背角无齿蚌AwPrx4A基因克隆及在PFOS和PFOA胁迫下的表达分析

硫氧化蛋白过氧化物酶(Prx)可以将过氧化氢、有机过氧化物和过氧化合物分别转化为水、乙醇和亚硝酸盐,是机体一种重要的抗氧化蛋白。为了探讨全氟辛烷磺酸(PFOS)和全氟辛酸(PFOA)对背角无齿蚌的胁迫效应,背角无齿蚌随机分为对照组、PFOS处理组和PFOA处理组;同时克隆出AwPrx4A全基因序列,分析PFOS和PFOA对AwPrx4A表达的影响。背角无齿蚌AwPrx4A cDNA全长由958个核苷酸组成,包含1个120 bp的5’非编码区,1个412 bp的3’非编码区和1个426 bp的开放阅读框,开放阅读框为由142个氨基酸组成的多肽链。PFOS和PFOA对背角无齿蚌的LC50分别为28.388和192.083 mg·L-1。与对照组相比,浓度6.25、12.5、25、50和100 mg·L-1的PFOS处理后,实验观察过程中肝胰腺中AwPrx4A mRNA水平分别增加了18.75%、2.85倍(P <0.05)、5.08倍(P <0.01)、5.52倍(P <0.01)和6.77倍(P <0.01)以上。与对照组相比,浓度50、100、200、400和800 mg·L-1的PFOA处理后,实验观察过程中肝胰腺AwPrx4A mRNA水平分别增加了20.83%、2.21倍(P <0.01)、2.25倍(P <0.01)、3.19倍(P <0.01)和5.64倍(P <0.01)以上。与对照组相比,PFOS和PFOA处理后鳃中AwPrx4A mRNA水平分别增加了61.61%(P <0.05)和59.59%(P <0.05)以上。与对照组相比,PFOS和PFOA处理后血淋巴中AwPrx4A mRNA水平分别增加了47.42%和20.61%以上。结果表明,PFOS和PFOA处理对背角无齿蚌AwPrx4A表达具有明显的诱导作用,其原因与对抗PFOS和PFOA的胁迫效应有关。

背角无齿蚌AwPrx4基因克隆与PFOS和PFOA胁迫表达分析

为了探讨全氟辛烷磺酸(PFOS)和全氟辛酸(PFOA)对背角无齿蚌的胁迫效应,将背角无齿蚌随机分为对照组、PFOS处理组和PFOA处理组;同时克隆出Aw Prx4全基因序列,分析PFOS和PFOA对Aw Prx4表达的影响。Aw Prx4全长cDNA开放阅读框由588 bp核酸组成,编码196个氨基酸,包含FYPLDFTFACPTEI和GEVCPA两个标签序列。肝胰腺Aw Prx4 mRNA水平在6.25 mg/L、12.5 mg/L和25 mg/L的PFOS处理组中的上调效应呈时间和剂量依赖模式;与对照组相比,在50 mg/L和100 mg/L PFOS处理中Aw Prx4 m RNA水平分别增加了6.11倍(p<0.01)和6.68倍(p<0.01)。与对照组相比,PFOA处理组中(50 mg/L,100 mg/L和200 mg/L)肝胰腺Aw Prx4 mRNA水平增加了37.05%以上;在PFOA处理组中(400 mg/L和800 mg/L),肝胰腺Aw Prx4表达水平在整个实验过程中分别增加了1.36倍(p<0.05)和75.76%(p<0.05)。与对照组相比,PFOS和PFOA处理后腮中Aw Prx4表达水平在整个实验过程中分别增加了64.64%(p<0.05)和69.69%。与对照组相比,PFOS和PFOA处理后血淋巴中Aw Prx4表达水平分别增加了37.11%和38.24%以上。这些研究结果为认识其他物种Prx4基因的结构和功能提供参考,同时为揭示双壳类动物对抗持久性有机污染物的胁迫效应提供了理论依据。