高血压分子机制及降压靶点的研究进展

高血压是导致脑卒中、心肌梗死、心力衰竭和肾衰竭等发生的危险因素,也是导致死亡的主要原因,因此研究高血压的潜在治疗靶点、开发新的抗高血压药尤为重要。现总结近年来关于高血压新治疗靶点的研究进展,包括Elabela/Apelin-APJ轴、序列相似性家族3D蛋白、成纤维细胞生长因子21和血管紧张素Ⅱ1型受体的变构调节,以期为抗高血压药的研究提供新的思路和文献支持。

胃肠道间质瘤组织中FAM96A、FAM96B、Caspase3表达观察

目的观察胃肠道间质瘤(GIST)中96序列相似的家庭成员A(FAM96A)、96序列相似的家庭成员B(FAM96B)及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase3)蛋白及FAM96A、FAM96B mRNA的表达变化,并探讨其意义。方法手术留取的GIST组织140例份(120例份用于免疫组化检测、20例份用于RT-PCR检测,分别记为肿瘤1组、肿瘤2组)和正常组织130例份(120例份用于免疫组化检测、10例份用于RT-PCR检测,分别记为正常1组、正常2组)。采用免疫组化EnVision二步法检测肿瘤1组及正常1组中FAM96A、FAM96B、Caspase3蛋白阳性率,分析FAM96A、FAM96B、Caspase3蛋白间及其与GIST临床病理参数的关系;采用RT-PCR法检测肿瘤2组、正常2组FAM96A、FAM96B mRNA。结果肿瘤1组和正常1组FAM96A蛋白阳性率分别为14.2%、91.7%,FAM96B蛋白阳性率分别为21.7%、89.2%,Caspase3蛋白阳性率分别为65.0%、90.0%,两组比较,P均<0.05。FAM96A、FAM96B蛋白阳性表达与肿瘤1组GIST肿瘤直径、危险度分级有关(P均<0.05),与患者性别、年龄、肿瘤发生部位、核分裂像无相关性(P均>0.05);Caspase3蛋白阳性表达与GIST患者性别、年龄、肿瘤发生部位、肿瘤直径、核分裂像、危险度分级均无相关性(P均>0.05)。肿瘤1组GIST组织中FAM96A、FAM96B蛋白表达与Caspase3蛋白表达均无相关性(P均>0.05)。肿瘤2组、正常2组FAM96A mRNA相对表达量分别为0.55±0.23、1,FAM96B mRNA相对表达量分别为1.22±0.66、1,两组FAM96A mRNA相对表达量比较,P均<0.05。结论FAM96A、FAM96B、Caspase3在GIST组织中呈低表达,FAM96A和FAM96B可能作为新的抑癌基因,其表达的减少甚至缺失可能抑制了GIST肿瘤细胞的凋亡,这为临床提供了新的治疗靶点和思路。

FAM60A在胚胎干细胞和肿瘤中的研究进展

序列相似度60家族成员A (FAM60A)作为新型生物标志物受到广泛关注,本研究介绍了FAM60A在胚胎干细胞(ESCs)中作为SIN3转录调控蛋白家族成员A (SIN3A)复合体稳定性和功能完整性的关键蛋白,通过对细胞周期的调控,促进增殖并维持ESCs处于未分化状态。分析了FAM60A在肿瘤发生发展中的重要作用,通过调控细胞周期和各种信号通路参与肿瘤细胞的增殖、凋亡、侵袭、迁移等生物学过程,提出肿瘤发生与胚胎发育有关,但具体分子机制以及参与的相关信号通路有待深层次挖掘,为以后的研究提供新方向。

FAM3C表达对胰腺癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响和调控机制

目的分析序列相似家族3成员C(FAM3C)在胰腺癌中的表达以及对胰腺癌细胞增殖、迁移、侵袭等影响和相关机制。方法收集2022年7月至2023年6月在江南大学附属医院手术切除的4例胰腺癌患者的癌组织和癌旁组织。聚合酶链反应和Western印迹检测组织和胰腺癌细胞PANC-1、MIA PaCa-2中FAM3C的表达。选取PANC-1、MIA PaCa-2细胞(FAM3C高表达)设置FAM3C-siRNA干扰组和甲基转移酶样蛋白3(METTL3)-siRNA干扰组,予以相应干扰小RNA处理,同时设置阴性对照组。细胞计数检测增殖能力,Transwell检测细胞迁移及侵袭。免疫共沉淀甲基化抗体检测FAM3C是否发生甲基化以及METTL3是否介导此甲基化。结果4例胰腺癌患者癌组织中FAM3C的mRNA相对表达为(1.29±0.19),高于癌旁组织(0.47±0.17),差异有统计学意义(t=-6.48,P=0.001)。与阴性对照A组相比,FAM3C-siRNA干扰组增殖能力下降,迁移和侵袭细胞数减少,差异均有统计学意义(均P<0.05)。在PANC-1细胞阴性对照B组中,IgG处理的细胞FAM3C mRNA相对表达为(1.05±0.53),低于甲基化抗体处理组的(30.57±1.09),差异有统计学意义(t=-42.04,P=0.001)。PANC-1细胞经甲基化抗体处理后,阴性对照B组FAM3C mRNA相对表达高于METTL3-siRNA干扰组(30.57±1.09)比(18.17±0.50),差异有统计学意义(t=17.89,P=0.001)。与阴性对照B组相比,METTL3-siRNA干扰组PANC-1细胞增殖能力、迁移和侵袭细胞数降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。MIA PaCa-2与PANC-1细胞检测结果一致。结论FAM3C在胰腺癌中高表达,且促进胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭,METTL3通过甲基化修饰FAM3C影响其表达,进一步影响胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭。

