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不同制备方式的FAdV-4疫苗免疫效果评价
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作者 陈红秀 刘学 +3 位作者 张立霞 康福忠 朱秀同 任培森 《现代畜牧兽医》 2024年第9期17-21,共5页
研究旨在评估对比禽腺病毒4型(FAdV-4)悬浮培养、贴壁培养、亚单位蛋白(杆状表达)疫苗的免疫效果,为生产工艺选择合适技术路线提供参考。试验分别制备悬浮培养腺病毒、贴壁培养腺病毒、杆状表达亚单位蛋白疫苗,分别使用3种疫苗免疫SPF... 研究旨在评估对比禽腺病毒4型(FAdV-4)悬浮培养、贴壁培养、亚单位蛋白(杆状表达)疫苗的免疫效果,为生产工艺选择合适技术路线提供参考。试验分别制备悬浮培养腺病毒、贴壁培养腺病毒、杆状表达亚单位蛋白疫苗,分别使用3种疫苗免疫SPF鸡进行免疫效果评价。结果显示,悬浮毒液组鸡群血清中和抗体、ELISA抗体效价均最高,贴壁毒液组鸡群两种抗体效价与其相近;亚单位蛋白组鸡群抗体效价最低,尤其是中和抗体效价明显低于其他两组。攻毒后除亚单位蛋白组有1只死亡外,其他免疫组均无死亡情况。免疫8W后进行攻毒,悬浮毒液组、贴壁毒液组中和抗体效价和攻毒保护率均优于亚单位蛋白组。研究表明,综合各项指标,悬浮毒和贴壁培养毒免疫效果较好。 展开更多
关键词 fadv-4 禽腺病毒 悬浮培养 杆状病毒表达 免疫效果
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Ⅰ群4型禽腺病毒Y17215-1株体外增殖规律及免疫原性研究
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作者 李秀丽 王利丽 +6 位作者 李富强 田向学 路超 任卫科 江珊 张莉 鄢明华 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第2期21-26,共6页
为探讨禽腺病毒4型分离株Y17215-1的体外增殖特性和免疫原性,本研究以LMH细胞为模型,摸索Y17215-1株最佳接种剂量和收获时间;通过活毒滴鼻接种和灭活疫苗肌肉注射的方式免疫SPF鸡,测定其免疫原性。结果显示:Y17215-1株0.1 MOI接种LMH细... 为探讨禽腺病毒4型分离株Y17215-1的体外增殖特性和免疫原性,本研究以LMH细胞为模型,摸索Y17215-1株最佳接种剂量和收获时间;通过活毒滴鼻接种和灭活疫苗肌肉注射的方式免疫SPF鸡,测定其免疫原性。结果显示:Y17215-1株0.1 MOI接种LMH细胞,培养48~72 h病毒滴度达到峰值108.625 TCID_(50)/mL。该病毒经肌肉注射对42日龄SPF鸡具有较强致病性,LD_(50)为103.000 TCID_(50)/0.2 mL。以10^(7.676) TCID_(50)的Y17215-1株滴鼻免疫21日龄SPF鸡,免疫后7 d 100%试验鸡产生中和抗体,14 d达到高峰。以Y17215-1株制备灭活疫苗肌肉注射免疫21日龄SPF鸡(10^(7.676) TCID_(50)/羽),免疫后7 d 70%试验鸡产生中和抗体,21 d达到高峰。在免疫后21 d用1000LD_(50)的Y17215-1株进行攻毒,活毒和灭活疫苗的保护率均为100%。以上结果表明:Y17215-1株具有很好的体外增殖特性和免疫原性,可以作为候选疫苗毒株。 展开更多
关键词 禽腺病毒4 LMH细胞 增殖规律 免疫原性
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2015-2020年我国禽腺病毒流行病学调查及高致病性FAdV-4分离株遗传变异性分析 被引量:16
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作者 冯敬敬 牛登云 +3 位作者 马利芳 段宝敏 史秋颖 李颖 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2021年第5期92-98,共7页
为了解目前我国Ⅰ群禽腺病毒的流行情况,本中心以临床诊断、分子生物学检测、血清学检测和LMH细胞病毒分离等方法对全国重点养殖家禽和水禽的区域进行跟踪检测。本实验室于2015-2020年,从北京、天津、河北、山东等30余个省份共收集到709... 为了解目前我国Ⅰ群禽腺病毒的流行情况,本中心以临床诊断、分子生物学检测、血清学检测和LMH细胞病毒分离等方法对全国重点养殖家禽和水禽的区域进行跟踪检测。本实验室于2015-2020年,从北京、天津、河北、山东等30余个省份共收集到7098份疑似样品,hexon基因测序成功1668份,其中FAdV-1型129份、FAdV-2型89份、FAdV-3型34份、FAdV-4型638份、FAdV-5型36份、FAdV-6型5份、FAdV-7型13份、FAdV-8a型177份、FAdV-8b型193份、FAdV-9型8份、FAdV-10型135份和FAdV-11型211份。将FAdV阴性样品全部接种LMH细胞进行病毒分离,共得到分离株703株,其中FAdV-4型分离株439株。高致病性FAdV-4型437株,与高致病性FAdV-4参考株同源性为99.1%~100%,非致病性分离株2株,与ON1参考株同源性为99.6%~100%。hexon基因的188、193、195、238和240位氨基酸也出现变异。 展开更多
