天青Ⅰ分光光度法测定DNA

研究了生物染色剂天青 与脱氧核糖核酸在碱性条件下的结合反应 ,影响因素和最佳反应条件 ,建立了一种测定 DNA的新方法。在 p H=8.4的三羟甲基氨基甲烷 -盐酸 (Tris- HCl)缓冲溶液中 ,鱼精 DNA(fs DNA)及小牛胸腺 DNA(ct DNA)的线性范围分别为 0 .5— 10 .0 mg· L-1(fs DNA)、0 .5— 8.0 mg·L-1(ct DNA) ,相关系数为 0 .996 8(fs DNA)、0 .996 5 (ct DNA) ,表观摩尔吸光系数 ε60 9.90 nm(fs DNA) =2 .5×10 4L· mol-1· cm-1、ε60 9.90 nm(ct DNA) =3.1× 10 4L· mol-1· cm-1,用于合成样品的测定 。

天青Ⅰ共振光散射法测定DNA

基于脱氧核糖核酸(DNA)对混合有机染料天青Ⅰ的共振光散射增强效应,拟定了一种测定DNA的共振光散射法。在pH9.5～10.5的范围内,天青Ⅰ在299、355、400、570、630nm附近均有较弱的共振光散射信号,随着DNA的加入,共振光散射信号大大增强。在355nm处,其散射光增强强度与DNA质量浓度呈线性关系。其线性回归方程为ΔI=-96.62+606.6ρ,线性范围为0 20～0.60μg mL,相关系数r=0.9998,检出限为11.2μg L。该方法可应用于合成样品中DNA的测定。