微小RNA-218-5p对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响及分子机制

目的探讨miRNA-218-5p对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法将BIU-78膀胱癌细胞分为miRNA-con组(转染miRNA-con)、miRNA-218-5p组(转染miRNA-218-5p mimics)、anti-miRNA-con组(转染anti-miRNA-con)、anti-miRNA-218-5p组(转染anti-miRNA-218-5p)、si-con组(转染si-con)、si-98序列相似的家族成员A(FAM98A)组(转染si-FAM98A)、miRNA-218-5p+pcDNA-con组(共转染miRNA-218-5p和pcDNAcon)、miRNA-218-5p+pcDNA-FAM98A组(共转染miRNA-218-5p和pcDNA-FAM98A)。采用定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miRNA-218-5p和FAM98A mRNA的表达水平;蛋白质印迹法(Western blot)检测蛋白表达;MTT法检测细胞增殖率;流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果相较于正常膀胱组织细胞SV-HUC-1,膀胱癌细胞BIU-78、T24、EJ中FAM98A mRNA和蛋白表达水平均升高,miRNA-218-5p表达水平均降低(P﹤0.05)。过表达miRNA-218-5p和敲减FAM98A均可抑制膀胱癌细胞BIU-78增殖,诱导细胞凋亡,抑制cyclin D1、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)表达,促进Bcl-2相关X蛋白(BAX)表达。miRNA-218-5p靶向负调控FAM98A的表达,过表达FAM98A能逆转miRNA-218-5p对膀胱癌细胞BIU-78的增殖抑制和凋亡促进作用。过表达miRNA-218-5p抑制磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路中p-PI3Kp85和p-AKT蛋白的表达,过表达FAM98A能逆转miRNA-218-5p对p-PI3Kp85和p-AKT表达的抑制作用。结论miRNA-218-5p可抑制膀胱癌细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与FAM98A及PI3K/AKT信号通路有关,将可为膀胱癌的预防和治疗提供新靶点。

水稻白叶枯病菌无毒新基因的克隆和序列分析

从菲律宾水稻白叶枯病菌9a生理小种的代表菌株PXO339中克隆到一个新的无毒基因,全长2118bp,编码705个氨基酸,分子质量和等电点分别约为74.7ku和6.585.NCBI网站BLAST表明,该基因属于avrBs3基因家族,命名为arp3.与所有avrBs3同源基因的Alignment分析发现,arp3的5’端缺少了两个长度分别是144bp和45bp的片断,但在水稻白叶枯病菌中,arp3基因的5’端的特征很普遍.全长的arp3基因中间区域是一个特异的只有5.5次102bp的重复区,是已克隆的avrBs3基因家族中重复次数最少的一个.C-端有3个核定位信号NLSs和1个酸性转录激活域AAD.

自噬与凋亡相关因子在人退变髓核中的共表达及其意义

目的探讨自噬与凋亡相关因子在人退变髓核中的共表达及其意义。方法收集2011年6月至2012年6月75例中山大学孙逸仙纪念医院住院患者腰椎间盘髓核标本，其中正常组10例来自腰椎骨折或肿瘤未侵犯椎间盘者，退变组65例来自腰椎间盘突出症或腰椎滑脱的手术患者。所有病例均行MRI检查并按Pfirrmann分级标准进行分级，其中Ⅰ／Ⅱ级10例，Ⅲ级32例，Ⅳ级22例，Ⅴ级11例。苏木素-伊红（HE）染色检测椎间盘组织的退变程度，原位末端转移酶标记（TUNEL）检测髓核细胞凋亡，Western blot检测自噬相关蛋白Beclin-1、Unc51样激酶-1（ULK-1）、微管相关蛋白1轻链3（LC3）、凋亡相关蛋白多腺苷二磷酸多聚酶（PARP）p85及白噬、凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤／白血病-2／腺病E1B相互作用相似蛋白3（BNIP3L）的表达。结果随着椎间盘退变程度的增加，细胞凋亡的发生率及其相关蛋白PARPp85表达增加（9．35±1．91、23．40±3．40、26．85±2．85和35．80±3．43，P〈0．05；0．30±0．04、0．80±0．22、0．88±0．06和1．07±0．05，P〈0．05），但自噬相关蛋白Beclin-1、ULK-1、LC3先增加后降低（0．40±0．24、1．08±0．02、1．22±0．13和0．89±0．06，P〈0．05；0．65±0．10、0．95±0．17、0．89±0．13和0．51±0．17，P〈0．05；0．20±0．09、0．65±0．10、0．69±0．27和0．44±0．10，P〈0．05）。BNIP3L蛋白亦呈先增加后降低的趋势（0．57±0．19、1．19±0．26、0．99±0．12和0．16±0．05，P〈0．05）。结论在椎间盘退变进程中，自噬与凋亡表达不同，作用亦可能不同。