关键词 高致病性fadv-4 禽腺病毒 hexon基因
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表达H7N9亚型禽流感病毒HA蛋白的重组血清4型禽腺病毒构建及其免疫效果评估
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作者 万志敏 李亚锋 +9 位作者 孙建文 姜文杰 赵喆泓 汤婷 谢泉 李拓凡 邵红霞 秦爱建 钱琨 叶建强 《中国家禽》 北大核心 2024年第11期25-33,共9页
为构建H7N9亚型禽流感病毒和血清4型禽腺病毒(FAdV-4)的二联疫苗候选株,试验通过CRISPR/Cas9和Cre-Loxp系统,以课题组前期构建的表达EGFP蛋白的重组病毒FAdV4-EGFP为载体,构建能够稳定表达H7N9亚型禽流感病毒血凝素(HA)蛋白的重组血清4... 为构建H7N9亚型禽流感病毒和血清4型禽腺病毒(FAdV-4)的二联疫苗候选株,试验通过CRISPR/Cas9和Cre-Loxp系统,以课题组前期构建的表达EGFP蛋白的重组病毒FAdV4-EGFP为载体,构建能够稳定表达H7N9亚型禽流感病毒血凝素(HA)蛋白的重组血清4型腺病毒;并通过PCR、间接免疫荧光试验(IFA)、Westernblot试验以及SPF鸡保护性试验等方法,探究此重组病毒体外生物学特性并评估其为鸡提供的保护力。结果显示:研究成功构建能稳定表达H7N9禽流感亚型病毒HA蛋白的重组血清4型腺病毒,命名为FAdV4-H7;FAdV4-H7能在LMH细胞高效复制,并能在LMH细胞传代15次后仍能稳定表达HA蛋白;FAdV4-H7不仅高度致弱,而且能诱导机体产生高滴度针对H7N9亚型禽流感病毒HI抗体和FAdV-4的中和抗体,能为SPF鸡提供足够保护来抵抗致死性FAdV-4感染。研究表明,试验成功构建了重组病毒FAdV4-H7,为H7N9亚型禽流感病毒和FAdV-4的联防联控提供了二联苗候选疫苗株。 展开更多
关键词 H7N9亚型禽流感病毒 HA蛋白 重组血清4型腺病毒 CRISPR/Cas9 疫苗
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1例疣鼻天鹅Ⅰ群禽腺病毒血清4型的诊断与治疗
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作者 王小雨 喇斐燕 +1 位作者 马旭晨 张浩 《现代畜牧科技》 2024年第8期117-120,共4页
为给临床兽医及科研工作者提供疣鼻天鹅禽腺病毒4型诊断与治疗的借鉴。方法:该文通过临床诊断、血清学检测、粪便检测、荧光PCR检测等手段对伊犁州林草局野生动物保护办公室发现的4只4月龄患病疣鼻天鹅进行诊断。结果:血清学检测结果显... 为给临床兽医及科研工作者提供疣鼻天鹅禽腺病毒4型诊断与治疗的借鉴。方法:该文通过临床诊断、血清学检测、粪便检测、荧光PCR检测等手段对伊犁州林草局野生动物保护办公室发现的4只4月龄患病疣鼻天鹅进行诊断。结果:血清学检测结果显示天鹅血清样本中禽流感和新城疫抗体水平为0,荧光PCR检测结果显示4只疣鼻天鹅禽呼肠孤、鸭坦布苏均为阴性,禽腺病毒4型为阳性。结论:可判定该群疣鼻天鹅感染Ⅰ群禽腺病毒血清4型,通过使用腺病毒卵黄抗体并配合抗生素和对症治疗,4只天鹅5 d后均治愈,治愈率100%。 展开更多
关键词 疣鼻天鹅 血清学诊断 荧光PCR 禽腺病毒4 卵黄抗体
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4株禽腺病毒4型的分离及序列分析
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作者 邝瑞欢 陈玫婷 +4 位作者 孟宪波 王刚 徐志宏 谢梓民 董嘉文 《广东畜牧兽医科技》 2024年第4期43-48,共6页
禽腺病毒4型(Fowl adenovirus 4,FAdV-4)是家禽常见的传染病病原之一,可引起鸡心包积液-肝炎综合征,死亡率为20%-80%,给家禽养殖业造成巨大的经济损失。该研究分离鉴定了分别来自广东省和云南省的4株FAdV-4,通过对FAdV-4主要结构蛋白He... 禽腺病毒4型(Fowl adenovirus 4,FAdV-4)是家禽常见的传染病病原之一,可引起鸡心包积液-肝炎综合征,死亡率为20%-80%,给家禽养殖业造成巨大的经济损失。该研究分离鉴定了分别来自广东省和云南省的4株FAdV-4,通过对FAdV-4主要结构蛋白Hexon基因和Fiber-2基因的全基因扩增及序列分析,结果显示,4株FAdV-4分离株(分别命名为JM、QY、FS和YN)Hexon基因和Fiber-2基因的核苷酸序列相似性均为100%。Hexon基因和Fiber-2基因系统进化树显示,本研究分离的4株FAdV-4均位于I群禽腺病毒的C种,属于禽腺病毒4型分支,与我国流行的FAdV-4亲缘关系较近。该研究为探究目前流行的FAdV遗传进化关系提供了参考。 展开更多
