套管法建立的大鼠颈静脉-颈动脉移植模型方法简单,成功率高。其能较确切的复制人体静脉移植的病理生理过程,可应用于人类移植静脉狭窄闭塞的实验研究。

自体大隐静脉搭桥与血管腔内支架植入在下肢动脉硬化闭塞症中的应用比较

目的:比较自体大隐静脉搭桥与血管腔内支架植入在下肢动脉硬化闭塞症中的应用效果。方法:选取2016年1月至2018年6月我院下肢动脉硬化闭塞症患者60例,按照手术方法分为搭桥组30例和支架组30例。搭桥组行自体大隐静脉搭桥术,支架组行血管腔内支架植入术。对比两组临床疗效、手术前后间歇性跛行距离、踝肱指数(ABI)。结果:支架组治疗总有效率与搭桥组对比,差异无统计学意义(P>0.05)。术后1个月、3个月两组间歇性跛行距离较术前均增加,且支架组优于搭桥组(均P<0.05)。术后1个月、3个月两组ABI较术前均升高(均P<0.05)。结论:自体大隐静脉搭桥与血管腔内支架植入均可有效疏通下肢动脉硬化闭塞症患者闭塞血管,提高ABI,而血管腔内支架植入在增加间歇性跛行距离方面具有明显优势。

移植血管内膜增生与白细胞共同抗原CD_(45)表达的量效关系

观察术后不同时间内自体移植静脉增生内膜中移行白细胞与内膜增生的量效关系。方法:将24只家兔分为服药组与对照组,在股静脉移植至股动脉模型上,应用白细胞共同抗原CD_(45)免疫组织化学方法,并结合真彩扫描仪计算机图象分析技术,观察内膜增生、白细胞阳性指数及类皮质激素的作用。结果:(1)对照组与服药组各对应时间内移植血管内膜相对厚度无显著性差异;(2)CD_(45)阳性细胞指数在两组之间存在显著性差异,术后1W和2W平均阳性细胞指数分别为14.73±0.38％和3.92±0.42％,术后4W和16W各组均无明显的阳性染色细胞。结论:(1)白细胞在血管移植术后1W和2W各占增生内膜的14％和4％左右,可能在诱导移植术后早期内膜增生和促进术后中后期非细胞性增殖方面具有重要意义。(2)本实验条件下的类皮质激素对移植血管内膜增生无明显抑制作用。

大鼠自体静脉移植模型的建立

目的:建立一种与冠状动脉旁路移植术后静脉桥再狭窄病理过程相似的动物模型。方法:选取40只Wistar大鼠,采用2点定位间断全层外翻吻合法,取游离的大鼠颈外静脉与肾下腹主动脉行端端吻合。结果:手术成功33只,成功率为82.5%(33/40)。取静脉桥时间为10~20 min,平均15 min;游离腹主动脉时间为15~40 min,平均20 min;血管吻合时间为1~2 h,平均1.5 h。结论:成功建立大鼠颈外静脉移植腹主动脉模型,为进一步研究防治冠状动脉旁路移植术后静脉桥再狭窄提供实验模型。

静脉桥接大鼠周围神经缺损的实验研究

在30只大鼠实验中,用自体股静脉或坐骨神经段桥接60根坐骨神经的缺损。术后15、30、60天,先后检测腓肠肌、比目鱼肌肌肉收缩力,再生轴索通过率、直径,并应用电子显微镜观察神经再生超微结构。术后60天,静脉桥接组和神经桥接组均有良好功能恢复,两组间的各项数据差异均并不显著。作者等认为,自体静脉是一种良好的移植体,应能应用于修复周围神经损伤。