不同禽源副鸡禽杆菌的人工交叉致病试验

为探讨鸡源和鹅源副鸡禽杆菌(Avibacterium paragallinarum,Apg)对鸡、鹅的跨禽种感染致病力情况,试验将3株鹅源Apg和4株鸡源Apg培养物经鼻窦腔接种60日龄鸡和鹅,观察接种禽的临床症状并进行表征评分。通过组织病理学检查、细菌分离培养和Apg种特异性PCR鉴定,研究鸡源和鹅源Apg对不同宿主的致病性情况。结果显示:鸡源和鹅源Apg均可导致鸡、鹅出现典型症状与病变,且对原宿主禽种致病性高于非原宿主禽种;发病鸡、鹅的病理变化相似,以面部皮下和鼻窦黏膜水肿、充血出血、纤维素性渗出,鼻甲骨变形为特征;发病鹅和鸡组织病理变化相似,鼻窦黏膜与鼻甲黏膜出现大量炎性细胞浸润,黏膜上皮水肿、坏死、崩解脱落,固有层结构疏松,局部可见纤维结缔组织增生;3株鸡源Apg接种鸡试验组能从鼻窦部、肝脏和脾脏中重新分离到接种菌,而接种鹅试验组仅从鼻窦部分离接种菌,未能从其他组织中分离到。研究表明,鸡源和鹅源Apg均可感染鸡或鹅并引起发病,但在致病程度上以本禽源菌株强于非本禽源菌株。

鸡传染性鼻炎三价灭活疫苗生产用菌株的筛选

为了筛选免疫原性良好的鸡传染性鼻炎灭活疫苗生产用菌株,本试验对分离的5株A型、3株B型和3株C型副鸡禽杆菌的致病性和免疫原性进行分析。首先通过毒力试验筛选毒力较强的菌株,对筛选出的菌株进行最小发病剂量测定,再将最小发病剂量定为攻毒剂量,进行免疫原性分析和最小抗原含量测定。毒力试验结果显示,11株分离株均具有较强的毒力,从中筛选出毒力较强的A型菌2株(HN3株和HB2株)、B型菌2株(HN5株和SD4株)和C型菌2株(HN1株和SD3株)。最小发病剂量测定结果显示,A型HN3株、B型HN5株和C型SD3株毒力最强,最小发病剂量分别约为2.0×10^(4)、1.8×10^(3)和2.3×10^(3)CFU。免疫原性分析和最小抗原含量测定结果显示,A型HN3株、B型HN5株和C型SD3株具有良好的免疫原性,不仅可以抵抗同源菌株的攻击,还能对同血清型异源菌株提供良好的保护,免疫后血清HI抗体效价和阳性比例均较高,且与攻毒保护相关性较好,A型HN3株、B型HN5株和C型SD3株的最小抗原含量分别为5.0×10^(8)、1.0×10^(9)和1.5×10^(9)CFU/mL。因此,毒力较强和免疫原性良好的A型HN3株、B型HN5株和C型SD3株副鸡禽杆菌可作为鸡传染性鼻炎三价灭活疫苗的生产用菌株。

基于重组外膜蛋白研制检测副鸡禽杆菌抗体金标试纸

为研制一种采用胶体金间接法检测副鸡禽杆菌抗体的试纸条,本试验设计试纸条胶体金标记的蛋白为兔抗鸡IgG蛋白,检测线(T)为副鸡禽杆菌外膜蛋白P9,质控线(C)为羊抗兔IgG蛋白。检测试纸条的特异性、灵敏度及稳定性,并与间接ELISA法检测结果比较2种方法符合率。结果显示,当副鸡禽杆菌标准阳性血清稀释1000倍时,用该试纸条仍可检测出阳性结果,表明该检测试纸条敏感性良好;试纸条检测鸡新城疫病毒阳性血清、禽流感病毒阳性血清、鸡支原体阳性血清、鸡大肠埃希菌阳性血清等均为阴性,无交叉反应,说明试纸条具有很好的特异性;试纸条在4℃冰箱存放28 d,仍可成功检测出副鸡禽杆菌阳性血清,灵敏度下降不明显,说明该试纸条具有很好的稳定性。用此试纸条检测200份鸡传染性鼻炎疫苗免疫后的血清样品,阳性符合率为98%。此外,针对已知阴性、阳性血清样品,采用该试纸条与采用ELISA法检测,2种试验方法的检测总符合率高达99.5%。综上所述,此试纸条特异性、灵敏性及稳定性均很好,是一种理想的检测副鸡禽杆菌抗体的方法。

2014—2019年国内127例鸡传染性鼻炎流行病学分析

为了了解近6年国内鸡传染性鼻炎的流行情况,为临床防控该病提供数据支持。本文采用汇总分析方法,对本中心2014—2019年鉴定的127例鸡传染性鼻炎的临床症状、病理变化、发病数量、发病季节、发病日龄、混合感染、药敏试验及血清型鉴定等数据进行统计。结果显示:该病检出阳性率从2014年的3.8%增长到2019年的13.1%,呈逐年递增趋势;一年四季均发,冬春季多发;初产鸡及产蛋高峰期发病最多,其次是青年鸡,61~360日龄段病例占总病例的85%;47株分离菌对药敏试验的16种药物均有不同程度耐药性,对丁胺卡那霉素、头孢喹肟及新霉素高敏次数多,对甲氧嘧啶、诺氟沙星则普遍耐药;与大肠杆菌、H9亚型禽流感等混合感染多发,占比62.0%;近6年71株分离菌A、B、C三种血清型均有,B型最多,占比45.1%。结果表明近6年鸡传染性鼻炎发病日趋严重,其临床表现及病原血清型都有不同的变化,增加了防控难度,防控措施需要不断更新。