关键词 禽腺病毒4 病毒分离 Hexon基因 Fiber-2基因 序列分析
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禽腺病毒4型的分离与初步鉴定 被引量:9
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作者 陈珍 施少华 +7 位作者 黄瑜 韩跃松 陈翠腾 刘荣昌 蔡国漳 朱春华 刘斌琼 林羽 《福建农业学报》 CAS 北大核心 2016年第10期1020-1023,共4页
从疑似心包积液综合征的病死鸡组织中分离获得1株病毒,该病毒无血凝活性,提取其核酸经禽流感病毒、新城疫病毒、鸡传染性支气管炎病毒、禽脑脊髓炎病毒、禽白血病病毒、传染性法氏囊病毒、禽偏肺病毒和包涵体肝炎病毒特异引物扩增均为阴... 从疑似心包积液综合征的病死鸡组织中分离获得1株病毒,该病毒无血凝活性,提取其核酸经禽流感病毒、新城疫病毒、鸡传染性支气管炎病毒、禽脑脊髓炎病毒、禽白血病病毒、传染性法氏囊病毒、禽偏肺病毒和包涵体肝炎病毒特异引物扩增均为阴性,而经禽腺病毒4型特异性引物检测为阳性,则将其暂命名为禽腺病毒4型FJ1674株。将其扩增产物回收后克隆,经序列测定分析表明该株病毒与国内外禽腺病毒4型毒株的同源率为99.4%~100%;经遗传进化分析表明,其与禽腺病毒4型关系密切,共处同一分支。 展开更多
关键词 鸡心包积液综合征 禽腺病毒4 分离鉴定
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鸡源4型禽腺病毒滨州株适应细胞的筛选及培养特性的研究
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作者 魏凤 张文通 +6 位作者 唐娜 王艳 管宇 祖立闯 王金良 苗立中 沈志强 《家畜生态学报》 北大核心 2021年第9期68-72,共5页
为探究鸡源禽腺病毒的适应细胞及培养特性,将前期分离保存的1株4型禽腺病毒滨州株,分别接种Vero细胞、QT-35细胞、DF-1细胞和LMH细胞,连续传3代后,通过细胞病变特征和病毒含量,选出最适宜的细胞,并对细胞进行克隆优选。同时研究了该毒... 为探究鸡源禽腺病毒的适应细胞及培养特性,将前期分离保存的1株4型禽腺病毒滨州株,分别接种Vero细胞、QT-35细胞、DF-1细胞和LMH细胞,连续传3代后,通过细胞病变特征和病毒含量,选出最适宜的细胞,并对细胞进行克隆优选。同时研究了该毒株的接毒剂量、接毒后吸附时间和收获时间。结果表明,LMH细胞最适于4型禽腺病毒滨州株的培养。最佳增殖条件为:最佳接毒量为1/1000、接毒后最佳吸附时间为1 h、收毒时间为接毒后36 h。 展开更多
关键词 4型禽腺病毒 LMH细胞 筛选 培养特性
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山西中部4型禽腺病毒遗传进化及其分离毒株致病性分析 被引量:4
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作者 刘璐 王晨 +5 位作者 张丹 高宇 程宇 谭世明 梁立滨 马海利 《山西农业科学》 2022年第4期591-597,共7页
为了解山西地区4型禽腺病毒(FAdV-4)的遗传进化情况及其致病性,为山西省FAdV-4的疫苗研发和防控策略制定提供理论依据,收集了山西中部地区太谷、祁县、介休、临汾、长治、交城、柳林等养鸡场11份疑似心包积水-肝炎综合征病鸡的肝脏组织... 为了解山西地区4型禽腺病毒(FAdV-4)的遗传进化情况及其致病性,为山西省FAdV-4的疫苗研发和防控策略制定提供理论依据,收集了山西中部地区太谷、祁县、介休、临汾、长治、交城、柳林等养鸡场11份疑似心包积水-肝炎综合征病鸡的肝脏组织样本,采用PCR方法进行FAdV-4检测,对阳性样品进行FAdV-4的Hexon和Fiber-2蛋白的全基因序列扩增,将处理后的阳性病料接种于鸡肝癌细胞(LMH)进行病毒分离和PCR鉴定,测定分离毒株的TCID50,研究病毒对SPF鸡胚和SPF鸡的致病性。结果表明,11份样品的FAdV-4检测均为阳性,经比对,11份样品中FAdV-4的Hexon和Fiber-2基因序列相同,与GenBank中不同FAdV分离株的同源性分别为67.7%~100%和43.2%~100%,其中,与GenBank中的基因C型FAdV-4毒株处于同一个分支,同源性分别为98.4%~100%和95.9%~100%,说明11份疑似样品均存在FAdV-4感染,且为同一毒株。分离获得的1株FAdV-4(命名为SX2020)可在LMH细胞中良好复制并产生明显的细胞病变,对SPF鸡胚及SPF鸡均有致病性,感染后出现FAdV-4典型病变,并且病毒可以在感染鸡体内持续向外排毒达21~28 d。 展开更多
