“全胚双氟碳法”制备禽脑脊髓炎琼扩抗原的研究

用禽脑脊髓炎病毒 (AEV) Van Rockel毒株接种 6日龄 SPF鸡胚 ,感染 11d后 ,分别收集鸡胚、绒毛尿囊膜及尿囊液 ,鸡胚剔除羽毛、眼球、爪和喙后与绒毛尿囊膜一起 ,制成匀浆 ,反复冻融 3次。通过 2次氟碳 (三氯三氟乙烷 )从全胚匀浆中萃取制备 AE琼扩抗原 (AGP- Ag)。用进口标准 AE AGP试剂进行标化 ,结果发现 :制备的 AE AGP- Ag与标准阳性血清之间有清晰、致密的沉淀线 ,并与标准 AE AGP- Ag的沉淀线完全吻合 ,表明两者的沉淀反应一致 ,从而建立了 AE AGP- Ag制备新方法——“全胚双氟碳法”。其制备 AEAGP- Ag有如下特点 :1产量高 ,平均每 3个 SPF鸡胚可获得 1m L AE AGP- Ag;2特异 ,与类症阳性血清无交叉反应 ;3敏感 ,AGP试验中毋需重复加样 ,普通琼脂板即可出线 ;4稳定性好 ,保存期长 ;5与标准 AEAGP- Ag阳性检出符合率均达 10 0 %。本研究表明用“全胚双氟碳法”制备的 AEAGP- Ag达到了进口标准 AEAGP- Ag质量 ,可用于 SPF鸡 AE抗体的监测 ,且生产成本低 ,也可用于商品鸡

禽脑脊髓炎琼扩抗原的研制与应用

利用禽脑脊髓炎病毒（ＡＥＶ）ＶａｎＲｏｅｋｅｌ株和山东野外分离株，分别脑内接种１日龄ＳＰＦ雏鸡，在隔离器中饲养，取典型发病鸡脑、胃肠和胰腺等制备琼扩抗原。通过特异性检查、效价测定、与进口抗原及血清对比、田间试验等证实，该方法所制备的抗原性能稳定、效价高、特异性强，可广泛用于ＡＥ抗体的普查。