关键词 4型禽腺病毒 分离与鉴定 遗传进化 致病性
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禽腺病毒血清型4通过JAK/STAT信号通路调控鸡胚心脏成纤维细胞炎症反应的研究
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作者 冯孝傲 尹德晶 +4 位作者 朱二鹏 宋春 文明 岳筠 程振涛 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1038-1044,共7页
为探究禽腺病毒血清型4(FAdV-4)感染鸡胚心脏成纤维细胞(CEF)后调控该细胞中炎症因子反应的机制,本研究以MOI 5 FAd V-4贵州分离株(GZ-QL)感染鸡胚心脏CEF细胞,采用荧光定量PCR(qPCR)检测FAd V-4感染后CEF细胞中IL-1β、IL-6、IL-8、TNF... 为探究禽腺病毒血清型4(FAdV-4)感染鸡胚心脏成纤维细胞(CEF)后调控该细胞中炎症因子反应的机制,本研究以MOI 5 FAd V-4贵州分离株(GZ-QL)感染鸡胚心脏CEF细胞,采用荧光定量PCR(qPCR)检测FAd V-4感染后CEF细胞中IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α基因的转录水平;采用western blot检测FAd V-4感染后CEF细胞中不同时间段JAK/STAT信号通路关键蛋白JAK2和p-JAK2的表达情况;以40μmol/L JAK/STAT信号通路抑制剂Ruxolitinib预处理CEF细胞2 h后,将FAd V-4按MOI 5感染CEF细胞,在感染后不同时间分别收集细胞和上清,采用western blot检测Ruxolitinib处理后FAd V-4感染的CEF细胞中不同时间段JAK/STAT信号通路关键蛋白JAK2和p-JAK2的表达情况;采用q PCR检测Ruxolitinib处理后FAd V-4感染的CEF细胞中IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α基因的转录水平;采用ELISA检测Ruxolitinib处理后FAd V-4感染的CEF细胞上清中IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α的表达水平。结果显示,与不感染FAd V-4的空白对照细胞相比,FAd V-4感染CEF细胞后IL-6和IL-8基因的转录水平均极显著上调(P<0.01),IL-1β基因的转录水平在后期显著上调(P<0.05),TNF-α基因的转录水平在前期无变化,后期极显著上调(P<0.01);western blot结果显示,与空白对照细胞相比,FAd V-4感染CEF细胞后p-JAK2蛋白的表达水平均极显著升高(P<0.01),且48 h p-JAK2蛋白的表达水平最高。Western blot结果显示,与FAd V-4感染组相比,Ruxolitinib处理后FAd V-4感染的CEF细胞及Ruxolitinib处理的CEF中p-JAK2蛋白的表达水平均极显著降低(P<0.01),Ruxolitinib组与空白对照组无显著差异;q PCR结果显示,与FAd V和空白对照组相比,Ruxolitinib处理后FAd V-4感染的CEF细胞中炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8基因的转录水平均极显著上调(P<0.01),TNF-α基因的转录水平显著上调(P<0.05);ELISA结果显示,与FAd V和空白对照组相比,Ruxolitinib处理后FAd V-4感染的CEF细胞中炎症因子IL-8分泌水平极显著上调(P<0.01),TNF-α分泌水平显著上调(P<0.05)、IL-1β和IL-6分泌水平无显著变化,与转录水平结果基本一致。本研究上述结果首次证实FAd V-4可以诱导鸡胚心脏CEF细胞产生强烈的炎症反应,并激活了该CEF细胞中的JAK/STAT信号通路,该研究结果为深入阐明FAd V-4感染心脏细胞的致病机制提供一定的参考依据。 展开更多
关键词 禽腺病毒血清型4 JAK/STAT信号通路 炎症反应 心脏成纤维细胞
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1例鸡源血清4型禽腺病毒感染的实验室诊断 被引量:3
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作者 李荣旭 曹梦蕊 +5 位作者 伍辉吉 张溢珊 刘敏芳 陈济铛 陈建红 张济培 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2019年第2期54-56,I0007,I0008,共5页
本研究从广州番禺某鸡场送检病死鸡中分离获得1株疑似Ⅰ群禽腺病毒。病鸡剖检以心包积液、肝脏呈土黄色并伴有出血点,肾脏肿胀、出血为主要特征。实验室通过血凝试验、PCR鉴定、序列测定及遗传进化分析、动物回归试验、病理组织学观察... 本研究从广州番禺某鸡场送检病死鸡中分离获得1株疑似Ⅰ群禽腺病毒。病鸡剖检以心包积液、肝脏呈土黄色并伴有出血点,肾脏肿胀、出血为主要特征。实验室通过血凝试验、PCR鉴定、序列测定及遗传进化分析、动物回归试验、病理组织学观察等进行一系列检测。结果显示,该毒株不能凝集鸡红细胞,根据FAdV的六邻体(Hexon)基因设计引物,进行PCR扩增和单克隆测序,PCR扩增出分子量约为550bp的特异性条带,通过序列测定和遗传进化分析表明,该分离病毒株与FAdV-4的相似性最高。同时用该分离毒株的鸡胚尿囊液感染28日龄雏鸡,试验鸡可复制出与临床相似病例,病理组织学观察可见,心肌细胞有炎性细胞浸润,肝内有嗜碱性包涵体等病变特征。综上,分离株B13为Ⅰ群FAdV-4。 展开更多
关键词 fadv-4 实验室诊断
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4型禽腺病毒HLJ1701株灭活疫苗的研制 被引量:5
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作者 朱庆贺 苗艳 +5 位作者 杨旭东 王爽 张鹏宇 陈曦 王观悦 史同瑞 《中国兽药杂志》 2020年第8期9-13,共5页
利用4型禽腺病毒HLJ1701株进行灭活疫苗的研制,并对疫苗的免疫效果进行评价,为家禽4型禽腺病毒的防控提供数据及参考。将HLJ1701株用灭菌生理盐水作10^4倍稀释后,接种9日龄SPF鸡胚,37℃孵育72 h后收获感染鸡胚尿囊液,经甲醛灭活后,加白... 利用4型禽腺病毒HLJ1701株进行灭活疫苗的研制,并对疫苗的免疫效果进行评价,为家禽4型禽腺病毒的防控提供数据及参考。将HLJ1701株用灭菌生理盐水作10^4倍稀释后,接种9日龄SPF鸡胚,37℃孵育72 h后收获感染鸡胚尿囊液,经甲醛灭活后,加白油佐剂乳化制成油乳剂灭活疫苗,对制备疫苗的性状、安全性、免疫效力等进行检验。结果显示,制备的3批4型禽腺病毒灭活疫苗(HLJ1701株)均为油包水型,黏度均在50 cP以内,对3批疫苗取样,样品经3000 r/min离心15 min,管底无水相析出。安全性试验结果显示,将疫苗按1 mL/只超剂量接种3周龄SPF鸡,试验鸡在观察期内全部健活,未出现局部或全身不良反应,表明疫苗对SPF鸡具有良好的安全性;免疫效力及攻毒保护试验结果显示,用疫苗按0.2 mL/只的剂量免疫接种3周龄SPF鸡1次,免疫接种后21d试验鸡血清中HLJ1701株的抗体平均效价可达28以上,使用4型禽腺病毒(HLJ1701株)接种0.2 mL/只(100 LD50)对免疫鸡进行攻毒,疫苗对免疫鸡的保护率均为100%。研究表明,实验室条件下研制的4型禽腺病毒(HLJ1701株)灭活疫苗的各项指标均符合标准。 展开更多
关键词 4型禽腺病毒 灭活疫苗 佐剂 研制 安全性 保护率
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鸡DDX 41基因克隆表达、细胞定位及其在禽腺病毒4型感染调控天然免疫中的作用 被引量:1
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作者 刘琪 曹影丽 +6 位作者 魏宁波 杨侃侃 梁月巧 宋祥军 邵颖 涂健 祁克宗 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2023年第5期1028-1036,共9页
为获得鸡DDX41(chDDX41)的原核表达蛋白,探讨chDDX41的细胞定位及其在禽腺病毒4型(FAdV-4)感染引起的天然免疫中的作用。根据GenBank中chDDX41基因序列,设计特异性引物,以LMH细胞cDNA为模板扩增,将扩增序列连接至pET-32a、pCAGGS-HA、pC... 为获得鸡DDX41(chDDX41)的原核表达蛋白,探讨chDDX41的细胞定位及其在禽腺病毒4型(FAdV-4)感染引起的天然免疫中的作用。根据GenBank中chDDX41基因序列,设计特异性引物,以LMH细胞cDNA为模板扩增,将扩增序列连接至pET-32a、pCAGGS-HA、pCMV-3×Flag和pmCherry-C1空载体,构建重组质粒。将pET-32a-chDDX 41转化至大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导表达。利用激光共聚焦显微镜观察chDDX41在鸡肝癌细胞(LMH)和鸡巨噬细胞(HD11)中的亚细胞定位;利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测在LMH细胞中过表达chDDX 41对IFN-β等细胞因子表达量的影响。结果表明,克隆得到1854 bp的chDDX 41基因,共编码617个氨基酸。SDS-PAGE结果显示,重组蛋白pET-32a-chDDX41主要以可溶性蛋白的方式在上清液中表达,经Western Blot鉴定,在90 ku左右有特异性条带,与预期结果一致;chDDX41在LMH和HD11细胞中主要定位在细胞核;FAdV-4感染过表达chDDX 41基因后的LMH细胞,发现IFN-β、IL-6、IL-1β和IL-8等细胞因子在mRNA水平上的表达量上调,表明chDDX41参与了FAdV-4引起的天然免疫应答。研究结果可为进一步研究DDX 41基因功能及其在天然免疫中的分子机制提供参考。 展开更多
关键词 chDDX41 原核表达 细胞定位 禽腺病毒4 天然免疫
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Ⅰ群4型禽腺病毒蛋黄抗体中和效价与攻毒保护相关性研究
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作者 李斌 路晓 +4 位作者 刘美丽 赵鲁宁 张帆 于可响 韩易航 《家禽科学》 2023年第1期3-7,共5页
为了研究Ⅰ群4型禽腺病毒蛋黄抗体中和效价与攻毒保护的相关性,取3批实验室试制抗体,分别通过预防试验和紧急预防试验模型进行抗体中和效价与靶动物攻毒保护力相关性试验。预防试验:21日龄SPF鸡经颈背部皮下注射中和效价分别为1:64、1:... 为了研究Ⅰ群4型禽腺病毒蛋黄抗体中和效价与攻毒保护的相关性,取3批实验室试制抗体,分别通过预防试验和紧急预防试验模型进行抗体中和效价与靶动物攻毒保护力相关性试验。预防试验:21日龄SPF鸡经颈背部皮下注射中和效价分别为1:64、1:128、1:256的蛋黄抗体,每只0.5 mL,168 h后接种Ⅰ群4型禽腺病毒检验用强毒,观察10日。紧急预防试验:先给21日龄SPF鸡接种Ⅰ群4型禽腺病毒检验用强毒,36 h后经颈背部皮下注射不同中和效价的抗体,每只0.5 mL,观察10日。结果表明:当中和效价为1:128时,攻毒保护率均达到80%以上;当中和效价为1:256时,攻毒保护率均达到90%以上。故本研究结果表明,抗体效价不低于1:128时可有效抵御Ⅰ群4型禽腺病毒的攻击。 展开更多
关键词 Ⅰ群4型禽腺病毒 蛋黄抗体 中和效价 攻毒保护 相关性
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LMH贴壁细胞悬浮驯化及病毒增殖研究
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作者 任培森 吕文静 +2 位作者 黄金海 刘海霞 蔡天宁 《现代畜牧兽医》 2024年第6期28-31,共4页
研究旨在实现LMH贴壁细胞悬浮培养、稳定传代、高密度生长,并应用于血清4型禽腺病毒(FAdV-4)悬浮培养。研究进行LMH贴壁细胞低含量血清适应驯化,并进行无血清悬浮培养筛选及FAdV-4 RP-4毒株接毒盲传试验。结果显示:LMH悬浮细胞可在无血... 研究旨在实现LMH贴壁细胞悬浮培养、稳定传代、高密度生长,并应用于血清4型禽腺病毒(FAdV-4)悬浮培养。研究进行LMH贴壁细胞低含量血清适应驯化,并进行无血清悬浮培养筛选及FAdV-4 RP-4毒株接毒盲传试验。结果显示:LMH悬浮细胞可在无血清培养基中传代第3代后,最终细胞密度达4.00×10^(6)cells/mL以上;FAdV-4连续培养至第4代,毒价可达10^(8.13)TCID_(50)/0.1 mL。研究表明,用特定培养基可使LMH贴壁细胞实现悬浮驯化,并可应用于FAdV-4稳定增殖。 展开更多
关键词 LMH贴壁细胞 驯化 悬浮培养 血清4型禽腺病毒(fadv-4)
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Pathogenicity of an FAdV-4 isolate to chickens and its genomic analysis 被引量:11
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作者 Kai-kun MO Chen-fei LYU +6 位作者 Shang-shang CAO Xia LI Gang XING Yan YAN Xiao-juan ZHENG Min LIAO Ji-yong ZHOU 《Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology)》 SCIE CAS CSCD 2019年第9期740-755,共16页
Fowl adenovirus serotype 4(FAdV-4)strain SD1511 was isolated from chickens with severe inclusion body hepatitis and hydropericardium syndrome in Shandong Province,China.The isolate was cultured in primary chicken embr... Fowl adenovirus serotype 4(FAdV-4)strain SD1511 was isolated from chickens with severe inclusion body hepatitis and hydropericardium syndrome in Shandong Province,China.The isolate was cultured in primary chicken embryo kidney cells.A study of pathogenicity indicated that SD1511 readily infected 7–35-d-old chickens by intramuscular injection and intranasal and oral routes,causing 50%–100%mortality.The 35-d-old chickens suffered more severe infection than 7-and 21-d-old chickens with mortality highest in the intramuscular injection group.The serum from surviving chickens showed potent viral neutralizing capability.The complete genome of SD1511 was sequenced and analyzed.The strain was found to belong to the FAdV-4 cluster with more than 99%identity with the virulent FAdV-4 strains isolated in China in recent years except for some distinct variations,including deletions of open reading frame 27(ORF27),ORF48,and part of ORF19.Our findings suggest that SD1511 might be used as a prototype strain for the study of pathogenesis and vaccine development. 展开更多
关键词 Fowl adenovirus serotype 4(fadv-4) PATHOGENICITY Infection way Virus neutralization activity Genome analysis
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表达基因Ⅰ亚型禽呼肠孤病毒σB和σC的重组4型禽腺病毒的拯救及鉴定
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作者 许壮壮 郭茹 +12 位作者 王素艳 高立 陈运通 张涛 高宁玉 吴龙波 祁小乐 张艳萍 崔红玉 刘永振 段雨路 王牟平 高玉龙 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1175-1181,共7页
为获得1株能够融合表达基因Ⅰ亚型禽呼肠孤病毒(avian reovirusⅠ-sub,ARV GCⅠ-sub)σB和σC的重组4型禽腺病毒(fowl adenovirus 4,FAdV-4)株,以禽腺病毒rHN20为病毒载体,构建表达σB和σC蛋白的重组黏粒rHN20-r1966-ARV GCⅠ-sub,使... 为获得1株能够融合表达基因Ⅰ亚型禽呼肠孤病毒(avian reovirusⅠ-sub,ARV GCⅠ-sub)σB和σC的重组4型禽腺病毒(fowl adenovirus 4,FAdV-4)株,以禽腺病毒rHN20为病毒载体,构建表达σB和σC蛋白的重组黏粒rHN20-r1966-ARV GCⅠ-sub,使用新型Fosmid黏粒拯救系统进行病毒拯救。通过PCR、间接免疫荧光试验(ⅠFA)、Western-blot以及体外复制动力学曲线鉴定重组毒株。结果显示,在感染的LMH细胞中成功检测到ARVGCⅠ-sub的σB和σC基因;Western-blot结果显示,在感染重组病毒的LMH细胞中成功检测到FAdV-4的Fiber蛋白、ARVGCⅠ-subσB和σC蛋白;ⅠFA结果显示,能特异性检测到FAdV-4的Fiber蛋白、ARVGCⅠ-subσB和σC蛋白;重组毒rHN20-r1966-ARV GCⅠ-sub与亲本毒rHN20的复制能力无明显差异;表明重组病毒rHN20-r1966-ARV GCⅠ-sub拯救成功。重组病毒rHN20-r1966-ARV GCⅠ-sub的成功构建为同时靶向ARVσB和σC蛋白的ARV防控疫苗的研制提供了技术支撑,为ARV与FAdV-4的防控奠定了基础。 展开更多
关键词 基因Ⅰ亚型禽呼肠孤病毒 4型禽腺病毒 σB σC 重组病毒
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基于Fiber1基因分型的安卡拉病毒感染病例实验室检测
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作者 李梅 何玲 +4 位作者 岳筠 周敏会 张启琴 程振涛 李凤龙 《贵州畜牧兽医》 2019年第6期30-33,共4页
为确诊贵州省某养鸡场发生疑似安卡拉病毒感染的病例,实验基于安卡拉病毒Fiber1基因设计合成引物,对病料样本进行病原核酸检测和核酸测序与序列分析。结果:(1)从病例的肝脏样本中扩增出大小约1 296 bp的Fiber1基因目的片段,与预期结果... 为确诊贵州省某养鸡场发生疑似安卡拉病毒感染的病例,实验基于安卡拉病毒Fiber1基因设计合成引物,对病料样本进行病原核酸检测和核酸测序与序列分析。结果:(1)从病例的肝脏样本中扩增出大小约1 296 bp的Fiber1基因目的片段,与预期结果相符。(2)序列测定与分析显示,扩增的Fiber1基因序列与国内分离株序列同源性高,亲缘关系近。(3)系统进化分析显示,感染病例中的安卡拉病毒流行株(命名为:GZ-LPS)与K31、MX-SHP9、ON1和河北、江苏等地的FAdV-4分离株处于同一进化分支,而与其他血清型禽腺病毒株处于不同进化分支。结论:此次疫情经实验室诊断,确定为禽腺病毒Ⅰ群C种血清4型的安卡拉病毒感染所致。 展开更多
关键词 鸡安卡拉病毒 禽腺病毒Ⅰ群C种血清4 Fiber1基因 实验室检测 序列分析
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新城疫、血清4型和8型禽腺病毒病二联三价嵌合型病毒样颗粒的构建及鉴定
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作者 郭春红 李金斗 +4 位作者 丁佳欣 冯嘉轩 陈凯楠 姜峰 丁壮 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期2087-2093,2115,共8页
基于昆虫杆状病毒表达系统和新城疫病毒样颗粒载体平台,采用间接免疫荧光、Western blot和透射电镜等方式,构建一种表面展示NDV HN蛋白、FAdV4 Fiber-2蛋白、FAdV-8a Fiber蛋白和FAdV-8b Fiber蛋白的二联三价嵌合型病毒样颗粒(ND-FAdV-4... 基于昆虫杆状病毒表达系统和新城疫病毒样颗粒载体平台,采用间接免疫荧光、Western blot和透射电镜等方式,构建一种表面展示NDV HN蛋白、FAdV4 Fiber-2蛋白、FAdV-8a Fiber蛋白和FAdV-8b Fiber蛋白的二联三价嵌合型病毒样颗粒(ND-FAdV-4/8a/8b cVLPs)。结果显示,成功构建了表达FAdV-8a Fiber和FAdV-8b Fiber蛋白的重组杆状病毒rBV-c8aFiber和rBV-c8bFiber。此外,ND-FAdV-4/8a/8b cVLPs各组分蛋白均正确表达,是一种约100 nm、具备囊膜和纤突的纳米颗粒,为新城疫、禽腺病毒病的防控提供了一种安全的病毒样颗粒新型疫苗候选株。 展开更多
关键词 新城疫 血清4型和8型禽腺病毒病 昆虫杆状病毒表达系统 嵌合病毒样颗粒
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禽腺病毒4型感染病理组织学观察 被引量:6
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作者 陈萍 朱佳佳 +8 位作者 马晓勇 张姗 经美 崔元 董世山 陈立功 刘聚祥 孙继国 袁万哲 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1753-1755,共3页
将30只1日龄SPF鸡随机分为2组,其中攻毒组20只,对照组10只。攻毒组按每只0.2mL腹腔注射禽腺病毒4型(FAV-4)病毒液,对照组不做处理,隔离饲养,临床观察2周。攻毒后第3天攻毒组开始出现死亡,将死亡鸡解剖观察各器官大体病变,经聚合酶链式反... 将30只1日龄SPF鸡随机分为2组,其中攻毒组20只,对照组10只。攻毒组按每只0.2mL腹腔注射禽腺病毒4型(FAV-4)病毒液,对照组不做处理,隔离饲养,临床观察2周。攻毒后第3天攻毒组开始出现死亡,将死亡鸡解剖观察各器官大体病变,经聚合酶链式反应(PCR)检测为FAV-4后,采集心脏、肝脏、脾脏、肾脏、肺脏制作石蜡切片,观察病理组织学变化。结果显示,攻毒组死亡鸡只无明显临床症状而突然倒地死亡;主要剖检病变为心包积液、肝脏肿大,个别可出现脾脏肿大、肺脏淤血、肾脏肿大;病理组织学变化为肝脏、肺脏、肾脏淤血,细胞变性坏死;而对照组无任何异常症状和病理组织学变化。 展开更多
关键词 禽腺病毒4 病理组织学
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